专题24 微生物的利用(试题部分)

高一生物微生物的利用试题1.大肠杆菌在自然环境中广泛存在，种类繁多，有的有害有的则有益：其代谢类型和在生态系统中的地位随着其生存的环境不同而不同。

2011年肠出血性大肠杆菌（EHEC）感染引发的溶血性尿毒综合症在欧洲多国陆续暴发，引起世界各国的关注。

结合相关信息，回答下列问题。

（1）存在于人类和恒温动物肠道内的肠出血性大肠杆菌（EHEC），其代谢类型最可能是，它在生态系统中的地位是。

（2）肠出血性大肠杆菌（EHEC）产生的肠毒素，可引起患者的局部肠出血并使血管和肾功能受损，肠毒素是大肠杆菌的（填初级或次级）代谢产物，据研究这种肠毒素可被霍乱外毒素的抗毒素中和，对此现象合理的解释是。

（3）此次暴发的大肠杆菌是一种嵌合体，它包含了多种大肠杆菌的遗传物质。

它还含有瘟疫细菌的DNA，产生这种变异来源属于。

（4）肠出血性大肠杆菌（EHEC）感染引发的溶血性尿毒综合症用多种抗生素治疗均无效，表现出很强的耐抗生素性，说明肠出血性大肠杆菌（EHEC）体内含有。

（5）下表是某培养基成分含量：若用此培养基来培养肠出血性大肠杆菌（EHEC），还应在培养基成分中添加，如果再加入伊红和美蓝，按用途分此培养基叫，接着用此培养基（能或不能）检测出饮用水和乳制品是否含有肠出血性大肠杆菌（EHEC）。

【答案】（1）异养厌氧型消费者（2）次级肠毒素与霍乱外毒素的抗原相同或相似（3）基因重组（4）体内含有多种耐抗生素基因（5）含碳的有机物鉴别培养基不能【解析】（1）动物肠道内没有充足的氧气，并且寄生生物都属于异养的，因此该大肠杆菌属于异养厌氧型。

寄生生物在生态系统中都属于消费者。

（2）该毒素并非是该生物生长和繁殖所必需的物质，因此属于次级代谢产物。

可能肠毒素与霍乱外毒素的抗原相同或相似，因此可被霍乱外毒素的抗毒素中和。

（3）生物变异包括基因重组、基因突变、染色体变异。

原核细胞没有染色体，因此不会发生染色体变异。

又据题意知，该大肠杆菌包含了多种大肠杆菌的遗传物质，还含有瘟疫细菌的DNA，最有可能是发生的基因重组。

高二生物微生物的利用试题1.牛奶、吸管、接种环、培养基、空气灭菌的方式依次是①灼烧灭菌②巴氏消毒③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌A．②③①⑤④B．②⑤③③④C．②①③⑤④D．⑤①③⑤④【答案】A【解析】牛奶一般采用巴氏消毒法最好，吸管一般采取干热灭菌较好，接种环采用灼烧灭菌法，培养基一般采用高压蒸汽灭菌，空气灭菌经常采用紫外线消毒法，故A正确。

【考点】本题考查灭菌和消毒的有关知识，意在考查考生识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

2.多环芳烃菲在染料、杀虫剂等生产过程中被广泛使用，是土壤、河水中常见的污染物之一。

下图表示科研人员从被石油污染的土壤中分离获得能降解多环芳烃菲的菌株Q的主要步骤。

请回答：（1）步骤①→③的培养过程中，培养液中加人多环芳烃菲作为唯一碳源，目的是。

（2）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能。

（3）步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线，原因是。

采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是。

（4）接种环通过灼烧来灭菌，完成步骤④中划线操作，共需灼烧接种环次。

（5）为了获得分解多环芳烃菲能力更强的菌株，研究人员又对菌种Q进行了诱变处理，得到突变株K。

为了比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力，设计了下列实验，请补全实验步骤：①取9只锥形瓶均分成三组，编号A、B、C。

②向9支锥形瓶中分别加入为唯一碳源的培养液。

③向A、B、C三组培养液中分别加入。

④28℃恒温培养3天后，测定锥形瓶中多环芳烃菲的降解率。

【答案】（1）筛选出菌株Q（2）增加溶液中的溶氧量（3）线条末端细菌的数目比线条起始处少防止冷凝后形成水珠滴在培养基上污染培养基（或避免培养基中水分的过快挥发）（4）6（5）②等量以多环芳烃菲③等量的无菌水、菌株Q菌液和突变株K菌液【解析】（1）因为菌株Q能降解多环芳烃菲，所以步骤①→③的培养过程中，培养液中加入多环芳烃菲作为唯一碳源，目的是筛选出菌株Q．（2）步骤①→③的培养过程中，需将锥形瓶放在摇床上振荡，目的有两个，一方面使菌株与培养液充分接触，提高营养物质的利用率；另一方面能增加培养液中的溶氧量．（3）步骤④用平板划线法纯化菌株Q过程中，由于线条末端细菌的数目比线条起始处要少，所以在做第二次以及其后的划线操作时，总是从上一次划线的末端开始划线．采用固体平板培养细菌时要倒置培养的目的是防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基．（4）接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次．（5）本实验的目的是比较两种菌株降解多环芳烃菲的能力．实验设计需要遵循对照原则，对照组需加入等量无菌水；还需遵循单一变量原则，单一变量是菌种类比不同，即菌株Q菌液和突变株K菌液，【考点】本题考查微生物的分离和培养的有关知识，意在考查考生识图能力、识记能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理。

选修1 “微生物的利用”专题突破命题人：安徽省绩溪中学 245300）汪朝晖一、选择题1．自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( )A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质2．酵母菌培养液中常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，原因是（）A．碳源供应太充足 B．细胞会发生质壁分离C．改变了酵母菌的pH值 D．葡萄糖不是酵母菌的原料3．培养流感病毒时，应选用( )A．固体培养基 B．含有多种无机盐的培养液C．活的鸡胚 D．无菌的牛肉汤4．可以使微生物细胞内蛋白质、核酸发生不可逆破坏的环境因素是（）A．高温 B.营养成分的变化 C.氧含量 D.温度、pH、氧的共同作用5．菌落形成的根本原因是（）A．细菌有鞭毛 B．细菌能运动C．培养基有琼脂 D．子细胞成为群体6．在接种操作的过程中，不正确的是（）A．要将接种环灼烧灭菌 B．取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C．将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位 D．接种后还要将管口灭菌加塞7．高压蒸气灭菌的原理是（）A．高压使细菌DNA变性 B．高压使细菌蛋白质凝固变性C．高温烫死细菌 D．高温使细菌DNA变性8.若要通过稀释涂布平板法分离纯化土壤中的微生物，其正确操作步骤是（）①土壤取样②称取10g土壤加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中制备水壤提取液③吸取0.1mL进行平板涂布④依次稀释至101、102、103、104、105、106、107的稀释度A．①②③④ B．①③②④ C．①②④③ D．①④②③9.实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂块平板上画3条等长的平行线（3条线均与下图中的链霉素带接触），将平板置于37℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。

从实验结果分析以下叙述，不正确的是（）A．链霉素能阻止结核菌的生长 B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D．链霉素可以用于治疗伤寒病人10．将圆褐固氮菌接种到彻底灭菌的固体培养基上，经过一段时间培养，就能够得到（）A．菌丝 B．无一定形态的群体 C．单个细菌 D．菌落11．在实验室里，从土壤里分离出尿素分解菌所需的培养基属于（）A．天然培养基 B．鉴别培养基 C．选择培养基 D．液体培养基12.下列操作与灭菌无关的是（）A．接种前用火焰烧灼接种环 B．接种前用酒精擦拭双手C．培养基在50℃时搁置斜面 D．接种在酒精灯的火焰旁完成13．若将某种细菌置于有营养的物体上，它会繁殖并形成细胞群（如下图）。

高二生物微生物的利用试题1.【选修1-生物技术实践】（15分）利用微生物分解淀粉生产糖浆具有广阔的应用前景。

某研究所为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌，进行了如下实验。

请进一步完善实验内容并回答相关问题：（1）实验步骤：①配制以为碳源的固体培养基，为了使培养基凝固成固体，应该向培养基中加入的物质是。

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上会出现和透明圈。

③将接种针用法灭菌后，从②中的培养基上挑取一定量细菌，接种至（填“固体”、“半固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖。

④取与①培养基中相同的成分及配比，并加入少量碘液，使制作的培养基呈蓝紫色，灭菌并调节PH，用法将③过程所获得大量繁殖的细菌接种到该培养基上。

⑤培养一段时间后，观察菌落周围培养基的颜色变化及其范围的大小，周围出现的菌落即为初选菌落，经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

（2）上述实验步骤中，倒平板和接种的操作都应在超净台上的附近进行。

（3）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于培养基，④和⑤所用培养基属于培养基。

【答案】（1）①淀粉（1分）琼脂（1分）②菌落（2分）③灼烧（2分）液体（1分）④稀释涂布平板（涂布分离）（2分）⑤较大透明圈（浅色范围大）（2分）（2）酒精灯火焰（2分）（3）选择（1分）鉴别（鉴定）（1分）【解析】（1）①欲筛选出能高效分解淀粉的菌株，培养基中应只含有淀粉而无其他碳源。

②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上，在恒温培养箱中培养一段时间后，培养基上会出现菌落和透明圈。

③为了避免杂菌的污染，接种过程中要进行无菌操作，如对接种针进行灼烧处理。

④用稀释涂布平板法将③过程所获得大量繁殖的细菌接种到该培养基上。

（2）整个实验操作应是无菌的，倒平板和接种的操作都应在超净台上的酒精灯火焰附近进行。

【考点】本题考查微生物的培养的有关内容，意在考查考生对相关知识的掌握情况。

高二生物微生物的利用试题答案及解析1.下列有关菌落的表述，不正确的是A．每个菌落可由一种或多种细菌大量繁殖而成B．各种霉菌在面包上生长形成不同颜色的斑块也是菌落C．噬菌体能使固体培养基上的细菌裂解，菌落变得透明D．细菌和真菌在培养基上形成的菌落形态不同【答案】A【解析】菌落（colony）是由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落，故A错误。

【考点】本题考查菌落的相关知识，意在考查考生的理解应用能力。

2.(10分)(2012年烟台诊断)如下表所示为某微生物培养基的配方，请回答：培养基。

(2)该培养基中的碳源是________。

不论何种培养基，在各成分都溶化后分装前，要进行的是调整pH和________，倒平板时，一般需冷却至________左右，在________附近操作。

(3)若用该培养液培养纤维素分解菌，应除去的物质是________，应加入的碳源是________，（4）与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成___________保存备用。

（5）纯化菌株时，通常使用的划线工具是____________。

【答案】（10分）O) 灭菌 50 ℃酒精灯火焰(1) 液体 (2) (CH2(3) 青霉素和(CHO) 纤维素粉（4）细胞分裂素母液（5）接种环（或接种针）2【解析】（1）由表可知该培养基中无凝固剂琼脂，应属于液体培养基。

（2）在该培养基中的碳源是糖类(CHO)，培养基要进行调PH和灭菌，倒平板时一般需要冷却2到50度左右，为了防止外来杂菌的污染应在酒精灯火焰附近进行操作。

（3）如果用该培养液培养纤维素分解菌，应将碳源物质糖类去掉，也应将一种细菌生长的青霉素去掉，但应加入纤维素粉提供碳源。

（4）植物组织培养需要加入植物激素主要是生长素和细胞分裂素，激素因为用量极少，一般配制成母液进行保存备用。

生物微生物的利用试题答案及解析1.[生物——选修1生物技术实践]（15分）根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：（1）在制作腐乳、果醋、泡菜的过程中需要氧气的是。

现代科学研究发现，腐乳生产过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是。

（2）果汁发酵后是否产生酒精，可以用来检验，在酸性条件下，该物质与酒精反应呈色。

（3）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是，其中对培养皿进行灭菌常用的方法是。

（4）将月季的花粉通过无菌操作接种到培养基中，在一定的条件下诱导形成幼苗，最合适进行培养的花粉时期为，选择花粉时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，最常用的方法为。

（5）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是；从薄荷叶中提取薄荷油时（能、不能）采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法。

【答案】(除标明外，每空1分)（1）腐乳、果醋毛霉（2）重铬酸钾灰绿（3）防止外来杂菌的污染（无菌技术）（2分）干热灭菌法（2分）（4）单核靠边期（2分）醋酸洋红法（2分）（5）水蒸气蒸馏法（2分）能【解析】（1）腐乳、果醋制作过程中利用的是好氧菌，泡菜制作过程中利用的是厌氧菌，因此泡菜的制作不需要氧气。

毛霉是参与豆腐发酵的主要微生物。

（2）果汁发酵后，可以用重铬酸钾来检验是否产生酒精，在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈蓝绿色。

（3）在微生物培养操作过程中，为了防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行灭菌，常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压灭菌，对于耐高温需干燥的培养皿则用干热灭菌法。

（4）选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素，一般来说，在单核靠边期，花粉培养成功率最高；确定花粉发育时期的最常用方法是醋酸洋红法。

（5）由于玫瑰精油的化学性质稳定、易挥发、难溶于水，所以玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取；而薄荷油与玫瑰精油的化学性质相似，故也可以用水蒸气蒸馏法提取。

第十单元 生物技术实践专题24 微生物的应用【考情探究】课标解读考情分析 备考策略 考点 考向 1 微生物的实验室培养 培养基与微生物的纯化 本专题内容一直是高考的命题热点,考查内容集中在微生物的实验室培养、特定微生物数量的测定方法、培养基对微生物的选择作用等;题目情境贴近生活或科技进展,但试题答案通常落脚于教材主干知识 复习时应注意对各种技术的系统理解和横向对比,可将果酒、果醋与泡菜的制作、特定微生物的分离纯化等实践操作构建过程模型,以加深对相关技术的记忆和理解2 微生物的分离与计数 微生物的分离与计数【真题探秘】基础篇【基础集训】考点一微生物的实验室培养1.下表是某同学列出的分离土壤中微生物的培养基配方,据此回答下列问题:KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O尿素葡萄糖琼脂14 g 2.1 g0.2 g10 g10.0 g15.0 g将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL。

(1)从作用上看,该培养基属于培养基,提供氮源的物质是,细菌能利用该氮源是由于体内能合成酶。

(2)在对分离的能分解尿素的细菌进行鉴定时,还需在培养基中加入指示剂,若指示剂变,说明有目的菌株存在。

(3)为了测定微生物的数量,接种时应采用法,某同学在4个培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1 mL,培养后菌落数分别为180、155、176、129个,则每升原土壤样液中上述微生物的数量为个,测定的活菌数比实际活菌数(填“低”“高”或“基本一致”)。

答案(1)选择尿素脲(2)酚红红(3)稀释涂布平板 1.6×1012低2.为了调查银川市自来水水源地的水质情况,某研究小组对该地自来水水样中的大肠杆菌进行了测定,请回答下列问题:(1)该小组采用平板划线法分离提纯水样中的细菌,划线时在培养基上共画了4个区域,则需要次灼烧接种环。

在第二次及以后划线时,总是从上一次的末端开始划线,这样做的目的是。

高一生物微生物的利用试题答案及解析1.在从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验中，先进行选择培养，再进行刚果红染色法分离。

先选择培养的目的是A．浓缩目标菌种B．除去杂菌，获得能分解纤维素的纯菌种C．杀灭不需要的微生物D．在微生物的菌落上获得纤维素分解菌种【答案】A【解析】在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此选择培养可以起到浓缩目标菌种的作用，但是不能得到单一菌种。

该培养基中的化学成分不能杀死其它微生物。

选择培养时用液体培养基，微生物在培养液中繁殖，不能获得目标菌落。

故选A【考点】本题考查选择培养的目的。

点评：本题意在考查考生的识记能力，属于容易题。

2.酵母菌群体生长状况可用660nm光吸收量来表示，培养液中菌体越多(不包括死亡个体)，光吸收量越高，光吸收量和酵母菌干重之间的关系如下左图所示。

为了验证恒定容积液体培养基中酵母菌的群体生长规律，某小组在一个装有0．5 L葡萄糖溶液的锥形瓶中进行了酵母菌的培养实验，实验结果如下右图所示。

请分析回答下列问题：(1)培养至第8 h后，酵母菌种群开始进入＿＿＿期。

培养至第24 h时，锥形瓶中酵母菌的干重为＿＿＿g。

(2)培养至第＿＿＿h之后，酵母菌种群将进入衰亡期。

在生产实践中，为了提高酒精的产量，应该延长＿＿＿期，常采用＿＿＿法进行培养。

(3)为使以上实验方案更科学严密、数据更准确，上述实验方案还应作怎样的完善? ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿【答案】（1）对数；3；（2）40；稳定；连续培养；（3）设置多个组进行重复实验（或同时在多个锥形瓶中进行实验）【解析】由图可知，培养至第8 h后，660nm光吸收量逐渐增多，酵母菌开始进入对数期。

培养至第24 h时，1L葡萄糖溶液中酵母菌660nm光吸收量为30，结合左图可知酵母菌的干重为6g，则装有0.5 L葡萄糖溶液的锥形瓶中酵母菌的干重为3g。

高三生物微生物的利用试题1.研究发现柚皮精油和乳酸菌素（小分子蛋白质）均有抑菌作用，两者的提取及应用如图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用法提取柚皮精油，该过程得到的糊状液体可通过除去其中的固体杂质。

（2）筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或接种。

采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是。

对新配制的培养基灭菌时常用的是。

实验前需对超净工作台进行___________处理。

（3）培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供______________。

（4）抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。

可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

【答案】（１５分，每空２分）（1）压榨过滤（2）稀释涂布平板法灭菌(或防止杂菌污染)高压蒸汽灭菌法消毒（3）氮源（１分）（4）直径（或大小）【解析】（1）橘皮易焦糊不能采用蒸馏法，应采用压榨法比较合适。

在提取过程中获得的糊状液体可以采用过滤的方法除去其中的固体杂质。

（2）筛选菌种时常用平板划线法和稀释涂布平板法。

用平板划线法灼烧接种环的目的是防止杂菌的污染。

而对配制的培养基常用高压蒸汽灭菌法，实验时要对超净台进行消毒处理。

（3）尿素可以为微生物提供氮源。

（4）抑菌实验能出现透明圈，那就可以通过测定透明圈的大小或直径来比较抑菌效果。

【考点】本题考查生物技术实践相关知识，意在考察考生对知识点的识记理解掌握程度。

2.胡萝卜素是一种常用的食用色素，在保护视力方面具有重要功效．从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取胡萝卜素的流程图如下，请据图回答：(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可用________法接种菌种；从功能上看，所用培养基为___________培养基。

(2)在培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可提供_________等营养。

(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素，干燥时应控制好_________，以防止胡萝卜素分解；萃取时一般不直接用酒精灯加热而用水浴加热，因为________________________。

生物微生物的利用试题1.下列关于腐乳制作过程相关的操作，错误的是A．在腐乳制作过程中要有能产生蛋白酶的微生物参与B．与果酒、果醋制作相比，腐乳制作所需要的适宜温度最低C．加盐和加酒都能抑制微生物的生长D．卤汤可以调制腐乳的风味，并有加强腐乳营养的作用【答案】D【解析】毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成肽和氨基酸，A正确；豆酵母菌酒精发酵的适宜温度为18～25 ℃,而醋酸菌醋酸发酵的适宜温度是30～35 ℃，腐乳制作中豆腐长出毛霉的适宜温度是15～18 ℃，可见果醋制作的适宜温度最高，B正确；加盐和加酒都能抑制微生物生长，C正确；卤汤有调味作用，但不能增加营养，D错误。

2.分）回答下列有关微生物的培养和利用问题：（1）在培养基的配制过程中，具有如下步骤：①溶化②调pH③加棉塞④包扎⑤分装⑥称量，正确的顺序为；倒平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其主要原因是。

(2)若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数，要想使所得估计值更接近实际值，除应严格操作、多次重复外，还应保证待测样品稀释的________。

(3)食品安全检测时通常采用大肠杆菌作为致病微生物的指示菌，为测定哪些菌落属于大肠杆菌，可选用培养基对菌落进行鉴定，大肠杆菌的菌落在该培养基上呈现黑色。

(4)生物柴油是一种可再生的清洁能源，可从油料作物中提取植物油与甲醇在脂肪酶的催化下生成生物柴油，从微生物中提取脂肪酶通常需要检测，为降低柴油生产成本，可利用技术使脂肪酶能重复使用。

(5)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了______________的发酵作用；喝剩的葡萄酒放置一段时间后变酸的原因是______________________________。

【答案】（1）⑥①②⑤③④（2分）防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染（2分）(2)比例合适（2分）（3）伊红美蓝（4）酶活性固定化酶（5）醋酸菌空气中的醋酸菌混入葡萄酒后发酵产生了醋酸（2分）【解析】（1）培养基的配制过程中需要先计算、称量、溶化、调PH、分装、加棉塞然后进行包扎，故是⑥①②⑤③④，平板倒置的原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。