植物组织培养消毒方法

初代培养步骤（以百合为例）
前期准备：
1、冲洗：先将百合球根掰成鳞片，之后将鳞片表面清洗干净，并筛选可用鳞片（无斑点，无霉，无腐烂）。

将清洗好的鳞片装入网袋中置于自来水下冲洗2-3小时（网袋可放于大烧杯中）。

之后根据实验操作人数分瓶，放于烧杯中（500ml烧杯）。

2、实验药剂：75%酒精，0.1%升汞，蒸馏水（4个培养瓶以上），用量均以鳞片数量为准（使液面漫过鳞片），以及若干培养基和烧杯。

3、消毒：将实验材料和药剂放入操作室中的操作台上，之后将操作台电源开启，打开高温灭菌器，并将紫外灭菌灯打开，关闭操作台的玻璃窗。

之后将储藏室玻璃门关闭，退出操作室，打开操作室紫外灭菌灯。

紫外灯光15分钟后，进入操作室将操作台通风设备开启，再打开玻璃窗（微微抬起15-20cm），通风10分钟。

实验操作：
通风结束后，开始操作。

首先将盛放鳞片的烧杯口内壁四周喷一些酒精，之后再向其倒入75%酒精（漫过鳞片），摇晃30s，再用蒸馏水洗1-2次。

废液倒入事先准备好的大烧杯（1000ml）中。

之后再倒入0.1%升汞（漫过鳞片），摇晃20min。

之后用蒸馏水洗3-4次，废液倒入大烧杯中。

之后进行鳞片处理，从烧杯中取出少量鳞片放于培养皿中操作，一般是将鳞片横切一刀，切口向下插入培养基中。

后期处理：
将装好的培养基放于暗处，定期查看。

植物组织培养灭菌方法
植物组织培养灭菌是保证植物组织培养过程成功的关键之一。

以下是几种常用的灭菌方法:
1. 高压灭菌法(High压力灭菌法):在高压环境下,将培养基、接种杯、植物体等进行灭菌,可以达到121°C至132°C,持续16-20分钟,杀死各种微生物和病原体。

这种方法适用于广泛种类的植物组织
培养。

2. 巴斯德灭菌法(Baruch Process):巴斯德灭菌法是一种通过
加热和化学作用来杀死微生物的方法。

将培养基、接种杯、植物体等进行加热至80°C至85°C,并加入适当的消毒液,再持续加热至100°C,杀死细菌、真菌等微生物。

这种方法需要使用专业的设备,适用于
严格的消毒控制。

3. 紫外线灭菌法(UV灭菌法):紫外线灭菌是利用紫外线辐射来
杀死微生物的方法。

将培养基、接种杯、植物体等进行照射,一般照
射时间约为45-60秒。

这种方法可以使大多数微生物死亡,但对于一
些耐高温和耐高压的细菌,可能需要特殊处理。

4. 快速灭菌法(Quick-死亡法):快速灭菌法是指在较短的时间
内杀死微生物的方法。

将培养基、接种杯、植物体等进行快速加热,
一般温度为120°C至150°C,时间约为5-10分钟。

这种方法适用于快速处理和紧急灭菌。

需要注意的是,不同的灭菌方法适用于不同的植物和组织培养过程,具体使用方法需要根据具体情况来确定。

此外,为了确保灭菌效果,
需要严格控制灭菌环境和时间,避免灭菌失败或产生不良后果。

拟南芥植物组织培养 WTD standardization office【WTD 5AB- WTDK 08- WTD 2C】拟南芥组织培养一、种子消毒：方法一：将拟南芥种子置于1 .5 ml eppendorf 管(微量离心管)中，加入1 ml 蒸馏水，4C春化3 d，70 %（v／v ）乙醇1mi n、7 %（v／v ）次氯酸钠10 mi n 浸泡消毒，并用无菌水冲洗5 次。

方法二：在超净工作台内，用无菌蒸馏水浸泡1 min，然后用80％乙醇消毒90s，最后用无菌蒸馏水冲洗3～5次备用。

消毒完毕的种子可以用200ul的tips吸去洗涤液，然后在超净工作台上挥发掉残余水分、洗涤液。

方法三、取野生型拟南芥种子放人离心管内，75％乙醇清洗后，无菌蒸馏水清洗1—2次，转入无菌离心管；5％次氯酸钠溶液浸泡5—6 min，用无菌蒸馏水清洗3～4次，加入1 ml无菌水，用移液枪接种。

二、选用的培养基选用1/2MS培养基对种子进行培养。

（MS和1/2MS都可以，1/2MS就是大量元素减半，其他东西和ms培养基是一样的量。

糖可以加，会长得比较好，但是也很容易污染。

如果在平板上要生长时间比较长，需要做一些实验的，比如根的发育，最好不要加。

）也可以用MS+30 g／L蔗糖的固体培养基。

（我想两种培养基都接种上，比作对比确定好坏）。

MS培养基配料表：三：接种方法拟南芥种子消毒后，用移液枪吸取拟南芥种子和水的混合物，均匀地在MS 生长培养基的培养皿平板上滴落，并使之形成两条平行的直线。

（如不行，可适当添加琼脂）。

四、培养得无菌苗接种后置于光照培养箱(型号：GXZ．500C；培养光照条件为16小时光照，8小时黑暗，培养温度为22℃中竖直培养。

3天后即可取材用于器官离体再生实验。

萌发5天后，在超净工作台中，用镊子将苗移栽到装有1／2 MS培养基的50ml三角瓶中（每瓶4--6棵，视情况而定），于短日照条件下培养30天左右获得无菌苗。

植物组织培养是人为控制培养条件，根据植物不同提供特定的培养条件。

组培可以使植物能按几何级数繁殖生产，平均成本低，能快速及时提供规格一致的优质种苗和脱病毒种苗。

植物组织培养需要在十分苛刻的无菌环境进行，组培实验室的环境和空气消毒十分重要，要做到杀孢子的级别（杀灭芽孢和孢子），否则实验室环境中的微生物极易使植物染菌，培养失败。

一．组培实验室常用消毒方式组培实验室常用消毒方式有酒精、升汞、次氯酸钠、漂白粉（次氯酸钙）、新洁尔灭、硝酸银等，虽然这些传统消毒剂各有特色，但也存在诸多缺点，往往造成灭菌不彻底或其它问题，主要有如下情况。

●杀菌率低，不能杀灭芽孢、霉菌孢子等高抗性微生物；●易产生耐药性，需多种消毒剂交替使用；●毒性和刺激性，传统消毒剂对操作人员健康有极大危害；●有残留，传统消毒剂对植物危害较大二．高效、生态的奥克泰士消毒剂Oxytech/奥克泰士作为过氧化氢银离子的倡领者，是多组分杀菌剂，协同微动作用，使用的氧化剂为过氧化氢，结合稳定剂形成复合溶液，作为催化剂添加的痕量银离子可以持久抑菌的效用。

过氧化氢与银结合形成强大的消毒杀菌与抑菌剂。

研究显示，Oxytech/奥克泰士是一种安全有效的抑菌剂和消毒杀菌剂，具有长久的效用，不会产生任何令人不愉快的外观、气味或味道。

更重要的是，奥克泰士-过氧化氢银溶液没有产生任何消毒副产物或其它有毒物质，其作用后完全分解为氧气和水。

三．奥克泰士用于组培实验室消毒的优势✧高效杀菌剂，杀局率大于99.999%，属于广谱消毒剂，能够杀灭细菌、真菌、霉菌、病毒等目前所知的所有类型微生物，且能够杀灭芽孢、霉菌等传统方式难以杀灭的微生物。

✧无色无味、无毒无残留，安全可靠，荣获国际专利的生态安全环保型消毒剂。

杀孢子剂对材料的兼容性很好✧杀菌性能稳定，不易受环境HP、温度及光照的影响，彻底杀灭微生物不会产生耐药性。

✧杀菌作用迅速，3-5分钟可以杀灭芽孢，大大节约时间，从而提高企业的生产效率。

植物组织培养的方法植物组织培养（Plant tissue culture）是指利用无菌条件下培养植物细胞或组织，以实现繁殖、繁育新品种、生物合成化合物、环境污染处理等目的的技术。

其不仅可以大幅度提高植物材料的品质和数量，还可以在无限制地产生同一种植物。

方法一：赤潮法（Embryogenesis）这一方法是利用赤潮细胞发生器官（如胚性板）的细胞分化，诱导植物组织的胚胎发生，进而实现植物再生。

该方法适用于很多种植物，如玉米、大麦、水稻等。

步骤为：1. 准备培养基：含有赤潮素、氨基酸、维生素、植物激素和适当的糖类和盐类的基础培养基。

2. 处理材料：将植物的姿态板或种子材料在高温（35-40C）下进行消毒，使其无菌。

3. 材料分离：将消毒材料放入无菌条件下进行材料分离。

4. 培养细胞：将细胞或组织放入含有培养基的无菌培养皿中，保持恒定的温度、湿度和光照条件，促进发生素感应化。

5. 发生胚胎体：促进胚胎形成，通过培养发生胚胎胶囊或胚胎体。

6. 块茎冷藏：利用低温存储胚胎体或胚胎胶囊。

方法二：组织培养（Organogenesis）组织培养方法是通过培养植物的基本组织如叶片、茎尖、芽分根进而再生整个植株。

步骤为：1. 材料处理：对种子或植株进行表层消毒处理。

2. 制备组织片：将消毒好的植株切成组织片段，如茎尖、叶片等。

3. 培养基准备：准备无菌的培养基，其中含有植物的必需胰凡陈列如糖类、氨基酸、维生素、生长因子和植物激素等。

4. 组织分化：将组织片段放入含有培养基的培养皿中，使其分化成根、茎、叶等。

5. 干涸与移栽：将培养的加上适量水后，移栽到含有生长素适量的培养基中，促进植物以正常生长的形式营养。

方法三：悬浮细胞培养（Suspension Culture）在此方法中，使用悬浮培养细胞进行植物细胞或组织的生物合成和生物转化。

步骤为：1. 培养基准备：通常使用植物基础培养基加入氨基酸、维生素和植物激素等。

2. 细胞处理：将细胞分散在含有培养基的匀浆器中，使其悬浮在培养基中。

植物组织培养灭菌方法1.灭菌剂处理法灭菌剂处理法是最常见、最简便的植物组织培养灭菌方法之一、常用的灭菌剂有乙醇、漂白粉、ε-环状酯、紫草素等。

处理步骤如下：（1）将材料（如种子、茎段等）放入一个密闭容器中。

（2）向容器内加入一定浓度的灭菌剂，使材料完全浸泡其中。

（3）将容器密闭，放置一定时间。

（4）取出材料，用无菌水洗净，并在无菌条件下进行培养。

这种方法适用于对微生物敏感性比较低的植物材料，如种子。

但对于一些难以灭菌的种子和组织，灭菌剂处理法可能无法彻底灭菌。

2.高压灭菌法高压灭菌法是一种通过高温高压处理来灭菌的方法。

常用的设备有高压灭菌锅。

具体操作如下：（1）将材料放入高压灭菌锅中。

（2）加入适量的水，使锅内的水位超过材料。

（3）将锅盖盖好，调整压力和温度。

（4）根据不同材料的要求，进行一定时间的高温高压处理。

（5）取出材料，在无菌条件下进行培养。

高压灭菌法可以有效杀灭植物材料中的微生物，但是对于一些难以灭菌的菌种，如孢子，可能需要更高的温度和压力。

3.紫外线灭菌法紫外线灭菌法是一种利用紫外线照射杀灭微生物的方法。

（1）将材料放入无菌培养器皿中。

（2）将紫外线灯放在距离材料表面一定距离的位置上，照射一定时间。

（3）取出材料，在无菌条件下进行培养。

通过紫外线灭菌法可以快速灭菌并保持材料的无菌状态，但紫外线照射对于一些不易透过的材料，如种子表皮，效果较差。

总而言之，植物组织培养灭菌方法有很多种，不同的方法适用于不同的植物材料。

在进行组织培养之前，必须选择合适的灭菌方法来确保培养过程的无菌性，从而保证实验的顺利进行。

植物组织培养灭菌方法
植物组织培养是一项重要的生物技术,培养基和植物组织在进行培养过程中需要保持清洁卫生。

以下是常见的灭菌方法:
1. 高压灭菌(High压力灭菌):这种方法使用高压蒸汽系统对培养基或植物组织进行灭菌,通常需要121-152摄氏度高压灭菌10-15分钟,杀死所有微生物和病原体。

这种方法适用于各种类型和形状的培养基和植物组织。

2. 低温灭菌(Low温度灭菌):这种方法使用低温系统对培养基或植物组织进行灭菌,通常需要130-160摄氏度低温灭菌60-90分钟,杀死所有微生物和病原体。

这种方法适用于杀死一些难以发现或难以繁殖的病原体,但需要注意避免损坏植物组织或培养基。

3. 化学灭菌(化学消毒):这种方法使用化学物质对培养基或植物组织进行消毒,通常使用氯气、氢氧化钠、过氧化氢等消毒剂。

这种方法需要谨慎使用,以免产生毒性气体或损害植物组织。

无论使用哪种灭菌方法,都需要注意保持适当的压力和时间,以确保杀死所有微生物和病原体。

同时,还需要注意消毒程序和储存方式,以确保培养基和植物组织的质量和安全。

植物组织培养实务--外植体的选择与消毒1、外植体的选择外植体是指植物组织培养中的各种接种材料。

从理论上讲，植物细胞都具有全能性，能够再生新植株，任何器官、任何组织、单个细胞和原生质体都可以作为外植体。

但实际上，不同品种、不同器官之间的分化能力有巨大差异，培养的难易程度不同。

为保证植物组织培养获得成功，选择合适的外植体是非常重要的。

（1）选择优良的种质及母株无论是离体培养繁殖种苗，还是进行生物技术研究，培养材料的选择都要从主要的植物入手，选取性状优良的种质、特殊的基因型和生长健壮的无病虫害植株。

尤其是进行离体快繁，只有选取优良的种质和基因型，离体快繁出来的种苗才有意义，才能转化成商品；生长健壮无病虫害的植株及器官或组织代谢旺盛，再生能力强，培养后容易成功。

（2）选择适当的时期组织培养选择材料时，要注意植物的生长季节和生长发育阶段，对大多数植物而言，应在其开始生长或生长旺季采样，此时材料内源激素含量高，容易分化，不仅成活率高，而且生长速度快，增殖率高。

若在生长末期或已进入休眠期时采样，则外植体可能对诱导反应迟钝或无反应。

花药培养应在花粉发育到单核靠边期取材，这时比较容易形成愈伤组织。

百合在春夏季采集的鳞茎、片，在不加生长素的培养基中，可自由地生长、分化；而其他季节则不能。

叶子花的腋芽培养，如果在1月至翌年2月间采集，则腋芽萌发非常迟缓；而在3-8月间采集，萌发的数目多，萌发速度快。

（3）选取适宜的大小培养材料的大小根据植物种类、器官和目的来确定。

通常情况下，快速繁殖时叶片、花瓣等面积为5mm2，其他培养材料的大小为0.5~1.0cm。

如果是胚胎培养或脱毒培养的材料，则应更小。

材料太大，不易彻底消毒，污染率高；材料太小，多形成愈伤组织，甚至难以成活。

（4）外植体来源要丰富为了建立一个高效而稳定的植物组织离体培养体系，往往需要反复实验，并要求实验结果具有可重复性。

因此，就需要外植体材料丰富并容易获得。

（5）外植体要易于消毒在选择外植体时，应尽量选择带杂菌少的器官或组织，降低初代培养时的污染率。

植物组织培养的操作手段及注意事项植物组织培养是一种利用植物的组织或细胞在无菌条件下进行培养和繁殖的技术。

通过植物组织培养，可以实现植物的无性繁殖、植物基因工程以及植物种质资源的保存等目的。

下面将介绍植物组织培养的操作手段及注意事项。

一、植物组织培养的操作手段1.材料准备：选择优良的母本植株，将其嫩茎、新芽、子叶等组织取出，进行消毒处理。

消毒处理一般采用漂白粉、酒精等方法，以确保材料的无菌状态。

2.培养基配制：根据实验需要，选择合适的培养基进行配制。

培养基可以分为基础培养基和添加物培养基。

基础培养基通常包括无机盐、糖类、维生素和植物激素等成分，而添加物培养基则根据具体实验需要添加特定的物质。

3.无菌操作：将材料放入培养室中进行无菌操作，保证实验的无菌条件。

无菌操作包括消毒台面、工具、培养器皿等，以及操作者本身的无菌状态。

4.培养条件控制：根据植物的特性和培养的目的，控制适宜的温度、光照和湿度等条件。

不同植物对于培养条件的要求有所不同，需要根据具体情况进行调整。

5.观察和记录：在培养过程中，要及时观察和记录植物的生长情况。

观察可以包括植物的生长速度、形态特征以及细胞分裂和器官发育等方面。

二、植物组织培养的注意事项1.消毒措施：在进行组织培养之前，必须进行彻底的消毒处理，以防止外源性的污染。

消毒处理可以使用漂白粉、酒精或高温高压等方法，具体方法根据实验需要进行选择。

2.培养器皿选择：选择适合的培养器皿进行培养。

常用的培养器皿有培养瓶、琼脂瓶、培养皿等。

不同的植物和实验要求可以选择不同的培养器皿。

3.培养基配制：培养基的配制要准确无误，按照配方进行称量和溶解。

培养基的pH值要适宜，一般在5.5-6.5之间。

4.无菌操作：在进行组织培养时，必须保持无菌操作。

操作者要穿戴无菌衣物、戴手套，并将操作区域消毒。

工具和培养器皿要进行高温高压消毒或用酒精擦拭。

5.培养条件控制：不同的植物对于培养条件有不同的要求，要根据具体植物的特性进行调整。

植物组培外植体消毒详解Modified by JACK on the afternoon of December 26, 2020植物组培外植体消毒详解外植体的消毒植物组织培养用的外植体大部分取自田间，表面上附着大量的微生物，这是组织培养的一大障碍。

因此在材料接种培养前必须要消毒处理，消毒一方面要求把材料表面上的各种微生物杀灭，同时又不能损伤或只轻微损伤组织材料而不影响其生长。

因此，外植体的消毒处理是植物组织培养工作中的重要一环。

（1）常用的消毒剂常用的消毒剂如下表所示。

理想的消毒剂应具有消毒效果好，易被无菌水冲洗掉或能自行分解，对材料损伤小，对人体及其他生物无害，来源广泛，价格低廉。

常用消毒剂的使用方法及效果①酒精酒精是最常用的表面消毒剂，以70%~75%酒精杀菌效果最好，95%或无水酒精会使菌体表面蛋白质快速脱水凝固，形成一层干燥膜，阻止了酒精的继续渗入，杀菌效果大大降低。

酒精具有较强的穿透力，使菌体蛋白质变性，杀菌效果好。

同时它还具有较强的湿润作用，可排除材料上的空气，利于其他消毒剂的渗入。

但酒精对植物材料的杀伤作用也很大，浸泡时间过长，植物材料的生长将会受到影响，甚至被酒精杀死，使用时应严格控制时间。

但酒精不能彻底消毒，一般不单独使用，多与其他消毒剂配合使用。

②升汞又称氯化汞，Hg2+可以与带负电荷的蛋白质结合，使蛋白质变性，从而杀死菌体。

升汞的消毒效果极佳，但易在植物材料上残留，消毒后需用无菌水反复多次冲洗。

升汞对环境危害大，对人畜的毒性极强，使用后应做好回收工作。

③次氯酸钠次氯酸钠是一种较好的消毒剂，它可以释放出活性氯离子，从而杀死菌体。

其消毒能力很强，不易残留，对环境无害。

但次氯酸钠溶液碱性很强，对植物材料也有一定的破坏作用。

④漂白粉漂白粉的有效成分是次氯酸钙[Ca(ClO)2]，消毒效果很好，对环境无害。

它易吸潮散失有效氯而失效，故要密封保藏。

⑤过氧化氢也称双氧水，消毒效果好，易清除，又不会损伤外植体，常用于叶片的消毒。

植物组织培养常用的灭菌方法常用的灭菌方法可分为物理的和化学的两类，即：物理方法如干热（烘烧和灼烧）、湿热（常压或高压蒸煮）、射线处理（紫外线、超声波、微波）、过滤、清洗和大量无菌水冲洗等措施；化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏水、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。

这些方法和药剂要根据工作中的不同材料不同目的适当选用。

1、培养基用湿热灭菌培养基在制备后的24小时内完成灭菌工序。

高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。

在0.1mpa的压力下，锅内温度达121℃。

在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

注意完全排除锅内空气，使锅内全部是水蒸气，灭菌才能彻底。

高压灭菌放气有几种不同的做法，但目的都是要排净空气，使锅内均匀升温，保证灭菌彻底。

常用方法是：关闭放气阀，通电后，待压力上升到0.05mpa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。

关阀再通电后，压力表上升达到0.1mpa时，开始计时，维持压力0.1-0.15mpa，20分钟。

按容器大小不同，保压时间有所不同。

见表1。

该表所列数字是彻底灭菌很保险的数字，如果容器体积较大，但是放置的数量很少，也可以减少时间。

表1. 培养基高压蒸汽灭菌所必需的最少时间容器的体积/ml 在121℃灭菌所需最少时间/min20-50 1575-150 20250-500 251000 30到达保压时间后，即可切断电源，在压力到0.5mpa，可缓慢放出蒸汽，应注意不要使压力降低太快，以致引起激烈的减压沸腾，使容器中的液体四溢。

当压力降到零后，才能开盖，取出培养基，摆在平台上，以待冷凝。

不可久不放气，引起培养基成分变化，以至培养基无法摆斜面。

一旦放置过久，由于锅炉内有负压，盖子打不开，只要将放气阀打开，大气压入，内外压力平衡，盖子便易打开了。

对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种工具，可以延长灭菌时间或提高压力。

植物组织培养室及培养用具的消毒与灭菌一、目的要求1、通过实验，培养学生良好的卫生观念，确立组织培养的无菌意识。

2、掌握组织培养室的消毒及灭菌方法。

3、掌握培养用具的干热灭菌的一般操作技术。

二、仪器与用具1、用具：喷雾器、工作服、口罩、手套等。

2、药品：2%新洁尔灭，高锰酸钾，甲醛，70%酒精。

三、方法步骤（一）植物组织培养室的灭菌1、地面、墙壁和工作台的灭菌：用2%新洁尔灭喷雾。

（1）配方：取新洁尔灭原液20ml，加水980ml，配成2%新洁尔灭溶液。

（2）方法：将配好的2%新洁尔灭溶液倒入喷雾器内，进行均匀喷雾。

（3）注意事项：①墙壁、角落、地面喷雾要均匀，不要遗漏；②注意安全，在喷房顶时，要特别小心，防止药液雾滴掉入眼睛。

2、无菌室和培养室的灭菌：用甲醛和高锰酸钾熏蒸，1年中熏蒸1-2次。

（1）配方：每立方米空间用甲醛10ml加高锰酸钾5g的配比液熏蒸。

（2）方法：首先房子要密封。

然后在房子中间放一口缸或大烧杯，将称好的高锰酸钾放入缸内，再把已称量的甲醛溶液慢慢倒入缸内，完毕，人迅速离开，并关上门，密封3天。

（3）注意事项：①操作前要戴好口罩及手套；②倒入甲醛时要小心，因为甲醛遇到高锰酸钾会迅速沸腾，并产生大量烟雾。

操作时人要迅速避开烟雾；③3天后，打开房间，搬走费液缸；一周后，方可进入操作。

3、在已经熏蒸过的房间内，用70%酒精纱布擦洗培养架、工作台。

4、用紫外灯照射20—30min。

5、使用前，再用70%酒精喷雾，使空间灰尘落下。

（二）培养基的灭菌——高压蒸汽灭菌（湿热灭菌法）（1）洗涤：把组织培养基用的培养皿、三角瓶、试管等玻璃器皿进行彻底清洗。

自然晾干或烘箱干燥。

（2）包扎：用牛皮纸、报纸、纱布或锡箔纸把玻璃器皿和金属器械分别包扎好。

（3）装水：在高压灭菌锅内装入一定量的水（水要淹没电热丝）。

（切忌干烧！）（4）装物品：在灭菌锅内放入含培养基的培养瓶或三角瓶、装蒸馏水的玻璃瓶，以及包扎好的玻璃器皿和金属器械等。

组培实验室常见消毒方法优劣比较组培实验室是生命科学及相关学科实验室建设中必备的实验室。

组培实验室的消毒是实验室日常管理工作的重要环节，直接关系着组培实验的成功与否和组培幼苗的质量高低。

组培实验室的消毒一般又可分为环境消毒、培养基消毒和外植体的消毒。

培养基的消毒主要是在高压灭菌锅中进行，在此不再赘述。

环境消毒和外植体的消毒则有多种方法，这些方法各有优劣，使用不当时还会对人体产生伤害，为此，笔者特对这些典型方法进行分析比较，为组培实验室的科学管理提供一些参考。

1 组培实验室的环境消毒保持组培实验室的空气清洁度是减少组培污染的重要条件，用于实验室消毒的常规消毒方法包括紫外线照射法、甲醛熏蒸法、新洁尔灭(苯扎溴铵溶液)法等，比较新的方法有中草药消毒法。

1.1 紫外线照射法紫外线是波长在10-400 nm之间辐射光的总称，能引起细菌、病毒等微生物遗传物质的结构发生变化，从而影响DNA复制、RNA转录和蛋白质的翻译，导致病菌或病毒死亡。

此外，紫外线辐射所产生的臭氧和各种自由基可损伤蛋白质和酶分子，导致功能改变。

紫外线消毒具有广谱性，可杀灭细菌、病毒、真菌、支原体等各种微生物。

紫外消毒具有较高的杀菌效率，且由于未使用化学药剂，消毒过程中不会产生对人体和环境有害的副产物。

该技术运行维护简单，费用较低。

采用室内悬吊式紫外线消毒时，室内安装紫外消毒灯的数量为每平方不少于1. 5 W，照射时间不少于30 min。

但需要指出的是，过量的紫外线照射对人体有一定的危害乃至致癌作用。

紫外线作用于中枢神经系统，可出现头痛、头晕、体温升高等症状。

过量辐射会诱发皮肤癌。

紫外辐射对眼睛的损伤特别明显，严重时可能诱发白内障。

因此，当组培实验室在用紫外消毒期间，工作人员不要呆在正消毒的空间内，切忌用眼睛注视紫外灯。

特别的，如超净工作台内的紫外灯打开消毒时，应避免将手长时间暴漏于紫外灯下。

一般在接种室用紫外线消毒后，不要立即进入接种室，此时室内充满高浓度的臭氧，会对人体，尤其是呼吸系统造成伤害。