3种经典工艺生产的金银花提取物中糖类成分含量比较(一)

金银花、山银花的质量分析与提取物的制备研究金银花是非常常用的传统中药材,历年版的《中华人民共和国药典》一部中都有收载,具有清热解毒,疏散风热的功效。

作为传统复方中药的主要组成部分,广泛应用于中医临床配伍组方治疗多种疾患,是众多中成药和保健药品的原料药材,也是广泛使用的食品资源。

近年来,随着金银花与山银花价格差异较大,市场上相当一部分产品是以山银花入药,导致金银花及含金银花的产品中掺假严重。

这两种草药外观形态和化学成分不同,中药特性和适应症有相似之处,但山银花中含有的较高含量的皂苷类成分能造成其在应用时存在诸多安全隐患,目前仅以绿原酸和木犀草苷作为质控指标,难以真正反映金银花质量的优劣。

因此,针对目前金银花掺假严重且传统检测方法耗时耗溶剂,使得它们不适合在工业生产中快速分析的问题,有必要建立一种具有快速鉴别,且能同时测定多指标成分含量和检测指纹图谱的低成本分析方法,来解决金银花药材及其复方中药的质量控制问题。

本课题采用超高效液相色谱法(UHPLC-DAD/ELSD)建立了一套用于金银花药材质量控制的定性定量分析方法,可在8 min内通过出峰的皂苷类成分鉴别金银花中是否掺有山银花,并且可以同时鉴别出金银花提取物中是否含有山银花;在同一色谱条件下,可以同时测定金银花与山银花中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、木犀草苷、异绿原酸A、B、C等7种共有成分的含量,以及山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙2种特有成分的含量。

此外,UHPLC作为全面评价中药材质量的方法,也实现了金银花多指标成分含量的同时测定和指纹图谱的同时检测。

通过方法学考察,研究的9种成分线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、回收率的RSD值均小于3%,平均加样回收率为98.71%~101.1%,说明本分析方法准确可靠。

与传统方法比较,本分析方法同时具有分析时间短、分离效果好、消耗溶剂少、进样量少、操作简便等优点。

采用本分析方法对15个批次金银花、9个批次山银花以及6个批次金银花提取物进行了比较分析研究,其分析结果能有效、快速和全面的评价不同来源药材及提取物的质量,从而为该药材建立了一种可靠的质量分析方法,能更全面反映和有效控制金银花及其提取物的内在质量,同时也可以为其他含金银花药材的复方完善质量标准提供参考依据,也可以作为参考应用于其他药材。

金银花的化学成分种类及药性测定分析金银花的化学成分种类及药性测定分析1 化学成分李氏等[12]从金银花Lonicera japonica Thunb.中分离得到一个新的裂环环烯醚萜苷,命名为dehydromorroniside。

该化合物为忍冬属中发现的第3个morroniside-型裂环环烯醚萜苷。

1.1 挥发油金银花中的.挥发油是其疏散风热主要物质基础之一。

研究学者主要应用气-质联用(GC-MS)技术,从干花、鲜花成分比较、不同来源样品、不同提取方法、不同药用部位等对金银花挥发油成分进行了分析和测定。

张氏等[1]研究认为,金银花Flos Lonicerae japonicae干、鲜花化学成分差异很大。

从干花挥发油中鉴定出65个化合物,占挥发油的94.42%,其中棕榈酸占26.36%,十八碳二烯酸乙酯占9.86%,二十四碳酸甲酯占8.44%；从鲜花挥发油中鉴定出52个化合物,占90.46%,其中α-TIN M烯为21.52%,芳樟醇为14.15%,芳樟醇氧化物为10.46%。

鲜花中含量最高的α-TIN M烯在干花中未测出,可能在干燥过程中损失。

其他化学成分为醇、醛、酯、酮、烷、烯、炔等有机化合物。

姚氏等[2]采取超临界CO2萃取法(SFE-CO2)所得萃取物进行GC-MS分析,经人工解析及计算机检索确定化学结构,共鉴定出绿叶醇等20种化合物,萃取物得率为3.25%。

1.2 黄酮类黄酮类化合物有抗菌抗病毒的药理作用,其中木犀草素- 7-0-β-D-半乳糖苷已作为2005版《中国药典》中金银花Flos Lonicerae japonicae的一个质量控制指标。

研究者通过色谱分离和光谱鉴定的方法,对忍冬和山银花中的黄酮类化合物进行了确定。

邢氏等[7]从忍冬花蕾中分离得到11个化合物,分别是木犀草素(Ⅰ)、5-羟基-7,3',4',5'-四甲氧基黄酮(Ⅱ)、5-羟基-7,4'-三甲氧基黄酮(Ⅳ)、5-羟基-7,4'一二甲氧基黄酮(Ⅳ)、槲皮素(Ⅴ)、忍冬苷(Ⅵ)、胡萝卜苷(Ⅹ)。

金银花有效成分提取工艺的优化研究金银花是一种常见的中药材，具有抗菌、抗病毒、抗氧化等多种药理活性，被广泛应用于中药制剂和保健品中。

提取金银花的有效成分，对于充分发挥其药理作用具有重要意义。

本文将对金银花有效成分的提取工艺进行优化研究，以提高提取效率和产品质量。

一、溶剂的选择金银花中的有效成分主要为挥发油、黄酮类和多糖类物质。

因此，选择合适的溶剂对于有效成分的提取具有重要作用。

研究表明，乙酸乙酯、乙醇和水三种溶剂可以较好地提取金银花的有效成分。

乙酸乙酯适用于提取挥发油，乙醇适用于提取黄酮类物质，而水适用于提取多糖类物质。

因此，提取金银花时可以根据所需提取的成分选择相应的溶剂，或采用多溶剂提取的方式，以充分提取金银花的有效成分。

二、影响提取效果的因素1. 提取时间：提取时间的设置对于提取金银花的有效成分具有重要影响。

一般来说，提取时间过长可能导致挥发油和其他易挥发成分的损失，提取时间过短则可能导致有效成分的提取不充分。

因此，应根据不同溶剂和成分的特性来确定合理的提取时间。

2. 提取温度：提取温度是影响提取效果的关键因素之一。

提取温度过高可能导致有效成分的降解和损失，提取温度过低则可能导致有效成分的提取效率低下。

因此，应选择合适的提取温度以达到最佳提取效果。

3. 溶剂比例：溶剂比例的设置也是影响提取效果的重要因素之一。

不同成分对不同溶剂的亲和性不同，因此，合理的溶剂比例可以提高有效成分的提取效率。

一般来说，使用两种或多种溶剂混合提取可以提高提取效果。

4. 固液比：固液比是指金银花与溶剂的质量比。

固液比过高可能导致溶剂不足，影响成分的提取效果；固液比过低则可能导致溶剂过量，增加处理成本。

因此，应通过实验确定合适的固液比。

三、超声波辅助提取技术超声波辅助提取技术是一种常用的物理方法，可以加速提取过程，提高提取效果。

超声波振荡产生的微弱反应力可以破坏细胞壁，促进有效成分与溶剂的接触和渗透，从而提高提取效率。

⾦银花的成分及功效引⾔1 引⾔⾦银花，是规定的在中国许多配⽅中被⼴泛使⽤的草药之⼀。

它有清热，解热，解毒，消炎的作⽤。

因此，它已经被规定去⽤来治疗感冒发烧，发热性疾病，痢疾以及致命的肿胀。

许多以前的报告中，绿原酸作为⾦银花的主要成分之⼀，由于其⾼含量和抗菌性，就被⼴泛⽤来控制衡量⾦银花的质量。

若⼲种其他成分，如黄酮，环烯醚萜苷和皂苷，由于它们的有效的活动，也已被发现并使⽤于先进的分析技术。

因此，在过去⼏年，⾦银花的研究和临床应⽤已经取得了巨⼤的进步。

⾃由基是⾼活性物种在⾝体正常的代谢功能中产⽣或者是从环境引进的。

⾃由基已被报道出在超过60种不同的健康状况中扮演很重要的⾓⾊，包括⽼化过程，癌症，动脉粥样硬化等。

因此，它是通过清除这些有害⾃由基利于我们的健康。

如今，科学家们⼀直在探索的⽣物传感器，⽤来评估其抗氧化状态，以防⽌⼀些疾病和控制⾷品的质量，这已经导致了⼀场⾰命，是前景⼤好的医疗保健的新范例。

1,1 -⼆苯基-2-苦味（DPPH）是稳定氮为中⼼的⾃由基之⼀，是有效的回收的抗氧化剂⾃由基的代表之⼀。

虽然⾦属螯合作⽤往往被认为作为⼀个轻微的抗氧化作⽤机制，但是离⼦减少的能⼒，也是抗氧化剂重要的属性之⼀。

抗氧化剂可以绑定，并减少为Fe2 +变为Fe3 +离⼦，形成⼀个⽆效的Fe2 +抗氧化剂的复杂保护。

⼀种抗氧化剂清除DPPH⾃由基和铁还原能⼒，历来被⼴泛接受的抗氧化能⼒理论。

虽然⾦银花已被⼴泛研究了很多年，到⽬前为⽌没有制备⾦银花提取物的抗氧化活性的研究报道。

在这项研究中，我们研究了不同的试剂，从⾦银花两种不同的检测发现，三种提取物表现出抗氧化活性。

绿原酸是⾦银花的重要组成部分，⾦银花的抗氧化活性的贡献⾮常明显。

2材料与⽅法2.1物料⾦银花样品采⾃中国河南省。

⾼效液相⾊谱法（HPLC）仪器购买了从美国实验室联盟公司。

贝克曼杜640分光光度计，配备热⾃动分析购买于贝克公司（美国）。

DPPH和菲林试剂均购⾃Sigma公司（美国）。

不同工艺的金银花提取物组分比较研究Co m ponents C o m pare of Honeysuckle Extracti o n Obtai n ed by D ifferent Pre paration黄云,肖艳萍,李娟,林海(湖南医药工业研究所,湖南　长沙　410014)[摘要]　目的:采用HPLC 法检测不同工艺所得金银花提取物的组分及绿原酸含量。

方法:采用Symm e try ODS (4.6×150mm ,5μm ),ODS 保护柱。

流动相为乙腈-0.4%磷酸(8：92),检测波长为327n m 。

结果:液相色谱图中只有采用改良石硫法所得提取物的组分与原石硫法基本保持一致,其它方法所得提取物的组分与原石硫法都有差别。

结论:金银花提取物组分不同,抗菌作用则不同。

由此可见绿原酸含量的高低尚不能说明金银花提取物质量的好坏。

[关键词]　金银花提取物;绿原酸;组分;高效液相色谱法[Abstract ]　O b j ec tive :H PLC was used t o exa m ine t he components of honey s uckle ex traction obtained by differen t prepara tion and t he conten t o f Ch l o rogen ic ac i d .M e t hod :To use the Symm e try ODS (4.6×150mm ,5μm ),ODS Co lu mn .M obil e phase :ace t oni -trile -0.4%P hospho ric (8：92),de t ec tive w aveleng t h w as 327n m.R esult :In liqu i d chrom atography -m ass s pectro m e try (LC -M S ),on l y have the components o f extracti on obtained by i m prove m ent me t hod o f SH IL I U kep t unifo r m w it h pri m a ry m ethod of SH IL I U ,the components o f extrac tion obtained by o t her ways had d iffe rent from pri m ary m ethod of S H ILIU.Conc l usi on :t he co m ponen ts of honey -s uckle extracti on we re differen t ,and its anti-bacte ri a e ffec tw as differen.t So ,Ch l o rogenic acid whatever its content wa s t he high o r lo w couldn 't explain that t he qualit y of honeysuck l e ex trac tion w as good o r bad .[K ey w ords ]　Honey s uckle extrac tion ;Chlorogenic acid ;Com ponents ;HPLC[中图分类号]R284.2　[文献标识码]A [文章编号]1672-951(2005)06-068-03 金银花为忍冬科植物忍冬Lonice ra j aponica Thunb .红腺忍冬Lonicera confusa CD.或毛花柱忍冬Lonicera dasy sty l a Rehd .的干燥花蕾或初开的花。

金银花多糖的提取工艺及含量测定研究【摘要】目的：优化金银花多糖的提取工艺并对多糖的含量测定进行研究。

方法：采用苯酚-硫酸法测定多糖含量，水提醇沉法制备粗多糖，sevag去蛋白法对多糖进行精制，以金银花总多糖提取率为指标，优选最佳提取工艺，并采用正交试验法对优选的最佳工艺参数进行优化。

结果：影响金银花多糖提取率的各因素关系为：提取温度>溶剂倍量>提取时间>提取次数；最佳提取工艺为：提取温度90℃，提取时间为1.5h，提取次数为2次，溶剂倍量为15倍量，多糖提取率为9.61%。

结论：优选的工艺操作简便，多糖提取率高。

【关键词】金银花多糖；提取工艺；含量测定【中图分类号】r282.4 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）12-0011-02金银花为忍冬科植物忍冬lonicera japonica thunb.的干燥花蕾或带初开的花[1-2]。

已有报道称多糖是金银花中有效成分之一，并有抗癌、抗肿瘤、提高人体免疫力等多种作用[3]，目前国内对金银花多糖方面的研究仍较少。

金银花的多糖提取工艺及含量测定研究有利于新的药效部位的开发，为金银花多糖的开发应用提供理论依据。

1 材料与仪器ab135-s型电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；uv-1100型双光束紫外-可见分光光度仪（上海天美科学仪器有限公司）；r1002型旋转蒸发仪（上海申顺生物科技有限公司）；tdl-5-a型台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；金银花药材购自济南建联中药有限公司，经鉴定为忍冬科植物忍冬lonicera japonica thunb.的干燥花蕾；d-无水葡萄糖（中国药品生物制品检定所，批号110833-200503）；苯酚、硫酸等试剂均为分析纯，水为去离子水。

2 方法与结果2.1 金银花多糖含量测定2.1.1 含量测定方法d-无水葡糖糖作为标准品配制标准品溶液，采用苯酚-硫酸法[4]测定金银花提取物中总多糖的含量。

临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical 2018 年第 5 卷第 31 期2018 Vol.5 No.31178·实验研究·金银花不同加工方法对绿原酸含量的影响董琼，徐继朋（马应龙药业集团股份有限公司，湖北武汉 430064）【摘要】目的 探讨不同加工方法，对金银花中绿原酸含量的影响。

方法 采用硫磺熏蒸、滚筒杀青和蒸汽杀青三种加工方法对金银花进行加工，采用高效液相色谱法对金银花中的绿原酸进行测定。

结果 硫磺熏蒸、滚筒杀青和蒸汽杀青三种方法加工后，绿原酸的平均含量分别为4.08%、5.64%、4.34%。

结论 三种加工方法加工金银花，其中采用滚筒杀青加工，绿原酸提取率最高，且操作简便，质量稳定。

【关键词】金银花；绿原酸；硫磺熏蒸；滚筒杀青；蒸汽杀青【中图分类号】R283 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8242.2018.31.178.01金银花是一种清热解毒的良药，它不仅能够宣散风热，还能够改清热解毒，用于各种热性病。

金银花中主要含绿原酸、异绿原酸、黄酮类物质，另外还含有少量的忍冬苷、肌醇、皂苷、挥发油等成分[1]。

近年来，临床对金银花的需求量更是逐年增加，但由于受到加工方式以及储存条件的影响，使得金银花药材的质量参差不齐。

有报道称，不同加工方法会影响金银花中部分化学成分的含量[2]。

本文旨在探讨不同加工方法对金银花中绿原酸含量的影响，现报道如下。

1 实验仪器与实验试剂1.1 实验仪器Agilent1260液相色谱仪（安捷伦科技有限公司）；FA1604电子天平（上海天平仪器厂）；HS3120超声仪（天津市恒奥科技发展有限公司）。

1.2 实验试剂与试药绿原酸标准品（中国药品生物制品检定所）；乙腈为色谱纯；甲醇为分析纯；纯化水；冰醋酸。

药材样品分别取材于山东省临沂市平邑县。

2 实验方法2.1 色谱条件色谱柱：Sino Chrome ODS-BP（250 mm×4.6 mm，5 μm）分析柱；流动相：乙腈—0.4%磷酸（15:85）；柱温：35℃；流速：1 mL/min；UVD检测波长：327 nm；进样量：20 μL。

临床医药文献杂志Journal of Clinical Medical 2019 年第 6 卷第 13 期2019 Vol.6 No.13178・实验研究・不同加工方法金银花有效成分高效液相色谱比较分析陈朝晖，喻晶（马应龙药业集团股份有限公司，湖北武汉 430064）【摘要】目的 通过高效液相色谱法比较不同加工方法金银花有效成分的含量。

方法 收集经杀青烘干、土烤烘干、晒干三种不同加工方法加工的金银花样品，采用高效液相色谱法测定有机酸类、黄酮类的含量。

结果 杀青烘干和土烤样品有机酸含量高于晒干，有显著性差异（P＜0.05），黄酮类含量无显著性差异（P＞0.05）。

结论 杀青烘干等现代加工方法更有利于提升金银花品质。

【关键词】金银花；有机酸类；黄酮类；加工方法【中图分类号】R284.1 【文献标识码】A 【文章编号】ISSN.2095-8242.2019.13.178.01金银花正名又称忍冬，自古便被誉为清热解毒的良药，因其性甘寒、气芳香，所以可清热却不伤胃，透达又可祛邪。

其功效主要是清热解毒，主治温病发热、热毒血痢、痈疽疔毒等。

现代研究已经证实存在于金银花中的绿原酸、木犀草苷、槲皮素等可以有效抑制金黄葡萄球菌、溶血性链球菌等多种上呼吸道感染致病病毒[1]。

不同产地对金银花的加工方法也各不相同，临床中缺少基于金银花不同加工方法对其有效成分含量的比较。

本研究中采用高效液相色谱法评价不同加工方法对其有效成份的影响。

1 仪器与试药1.1 仪器美国Agilent公司生产的高效液相色谱仪；电子分析天平；数控超声波清洗器。

1.2 试剂绿原酸对照品，木犀草苷、芦丁、槲皮素购自中国食品药品检定研究院。

异绿原酸A、异绿原酸C对照品购自成都曼思特生物科技有限公司，对照品纯度均高于98%。

乙腈、甲醇为色谱纯，磷酸、乙醇为分析纯。

1.3 材料收集于山东平邑县的金银花样品，经鉴定均为忍冬科植物忍冬的花蕾。

加工方法包括杀青烘干、土烤烘干、晒干三种。