雌激素受体(ER)免疫组化试剂盒

常用免疫组化试剂介绍一、用于鉴别诊断(一)上皮源性：1. 细胞角蛋白/cytokeratin.CK：目前，商品化的细胞角蛋白有20多种，不同的分子量代表不同类型的上皮标志。

通常将C K分为两大类型：Ⅰ型〔低分子量〕；Ⅱ型〔高分子量〕。

理论上讲，大多数单层上皮表达低分子量的CK；复层上皮多表达高分子量的CK；移形上皮〔膀胱〕和假复层上皮〔呼吸道的被覆上皮〕既表达低分子量的CK，也表达高分子量的CK。

在癌组织中，低分子量的CK多在腺癌中表达，高分子量的CK多在鳞癌中表达。

目前为止，未发觉任何一种上皮只含有一种CK，某些上皮可含2-10种不同分子量的CK。

因此，目前试图应用单一的CK免疫表型来确定某种特定的上皮性肿瘤是不可能的。

同样，应用CK来区别腺癌、类癌和间皮瘤也是困难的。

因此，CK的免疫组化结果推断是一个较为复杂的问题，在应用这类标记物作为腺癌和鳞癌的鉴别应特别注意。

有必要时，应联合用多种CK加以综合推断。

CK的阳性表达还包含有间变癌、双向分化的滑膜肉瘤、脊索瘤、胚胎癌、间皮瘤、上皮样肉瘤、胸腺瘤等。

CK的阴性表达有：副节瘤单向分化的滑膜肉瘤、软骨〔肉〕瘤、精原细胞瘤、淋巴瘤、脑膜瘤、恶黑、恶纤组、软组织肉瘤〔除特别类型外〕。

在推断CK免疫组化结果时应注意几点：〔1〕 CK的单克隆抗体优于多克隆抗体；〔2〕 CK常出现斑点状的假阳性反响，应注意识别；〔3〕虽然大多数CK多在胞浆表达，但CK17多在胞核表达；〔4〕绝大多数CK抗体需用胰酶消化，可增加阳性表达率和染色强度；〔5〕局部非上皮性肿瘤〔平滑肌肉瘤〕可见有CK表达，在诊断时应注意；〔6〕淋巴结、扁桃体和脾组织中的滤泡外的网织细胞含有CK8和18以及desmin,在推断淋巴结转移癌和肌源性肉瘤转移时应依据组织学综合推断。

2.上皮膜抗原〔epithelial membrane antigen/EMA〕：EMA是上皮细胞分泌的一种乳脂小球膜糖蛋白，广泛存在于人体各种上皮细胞中〔也存在于间皮细胞、浆细胞、组织细胞和T细胞淋巴瘤中〕，其分布与角蛋白相似，但对内脏腺上皮优于细胞角蛋白，尤其是分化差的癌EMA有时可呈强阳性表达。

乳腺癌免疫组化内容
一、标记物选择
在乳腺癌免疫组化实验中，通常会选择以下标记物：
1.ER（雌激素受体）：用于评估乳腺癌对激素治疗的反应性。

2.PR（孕激素受体）：与ER一起评估激素治疗的反应性。

3.HER2（人类表皮生长因子受体2）：用于评估乳腺癌的恶性程度和预测化疗效果。

4.Ki-67：反映肿瘤细胞的增殖活性。

5.p53：与肿瘤恶性程度和预后相关。

二、实验步骤
1.样本处理：将乳腺癌组织样本进行固定、脱水、透明、浸蜡等处理，以便进行免疫组化实验。

2.切片制备：将处理好的组织样本切成薄片，附着在载玻片上。

3.抗原修复：使用抗原修复液对组织切片进行加热，以暴露抗原并使其易于与抗体结合。

4.抗体孵育：将标记物抗体与组织切片混合，并在适宜温度下孵育一定时间，使抗体与抗原结合。

5.信号转化：使用酶或其他介质将抗原-抗体复合物转化为可见信号，以便在显微镜下观察。

6.染色观察：对组织切片进行染色，并在显微镜下观察标记物的表达情况。

7.结果分析：根据染色强度、阳性细胞比例等因素对结果进行分析，评估乳腺癌的生物学特性。

注意事项：
1.免疫组化实验需要使用特定的抗体，不同的抗体可能对不同的抗原具有特异性，因此选择合适的抗体非常重要。

2.实验过程中需要注意温度、时间和pH值等条件，以确保抗体与抗原的结合和信号转化的顺利进行。

3.免疫组化实验结果需要进行客观、准确的评估，避免出现假阳性或假阴性结果。

子宫内膜癌中ER、PR的表达及意义研究刘杰【摘要】目的：探讨子宫内膜癌中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达及其临床意义。

方法应用免疫组织化学SP法检测80例正常子宫内膜（C组）、80例子宫内膜非典型增生（B组）及80例子宫内膜癌（A组）的ER、PR的表达，分析其表达及与临床分期、组织学分级、肿瘤肌层浸润和淋巴结转的相关性。

结果ER、PR在C组、B组、A组中的表达阳性率逐渐下降且统计学处理差异有统计学意义（P＜0.05）；ER、PR在子宫内膜癌不同临床分期中的阳性表达率随着期别的增加而呈降低趋势，差异有统计学意义（P＜0.05）；从组织学分级来看，低分化的癌组织中ER、PR的阳性表达率显著低于中分化和高分化癌组织（P＜0.05）；肌层浸润深度＞1/2的癌组织中ER、PR的阳性表达率显著低于肌层浸润深度≤1/2组（P＜0.05）；有淋巴结转移的癌组织中ER、PR阳性表达率显著低于无淋巴结转移的癌组织（P＜0.05）。

ER、PR与临床分期、病理分级、肌层浸润深度、淋巴结转移有关（P＜0.05）。

结论ER、PR与子宫内膜癌的发生、发展、转移及预后相关。

【期刊名称】《当代医学》【年(卷),期】2016(022)027【总页数】2页(P24-25)【关键词】雌激素受体;孕激素受体;子宫内膜癌【作者】刘杰【作者单位】山东 253400 山东省宁津县中医院【正文语种】中文子宫内膜癌是女性生殖器最常见的肿瘤之一，是女性第4位常见的癌症，仅次于乳腺癌、肺癌和肠癌[1]。

随着分子遗传学研究与不断发展的分子生物学、免疫学技术相结合，对子宫内膜癌在分子水平致癌机制的研究越来越深入。

有研究表明，子宫内膜癌的发生与雌激素有关，增加无对抗性雌激素暴露的任何因素，均能增加内膜癌的发生风险[2]。

现就ER、PR在子宫内膜癌中的表达，对于子宫内膜癌基因表达及激素失调等方面的关系进行综述，并从其发生、发展、浸润、转移、预后等多个阶段、不同层次及多个方面揭示子宫内膜癌发生、发展、浸润、转移的演变过程及预后的相关因子。

雌激素受体亚型ERα在子宫肌瘤中的表达及其临床意义作者：李青来源：《中国保健营养·中旬刊》2013年第10期【摘要】目的：检测雌激素受体亚型ERα在子宫肌瘤中的表达，探讨ERα与子宫肌瘤的发生、发展之间的关系。

方法：收集子宫肌瘤组织标本30例，相应肌瘤包膜外正常子宫肌层组织30例，选取正常子宫肌层组织10例。

应用免疫组化 S-P法，检测ERα在子宫肌瘤组织、肌瘤包膜外正常子宫肌层组织及正常子宫肌层组织中的表达。

结果：30例子宫肌瘤组织中，29例ERα蛋白阳性表达（ 29/30），30例肌瘤包膜外正常子宫肌层组织中21例阳性表达（21/30）， 10例正常子宫肌层组织中7例阳性表达（ 7/10），三组不同组织ERα蛋白阳性率比较有非常显著性差异（x 2=8.06， P =0.004）。

结论：雌激素受体亚型ERα与子宫肌瘤的发生、发展有关。

【关键词】ERα；免疫组化；肌瘤组织；肌层组织【中图分类号】R737.33 【文献标识码】A 【文章编号】1004—7484（2013）10—0034—01子宫肌瘤是妇科最常见的良性肿瘤，生育期妇女其发病率约为20%～25%，占女性生殖器良性肿瘤的52%。

长期以来关于子宫肌瘤病因的研究颇多，确切发病机制不清。

目前为止，一般认为雌激素有诱发并促进子宫肌瘤生长的作用，近来研究表明孕激素对子宫肌瘤更有促生长作用[1， 2]。

雌、孕激素的生理作用分别由雌、孕激素受体介导。

雌激素受体分为α和β两种亚型[3] ，由两个独立的基因编码。

ERα和ERβ具有不同的调节基因转录的活性，最终发挥不同的临床作用。

1 实验材料与方法1.1 材料1.1.1实验对象为2012年5月-2012年12月在沈阳市红十字会医院因子宫肌瘤行子宫切除术的30例患者和因宫颈CINⅢ级或子宫脱垂行子宫切除术的10例患者的石蜡组织标本。

肌瘤组：取子宫肌瘤结节中心部位组织30例，患者年龄35 ～ 40岁，平均37.27+1.5岁。

子宫内膜癌免疫组化标记物的研究进展子宫内膜癌是女性生殖系统中常见的一种恶性肿瘤，其治疗效果与预后都与肿瘤的分子病理学特征密切相关。

免疫组化标记物作为肿瘤的分子标志物，在子宫内膜癌的诊断、分期和预后判断中起着重要的作用。

本文将介绍子宫内膜癌常用的免疫组化标记物及其研究进展。

一、ER和PR雌激素受体（ER）和孕激素受体（PR）是子宫内膜癌最常见的免疫组化标记物，也是肿瘤治疗中的靶向治疗对象。

研究表明，ER和PR表达阳性的子宫内膜癌患者，其预后明显优于阴性患者。

ER和PR的表达还可以作为判断预后指标，帮助医生选择合适的治疗方案。

二、p53p53是一种抑癌基因，被认为是肿瘤发生和发展的关键因子。

研究发现，子宫内膜癌中p53的异常表达与预后相对较差的患者密切相关。

p53的阳性表达还与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移等指标呈正相关。

p53的免疫组化检测可以作为子宫内膜癌预后判断的重要标志物。

三、Ki-67Ki-67是一种细胞增殖标志物，可以反映肿瘤细胞的增殖活性和生长速度。

研究发现，Ki-67的阳性率与子宫内膜癌的预后密切相关，阳性率越高，预后越差。

Ki-67的免疫组化检测可以辅助医生判断子宫内膜癌的进展和预后。

四、Her-2子宫内膜癌的免疫组化标记物研究进展主要集中在ER、PR、p53、Ki-67和Her-2等方面。

这些标记物的阳性表达与子宫内膜癌的预后密切相关，可以作为预后判断和治疗选择的重要依据。

目前关于这些免疫组化标记物的研究还相对较少，需要进一步的研究来验证其应用价值，并寻找更准确、可靠的标志物来指导子宫内膜癌的诊断和治疗。

免疫组化er pr表达
免疫组化（immunohistochemistry，IHC）是一种用于检测组织
标本中特定蛋白质表达的技术。

ER和PR分别指雌激素受体（estrogen receptor）和孕激素受体（progesterone receptor），它们是乳腺癌等肿瘤中常见的生物标志物。

在免疫组化分析中，ER和PR的表达通常通过染色来观察。

阳
性染色表示组织中存在相应受体的蛋白质表达，而阴性染色则表示
相应受体的蛋白质表达较低或不存在。

从临床角度看，ER和PR的表达状态对于乳腺癌等肿瘤的诊断
和治疗决策具有重要意义。

阳性的ER和PR表达通常提示肿瘤对激
素治疗的敏感性较高，因此患者可能会受益于激素治疗。

相反，阴
性的ER和PR表达则可能需要考虑其他治疗选择。

此外，免疫组化ER和PR的表达也可以用于预测肿瘤的生物学
行为和预后。

研究表明，ER和PR阳性的肿瘤通常具有较好的预后，而ER和PR阴性的肿瘤则可能具有较差的预后。

总的来说，免疫组化ER和PR的表达在肿瘤诊断、治疗选择和
预后评估中起着重要作用，对于临床医学具有重要意义。

因此，对于这两种生物标志物的准确检测和评估是非常关键的。

子宫内膜癌ＥＲ、ＰＲ的表达及其临床意义【摘要】目的检测子宫内膜癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)阳性表达率并探讨其临床意义。

方法应用免疫组化技术对47例子宫内膜癌组织进行ER、PR检测，结合临床及病理指标进行分析。

结果ER、PR在47例子宫内膜癌的阳性表达率分别为57．4%和61．7%，ER、PR的双阳性、双阴性分别为48．9%和29．8%。

ER、PR在子宫内膜癌的阳性表达率与组织学分级密切相关，随组织学分级的增高，其阳性表达率逐渐降低，有统计学意义(P＜0．05)。

ER、PR的表达与肌层浸润、子宫外病灶有关，差异有统计学意义(P＜0．05)。

结论ER、PR均反应了子宫内膜癌的生物学行为，是一个可以综合反映病程、病情和病变性质的客观指标，其测定对估计患者预后，指导临床选择激素治疗具有重要意义。

【Abstract】Objective To the expression rate of estrogen receptor(ER)and progestin receptor(PR)in endometrium carcinoma tissue andto discuss its clinical significance.Methods To detect ER and PR of 47 cases endometrium carcinoma tissue ，moreover，clinic and pathology analyse to themby immunohistochemistry technology Results In 47 cases endometrium carcinoma，the positive expression rate ofER and PR were 57．4%and 61．7%respectively.Both ER and PR positiveand negative expression rate were 48．9% and 29．8%respectively.ER and PR positive expression rate had relation to histological differentiation and gradually reduced with heightening of histological differentiation，which was statiscal significance(P＜0．05).Expression of ER and PR were correlated with uterus muscle layer’s soakage and uterus outer focus，was statistical significance(P＜0．05).Conclusion ER and PR all reflected biological behavior about endometrium carcinoma and wascomprehensive guideline that may respond a disease’s course and state and pathological change’scharacter.It’s menstruation were important in estimating the prognosis and directing clinic in choosing endocrine therapy.【Key words】Endometrium carcinoma;Estrogen receptor(ER);Progestin receptor(PR);Immunohistochemistry子宫内膜癌为女性生殖器常见的三大恶性肿瘤之一，占女性生殖系统恶性肿瘤的20%~30%[1]，是激素依赖性肿瘤。

免疫组织化学抗体试剂及检测试剂盒注册申报资料的基本要求2013-01-04 01:48免疫组织化学抗体试剂及检测试剂是指一类利用免疫学原理结合酶催化底物显色的化学方法，检测组织标本中抗原的检测试剂。

此类试剂为待测抗原特异性单克隆或多克隆抗体，或抗体与显色系统、对照试剂、质控片及其它辅助试剂一同包装成试剂盒形式的检测试剂盒。

该类产品检测项目繁多，应用广泛，检测过程为多步骤检测，影响因素多，在临床上主要用于检测细胞的特异性抗原以确定细胞的表型。

该类产品的预期用途与诊断、鉴别诊断、预后判断、指导用药相关，按照三类体外诊断试剂管理。

基于该类产品临床应用的重要性及特殊性，根据目前注册申报工作的需要、依据《体外诊断试剂注册管理办法（试行）》、《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》以及《体外诊断试剂说明书编写指导原则》的相关规定，结合临床及病理检测中的应用实践、临床病理专家和生产企业的建议，现对免疫组织化学抗体试剂及检测试剂盒注册申报资料提出以下基本要求（对于本要求未提及的部分，申请人均应依据相关法规要求提交注册申报资料）。

本《要求》是在目前科学技术认识水平及现阶段免疫组化类产品技术审评基础上形成的，审评人员会密切关注相关技术的最新进展，随着认识的提高将适时调整。

由于该类产品种类繁多，《基本要求》不能涵盖所有该类产品的特殊情况，如某些要求不适用，申请人也可采用其他方式证明产品的技术性能，建议申请人对此进行详细说明，并提交相应的性能验证资料。

依据免疫组化不同标志物的临床应用情况，将其分为二个大类：A类：Her2/Neu、ER、PR、ALK、CD117、c-met、CD20、EGFR等与临床治疗、用药密切相关的标志物；其他全新标记物，具有新的临床意义。

B类：临床使用多个指标综合诊治的标志物之一，与辅助诊断、鉴别诊断、病情监测、预后相关标志物：如：Ki67、CK5/6等。

一、产品说明书1. 【产品名称】：单独的第一抗体试剂通用名称建议采取以下命名方式：待测抗原特异性抗体+试剂（免疫组织化学法）。

如何看懂乳腺癌常见免疫组化指标本文档旨在详细介绍乳腺癌常见的免疫组化指标，帮助读者学会如何正确解读这些指标的含义。

以下将逐个章节介绍各个免疫组化指标的意义和解读方法。

1、ER（雌激素受体）雌激素受体是乳腺癌治疗中关键的指标之一。

它可以通过免疫组化技术来检测。

ER阳性意味着肿瘤细胞中存在雌激素受体，提示该肿瘤对雌激素具有依赖性，治疗时可以考虑使用内分泌治疗方法。

2、PR（孕激素受体）孕激素受体与ER类似，也是用于指导乳腺癌治疗的重要指标。

PR阳性表明肿瘤细胞对孕激素敏感，治疗时可以选择内分泌治疗方法。

3、HER2（人表皮生长因子受体2）HER2阳性与乳腺癌的预后和治疗效果密切相关。

HER2阳性表明肿瘤细胞中存在过量的HER2蛋白表达，提示该病例需要使用靶向治疗药物，如曲妥珠单抗。

4、Ki-67指标Ki-67是一种细胞增殖标志物，可以帮助评估肿瘤的生长速度和侵袭性。

Ki-67阳性指标越高，表示肿瘤细胞的增殖率越高，预后可能越差。

5、CK5/6和CK14指标CK5/6和CK14是一类乳腺上皮标记物，对于乳腺癌的分类和预后评估具有重要意义。

阳性表达这些标记物的肿瘤往往具有较高的浸润性和较差的预后。

6、BRCA1和BRCA2BRCA1和BRCA2基因突变与乳腺癌的发生密切相关。

检测肿瘤细胞中的BRCA1和BRCA2蛋白表达可以帮助指导患者进行基因突变检测及相关治疗。

7、p53p53是一个重要的抑癌基因，其蛋白表达异常与多种肿瘤的发生和发展相关。

乳腺癌中p53阳性表达往往提示肿瘤具有更高的侵袭性和复发风险。

8、E-cadherinE-cadherin是一种细胞间粘附分子，与肿瘤细胞间的黏附性密切相关。

E-cadherin的阳性表达常见于乳腺癌中，如果其表达异常可能提示肿瘤存在侵袭性。

本文所涉及的附件为乳腺癌免疫组化指标的样本图片，可以帮助读者更好地了解每个指标的免疫组化染色结果。

【法律名词及注释】1、ER（雌激素受体）- Estrogen Receptor2、PR（孕激素受体）- Progesterone Receptor3、HER2（人表皮生长因子受体2）- Human Epidermal Growth Factor Receptor 24、Ki-67指标- Ki-67 index，表示细胞核内Ki-67阳性细胞的百分比5、CK5/6和CK14指标- Cytokeratin 5/6和Cytokeratin 146、BRCA1和BRCA2- Breast Cancer Gene 1和Breast Cancer Gene 27、p53- 肿瘤蛋白538、E-cadherin- 细胞间粘附分子E。

乳腺癌新辅助化疗对ER＼PR和C-erbB-2的影响及意义作者单位：467000 河南省平顶山市第一人民医院通讯作者：邹力君目的讨论乳腺癌新辅助化疗（NAC）对雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和C-erbB-2的影响及意义。

方法对2006年1月～2009年1月收入笔者所在医院进行乳腺癌治疗的96例患者在知情同意情况下进行新辅助化疗，使用免疫组化S-P试剂盒检测化疗前后96例患者的ER、PR和C-erbB-2表达有无变化。

结果接受新辅助化疗后，患者的ER、PR、C-erbB-2表达水平无统计学意义（P＜0.05），发生变化的仅分别为13、18、16例。

结论新辅助化疗对乳腺癌患者的ER、PR、C-erbB-2表达水平无明显影响。

标签：乳腺癌；新辅助化疗；ER；PR；C-erbB-2Effect and clinical significance of neoadjuvant chemotherapy on expressions of ER, PR and C-erbB-2 in breast cancer tissues ZOU Li-jun.The First Pe ople’s Hospital of Pingdingshan, Pingdingshan 467000,China【Abstract】Objective To study the influence of neoadjuvant chemotherapy on expression of ER、PR and C-erbB-2.Methods The expressions of ER、PR and C-erbB-2 of 96 patients with breast cancer were investigated by SP immunohistochemical method before and after Neoadjuvant Chemotherapy，whom were treated by Neoadjuvant Chemotherapy from january 2006 to january 2009 in our hospital.Results The difference of ER,PR and C-erbB-2 before and after neoadjuvant chemotherapy were insignificant （P>0.05）Only changes are 13,18 and 16 cases.Conclusion Neoadjuvant chemotherapy could not reduce the expression of ER 、PR and C-erbB-2 significantly.【Key words】Breast cancer；Neoadjuvant chemotherapy; ER; PR; C-erbB-2新辅助化疗（NAC）是指术前对患者进行全身性、系统性的药物治疗，现在已被公认为局部晚期乳腺癌的常规治疗方案。

新辅助化疗前后乳腺癌免疫组化表达变化的研究分析贾巍;张红真;王文娟;赵光远;姜玉荣;李海平【摘要】目的分析乳腺癌患者行新辅助化疗前后其肿瘤组织雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人类表皮生长因子受体2(Her-2)及细胞增殖抗原(Ki-67)的表达情况,探讨这些指标的变化及其临床意义.方法选择2010年1月至2014年8月收治的采用ET方案进行新辅助化疗4个周期并成功实施乳腺癌改良根治术的女性原发性乳腺癌患者82例,对比患者新辅助化疗前空芯针穿刺标本与新辅助化疗后手术标本的ER、PR、Her-2及Ki-67的表达情况(采用免疫组化S-P法检测).结果化疗后有38例(80.85％)Ki-67表达发生改变,其中阴性转为阳性0例,阳性转为阴性20例,化疗前后Ki-67表达变化的差异有统计学意义(P=o.oo);有14例(29.79％)ER 表达发生改变,17例(36.17％)PR表达发生改变,9例(23.08％)Her-2表达发生改变,但3项指标化疗前后表达变化的差异均无统计学意义(均P ＞0.05).结论乳腺癌组织Ki-67的变化主要表现为由新辅助化疗前的高表达转变为化疗后的低表达,提示高表达Ki-67的肿瘤细胞对化疗较为敏感,化疗前检测乳腺癌组织Ki-67的表达对预测化疗效果有重要意义.虽然ER、PR、Her-2的改变差异无统计学意义,但仍有部分患者发生了变化,针对这部分患者有必要适当调整治疗计划.【期刊名称】《浙江医学》【年(卷),期】2016(038)014【总页数】4页(P1181-1183,1187)【关键词】乳腺癌;新辅助化疗;雌激素受体;孕激素受体;人类表皮生长因子受体2;细胞增殖抗原【作者】贾巍;张红真;王文娟;赵光远;姜玉荣;李海平【作者单位】053000衡水,哈励逊国际和平医院普外一科;053000衡水,哈励逊国际和平医院普外一科;053000衡水,哈励逊国际和平医院普外一科;053000衡水,哈励逊国际和平医院普外一科;053000衡水,哈励逊国际和平医院普外一科;河北医科大学第四附属医院乳腺中心【正文语种】中文【 Abstract】 Objective To assess the expressions of biological indexes in patients with breast cancer after neoadjuvantchemotherapy(NAC).Methods Eighty two patients with primary breast cancer received 4-cycles of NAC with ET regimen from January 2010 to August 2014.The expressions of estrogen receptor(ER),progesterone receptor(PR),human epidermal growth factor receptor 2(Her-2)and Ki-67 in needle biopsy specimens before NAC and in surgically resected specimens were detected by immunohistochemical S-P method.The changes of expression of above biological indexes after NAC were analyzed. Results The expression levels of Ki-67 were changed in 80.85%patients,among whom 20 cases were changed from positive to negative (P＝0.00).The expression of ER was changed in 14 patients(29.79%),the expression of PR was changed in 17 cases(36.17%), the expression of Her-2 was changed in 9 cases(23.08%). Conclusion The expression of Ki-67 changes after NAC,indicating that Ki-67 may be a sensitive index to chemotherapy.The expression of ER,PR and Her-2 changes in some patients after NAC, suggesting that it is necessary to adjust the treatment regimen for thesepatients.【 Key words】 Breast cancer Neoadjuvant chemotherapy Estrogen receptor Progesterone receptor Human epidermal growth factor receptor-2 Nuclear-associated antigen Ki-67新辅助化疗能够缩小肿瘤体积、降低患者临床分期，从而提高局部晚期乳腺癌患者保留乳房手术的成功率[1]，还可以控制全身微转移癌灶，进一步明确肿瘤组织对化疗药物的敏感性。

小鼠雌二醇（E2）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂盒仅供研究使用。

药品名称：通用名：小鼠雌二醇（E2）酶联免疫分析试剂盒使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆、或相关组织液中雌二醇（E2）的残留含量。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠的雌二醇（E2）水平。

用纯化的雌二醇（E2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入雌二醇（E2），再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的雌二醇（E2）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠雌二醇（E2）的含量。

试剂盒组成1 20倍浓缩洗涤液30ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品（72ng/L）0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本处理及要求1．血清、血浆标本可直接测定；2．组织：取相关组织1g 于5ml PBS中匀浆，室温孵育5小时（期间不时旋涡混合）后，2000-3000转/分离心10分钟后，取上清液待测。

3．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

4．采集后尽早进行实验，若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

操作步骤1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上按序设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；再各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后，在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉；再各取50μl分别加到第五、第六孔中；再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中；再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中；再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。

一、实验目的本次实验旨在通过对纤维腺瘤的组织学特征、生物学特性以及治疗方法的探讨，提高对乳腺纤维腺瘤的认识，为临床诊断和治疗提供理论依据。

二、实验材料与方法1. 实验材料（1）纤维腺瘤组织样本：选取经病理诊断为乳腺纤维腺瘤的手术切除标本。

（2）实验试剂：HE染色试剂盒、免疫组化试剂盒、细胞培养试剂等。

2. 实验方法（1）组织学观察采用HE染色技术对纤维腺瘤组织进行切片，观察其组织学特征，包括细胞形态、核分裂象、血管浸润等。

（2）免疫组化检测采用免疫组化技术检测纤维腺瘤组织中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、表皮生长因子受体（EGFR）等蛋白表达情况。

（3）细胞培养将纤维腺瘤组织剪碎，消化、分离成单个细胞，进行细胞培养。

观察细胞生长情况，并进行相关生物学特性实验。

（4）治疗实验将纤维腺瘤细胞分为实验组和对照组，实验组采用药物治疗，对照组不进行处理。

观察两组细胞的生长抑制率、凋亡率等指标。

三、实验结果1. 组织学观察纤维腺瘤组织切片显示，肿瘤细胞呈圆形或椭圆形，细胞核染色质丰富，核分裂象较少。

肿瘤间质富含纤维组织，血管丰富。

2. 免疫组化检测纤维腺瘤组织中ER、PR阳性表达率较高，EGFR阳性表达率较低。

3. 细胞培养纤维腺瘤细胞在体外培养条件下生长良好，具有增殖能力。

实验组细胞在药物治疗作用下，生长抑制率和凋亡率均显著高于对照组。

四、实验讨论1. 纤维腺瘤的组织学特征纤维腺瘤是乳腺常见的良性肿瘤，其组织学特征表现为细胞形态规则，核分裂象较少，血管丰富。

本研究结果显示，纤维腺瘤组织切片中细胞形态、核分裂象等特征与文献报道相符。

2. 纤维腺瘤的生物学特性本研究中，纤维腺瘤组织中ER、PR阳性表达率较高，提示该肿瘤可能受到性激素的影响。

同时，EGFR阳性表达率较低，提示EGFR在纤维腺瘤发生发展中的作用可能较小。

3. 纤维腺瘤的治疗本研究采用药物治疗纤维腺瘤细胞，结果显示，药物治疗能够有效抑制纤维腺瘤细胞的生长，提高细胞凋亡率。

子宫内膜样癌Ｐ53、ＥＲ和ＰＲ的表达及其临床意义目的探讨子宫内膜样癌组织中P53、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）的表达及其临床意义。

方法采用免疫组化S-P法检测36例正常子宫内膜、29例不典型增生内膜和67例内膜样癌组织中P53、ER、PR的表达，并与其病理特征进行对比分析。

结果P53、ER、PR在子宫内膜样癌组织中的表达率分别为44.8%、56.7%、61.2%。

P53的表达明显高于正常子宫内膜和不典型增生内膜组织，ER、PR的表达明显低于正常子宫内膜和不典型增生内膜组织，差异均有统计学意义（P＜0.05）。

P53的表达与内膜样癌组织学分级、浸润深度或淋巴结转移呈正相关，ER、PR的表达与内膜样癌组织学分级、浸润深度或淋巴结转移呈负相关。

结论P53、ER、PR的表达与子宫内膜样癌的发生、发展过程密切相关，其测定对估计患者预后，指导临床选择激素治疗具有重要临床意义。

标签：子宫内膜样癌；P53；ER；PR；免疫组化子宫内膜癌占女性生殖道恶性肿瘤的20%~30%[1]，其发病率在世界范围内呈持续上升趋势及年轻化趋势[2]。

同其他肿瘤一样，子宫内膜癌在癌前病变状态就发生了多基因、多步骤的变化，并且激素依赖性肿瘤的受体含量与许多临床病理特征有关。

因此本文采用免疫组化方法对正常子宫内膜、不典型增生内膜和内膜癌组织进行P53、ER、PR的测定，以探讨其在子宫内膜癌组织发生、发展中的作用及临床意义。

1材料与方法1.1材料标本选自本院病理科1998年6月～2008年3月间的存档蜡块共132例，其中正常增生期子宫内膜36例，不典型增生内膜29例，子宫内膜样癌67例。

1.2方法1.2.1实验方法免疫组化染色：P53、ER、PR鼠抗人单克隆和检测试剂盒均购自北京中杉公司，采用S-P法。

标本经4%甲醛固定，石蜡包埋，4μm连续切片，脱蜡、水化、微波抗原修复后，按试剂盒说明书进行染色，用PBS代替一抗作空白对照，用已知P53、ER、PR阳性及阴性的组织切片作阳性及阴性对照。

雌激素受体及孕激素受体测定人乳腺癌组织中，有60～70％的组织存在雌激素受体(ER)及／或孕激素受体(PR)，其存在状况与诊断、治疗及判断预后有关。

受体阳性者约60％用抗相应受体治疗有效；阴性者亦有10％的有效反应率。

测定ER及PR的常用方法包括生物化学及形态学两大类；前者为对受体蛋白作定量测定，后者是观察受体在肿瘤组织，包括细胞内的分布及半定量测定。

近年来在测定方面屡有改进，如单克隆技术、高效液相及细胞流式计数测定的应用等,尚未作为常规方法应用。

目前我国开展的生物化学方法有葡聚糖包裹活性炭液吸附法(DCC法)及蔗糖密度梯度超离心法(SDG法)；形态学方面有17-FE细胞化学法及免疫组织化学法(荧光法及酶联法)。

由于各自条件不同，所用测定方法也不相同。

为便于对资料进行对比分析，本章介绍这些方法，以便统一标准。

第一节生物化学法一、葡聚糖包裹活性炭液吸附法(DCC法)该类方法系通过3H标记的雌激素与受体的特异性竞争结合来检测受体，包括DCC法（葡聚糖包裹活性炭液吸附法，DextranCoatedCharcoal）、SDG法（蔗糖密度梯度超离心法，SucroseDensity GraientUltracontrifugation）、HPA（羟基磷石灰分析法，Hydroxylapatit e）、鱼精蛋白沉淀法、琼脂糖凝胶电泳法（AGE）等，以DCC法和SDG法为经典方法。

(一)测定原理在一定条件下，以氚标记雌二醇([3H]E2)为配体，与受体结合，以葡聚糖包裹活性炭液吸附游离的甾体激素，用液闪法测定与受体结合的标记激素含量，表示受体的量。

以激素与受体结合的动力学方法计算受体含量。

(二)测定方法1．标本处理：乳腺癌标本离体后立即分成两份，一份送病理检查，另份立即放入冰壶，送实验室作受体测定。

剪除待测标本中肿瘤周围的各种正常组织及坏死组织后，以生理盐水冲洗，吸干后置液氮罐中保存，待测定。

2．制备上清液：全过程均在0～4℃下进行。