分析型超速离心机

第三章离心技术与离心机习题参考答案一、名词解释1．离心现象：物体远离圆心运动的现象称为离心现象,也叫离心运动。

2．重力沉降：液体中的微粒受重力的作用，较重的微粒下沉与液体分开，这个现象称为重力沉降。

3．沉降速度：在强大离心力的作用下，单位时间内物质的运动的距离。

4．扩散现象：在介质中，扩散是由于微粒的热运动而产生的质量迁移现象,主要是由于密度差引起的，这种现象称为扩散现象。

5．解释R·C·F：相对离心力，是指在离心力场中，作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数，单位是重力加速度“g”6．解释沉降系数：是指颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度，其单位为秒。

7．K系数：是用来描述在一个转子中，将粒子沉降下来的效率。

也就是溶液恢复成澄清程度的一个指标。

8．最大转速：指离心转头可达到最大转速，单位是rpm。

9．最大离心力：指离心机可产生的最大相对离心力场R·C·F，单位是g。

10．最大容量：指离心机一次可分离样品的最大体积，通常表示为m×n。

11．调速范围：也叫转速设置范围，指离心机转头转速可调整的范围。

12．温度控制范围：指离心机工作时可控制的样品温度范围。

13．工作电压：一般是指离心机电机工作所需的电压。

14．电源功率：通常是指离心机电机的额定功率。

二、选择题【A型题】1．B 2．C 3．B 4．C 5．A 6．C 7．B 8．A9．C 10．A 11．A 12．C 13．C 14．C 15．D 16．B 17．A 18．A 19．B 20．A 21．D 22．E 23．D 24．C 25．C 26．B 27．C 28．B 29．C 30．A 31．D 32．B33．E 34．C 35．E 36．B 37．C 38．C【X型题】1．ABCE 2．ABC 3．ACD 4．ABCDE 5．ABDE6．ABCD 7．ABCD 8．ABD 9．ABC 10．ABCDE 11．ADE 12．ABCDE 13．ACDE 14．ABD 15．ABCD 16．ABCDE 17．ABCE 18．ABCD 19．ABCD 20．ABCD 21．ABCD 22．AB 23．ABCE 24．ABC 25．ABE26．ABC 27．ABCD 28．ABC 29．ABC 30．ABCDE31．CD 32．ABCDE 33．ABCDE 34．ABCDE 35．ABCE36．ABC 37．ABC 38．ADE 39．ABCDE三、简答题1．什么是离心技术，离心技术主要用于哪些方面？答：应用离心沉降进行物质的分析和分离的技术称为离心技术,实现离心技术的仪器是离心机。

临床医学检验：临床检验仪器必看题库知识点1、问答题简述激光扫描共聚焦显微镜的结构特点及其在医学领域的主要用途。

正确答案：激光共聚焦显微镜是在荧光显微镜成像基础上加装了激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，使用（江南博哥）紫外或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像。

另外在其载物台上加一个微量步进马达，可使载物台沿着Z轴上下移动，将样品各个层面移到照明针孔和检测针孔的共焦面上，样品的不同层面的图像都能清楚地显示，成为连续的光切图像。

激光扫描共聚焦显微镜具有高灵敏度、高分辨率、高放大率等特点。

在医学领域主要用于细胞三维重建、细胞定量荧光测定、细胞内钙离子、pH值和其它离子的动态分析、细胞间通讯和膜的流动性等过程的研究。

2、名词解释电负性组分正确答案：即是具有亲负性离子的中性分子，或对电子具有较大亲和力易捕获电子的物质。

3、单选世界上最早的自动生化分析仪是（）。

A.分立式自动生化分析仪B.离心式自动生化分析仪C.干化学式自动生化分析仪D.袋式自动生化分析仪E.管道式自动生化分析仪正确答案：E4、问答题简述自动生化分析仪常用性能评价指标。

正确答案：自动生化分析仪常用性能评价指标有精密度、波长的准确性和线性、与其他仪器的相关性等。

精密度包括：批内重复性、总精密度以及与厂商估计的精密度或临床要求的精密度比较是否合格。

波长的准确性和线性应符合要求。

不同仪器系统的测定结果存在差别，为了取得一致的结果，有必要进行仪器之间的相关性校正。

5、单选多层化学涂层技术所用的干片中，生成一种可以定量且与待测物含量直接成比例的产物，这一反应进行是在（）。

A.支持层B.指示剂层C.试剂层D.扩散层荧光E.遮蔽或净化剂层正确答案：B6、问答题分析型超速离心机的工作原理是什么？正确答案：其工作原理与一个普通水平转子相同。

分析室有上下两个平面的石英窗，离心机中装有的光学系统可保证在整个离心期间都能观察小室中正在沉降的物质，可以通过对紫外光的吸收（如对蛋白质和DNA.或折射率的不同对沉降物进行监测。

超速离心机的操作方法离心机操作规程超速离心机是利用离心力，分别液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械，紧要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开；或将乳浊液中两种密度不同，又互不相超速离心机是利用离心力，分别液体与固体颗粒或液体与液体的混合物中各组分的机械，紧要用于将悬浮液中的固体颗粒与液体分开；或将乳浊液中两种密度不同，又互不相溶的液体分开，也可用于排出湿固体中的液体，例如用洗衣机甩干湿衣裳；特别的超速管式分别机还可分别不同密度的气体混合物；利用不同密度或粒度的固体颗粒在液体中沉降速度不同的特点，有的沉降离心机还可对固体颗粒按密度或粒度进行分级。

超速离心机的操作方法:1、使用各种超速离心机时，必需事先在天平上精密地平衡离心管和其内容物，平衡时重量之差不得超过各个离心机说明书上所规定的范围，每个超速离心机不同的转头有各自的允许差值，转头中确定不能装载单数的管子，当转头只是部分装载时，管子必需相互对称地放在转头中，以便使负载均匀地分布在转头的四周。

2、若要在低于室温的温度下离心时。

转头在使用前应放置在冰箱或置于超速离心机的转头室内预冷。

3、离心过程中不得任意离开，应随时察看超速离心机上的仪表是否正常工作，如有异常的声音应立刻停机检查，适时排出故障。

4、每个转头各有其最高允许转速和使用累积限时，使用转头时要查阅说明书，不得过速使用。

每一转头都要有一份使用档案，记录累积的使用时间，若超过了该转头的最高使用限时，则须按规定降速使用。

5、装载溶液时，要依据超速离心机的实在操作说明进行，依据待离心液体的性质及体积选用适合的离心管，有的离心管无盖，液体不得装得过多，以防离心时甩出，造成转头不平衡、生锈或被腐蚀，而制备性超速离心机的离心管，则常常要求必需将液体装满，以免离心时塑料离心管的上部凹陷变形。

每次超速离心机使用后，必需认真检查转头，适时清洗、擦干，转头是离心机中须重点保护的部件，搬动时要当心，不能碰撞，避开造成伤痕，转头长时间不用时，要涂上一层上光腊保护，严禁使用显着变形、损伤或老化的离心管。

超速离心机技术原理与操作维护注意事项作者：黄靖娴来源：《科技创新与应用》2018年第36期摘要：文章以贝克曼库尔特有限公司的Optima XPN-100超速离心机为例，主要论述超速离心机相关离心技术，转头、容器的选择因素以及常规使用维护注意事项，为离心机管理人员及实验人员提供有用的参考，保障实验室离心机的正常使用，更好地提升离心机的使用效率。

关键词：超速离心机；离心技术；操作；维护中图分类号：Q-33 文献标志码：A 文章编号：2095-2945（2018）36-0130-03Abstract： Taking the Optima XPN-100 ultracentrifuge of Beckman Coulter Co.， Ltd as an exemplar， this paper mainly discusses the centrifuge technology related to the ultracentrifuge， the selection factors of the rotating head and the container， and the matters needing attention in routine use and maintenance. For centrifuge managers and laboratory personnel to provide a useful reference to ensure the normal use of laboratory centrifuges and improve the efficiency of the use of centrifuges.Keywords： ultracentrifuge； centrifuge technology； operation； maintenance前言超速离心机是通过驱动转头高速旋转产生的离心力场对样品中不同沉降系数或浮力密度值的混合物质进行快速分离、浓缩和提纯的专门设备，最高转速不低于30，000rpm。

临床医学检验：临床检验仪器题库考点1、多选快速血糖仪质控物测定的目的是OOA.检查血糖仪是否正常工作B.自动校准血糖仪C.血糖试纸有否失效D.消除背景干扰E.排除故障正确答案：A,C2、名词解（江南博哥）释生物传感器技术正确答案：利用离子选择电极，底物特异性电极，电导传感器等特定的生物检测器进行分析检测。

3、问答题简述双向凝胶电泳（二维电泳）的工作原理。

正确答案：第一维采用等电聚集电泳。

当把蛋白质加人到含有PH梯度的载体时，如果蛋白质所在位置的PH值与其等电点不同，则该蛋白质会带一定量的正电荷或负电荷，在外加强电场的作用下，蛋白分子就会分别向正极或负极泳动，直到PH值与其等电点相等的位置，蛋白质不再泳动，而浓缩成狭窄的区带。

第二维采用了十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE.。

蛋白质的电泳迁移率取决于各种蛋白质所带的静电荷、分子量的大小以及形状的不同。

SDS-PAGE就是按蛋白质分子量的大小使其在垂直方向进行分离。

蛋白质样品经过双向凝胶电泳两次分离后，其结果不再是条带状，而是呈现为斑点状。

4、单选生物安全等级4级（P4）的媒质是指OoA.普通无害细菌、病毒等微生物B.条件致病性细菌、病毒等微生物C.一般性可致病细菌、病毒等微生物D.烈性/致命细菌、病毒等微生物，但感染后可治愈E.烈性/致命细菌、病毒等微生物，感染后不可治愈正确答案：E5、多选自动生化分析仪的技术指标评价包括OoA.精密度B.准确度C.波长校正D.相关性E.线性检查正确答案：A,C,D,E6、多选血气分析仪的气路系统供气方式是OoA.外配气方式B.内配气方式C.蠕动泵供气方式D.真空泵供气方式E.压缩机供气正确答案：A,B7、单选外界空气需经高效空气过滤器过滤后才进入安全柜内，其主要目的是OOA.保护试验样品B.保护工作人员C.保护环境D.保护试验样品和环境E.保护工作人员和试验样品正确答案：A8、单选以空气为加热介质的PCR仪是OOA.金属板式实时定量PCR仪B.96孔板式实时定量PCR仪C.离心式实时定量PCR仪D.各孔独立控温的定量PCR仪E.荧光实时定量PCR仪正确答案：C9、填空题毛细管粘度计不适合检测Oo正确答案：全血10、单选紫外-可见分光光度计的工作原理主要依据（）。

生化分离方法：离心、层析、电泳和膜分离等生化分析方法：重量法、化学法、分光光度法、酶法、色谱法生化制备方法：生物大分子制备的前处理、分离纯化、浓缩与干燥、超临界流体提取法、萃取与相分离、结晶、样品的保存生化分离方法，常用的方法有：离心技术、层析技术、电泳技术和膜分离技术等。

1 离心技术1.1 基本原理离心技术（centrifugal technique）是根据颗粒在作匀速圆周运动时受到一个外向的离心力的行为而发展起来的一种分离技术。

应用：各种生物样品的分离和制备。

如分离收集细胞、细胞器及生物大分子物质；提纯、鉴定生物大分子；分离化学反应的沉淀物。

生物样品悬浮液在离心力作用下使悬浮的微小颗粒以一定速度沉降，从而与溶液分离，其沉降速度与颗粒的质量、大小和密度相关。

相对离心力离心力因离心半径不同而不同，因此用“相对离心力” （relative centrifugal force，RCF）表示离心力，若RCF值不变，一个样品可在不同的离心机上获得相同的结果。

RCF(×g)=1.119×10-5×r×rpm2。

1.2 离心分类根据离心原理，按照实际工作的需要，设计了许多离心方法，大致可分三类：差速离心法(differential velocity centrifugation)速率区带离心法（rate zonal centrifugation）等密度离心法（isopycnic centrifugation）1.2.1 差速离心法利用不同的粒子在离心力场中沉降的差别，在同一离心条件下，沉降速度不同，通过不断增加相对离心力，使一个非均匀混合液内的大小、形状不同的粒子分部沉淀。

操作过程中一般是在离心后用倾倒的办法把上清液与沉淀分开，然后将上清液加高转速离心，分离出第二部分沉淀，如此往复加高转速，逐级分离出所需要的物质。

差速离心的分辨率不高，沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开，常用于其他分离手段之前的粗制品提取。

超速离心技术超速离心技术是利用物质的沉降系数、浮力、质量等方面的差异，利用强大的离心力场，使样品中的混合物得以分离、浓缩、纯化和鉴定的技术。

离心技术现在已经成为分子生物学和生物化学研究中不可缺少的一项重要技术。

离心技术可分为制备型和分析型两类。

在生物学领域可以利用这种方法，分离提取各种细胞及其亚细胞物质，如细胞膜、细胞核、染色体、线粒体、叶绿体、溶酶体、核蛋白体等。

也可以鉴定蛋白质、酶及核酸的纯度。

处理的样品可多可少，少至0.2mL以下。

离心技术的范围相当广泛。

目前，利用这种技术分离各种亚细胞物质、酶、病毒、质粒及各种核酸。

因此，为分子生物学、生物化学和医学的发展，提供了有利的手段。

自从1926年瑞典物理学家Svedberg制成世界上第一台超速离心机（45000转/分）到现在已有快80年的历史，在这期间，离心机的发展是非常迅速的。

特别是在50年代以后发展的更快，例如，美国贝克曼（Beckman）公司和杜邦苏凡尔（Dupont Sorvall）公司，英国测量科学设备公司（MSE），日本的日立（HITACHI）公司以及德国的海吕斯（Heraeus）公司，都生产出各种离心机产品，如普通离心机、高速离心机和超速离心机。

从简单的低速高容量的制备离心机到用于精密分析的超速离心机，应有尽有。

美国贝克（Beckman）公司的超速离心机居世界领先地位，采用了大规模集成电路，计算机程序控制，分离-检测，全部实现自动化；最高转速可达13多万转/分钟，并配有各种型号的垂直转头、水平转头、固定角转头、区带转头、连续转头等，供用户选用，不但操作简单、节省时间，而且进一步提高了的分离效率。

此外，离心技术也有了很大的发展，有密度梯度离心技术和区带离心技术，为生物大分子的分离、纯化和鉴定提供了优越的手段。

虽然离心机的种类有多种，离心技术也多种多样，但是它们的工作原理基本相似。

在实际工作中用的最多的还是制备型离心。

本课程主要介绍制备型分离技术。