化妆品中山梨酸脱氢乙酸含量测定方法
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气相色谱法同时快速测定食品中丙酸、山梨酸、苯甲酸及脱氢乙酸高海军;范自营;张红云;高敬铭;郭静【摘要】通过液液萃取净化样品研究,建立了食品中丙酸、山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸及其盐含量气相色谱同时快速测定方法,适用于固体非酯(脂)类食品的检测.结果表明:丙酸的回收率在85.1%~91.3%之间,其余3种防腐剂的回收率均在95.2%~ 99.4%之间;实验室内变异系数(CV,n=6)最大值≤4.7%,4种防腐剂检出限均在0.002 g/kg以下.4种目标物在有杂质干扰时,可用不同的极性毛细管柱做进一步的确认.本方法具有适用范围广、检测效率高、重现性好、准确度高、检出限低的特点,推广应用对我国食品安全的监督检验具有重要的意义.【期刊名称】《粮油食品科技》【年(卷),期】2017(025)005【总页数】5页(P47-51)【关键词】食品;检测;丙酸;山梨酸;苯甲酸;脱氢乙酸【作者】高海军;范自营;张红云;高敬铭;郭静【作者单位】河南省粮油饲料产品质量监督检验中心,河南郑州450008;河南省粮油饲料产品质量监督检验中心,河南郑州450008;河南省粮油饲料产品质量监督检验中心,河南郑州450008;河南省粮油饲料产品质量监督检验中心,河南郑州450008;中储粮油脂(新郑)有限公司,河南新郑451100【正文语种】中文【中图分类】TS207.3防腐剂是防止食品腐败变质、延长食品储存期的一类物质[1],是食品常用的添加剂类别之一。
据调查有标注添加防腐剂的食品样本占总样本的52.36%,标注添加山梨酸、苯甲酸、脱氢乙酸、丙酸及其盐的样本占标注添加防腐剂食品样本的74.29%,排名分别为第一、第二、第四和第七位,说明上述4种物质是我国食品防腐剂中主要添加的品种[2]。
大量的研究结果表明上述4种防腐剂比较安全,但过量使用仍会对人体产生一定的伤害;在一定程度上抑制骨骼生长,危害肾、肝脏的健康,导致体重下降、腹泻以及胃黏膜永久性损伤等[3-6]。
应用高效液相色谱法测定食品中3种防腐剂的含量摘要:近年食品抽检中发现食品防腐剂超标使用,因此了解常见食品中防腐剂含量,可为食品安全监管提供参考。
采用高效液相色谱法对糖果、中式糕点及酱卤肉制品中苯甲酸、山梨酸及脱氢乙酸含量进行测定分析。
结果表明,中式糕点均含有苯甲酸,属于违法添加苯甲酸类防腐剂的食品;酱卤肉制品山梨酸含量超过国家标准规定的限值;其他食品的苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸含量均符合国家标准规定。
可见,苯甲酸、山梨酸存在超标使用问题,需要加强抽样检查监督管理力度,增加食品安全水平。
关键词:苯甲酸;山梨酸;脱氢乙酸;高效液相色谱随着经济水平的发展和科技水平的提高,市场上不断出现各式各样、色彩鲜明、可口美味、形状各式的食品,而多数食品易受微生物影响发生腐败变质,但为了到达更好的贮藏效果,会人为的在食品中适量添加如苯甲酸、山梨酸、脱氧乙酸等常用的食品防腐剂已达到增加食品储存时间的目的。
在国家发布的GB2760《食品添加剂使用标准》中就对所有类型的防腐剂在各种食品中的最多用量设定了严苛的要求,在规定范围内添加可以有效保证食品安全问题,但化学防腐剂长期且大量被人体摄入则可能会对人体有影响,如诱发癌症、导致畸变、引起中毒及其他影响人体健康的潜在危害[1,2]。
因此通过合适的方法检测食品中防腐剂的含量对我们来说是非常必要的。
目前国家标准或地方标准中很少有能够同时检测苯甲酸、山梨酸和脱氢乙酸的方法,即使有同时检测的方法但检测过程过于复杂。
本文应用高效液相色谱法对6种食品中苯甲酸、山梨酸、脱氧乙酸3种防腐剂的含量进行测定。
1材料与方法1.1 仪器与试剂本次实验所用样品均采集于本市各镇商场超市、门店,实验所用主要仪器为QC系列超纯水机、离心机、数控超声波清洗器、涡旋混匀仪、电子天平;试验条件是高效液相色谱;试剂为甲醇、苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸。
1.2 实验方法1.2.1 苯甲酸、山梨酸及脱氢乙酸标准溶液配制依次从不同标准储备液中提取出一定数量的溶液,将其掺杂搅拌制作成混合标准液,其浓度是100μg/mL;接着,置于0-4℃环境内贮存备用,用水分别进行稀释,使其变成1μg/mL、5μg/mL、10μg/L、20μg/mL以及50μg/mL的混合标准工作溶液。
脱氢乙酸的测定脱氢乙酸是一种有机化合物,其测定具有重要的应用价值。
本文将介绍脱氢乙酸的测定方法以及其在实际应用中的意义。
一、脱氢乙酸的测定方法脱氢乙酸的测定方法有多种,下面将介绍其中两种常用的方法。
1. 紫外分光光度法紫外分光光度法是一种常用的脱氢乙酸测定方法。
该方法是基于脱氢乙酸在紫外光区域(200-400nm)具有特征吸收峰的原理进行测定的。
首先,将待测样品溶解于适量的溶剂中,并用紫外分光光度计测定其在特定波长下的吸光度。
然后,利用标准曲线法或比色法计算出样品中脱氢乙酸的浓度。
2. 气相色谱法气相色谱法是另一种常用的脱氢乙酸测定方法。
该方法是基于脱氢乙酸在气相色谱柱上的分离和检测进行测定的。
首先,将待测样品经过适当的前处理后注入气相色谱仪中进行分析。
脱氢乙酸在柱上与固定相发生相互作用,从而实现其分离。
然后,利用检测器对分离后的脱氢乙酸进行检测和定量。
二、脱氢乙酸测定的意义脱氢乙酸的测定在许多领域具有重要的应用价值。
1. 医学领域脱氢乙酸是人体内的一种代谢产物,其测定可以用于临床疾病的诊断和监测。
例如,乳酸脱氢酶缺乏症是一种代谢性疾病,脱氢乙酸的测定可以帮助医生判断病情的严重程度和疾病的进展情况。
2. 食品工业脱氢乙酸是发酵食品中的一种常见成分,其测定可以用于酒类、酱油等食品的质量控制和安全检测。
通过监测脱氢乙酸的含量,可以判断食品是否存在发酵不完全、变质等问题。
3. 环境监测脱氢乙酸的测定在环境监测中也具有重要意义。
例如,在废水处理过程中,脱氢乙酸的测定可以用于评估处理效果和监测废水中有机物的含量。
4. 农业领域脱氢乙酸是土壤中的一种常见有机酸,其测定可以用于评估土壤的肥力和健康状况。
通过监测脱氢乙酸的含量,可以判断土壤中有机物的分解情况和微生物活性。
脱氢乙酸的测定具有广泛的应用价值,可以在医学、食品工业、环境监测和农业等领域发挥重要作用。
不同的测定方法可以根据具体需求选择,并结合实际情况进行分析和判断。
气相色谱法同时测定化妆品中15种防腐剂陆军;矫筱蔓;佟晓波;庞燕军;李莹【摘要】A method for simultaneous determination of content of 15 kindsof preservative in cosmetic products, salicylic acid, sorbic acid, benzylalcohol, benzoic acid, methyl isothiazolinone, 2 - phenoxyethanol, chloro -methyl - isothiazolinone, bronopol, dehydroacetic acid, methyl 4 - hydroxybenzoate, ethyl 4 - hydroxybenzoate, isopropyl 4 - hydroxybenzoate, propyl 4 - hydroxybenzoate, isobutyl 4 - hydroxybenzoate and butyl 4 - hydroxybenzoate by gas chromatography was established. Agilent GC -7890A with HP -5 column (30 m × 0. 53 mm×2. 65 μm) was adopted as the main instrument. Tests on samples of 4 varieties of cosmetics,bath shampoo,hair shampoo,moisturizing cream and anti - chaping gel were conducted. Results showed that relative standard deviations lies between 0. 3% and 4. 7% ; the recoveries lies between 86. 3% and 103. 4% ; the correlation coefficient achieves higher than 0. 997; and the limit of detection for the 15 kinds of preservative is identified as0.3,6,1.3,10,1.5,1.4,1. 1,10,6,0.5,1.5,1.5,1.5,1.2 and 1.2 ng respectively.%建立了同时测定化妆品中水杨酸、山梨酸、苯甲醇、苯甲酸、甲基异噻唑啉酮、苯氧乙醇、甲基氯异噻唑啉酮、溴硝丙二醇、脱氢乙酸、4-羟基苯甲酸甲酯、4-羟基苯甲酸乙酯、4-羟基苯甲酸异丙酯、4-羟基苯甲酸丙酯、4-羟基苯甲酸异丁酯和4-羟基苯甲酸丁酯等15种防腐剂的气相色谱分析方法.采用Agilent GC - 7890A气相色谱仪,配HP -5色谱柱(30 m × 0.53 mm×2.65 μm),对沐浴露、洗发露、润肤乳和皲裂膏样品进行测试.结果表明,检测的相对标准偏差为0.3%~4.7%,平均回收率为86.3%~103.4%,标准曲线的相关系数均达到0.997以上,15种防腐剂的检出限分别为0.3,6,1.3,10,1.5,1.4,1.1,10,6,0.5,1.5,1.5,1.5,1.2和1.2ng.【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2012(042)002【总页数】4页(P146-149)【关键词】化妆品;防腐剂;气相色谱法;检测【作者】陆军;矫筱蔓;佟晓波;庞燕军;李莹【作者单位】辽宁省食品药品检验所,辽宁沈阳 110023;辽宁省食品药品检验所,辽宁沈阳 110023;辽宁省食品药品检验所,辽宁沈阳 110023;辽宁省食品药品检验所,辽宁沈阳 110023;辽宁省食品药品检验所,辽宁沈阳 110023【正文语种】中文【中图分类】TQ658化妆品中的防腐剂是为了防止细菌污染而加入的一种添加剂。
高效液相色谱法同时测定食品中苯甲酸山梨酸脱氢乙酸的步骤1 材料与方法:1.1仪器:(1)高效液相色谱仪(2)分析天平,(3)酸度计,(4)离心机,(5)振荡器,(6)超纯水仪;试剂:(1)苯甲酸,(2)山梨酸,(3)脱氢乙酸,(4)甲醇;提取试剂:(1)0.3%盐酸乙醇溶液,(2)0.02mol/L磷酸氢二钾溶液1.2标准溶液的配制精密称取苯甲酸,山梨酸,脱氢乙酸对照品各适量,加乙醇溶解,配制成1.0mg/ml 的标准储备溶液。
1.3色谱参数和条件(1)色谱柱:DIONEX Acclaim 120 C18(4.6*250mm,5μm)(2)流动相:甲醇—0.02mol/L磷酸氢二钾溶液(10:90)(3)流速:1.0ml/min(4)进样量:10μL(5)检测波长:230nm(苯甲酸,山梨酸),293nm(脱氢乙酸)1.4样品处理1.4.1 固体样品(如熟肉制品.豆制品及糕点类)(1)称取捣碎混匀的样品5g ( 精确至0.01g ) 于具塞三角瓶中,(2)精密加入25ml提取溶剂,振荡1h后,于4℃放置24h ,(3)离心,取上清液3ml,用水定量稀释至10ml,离心,经0.45 μm滤膜过滤,(4)进液相色谱仪分析。
1.4.2 液体样品( 如冷冻饮品)(1)将样品于室温下解冻后,称取10g ( 精确至0.001g ) 于25ml 量瓶中,(2)用提取溶剂定容至刻度,混匀,于4℃放置24h ,(3)离心,取上清液3ml ,用水定量稀释至10ml,离心,经0.45μm滤膜过滤,(4)进液相色谱仪分析。
2数据处理2.1标准曲线与检出限精密量取标准储备溶液适量,用提取溶剂定量稀释制成每ml 中含0.1μg,0.5μg,1μg,4μg,8μg,12μg,16μg,20μg 的标准混合溶液,按前述色谱条件进行测定, 且每个浓度做两组平行试验,以浓度C(μg/ml)为横坐标,峰面积A 为纵坐标制作标准曲线;以浓度C(μg/ml) 对峰面积A 进行线性回归,按信噪比3,计算检出限2.2 精密度和方法回收率试验(1)精密度实验:取同一对照品溶液( 各浓度均为10μg/ml ) ,重复进样,测出各峰面积的 RSD 值。
高效液相色谱法同时检测食品中脱氢乙酸、山梨酸、苯甲酸、糖精钠的含量【摘要】:由于生活水平的提高,人们越来越注重食品的安全性。
本文选用紫外检测器,反向C18柱,以甲醇醋酸铵水溶液(0.02mol/L)(5:95比例)为流动相,同时检测食品中脱氢乙酸、山梨酸、苯甲酸和糖精钠的含量,提高了试验的效率可执行性。
尤其是脱氢乙酸,在230nm波长下检验,降低了检出限,提高了痕量元素检测精确度。
【关键词】:食品添加剂;高效液相色谱法;食品卫生检验食品添加剂即为使食品的质量、色、香、味得到改善,延长存放的时间等需求下使用的合成或自然化学物质。
现阶段许多生产商家在饮品、酱制品、发酵豆制品中加入的甜味素一般是糖精钠、安赛蜜(AK糖)等。
使用的防腐剂通常是苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸。
但过度摄入这些添加剂对人体健康有一定的危害[1~2]。
目前,我国的《食品添加剂使用标准》(GB2760—2014)中对这些添加剂的应用范畴和最大允许使用量都有明确的规定[3~4]。
为了更好地测量和提高效率,在有关参考文献的基础上,本次研究选择高效液相色谱法同时检测了食品中脱氢乙酸、山梨酸、苯甲酸、糖精钠添加剂的含量,现报告如下:1 材料和方法1.1 关键仪器和实验试剂液相色谱仪:Waters 1525,装有紫外检测器;离心机:10 000r/min,TGL-16A离心机,长沙普通仪器有限公司;工业甲醇:色谱纯,tedia公司;乙酸铵:优级纯,广州试剂厂;碳酸氢钠:优级纯,Comio实验试剂;紫外线可见光度计:TU-1810,北京谱仪通用性仪器有限公司1.0mg/mL脱氢乙酸标液:精确称量0.100g脱氢乙酸标准物质,添加5mL碳酸氢钠(20g/L),微热状态下溶解,转移到100mL容量瓶中,放水滴定剂至100mL,作为储备液,在4摄氏度的环境下保存。
1.0mg/mL山梨酸标液:精确称量0.100g山梨酸标准物质,添加5mL碳酸氢钠(20g/L),加温溶解,转移到100mL容量瓶中,放水滴定剂至100mL,作为贮备溶液。
山梨酸的检测方法山梨酸,化学式为C7H6O5,也被称为2-羟基丁二酸,是一种常见的有机酸,广泛用于食品和饮料工业中,作为防腐剂、抗氧化剂和调味剂等。
然而,过量的山梨酸会对人体造成伤害,因此对于食品和饮料中的山梨酸的检测非常重要。
在此,将详细介绍山梨酸的检测方法。
一、高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法是目前较为常用的一种检测山梨酸的方法。
该方法通过对样品中的山梨酸进行分离、纯化和定量,能够快速、准确地测量食品和饮料中的山梨酸含量。
HPLC法的操作步骤如下:1.准备样品和标准溶液将样品准确称量后,加入适量的水或溶剂中,制成一定浓度的样品溶液。
同时,根据不同的需求,制备一系列浓度不同的标准溶液,用于绘制标准曲线。
2.设备准备连接好高效液相色谱仪并打开电源。
同时,根据样品性质,选择合适的色谱柱和保护柱,以及合适的流速、温度和检测波长等参数。
3.样品注射将样品溶液经微量注射器注入色谱柱中。
根据需要,可进行多次注射和分析。
注射量和分析次数应该根据样品种类和含量确定,以保证结果的准确性和稳定性。
4.分离和检测样品中的山梨酸在色谱柱中被分离和纯化,然后通过检测器进行检测。
根据山梨酸的特征峰而得到峰高或峰面积的测定值,并与标准曲线上对应的数值进行比较。
二、气相色谱法(GC)气相色谱法同样是用于检测山梨酸的有效方法之一。
该方法的基本原理是将样品溶液转化为蒸汽,然后通过色谱柱将不同的化合物分离和纯化,再通过检测器检测和记录。
气相色谱法的操作步骤如下:1.准备样品和标准溶液将样品准确称量后,加入适量的溶剂中,制备成一定浓度的样品溶液。
同时,制备一系列不同浓度的标准溶液,用于绘制标准曲线。
2.设备准备连接好气相色谱仪并打开电源。
选择合适的色谱柱和保护柱、流量和检测波长等参数,并进行仪器的预热和调试。
3.样品准备和注射将样品经过质谱或气相色谱分离,然后通过注射器注入色谱柱中。
根据需要,进行多次注射和分析。
4.分离和检测样品中的山梨酸在色谱柱中被分离和纯化,然后经过检测器检测和记录。
附件1化妆品相关检验方法制修订概况表12附件24 防腐剂检验方法Determination of preservatives in cosmetics 本部分规定了化妆品中防腐剂的检验方法,各待测组分与《化妆品安全技术规范(2015年版)》准用防腐剂(第三章表4)的对应关系及采用的检验方法详见表1,各检验方法涵盖的待测组分详见表2。
表1 《化妆品安全技术规范(2015年版)》准用防腐剂与检验方法对照表《化妆品安全技术规范(2015年版)》准用防腐剂(第三章表4)序号和名称待测组分检验方法1 2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇 4.12 5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷 4.13 7-乙基双环噁唑啉7-乙基双环噁唑啉 4.74 烷基(C12-C22)三甲基铵溴化物或氯化物十二烷基三甲基溴化铵 4.35 苯扎氯铵, 苯扎溴铵, 苯扎糖精铵十二烷基二甲基苄基氯化铵4.3 十四烷基二甲基苄基氯化铵十六烷基二甲基苄基氯化铵6 苄索氯铵苄索氯铵 4.37 苯甲酸及其盐类和酯类苯甲酸 4.1 苯甲酸甲酯 4.2 苯甲酸乙酯 4.1 苯甲酸丙酯 4.1 苯甲酸异丙酯 4.1 苯甲酸苯基酯 4.1 苯甲酸丁酯 4.7 苯甲酸异丁酯 4.78 苯甲醇苯甲醇 4.110 溴氯芬溴氯芬 4.211 氯己定及其二葡萄糖酸盐, 二醋酸盐氯己定 4.312 三氯叔丁醇三氯叔丁醇 4.7《化妆品安全技术规范(2015年版)》准用防腐剂(第三章表4)序号和名称待测组分检验方法15 氯苯甘醚氯苯甘醚 4.116 氯咪巴唑氯咪巴唑 4.217 脱氢乙酸及其盐类脱氢乙酸 4.120 二氯苯甲醇2,6-二氯苯甲醇4.2 2,4-二氯苯甲醇21 二甲基噁唑烷二甲基噁唑烷 4.724 甲酸及其钠盐甲酸 4.725 戊二醛戊二醛 4.726 己脒定及其盐, 包括己脒定二个羟乙基磺酸盐和己脒定对羟基苯甲酸盐己脒定二(羟乙基磺酸)盐 4.327 海克替啶海克替啶 4.530 碘丙炔醇丁基氨甲酸酯碘丙炔醇丁基氨甲酸酯 4.231 甲基异噻唑啉酮甲基异噻唑啉酮 4.132 甲基氯异噻唑啉酮和甲基异噻唑啉酮与氯化镁及硝酸镁的混合物甲基氯异噻唑啉酮 4.133 邻伞花烃-5-醇邻伞花烃-5-醇 4.234 邻苯基苯酚及其盐类邻苯基苯酚 4.235 4-羟基苯甲酸及其盐类和酯类4-羟基苯甲酸4.1 4-羟基苯甲酸异丁酯4-羟基苯甲酸异丙酯4-羟基苯甲酸丁酯4-羟基苯甲酸甲酯4-羟基苯甲酸乙酯4-羟基苯甲酸丙酯4-羟基苯甲酸苯酯4-羟基苯甲酸苄酯4-羟基苯甲酸戊酯36 对氯间甲酚对氯间甲酚 4.237 苯氧乙醇苯氧乙醇 4.138 苯氧异丙醇苯氧异丙醇 4.239 吡罗克酮和吡罗克酮乙醇胺盐吡罗克酮乙醇胺盐 4.240 聚氨丙基双胍聚氨丙基双胍 4.441 丙酸及其盐类丙酸 4.742 水杨酸及其盐类水杨酸 4.243 苯汞的盐类, 包括硼酸苯汞硼酸苯汞 4.646 山梨酸及其盐类山梨酸 4.247 硫柳汞硫柳汞钠 4.2《化妆品安全技术规范(2015年版)》准用防腐剂(第三章表4)序号和名称待测组分检验方法50 十一烯酸及其盐类十一烯酸 4.751 吡硫鎓锌吡硫鎓锌 4.2表2 检验方法涵盖的待测组分信息表序号检验方法名称待测组分4.1 甲基异噻唑啉酮等23个组分甲基异噻唑啉酮2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇4-羟基苯甲酸甲基氯异噻唑啉酮苯甲醇苯氧乙醇苯甲酸4-羟基苯甲酸甲酯氯苯甘醚脱氢乙酸5-溴-5-硝基-1,3-二噁烷4-羟基苯甲酸乙酯4-羟基苯甲酸异丙酯4-羟基苯甲酸丙酯4-羟基苯甲酸苯酯4-羟基苯甲酸异丁酯4-羟基苯甲酸丁酯4-羟基苯甲酸苄酯苯甲酸乙酯4-羟基苯甲酸戊酯苯甲酸异丙酯苯甲酸丙酯苯甲酸苯基酯4.2 吡硫鎓锌等19个组分吡硫鎓锌水杨酸山梨酸苯氧异丙醇2,6-二氯苯甲醇苯甲酸甲酯碘丙炔醇丁基氨甲酸酯对氯间甲酚2,4-二氯苯甲醇邻苯基苯酚邻伞花烃-5-醇氯二甲酚氯咪巴唑序号检验方法名称待测组分吡罗克酮乙醇胺盐三氯卡班三氯生溴氯芬硫柳汞钠4.3 己脒定二(羟乙基磺酸)盐等7种组分己脒定二(羟乙基磺酸)盐氯己定十二烷基三甲基溴化铵十二烷基二甲基苄基氯化铵苄索氯铵十四烷基二甲基苄基氯化铵十六烷基二甲基苄基氯化铵4.4 聚氨丙基双胍聚氨丙基双胍4.5 海克替啶海克替啶4.6 硼酸苯汞硼酸苯汞4.7 甲酸等9种组分甲酸丙酸三氯叔丁醇苯甲酸异丁酯苯甲酸丁酯十一烯酸7-乙基双环噁唑啉二甲基噁唑烷戊二醛4.1甲基异噻唑啉酮等23种组分Methyl isothiazolinone and other 22 kinds ofcomponents1 范围本方法规定了高效液相色谱法测定化妆品中甲基异噻唑啉酮等23种组分的含量。
食品中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸的测定【摘要】目的:同时对食品中的山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸进行测定,缩短检测时间,提高检测效率。
方法:使用高效色谱仪,紫外检测器,同时检测食品中脱氢乙酸、山梨酸、苯甲酸、糖精钠的含量。
结果:精密度在1%-8%之间,回收率在91%-110%之间。
结论:该方法前处理简单,检测结果稳定性好,准确度高,能同时检测食品中的4种添加剂,提高检测效率。
【关键词】高效液相色谱仪; 安赛蜜; 苯甲酸; 山梨酸; 糖精钠; 脱氢乙酸在食品加工中,为了提高食品的风味,延长保持期等原因,食品中会加入各种的添加剂,而比较常用的包括山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸等。
在国标中,山梨酸、苯甲酸、糖精钠是使用国家标准GB 5009.28-2016进行检测,脱氢乙酸是使用国家标准GB 5009.121-2016进行检测,但在市场的抽检中,有很多的食品均需要检测这4种添加剂,在大量的检测工作中,如果能把这4种添加剂同时进行检测,可以大大缩短检测时间,提高检测效率。
本实验通过对流动相、检测波长的调整探索了一种能同时检测山梨酸、苯甲酸、糖精钠、脱氢乙酸的方法。
1 实验部分1 试剂与仪器岛津液相色谱仪,配紫外检测器,C18色谱柱苯甲酸钠标准品(CAS号:532 32-1),山梨酸钾标准品(CAS号:590-00-1),糖精钠标准品(CAS号:128-11-9)氨水、亚铁氰化钾、乙酸锌、无水乙醇、正已烷、甲醇: 色谱纯1.2 试样提取准确称取约2 g试样于50 ml具塞离心管中,加水约25 m,涡旋混匀,于50℃水浴超声20 min,冷却至室温后加亚铁氰化钾溶液(92g/L)2 ml和乙酸锌溶液(183g/L)2 mL,用氢氧化钠溶液(20g/L)调pH至7.5,混匀于8 000r/ min离心5 min,将水相转移至50 ml容量瓶中,于残渣中加水20 mL,涡旋混匀后超声5 min,于8 000 r/min离心5 min将水相转移到同一50 ml容量瓶中并用水定容至刻度,混匀。
附件12
化妆品中山梨酸和脱氢乙酸的检测方法
1 范围
本方法规定了采用高效液相色谱法测定化妆品中山梨酸(CAS:110-44-1)和脱氢乙酸(CAS:520-45-6)含量的方法。
本方法适用于膏霜、乳液、水类和啫喱化妆品中山梨酸、脱氢乙酸/盐的测定(以山梨酸、脱氢乙酸计)。
2 方法提要
以甲醇为溶剂提取化妆品中山梨酸和脱氢乙酸,用高效液相色谱仪进行分离,二极管阵列检测器检测,以保留时间和紫外吸收光谱定性,以峰面积定量。
本方法对山梨酸和脱氢乙酸的检出限均为6 ng,定量下限均为15 ng,如以取样0.2 g计,检出浓度均为0.006 %,最低定量浓度均为0.015 %。
3 试剂
除另有规定外,试剂均为分析纯,水为一级实验用水。
3.1 甲醇。
3.2 甲酸。
3.3 甲酸溶液:取甲酸(3.2)1 mL加水至1000 mL。
3.4 乙腈,色谱纯。
3.5 山梨酸,纯度≥ 99 %。
3.6 脱氢乙酸,纯度≥ 99 %。
3.7 混合标准储备液(ρ=0.6 g/L)。
准确称取山梨酸和脱氢乙酸标准品各0.03 g,精确到0.0001 g,置于50 mL容量瓶中,用甲醇(3.1)溶解并定容。
混合标准储备液在5℃下避光可保存5天。
4 仪器
4.1 高效液相色谱仪具二极管阵列检测器。
4.2 超声波清洗器。
4.3 0.45 µm滤膜。
4.4 离心机,10000 r/min。
4.5 涡旋振荡器。
4.6 天平,感量0.0001 g、0.001g。
5 分析步骤
5.1 样品预处理
准确称取样品0.2 g(精确至0.001g),置于具塞比色管中,加入甲醇(3.1)定容至10 mL,涡旋振荡30 s,使试样与提取溶剂充分混匀,超声提取20 min(工作频率20~43KHz,200 W),必要时以10000 r/min离心5 min。
取上清液经0.45 μm滤膜过滤,滤液作为试样溶液备用。
必要时用甲醇(3.1)稀释滤液备用。
5.2 测定
5.2.1 色谱参考条件
色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶填充柱;
流动相:乙腈(3.4)+甲酸溶液(3.3)= 25+ 75;
流速:1 mL/min;
检测波长:二极管阵列检测器,检测波长:290 nm;
柱温:30 ℃;
进样量:5 µL。
5.2.2 标准曲线的制备
用甲醇(3.1)将混合标准储备液(3.5)稀释成含山梨酸和脱氢乙酸6.00、12.0、24.0、60.0、150 µg/mL的混合标准溶液。
依次从混合标准溶液中取5 µL注入高效液相色谱仪,记录各次色谱峰面积,绘制峰面积-浓度曲线并计算回归方程。
5.2.3 样品测定
取5 µL待测试样溶液注入高效液相色谱仪,根据峰的保留时间和紫外光谱图定性,根据峰面积用回归方程计算待测试样溶液中山梨酸、脱氢乙酸的浓度,按“6 计算”计算样品中山梨酸或脱氢乙酸/盐的含量。
5.3 平行实验
按以上步骤操作,对同一样品独立进行测定获得的两次独立测试结果的绝对差值不得超过算
术平均值的10 %。
6 计算
%10010m V
/6⨯⨯⨯=ρ盐)(山梨酸或脱氢乙酸w
式中:w ——样品中山梨酸或脱氢乙酸/盐的质量分数(以山梨酸、脱氢乙酸计),%; ρ——测试溶液中山梨酸或脱氢乙酸/盐的浓度(以山梨酸、脱氢乙酸计),µg/mL ;
V ——样品定容体积,mL ; m ——样品取样量,g 。
7 色谱图
图1 山梨酸、脱氢乙酸色谱图
色谱峰:山梨酸TR=7.7 min ,脱氢乙酸TR=11.1 min
8回收率和精密度
多家实验室验证,本方法山梨酸回收率为92.4%~99.5%,相对标准偏差小于1.4%(n=6);脱氢乙酸回收率为90.9%~99.5%,相对标准偏差小于1.7%(n=6)。
山
梨
酸
脱氢乙酸。