不同品种肉羊胚胎移植方法比较
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山羊胚胎移植技术研究动物胚胎移植技术研究及应用,在我国起始于二十世纪70年代中后期,且以绵羊的手术移植开展最早,成功率最高。
已逐步发展成为家畜繁殖工程中成熟度高,应用前景好,推广性强的一项先进技术。
它在家畜纯种繁育、快速扩群、提高优质高产品种比例等方面具有重要作用。
但是,胚胎移植技术在贵州尚未形成生产力,推广应用尚未广泛,目前只有少数几家科研、教学和生产单位,依托国外专家和技术进行先期试验和应用。
究其未能形成生产力,未能广泛推广应用的根本原因,主要在于其技术难度较大,某些技术环节尚待改进,尤其是利用本地山羊作受体进行胚胎移植,还有一系列技术难题需要解决。
镇远华盛科技有限公司于2003年承担黔东南州科技局“山羊胚胎移植新技术研究与推广应用”和“贵州省财政扶贫资金牛羊胚胎移植”项目之后,积极引进技术和培养人才,选送公司技术人员赴浙江大学临安基地学习羊的胚胎移植技术,并大力进行供体羊(波尔山羊)、受体羊(本省山羊)、设备、仪器、药物等方面的准备工作。
于2003年11月12日在浙江大学余颂东教授的指导下,率先在我州开展了山羊鲜胚直接移植试验。
2004年1月15日在北京安伯公司(按贵州省农业厅与该公司购买冻胚及承担移植的协议)技术员指导下开展了山羊的冷冻胚胎移植试验。
载至2004年6月中旬,进行了三批次鲜胚直接移植和冷冻胚胎移植,现已产胚胎移植羔羊38只,尚有胚胎移植后怀孕母羊47只。
初步试验即获得鲜胚移植受胎率62.66%,冻胚移植受胎率53.4%和第二批鲜胚移植妊娠率比第一批提高了12.66个百分点的良好效果。
现将本公司山羊鲜胚直接移植和冷冻胚胎移植试验研究及成果报告如下:一、供体母羊、受体母羊和种公羊的选育1、供体羊群选育于2003年5月从湖南吉首种畜场选购发育良好,具有多胎遗传特性的成年波尔母羊4只作为供体羊,平均体重60.3kg、平均体高66cm、体长76cm、胸围91cm。
与其产地的标准体重、体尺相近。
肉羊的胚胎移植技术
胚胎移植技术是一项生物工程技术,即一般所说的“借腹怀胎”。
在养羊业中,此项技术主要用于良种羊的快速繁殖。
此项技术的核心包括两个部分,一是超数排卵及冲胚,二是同期发情及移胚,正常情况下,母羊每次排卵只有2~3个,但通过药物刺激,进行人工超排,一次可获得8~20个胚胎,是正常排卵数的4~6倍。
整个过程是将受精卵从供体母羊(良种羊)中取出后再移植到经过同期发情处理的受体母羊(普通羊)子宫内的操作过程,亦即通过借腹怀胎达到繁育优良种羊的目的。
目前,次项技术在畜牧业中已成为一项实用推广技术,采用腹腔镜移植是比较先进的方法。
正常情况下,冷冻胚胎的移植成功率为20%~30%,鲜胚移植的成功率为45%~60%。
在生产实际中,胚胎移植对于引进组建国外良种畜群具有重要意义。
一是可以引进优秀个体的胚胎。
正常情况下,从国外引进活的种畜一般难以买到优秀的个体,而胚胎则不同。
二是可以节约大量外汇。
以组建100只规模的杜泊羊种群为例,如果直接引种,则需投资300万元,而通过引进胚胎的方法建群,只需购买400枚冷冻胚胎,加上移植费用,总投资也不过160万元,可以节省将近50%的资金。
三是可以提高行业的科技含量。
胚胎移植作为一项先进技术,运用到生产中,必然会带动相关学科的研究与发展,培养和造就一批人才,从而推动整个行业的技术进步,产生巨大的社会效益。
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德国肉用美利奴羊胚胎移植试验研究报告摘要:目前,羊胚胎移植技术已由实验室转向生产应用,在畜牧生产中发挥着重大作用。
我国在2005~2015年科技规划中,已将胚胎移植技术作为重点推广应用的产业化科技项目之一。
我分院非常重视此项技术的应用与开发,并与内蒙古赤峰市胚胎移植中心合作组建了标准化生物工程实验室,使羊胚胎移植技术在阜新高效养羊业中发挥积极作用。
关键词:超数排卵;冲取胚胎;胚胎移植1材料与方法1.1试验羊只供体为德国肉用美利奴羊,受体为乌珠穆沁羊和本地绵羊,饲养管理按常规方法。
1.2试验时间10月下旬至11月上旬。
1.3试验药物促卵泡素(FSH),宁波激素制品厂生产100IU/安瓶;促黄体素(LH),宁波激素制品厂生产200IU/安瓶;氯前列烯醇(PG),上海市计划生育科学研究所生产0.20mg,2ml/安瓶。
1.4供体羊超排处理采用FSH减量注射法,以母羊发情之日做为发情周期的0d,在母羊发情的第13d开始,每天早(6时~7时)和晚(18时~19时)各肌注1次FSH,连续3d,递减注射,注射剂量为126~150μ,注射FSH第6针时,肌注PG 0.08mg。
早晚2次试情,见发情表现时肌注LH110~130μ。
同时采用鲜精输精之后每隔12h输精1次,总计2~3次即可。
1.5受体羊同期处理在供体羊发情第13d,给受体肌注PG2ml/只,未发情母羊在第1次注射后间隔7d再次注射PG2ml/只。
1.6胚胎的采集与移植供体羊于发情配种后66~72h采用腹中线侧开口手术,暴露出卵巢,输卵管与子宫,记录排卵点数后,用冲卵液从输卵管中冲胚胎。
同期处理后的受体羊用同样方法手术,检查卵巢排卵情况,将胚胎移植于排卵侧输卵管中。
2试验结果2.1超数排卵与冲取胚胎结果48只供体羊在超排66~72h采用手术法冲取胚胎480枚,其中受精卵392枚,平均每只供体羊获受精卵8.20枚。
3结论与讨论3.1供体羊供体羊应符合具有较高生产性能,健康无病,繁殖机能正常,经产母羊没有空怀史,应有两胎以上的产羔记录的标准且超排前应有两个正常的发情周期观察记录。
羊的胚胎移植一、胚胎移植概述二、胚胎移植原理三、胚胎移植技术程序一、胚胎移植概述1.胚胎移植的发展历史2.胚胎生物技术的研究意义及其在畜牧生产中的应用3.胚胎移植目前存在的问题4.影响胚胎移植的主要因素5.胚胎移植的经济效益6.胚胎移植的发展前景1.1国外胚胎移植发展史George是世界上第一个提出动物胚胎移植的人。
1890年4月,Walter Heape用兔作为实验动物,成功地获得了世界上第一个动物胚胎移植后代。
Heape兔胚胎移植的成功,极大的影响着繁殖生物学和畜牧业的发展。
1900年,Heape的杰出接班人FHA Marshall和John Hammond总结了他的主要工作内容,提出了哺乳动物性季节的概念,也就是现在所说的发情周期。
1911-1913年,奥地利维也纳的Biedl 等进行了兔的胚胎移植实验,但由于战争,直到1922年才报道了其研究结果。
虽然他们做了70多个实验,但由于把输卵管的胚胎移植到子宫,结果只有一只受体兔妊娠,这充分证明了胚胎和受体的同步性是非常重要的。
1932年和1933年,Warwick,Berry和Horlache第一次把胚胎移植技术用在绵羊和山羊上,Dr. Berry也因此成为了第一个国际胚胎移植协会先驱奖的获得者。
1948年,张明觉用超数排卵技术从2只母兔获得88枚受精卵,给7只受体母兔移植,成功地产出76只小兔,这次试验的成功具有划时代的意义。
1950年12月19日,33岁的美国人Elwyn Willed成功地获得了世界上第一头胚胎移植牛犊。
60年代初,全部采用的是手术回收胚胎和移植,1964年Mutter 等和1965年Sugie相继报道了非手术移植胚胎获得成功。
70年代中期,牛的非手术移植完全取代了手术移植. 1974年,成立了国际胚胎移植协会(IETS ),随后相继成立了美国胚胎移植协会、加拿大胚胎移植协会、欧洲胚胎移植协会1.2 国内胚胎移植发展史我国的胚胎移植研究起步较晚,于20世纪70年代初才开始。
肉羊胚胎移植的要点作者:庄爱春来源:《现代畜牧科技》 2015年第10期庄爱春(黑龙江省讷河市青色草原种畜场 161300)胚胎移植是指通过同期发情和超数排卵技术将优良肉羊品种的胚胎,即约7日龄的受精卵,采取人工方法将其移植到普通品种母羊的子宫内继续发育,形成胎儿,直至生产的过程。
目前,我国通过采用该技术对现有的生产性能较低品种的肉羊、山羊和绵羊进行改良,对羊群整体生产性能的提高具有非常重要的意义。
1 选择供、受体母羊供体选择。
供体母羊具有优质的遗传基因,即具备遗传优势,一般选择高生产性能和经济价值的母羊作为供体。
供体的繁殖能力良好,即繁殖史较好,且容易配种,容易成功受孕;繁殖史上不存在遗传性缺陷;分娩过程顺利,未出现胎衣不下或难产的现象;未患过繁殖性疾病,生殖器官发育正常;发情表现明显,性周期正常。
另外,选择供体母羊还要考虑年龄、营养需要、发情周期对超数排卵的反应、繁殖力以及自然排卵是否正常等方面,由此进一步选择优质供体,然后建立严格、规范的供体档案,同时要根据供体在胚胎移植过程中的具体情况重新评价或淘汰个别供体。
供体母羊健康无病,体质健壮,且营养状况良好。
具体是选择经产母羊作为供体,但必须是产后超过60天的母羊,且其生殖系统已经恢复正常,有正常的发情周期,供体母羊体况良好,年龄为1.5~7周岁,膘情中等。
选择的供体羊必须加强饲养管理,同时制定完善的超数排卵计划。
受体选择。
受体母羊一般选择本地品种或者非优良品种,但必须确保其健康状态和繁殖性能良好,体型在中上等。
如养殖场饲养的母羊数量很多,也可以选择与供体发情时间相近或相同的自然发情母羊,一般二者间发情时间相差要少于24小时。
但一般情况下常无法找到非常合适的母羊作为受体,因此多数情况下需要对供体和受体采取同期发情。
2 同期发情供体母羊和受体母羊的发情时间要基本保持一致,且发情时间越接近其受胎率越高,从而为受精卵移植奠定良好基础。
据报道,移植肉羊受精卵时,供体和受体母羊同期发情相差小于24小时,其受胎率可高于70%,而相差48小时则在50%以下。
羊的胚胎移植一、胚胎移植概述二、胚胎移植原理三、胚胎移植技术程序一、胚胎移植概述1.胚胎移植的发展历史2.胚胎生物技术的研究意义及其在畜牧生产中的应用3.胚胎移植目前存在的问题4.影响胚胎移植的主要因素5.胚胎移植的经济效益6.胚胎移植的发展前景1.1国外胚胎移植发展史George是世界上第一个提出动物胚胎移植的人。
1890年4月,Walter Heape用兔作为实验动物,成功地获得了世界上第一个动物胚胎移植后代。
Heape兔胚胎移植的成功,极大的影响着繁殖生物学和畜牧业的发展。
1900年,Heape的杰出接班人FHA Marshall和John Hammond总结了他的主要工作内容,提出了哺乳动物性季节的概念,也就是现在所说的发情周期。
1911-1913年,奥地利维也纳的Biedl 等进行了兔的胚胎移植实验,但由于战争,直到1922年才报道了其研究结果。
虽然他们做了70多个实验,但由于把输卵管的胚胎移植到子宫,结果只有一只受体兔妊娠,这充分证明了胚胎和受体的同步性是非常重要的。
1932年和1933年,Warwick,Berry和Horlache第一次把胚胎移植技术用在绵羊和山羊上,Dr. Berry也因此成为了第一个国际胚胎移植协会先驱奖的获得者。
1948年,张明觉用超数排卵技术从2只母兔获得88枚受精卵,给7只受体母兔移植,成功地产出76只小兔,这次试验的成功具有划时代的意义。
1950年12月19日,33岁的美国人Elwyn Willed成功地获得了世界上第一头胚胎移植牛犊。
60年代初,全部采用的是手术回收胚胎和移植,1964年Mutter 等和1965年Sugie相继报道了非手术移植胚胎获得成功。
70年代中期,牛的非手术移植完全取代了手术移植. 1974年,成立了国际胚胎移植协会(IETS ),随后相继成立了美国胚胎移植协会、加拿大胚胎移植协会、欧洲胚胎移植协会1.2 国内胚胎移植发展史我国的胚胎移植研究起步较晚,于20世纪70年代初才开始。
繁 殖 育 种中国畜牧兽医文摘 2012年 28卷 第3期我国自20世纪70年代开始应用胚胎移植技术至今,胚胎移植技术在各类家畜改良、加速繁殖及保种方面发挥了重大作用。
引进国外优良品种对本地品种进行改良,胚胎移植是一种高效,快速的手段。
随着国民生活条件的提高,对肉类产品的需求日益加大,为了提高肉羊的品质和生产水平,我国自20世纪80年代开始从国外多次引进优良肉用绵羊,对国内品种进行改良。
内蒙古是国内畜牧业产业大区,近年来为了满足市场对羊肉的需求和农牧民对优秀种畜的需求,不断从国外引进优良品种,采用各类现代生物技术对其进行快速扩繁,以满足各类需求。
本实验采用胚胎移植技术对从国外引进的无角道赛特、德国美利奴和白萨福克等羊进行子宫角冲胚,对不同引进优良品种在胚胎移植繁殖方式下的繁殖能力进行比较。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 实验动物供体羊:德国美利奴20只、白萨福克20只、无角道赛特40只;受体羊:蒙古羊。
均选自内蒙古鄂尔多斯市万通现代农牧业养殖园区。
德国美利奴、白萨福克、无角道赛特均为纯进口品种,蒙古羊购自乌珠穆沁。
1.1.2 药品、器材和仪器药品:阴道栓、PG、FSH、LH、麻药、PBS缓冲液、保存液、酒精、新洁尔灭、石蜡油、孕马血清促性腺激素。
器材、仪器:白纱布、手术刀、镊子、大头针、三棱针、三通管、缝合线、刮毛刀、注射器、肥皂、培养皿、移液枪、枪头;显微镜、恒温箱、恒温水浴锅、烘干箱、高压灭菌锅、净水仪、数码照相机、恒温台。
1.2 方法对供体羊做胚胎移植前期同期发情和超排处理,并根据发情情况进行配种,对受体做同期发情处理,并做与供体羊相应的标记。
供体羊发情后第6~7 d采卵用子宫角冲胚方法。
供体羊仰卧在手术架上,固定四肢。
肌注麻药进行麻醉。
按《中华人民共和国农业行业标准》(绵羊胚胎移植技术形成)的中胚胎采集方法进行手术、冲胚和术后处理工作。
冲出的液体拿到显微镜下进行检胚操作。
将各个羊的胚胎收集回来以后,仔细检验,以免把胚胎随冲卵液一起倒掉。
拣出的胚胎放到保存液当中,置于恒温板上,再根据胚胎大小、形态、透明带折光性、均匀度以及卵裂球大小进行鉴定和分级。
对每个羊冲胚数、可用胚数、黄体发育情况等进行详细的记录,以便进行比对。
将鉴定好的胚胎标号,移进与供体羊发情时间相对应的受体羊子宫角处。
移植部位与供体羊相一致,移植方法相似。
移植后用药物进行处理,缝合伤口。
1.3 数据处理用SPSS13.0生物统计软件对数据进行分析。
采用均数比较当中的单向方差分析(One-way ANOVA)进行分析。
2 结果与分析2.1 不同品种肉用绵羊冲胚数比较不同品种肉羊供体冲胚数的结果详见表1。
由表1可看出,德国美利奴冲胚数平均值高于白萨福克和无角道赛特,其冲胚最大值也比白萨福克和道赛特高,高达22枚。
通过以上结果,对其进行进一步的差异显著性分析,结果见表2。
不同品种肉羊胚胎移植方法比较乌力吉1 李春生1 丹 巴1 陶萨茹拉1 黄春花2 萨仁高娃1(1.内蒙古鄂尔多斯市市家畜改良工作站,东胜 017000;2.内蒙古天和荷斯坦牧业有限公司,呼和浩特 010010)[摘 要]研究目的:研究不同品种肉羊在胚胎移植方法下的繁殖能力。
方法:采用子宫角冲胚方法,对德国美利奴、无角道赛特和白萨福克进行胚胎移植手术。
结果:通过对冲胚情况比较表明,德国美利奴的冲胚数和可用胚数都最高,最高冲胚数达22枚,最高可用胚数达18枚。
结论:通过比较显示,德国美利奴和无角道赛特在冲胚数和可用胚数上都存在显著差异(P<0.05);德国美利奴与白萨福克羊在冲胚上和可用胚上都无显著差(P>0.05)。
[关键词] 肉用绵羊 胚胎移植 冲胚效果表1 不同品种肉用绵羊冲胚情况描述性统计量冲胚数・49・・50・繁 殖 育 种中国畜牧兽医文摘 2012年 28卷 第3期由表2可看出:德国美利奴和无角道赛特的冲胚数存在显著差异,它们的均值差检验的尾概率为0.003,远低于显著差异水平0.05;德国美利奴与白萨福克之间的均值差检验的尾数概率为0.056,接近0.05的水平。
2.2 不同品种肉用绵羊可用胚数比较不同品种肉羊可用胚数比较,详见表3。
由表3可看出:德国美利奴可用胚数平均值高于白萨福克和无角道赛特,其可用胚数最大值也比白萨福克和道赛特高,高达18枚。
通过以上结果,对其进行进一步的差异显著性分析,结果见表4。
由表4可看出:德国美利奴和无角道赛特的可用胚数存在显著差异,它们的均值差检验的尾概率为0.037,低于显著差异水平0.05;德国美利奴与萨福克之间无显著差异。
表2 不同品种肉用绵羊冲胚情况多重比较均差差异显著水平为0.05。
表3 不同品种肉用绵羊可用胚数描述性统计量3 讨论不同品种肉用绵羊胚胎移植冲胚数和可用胚数比较显示,德国美利奴羊冲胚情况最好,平均冲胚10枚/只,冲胚数最高值达22枚,平均冲胚数与无角道赛特羊存在显著性差异(P<0.05)与白萨福克羊差异趋于显著(P>0.05)。
从可用胚平均值比较来看,德国美利奴羊依然高于其他2个表4 不同品种肉用绵羊可用胚胎数多重比较均差差异显著水平为0.05。
繁 殖 育 种中国畜牧兽医文摘 2012年 28卷 第3期品种,德国美利奴可用胚平均值为6.81枚/只,可用胚最大值为18枚,平均数与无角道赛特有显著差异(P<0.05)与白萨福克无显著差异(P>0.05),以上数据表明,德国美利奴在冲胚数、可用胚数和胚胎可利用率上都比其他2个品种要优越。
试验用的无角道赛特和白萨福克是2010年从澳大利亚引进的周岁羊,部分羊甚至没有产羔经验,而且到万通现代农牧业养殖园区不到一个月开始了胚胎移植前期工作,40 d左右开始进行了手术,所以引入品种原始产地与引入地在气候条件、饲料和饲养方式上的差异很大,很有可能影响了引入品种的状态。
而德国美利奴是2009年引进品种,来到万通现代农牧业养殖园区已一年多,对环境、气候和养殖方式基本适应,而且都是2周岁以上,有产高记录,所以状态较佳。
根据资料显示,德国美利奴羊本身的繁殖性能就较其他2个品种要好,在自然繁殖情况下,平均产羔率140%~175%。
而白萨福克和无角道赛特的自然繁殖率分别为130%~140%和110%~130%。
如此看来以上结果与环境、饲料、饲养情况有关以外,很有可能与品种本身的繁殖性能也有关系。
其具体原因还待后续研究考证。
参考文献[1] NY/T826-2004,中华人民共和国农业行业标准(绵羊胚胎移植技术形成)[S][2] 赵有璋,岳文斌,羊生产学[M].北京;中国农业出版社,2002[3] 姜丹,吴树青,杜山,等,不同品种肉用绵羊舍饲条件下前胃组织学变化[J].中国草食动物,2010,30(3):23-26[4] 李志农,中国养羊学[M].北京:农业出版社,1993[5] 岳文斌,畜牧学[M].北京:中国农业大学出版社,20022.3 动物卫生监督执法力度不够,开展工作难度大近年来,在动物卫生监督执法没有统一的执法服装,导致执法人员时常受到不法分子的严重挑衅,给动物卫生监督执法工作带来极大的困难。
提倡文明执法,但有时却不能执法,为查处违反动物卫生行为的案件,常需借助工商、公安等有关部门的力量进行处理,无形中就弱化了动物卫生监督执法部门的权威性。
2.4 动物标识和疫病可追溯体系建设和产地检疫仍显滞后动物标识和疫病可追溯体系建设和产地检疫工作是从源头控制动物疫病的有效措施,在实际工作中仍然存在问题。
主要有:基层识读设备操作困难,有待加强培训;网络连接不畅,识读器识读和录入困难,动物信息上传少;基层防疫挂标、录入等等操作困难、工作量加大;用识读器出证、注销更是存在距离;畜禽标识、产地检疫在牛羊等畜种和行政村以下的散养户开展面窄、量少,工作仍显滞后;工作经费严重不足。
3 丽江市动物检疫工作发展对策3.1 加大兽医管理体制改革力度,建立和实行动物卫生监督执法工作的垂直管理模式要按照国务院国办发(2005)15号、云政发[2006]78号文件切实加强兽医管理体制改革,建立兽医管理机构、动物卫生监督执法机构、动物疫病控制机构,加快兽医体制改革进程,理顺兽医体制。
根据《动物防疫法》的规定,乡镇畜牧兽医站没有检疫授权,检疫员都是由县级动物卫生监督机构派驻的。
因此,县级动物卫生监督所可以在乡镇级设立派出分机构,实行垂直管理。
这样,有利于统一指挥,统一行动,同时也为今后实行兽医官制度打下良好基础。
3.2 加强执法队伍建设要打造一支能适应畜牧业发展新形势,为动物疫病防控、保障公共卫生和动物产品安全服务的专业队伍。
(1)不断充实进入年青化、知识化、专业化的新生力量,提高执法队伍的整体素质,增强执法队伍的活力。
(2)加强业务培训,培养一支精通业务、熟悉法律、作风过硬的执法队伍,不断提高执法队伍的执法能力。
(3)妥善解决执法人员工资待遇问题,依据国家的有关规定,尽快争取参公管理,暂时不能参公管理的,应当按照《动物防疫法》第六十四条“……检疫和监督管理所需经费纳入本级财政预算”。
3.3 加大投入,保障动物卫生工作顺利开展建议各级政府财政和上级业务主管部门加大对动物卫生监督执法工作的投入,解决动物卫生监督执法工作所需的基本设备和工作经费,改善工作条件;通过动物防疫基础设施等项目建设,不断改善基层动物检疫人员的装备,特别是要装备快速检测设备,发展切实可行的快速检疫技术;配备好检疫监督执法中所必需的交通、取证、办案等设备设施,逐步改变办案难的问题。
使动物卫生监督执法工作能有序开展,使畜牧产业的发展和动物产品的卫生安全得到有力的保障。
3.4 加大动物标识和疫病可追溯体系建设力度要以实施畜禽标识为突破口,克服畏难情绪,按要求实行畜禽标识和养殖档案管理制度,全面推进产地检疫工作,做到无“一证一标”的动物不得上市交易、进屠宰场屠宰和出具出境检疫证明。
3.5 统一执法着装,规范执法行为建议全国实行执法人员的统一着装,提高执法的尊严,依据法律规定制定完善相关的动物卫生监督执法规章制度,做到执法工作有法可依,有章可循,文明执法。
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