乙型肝炎的实验室诊断

乙型肝炎病毒实验室检测结果的再认识关于乙型肝炎病毒（HBV）感染的实验室检测是目前国内较为常用的检验项目，也是医患纠纷产生较多的领域之一。

如何正确分析和解释乙肝实验室的检验结果以及对于这些检验项目的实际应用具有重要意义。

本文通过探讨乙肝标志物模式与HBV-DNA结果的关系，为临床正确解读使用检验结果提供有力依据。

方法：乙型肝炎病毒血清标志物定性检测采用实验室常用的ELISA法，HBV-DNA采用实时荧光PCR定量检测。

结果1000例血清标本中，”大三阳”模式与HBV-DNA结果阳性符合率达96.5%，”小三阳”模式与HBV-DNA阳性符合率达32.5%，HBsAg（+）、HBcAb（+）模式与HBV-DNA 阳性符合率达48.8%，HBsAg（+）、HBeAg（+）模式与HBV-DNA结果阳性符合率达94.7%。

讨论”大三阳”模式标本两种检测阳性符合率很高，但是也有3.7%不相符，经调查均在治疗服药过程中，因药物干扰而呈假阴性。

”小三阳”模式标本，两种检测阳性符合率仅有32.3%，却有68.9%不相符，说明”小三阳”模式病毒复制减弱，并非所有”小三阳”患者均不具有传染性，必须密切观察，才能更好服务于患者。

HBsAg（+）、HBcAb（+）模式标本中HBV-DNA检测阳性占到48.8%，超过”小三阳”模式，表明HBeAg因浓度过高或刚好采样时间处于HBeAg滴度尚低于可检测线之上，已有报道此种情况下稀释标本重新检测HBeAg可呈阳性，部分患者在以后复查时变为”大三阳”或”小三阳”。

因此这一模式结果做HBV-DNA检测查明病毒复制强弱。

HBsAg（+）、HBeAg（+）模式与HBV-DNA 结果非常一致，阳性符合率达94.7%。

这一模式一般处于病毒感早期，传染性强。

综上所述，两种乙型肝炎病毒血清标志物检测方法相辅相成，ELISA定性检测开展普遍，但影响因素较多，无法确知病毒复制强弱。

HBV-DNA实时荧光PCR 定量检测越来越受到重视，是反映乙肝病毒复制的良好标志。

乙型肝炎各项指标实验室检查方法进展乙型肝炎病毒(HBV)感染仍是威胁着人民健康的全球性问题。

目前，全世界受HBV感染者接近20亿，其中有超过3亿的慢性感染者，每年它大约带走120万人的生命，在重组乙肝疫苗问世以前，乙肝病毒和艾滋病毒一样可怕，因为还没有药物能有效清除病人体内的乙肝病毒。

在亚太地区，慢性HBV感染率超过10%，其中25%—40%患者会因合并或不合并肝细胞癌的肝硬化而死亡。

世界卫生组织已将HBV感染列为全球十大死亡原因之一。

我国是乙型肝炎病毒的高发区域，本病在我国广泛流行，人群感染率高，在某些地区感染率达到35%以上。

据有关资料报道，肝炎检测阳性的患者已经达到1.89亿，而应就诊未就诊人数(携带者)将近4亿，是当前危害人民健康最严重的传染病。

随着实验室检查方法进展,对乙型肝炎的早期诊断、预防和治疗水平有很大的提高。

经过几十年不断发展,我国已形成了一套完整的检测系统。

敏感、特异、快速、定量的乙肝病毒血清标志物的检测方法为诊断治疗及研究提供了重要的工具。

用HBsAg采用的免疫沉淀法作为临床检测，开创了我国对乙型肝炎病毒抗原的检测。

先后采用了琼脂免疫扩散和对流免疫电泳法来检测HBsAg、HBsAb和HBeAg、HBeAb,但这些检测方法的特异性及敏感性都较差。

至上个世纪七十年代逐渐被一系列方法取代，这些方法的出现，对于检测乙型肝炎在敏感性和特异性方面有了很大的提高。

1 间接免疫凝集试验包括间接血凝试验、免疫粘附血凝试验和乳胶凝集试验等,使敏感性和特异性有所提高[1]。

在ELISA方法出现之前，在表面抗原检测中占据了重要地位。

反向被动血凝用表面抗体致敏O型红细胞,将病人血清连续二倍稀释与其反应一定时间后肉眼观察凝集现象判断表面抗原滴度。

此法的特别之处在于可对表面抗原作相对定量,但操作繁复是其缺点。

2 酶联免疫试验( ELISA)由于反向被动血凝本身存在很大的缺陷，到20世纪70年代盛树力等开始将双抗体夹心法为代表的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法介绍至国内,其发展迅速,很快覆盖了医学检验的诸多领域。

乙型肝炎病例诊断报告要求★乙肝诊断《乙型病毒性肝炎（WS 299-2008）》一、诊断原则乙肝的诊断依据流行病学资料、临床表现、实验室检查、病理学及影像学检查等进行初步诊断，确诊须依据血清HBV标志和HBV DNA检测结果。

二、诊断分类根据临床特点和实验室检查等将乙肝分为不同临床类型，包括急性乙肝、慢性乙肝、乙肝肝硬化、乙肝病毒相关的原发性肝细胞癌等。

三、诊断（一）急性乙肝1 近期出现无其他原因可解释的乏力和消化道症状，可有尿黄、眼黄和皮肤黄疸。

2 肝脏生化检查异常，主要是血清ALT 和AST 升高，可有血清胆红素升高。

3 HBsAg 阳性。

4 有明确的证据表明6 个月内曾检测血清HBsAg 阴性。

5抗-HBc IgM 阳性1: 1000以上。

6 肝组织学符合急性病毒性肝炎改变。

7 恢复期血清HBsAg 阴性，抗HBs 阳性。

▲疑似急性乙肝病例符合下列任何一项可诊断：♦同时符合1和3。

♦同时符合2和3。

▲确诊急性乙肝病例符合下列任何一项可诊断：♦疑似病例同时符合4。

（1、3、4或2、3、4）♦疑似病例同时符合5。

（1、3、5或2、3、5）♦疑似病例同时符合6。

（1、3、6或2、3、6）♦疑似病例同时符合7。

（1、3、7或2、3、7）（二）慢性乙肝1、急性HBV感染超过6个月仍HBsAg阳性或发现HBsAg阳性超过6个月。

2、HBsAg 阳性持续时间不详，抗HBc IgM 阴性。

3、慢性肝病患者的体征如肝病面容，肝掌、蜘蛛痣和肝、脾肿大等。

4、血清ALT 反复或持续升高，可有血浆白蛋白降低和（或）球蛋白升高，或胆红素升高等。

5、肝脏病理学有慢性病毒性肝炎的特点。

6、血清HBeAg阳性或可检出HBV DNA并排除其他导致ALT升高的原因。

▲疑似慢性乙肝病例符合下列任何一项可诊断：♦符合1和3。

♦符合2和3。

♦符合2 和4 。

▲确诊慢性乙肝病例符合下列任何一项可诊断：♦同时符合1、4 和6。

♦同时符合1、5 和6。

乙肝实验室诊断标准
乙肝实验室诊断标准主要包括以下几个方面的内容：
1.肝功能检查：包括谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、胆碱酯酶（ChE）、胆红素等指标。

正常值为0-40U/L。

对于肝功能出现异常的患者，要警惕肝炎的存在，其中转氨酶也是检测肝功能损害的指标之一。

2.乙肝病毒DNA定量检测：正常值为0-
100copies/ml，如果小于100copies/ml，则为阴性，乙肝病毒DNA定量阴性一般代表没有感染乙肝病毒。

3.乙肝两对半检查：即乙肝表面抗原（HBsAg）、乙肝表面抗体（HBsAb）、e抗原（HBeAg）、e抗体（HBeAb）和核心抗体（HBcAb）的检测。

通过这项检查可以判断机体是否感染了乙肝病毒以及病毒的具体类型。

4.HBV-DNA测序：通过检测HBV-DNA的序列，可以了解病毒的变异情况，如检测出病毒的耐药位点等。

5.乙肝病毒前S1抗原（PreS1）检测：PreS1是乙肝病毒外膜蛋白上的抗原前体，具有很强的免疫原性，能刺激机体产生较强的保护性抗体。

PreS1抗原检测可弥补HBsAg检测的不足，有助于对乙型肝炎的诊断、病程观察、预后判断及疫苗效果的评价。

6.其他相关检测：如血常规、尿常规、凝血功能、甲胎蛋白等检查，以评估患者的整体健康状况。

在进行乙肝实验室诊断时，医生会根据患者的具体情况选择相应的检测方法。

同时，患者也需要注意提供准确的个人信息和病史，以便医生做出准确的诊断和治疗方案。

乙型肝炎病毒实验室检测技术规范简介本文档旨在制定乙型肝炎病毒实验室检测技术规范，以确保实验室操作的准确性、有效性和安全性。

本规范适用于乙型肝炎病毒的检测工作，包括样本采集、处理、实验操作和数据分析等环节。

实验室设备和材料要求- 实验室应配备符合乙型肝炎病毒检测要求的设备，包括PCR 仪、离心机、显微镜等。

- 实验室应储备足够的试剂和耗材，确保进行实验所需材料的充足性和质量。

- 实验室应建立样本采集、储存和处理的标准操作流程，确保样本的完整性和稳定性。

实验操作规范- 实验操作前，操作人员应接受相关的乙型肝炎病毒检测方法培训，熟悉操作流程和安全注意事项。

- 实验操作中应严格遵守无菌技术操作要求，避免交叉污染和误差的发生。

- 样本采集时应采用合适的器械和方法，并确保采集的样本足够，并满足乙型肝炎病毒检测的要求。

- 样本处理过程中应遵循实验室内的安全操作规定，包括穿戴个人防护装备、定期消毒等。

- 实验操作中应遵循乙型肝炎病毒检测方法的标准程序，确保操作的准确性和可靠性。

数据分析和结果报告要求- 实验数据应进行准确的记录和整理，确保数据的可追溯性和准确性。

- 数据分析应遵循乙型肝炎病毒检测方法的要求，运用适当的统计方法和质控措施进行数据分析。

- 检测结果应及时报告，包括样本编号、检测方法、检测结果等内容，并存档备查。

质量控制要求- 实验室应建立质量控制体系，包括质量控制样品的使用和监测，以确保实验结果的准确性和可靠性。

- 定期进行设备的校准和维护，确保设备运行的准确性和稳定性。

- 实验操作过程中应进行内部质量控制的监测，包括设立质控样品和进行校准实验等。

安全要求- 实验室应遵守乙型肝炎病毒实验室安全管理规范，包括建立安全操作标准、储存和处置感染性废弃物等。

- 操作人员应接受相关的安全培训，熟悉应急处理措施和事故报告要求。

- 实验室应建立和维护安全管理档案，包括安全设施和装备的维护记录、事故处理记录等。

总结本文档为乙型肝炎病毒实验室检测技术规范，提供了实验室设备和材料要求、实验操作规范、数据分析和结果报告要求、质量控制要求以及安全要求等方面的内容。

乙型肝炎的诊断标准
乙型肝炎是一种由乙型肝炎病毒（HBV）引起的慢性疾病，其诊断主要依据实验室检查和临床体征。

以下是乙型肝炎的诊断标准：
1.乙肝表面抗原（HBsAg）阳性：HBsAg是HBV的外壳蛋白，其阳性是HBV感染的标志。

当血液中HBsAg阳性时，通常表示存在HBV 感染。

2.乙肝表面抗体（HBsAb）阴性：HBsAb是一种保护性抗体，其阴性表示尚未产生免疫力或免疫力已消失。

3.乙肝e抗原（HBeAg）阴性：HBeAg是HBV核心抗原的可溶性成分，其阴性表示病毒复制可能处于静止状态或复制水平较低。

4.乙肝e抗体（HBeAb）阳性：HBeAb是HBeAg的抗体，其阳性表明病毒复制减少或停止，传染性降低。

5.乙肝核心抗体（HBcAb）阳性：HBcAb是针对HBV核心抗原的抗体，其阳性表示曾经感染过HBV或正在感染中。

在诊断乙型肝炎时，医生还会考虑其他因素，如临床症状、肝功能检查、肝脏超声等。

如果满足上述标准中的至少一条，就可以诊断为乙型肝炎。

同时，医生会根据病情的严重程度和患者的具体情况制定相应的治疗方案。