聊城大学畜禽疫病防治技术实验室
- 格式:pptx
- 大小:2.27 MB
- 文档页数:12


畜牧兽医系部分实验室简介家畜病理学实验室简介家畜病理学实验室是畜牧兽医系直属统一建立的实验室,2002年以来,根据专业与课程设置、学科建设等发展方向进行了改造建设。
实验室现设1个实验室,总面积为54m2,实验器材和设备总额约10万元人民币。
实验所用大体标本和病理组织切片都是学生实验自制。
实验室现有工作人员6人,其中专职教师兼主管1人、理论及实验教师4人、管理人员1人。
实验室工作人员名单:陶艳芳副教授、郑锦玲讲师、黄光红助讲、王荣琼助讲、施忠芬助讲、王昌梅中技工。
实验室现承担畜牧兽医系5个专业的家畜病理学和兽医基础(病理)2门实验课程,以及畜牧兽医系的动物防疫与检疫员和动物防疫治疗员的技能鉴定。
实验室注重培养学生的实验操作能力,提高和培养学生的独立工作、科学思维,以及观察问题、分析问题和解决问题的能力。
实验课采取启发式、讨论式教学方法调动学生的学习积极性,强化了实验基本理论和技能的训练,取得了显著的教学效果。
动物生物化学实验室简介动物生物化学实验室是畜牧兽医系于1996年建立的独立实验室。
该实验的主要设备有:高速离心机、分光光度计、电子天平、酸度计、层析系统、电子天平、稳压稳流电泳仪、恒温水浴锅、组织捣碎机、台式PH测试仪;设备价值约为65088元;实验室面积为75.6 m 2左右;管理指导教师有3 名(中级职称2 人,管理人员1 人)。
2006学年约接纳13960 人时完成实验,使用率达99% ;实验能同时容纳40 多名学生进行实验。
主要开设实验项目有:生物化学基本操作技能和常用仪器使用方法;血液生化样品的采集及组织匀浆的制备;牛乳中酪蛋白的提取与鉴定;蛋白质等电点的测定;双缩脲测定蛋白质含量;酶的特性—底物专一性;pH对唾液淀粉活性影响;维生素C的提取与含量测定;血清胆固醇的测定——磷硫铁法等。
动物生物化学实验室作用主要是巩固提高学生的理论知识,培养他们实验操作的基本技能,锻炼他们的独立思考能力与原始创新能力。
㊀山东农业科学㊀2023ꎬ55(6):152~156ShandongAgriculturalSciences㊀DOI:10.14083/j.issn.1001-4942.2023.06.020收稿日期:2022-09-22基金项目:山东省自然科学基金项目 莱氏绿僵菌致病过程中的群体感应调节及诱导机制 (ZR2020MC127)ꎻ聊城大学大学生创新创业训练计划项目(CXCY2022219)作者简介:张希鹏(1998 )ꎬ男ꎬ山东淄博人ꎬ硕士研究生ꎬ研究方向为园林植物害虫生物防治ꎮE-mail:m17852266701@163.com通信作者:刘守柱(1971 )ꎬ男ꎬ山东泰安人ꎬ博士ꎬ副教授ꎬ主要从事昆虫病理及害虫生物防治研究ꎮE-mail:liushouzhu@lcu.edu.cn五种昆虫脱皮抑制剂与莱氏绿僵菌的相容性研究张希鹏1ꎬ王世贤1ꎬ李学文2ꎬ于妙荣1ꎬ聂玉恒1ꎬ任宪銮1ꎬ刘守柱1(1.聊城大学农学与农业工程学院ꎬ山东聊城㊀252000ꎻ2.福建农林大学植物保护学院ꎬ福建福州㊀350002)㊀㊀摘要:为明确莱氏绿僵菌与常用昆虫脱皮抑制剂的相容性ꎬ本试验采用涂板法和液体培养法测定了虱螨脲㊁氟啶脲㊁灭幼脲㊁氟铃脲和吡丙醚对莱氏绿僵菌菌丝生长㊁产孢量和分生孢子萌发的影响ꎮ结果表明ꎬ虱螨脲㊁氟啶脲和灭幼脲与莱氏绿僵菌的相容性较好ꎬ对莱氏绿僵菌的菌丝生长㊁产孢量和孢子萌发率均无抑制作用ꎮ氟铃脲和吡丙醚对莱氏绿僵菌菌丝生长无抑制作用ꎻ对产孢量和孢子萌发抑制作用较强ꎬ在25%田间剂量浓度时的产孢抑制率分别为66.97%㊁39.74%ꎬ在4倍田间剂量浓度时孢子萌发抑制率分别为68.69%㊁60.45%ꎮ以上结果表明ꎬ莱氏绿僵菌与虱螨脲㊁氟啶脲和灭幼脲的相容性好ꎬ与氟铃脲和吡丙醚的相容性差ꎮ关键词:莱氏绿僵菌ꎻ昆虫脱皮抑制剂ꎻ相容性ꎻ孢子萌发率ꎻ产孢量中图分类号:S476.1㊀㊀文献标识号:A㊀㊀文章编号:1001-4942(2023)06-0152-05CompatibilityofFiveInsectMoltingInhibitorswithMetarhiziumrileyiZhangXipeng1ꎬWangShixian1ꎬLiXuewen2ꎬYuMiaorong1ꎬNieYuheng1ꎬRenXianluan1ꎬLiuShouzhu1(1.AgriculturalScienceandEngineeringSchoolꎬLiaochengUniversityꎬLiaocheng252000ꎬChinaꎻ2.CollegeofPlantProtectionꎬFujianAgricultureandForestryUniversityꎬFuzhou350002ꎬChina)Abstract㊀InordertoconfirmthecompatibilityofMetarhiziumrileyiwithcommonlyusedinsectmoltinginhibitorsꎬtheeffectsoflufenuronꎬchlorfluazuronꎬchlorbenzuronꎬhexaflumuronandpyriproxyfenonthemy ̄celialgrowthꎬsporulationandsporegerminationofM.rileyiwerestudiedbycoatingmethodandliquidculturemethod.TheresultsshowedthatlufenuronꎬchlorfluazuronandchlorbenzuronhadbettercompatibilitywithM.rileyiꎬandhadnoinhibitoryeffectsonmycelialgrowthꎬsporulationandsporegerminationrate.Hexaflumuronandpyriproxyfenhadnoinhibitoryeffectonmycelialgrowthꎬbutstronglyinhibitedthesporulationandsporegerminationwiththeinhibitionratesofsporulationas66.97%and39.74%respectivelyat25%fielddosageandtheinhibitionratesofsporegerminationas68.69%and60.45%respectivelyat4timesoffielddosage.TheaboveresultsindicatedthatM.rileyihadgoodcompatibilitywithlufenuronꎬchlorfluazuronandchlorben ̄zuronꎬbutpoorcompatibilitywithhexaflumuronandpyriproxyfen.Keywords㊀MetarhiziumrileyiꎻInsectmoltinginhibitorꎻCompatibilityꎻSporegerminationrateꎻSporulation㊀㊀昆虫病原真菌是最早被鉴定为昆虫病原的微生物ꎬ也是一种可开发为环境友好型生物农药的重要资源ꎮ如今越来越多的昆虫病原真菌ꎬ如球孢白僵菌(Beauveriabassiana)[1-3]㊁金龟子绿僵菌(Metarhiziumanisopliae)[4-6]㊁淡紫拟青霉(Paecilomyceslilacinus)[7]等被广泛应用于农田㊁温室等的害虫防治中ꎮ大量研究表明ꎬ利用昆虫病原真菌防治害虫不但对环境友好ꎬ而且不会引起害虫的抗药性ꎬ不杀伤天敌ꎬ对人畜安全ꎬ是一种绿色有效的方法[8-10]ꎮ莱氏绿僵菌(M.rileyi)是一种昆虫病原真菌ꎬ其寄主范围广泛ꎬ可以寄生在30多种鳞翅目害虫上[11-13]ꎬ自然条件下可在害虫种群内形成侵染循环ꎬ引起昆虫的田间流行病ꎬ能够有效降低种群密度ꎬ具有很强的致病力ꎬ是极具开发潜力的虫生真菌之一ꎮ不同病原真菌的杀虫效果差异较大ꎬ并容易受到环境影响[14ꎬ15]ꎮ虽然绿僵菌制剂已被联合国粮食与农业组织(FAO)推荐为环保产品并推广应用[16ꎬ17]ꎬ但与其他真菌一样ꎬ莱氏绿僵菌也存在击倒害虫时间长㊁杀虫速率低下㊁受环境影响较大等弊端ꎬ尤其当虫口密度较大时ꎬ不能及时压低虫口㊁减少损失ꎮ为了提高杀虫效果ꎬ现阶段多将莱氏绿僵菌与其他药剂混用以达到增强致病力的目的ꎬ但虫生真菌与化学农药的混用不能盲目进行ꎬ需要提前进行二者的相容性测定ꎮ已有研究表明ꎬ昆虫病原真菌与大部分化学农药相容性较差[18-22]ꎬ与绿色农药的相容性较好[23ꎬ24]ꎬ因而绿色农药与昆虫病原真菌复配是未来的应用方向ꎮ虱螨脲㊁氟啶脲等是作用于昆虫脱皮过程的一种绿色农药ꎬ具有低毒㊁低残留的特点ꎬ对人和牲畜相对安全ꎬ对环境友好ꎬ且害虫对其不易产生抗性ꎬ已成为当前农林害虫综合治理中不可或缺的重要组成部分ꎮ为明确莱氏绿僵菌与虱螨脲等绿色农药混用的可能性ꎬ本试验选择5种常用昆虫脱皮抑制剂ꎬ研究该类药剂与莱氏绿僵菌的相容性ꎬ并筛选相容性好的药剂ꎬ为下一步与莱氏绿僵菌的复配提供科学依据ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀试验材料供试菌株:莱氏绿僵菌Nr5772菌株ꎬ源自于美国佛罗里达大学昆虫病理实验室ꎬ并在聊城大学昆虫实验室内用萨氏麦芽糖酵母琼脂固体培养基(SMAY)培养ꎬ-20ħ冷藏保存ꎮ由于长时间人工培养菌株会出现毒力衰退的现象ꎬ为保证其毒力ꎬ试验开始前先接种到草地贪夜蛾幼虫体内ꎬ幼虫死亡后从僵虫上分离孢子ꎬ纯化㊁复壮后备用ꎮSMAY培养基:蛋白胨5g㊁麦芽糖5g㊁酵母粉5g㊁琼脂6gꎬ用蒸馏水定容至500mLꎬ121ħ灭菌20minꎮ昆虫脱皮抑制剂:94%氟啶脲㊁98%虱螨脲㊁94%氟铃脲㊁95%灭幼脲和98%吡丙醚ꎬ均为原药ꎬ由青岛瀚生生物科技股份有限公司提供ꎮ1.2㊀试验方法1.2.1㊀药剂剂量设置㊀在中国农药信息网查找5种供试药剂的田间使用剂量ꎬ以田间使用剂量为基准ꎬ设置4倍㊁2倍㊁1倍㊁50%㊁25%共5个浓度梯度ꎬ以丙酮作为溶剂ꎬ配制各浓度药液(表1)ꎮ㊀㊀表1㊀㊀5种昆虫脱皮抑制剂浓度设置药剂名称田间剂量25%50%1倍2倍4倍94%氟啶脲28.7557.50115.00230.00460.0098%虱螨脲25.0050.00100.00200.00400.0095%灭幼脲34.2568.25137.00274.00548.0094%氟铃脲31.0062.00124.00248.00496.0098%吡丙醚18.7537.5075.00150.00300.001.2.2㊀脱皮抑制剂对莱氏绿僵菌菌丝生长的影响㊀取复壮完成的莱氏绿僵菌新鲜孢子ꎬ用0.1%吐温80(无菌水配置)配制浓度为1ˑ106个/mL的分生孢子悬浮液待用ꎮ根据表1配制各浓度药剂ꎬ移液枪吸取300μL药液加入SMAY平板中ꎬ并用玻璃棒涂布均匀ꎬ以涂布丙酮为对照ꎮ静置10min待丙酮完全挥发后ꎬ用移液枪将分生孢子悬浮液接种至不同平板中ꎬ每皿接种3滴ꎬ每滴3μL(液滴圆形)ꎬ液滴呈三角形排列ꎮ静置20min密封平板ꎬ将平板置于光照培养箱内培养(25ħꎬ光周期LʒD=12hʒ12h)ꎮ每个药剂浓度重复3次ꎮ培养第4天后平板出现较为明显的菌落ꎬ采用十字交叉法测量各菌落直径ꎬ以每皿3个菌落直径的平均值作为菌落的原始直径ꎬ以第14天平均菌落直径作为最终值ꎬ计算菌落直径增长量ꎮ菌落直径增长量(cm)=第14天菌落平均直径-第4天菌落平均直径ꎮ1.2.3㊀昆虫脱皮抑制剂对莱氏绿僵菌产孢量的影响㊀基于1.2.2菌落直径测定完成后ꎬ用0.1%吐温80将每皿平板内的所有孢子充分洗脱ꎬ转移至离心管内定容至10mLꎬ漩涡振荡器上充分混匀后过滤ꎬ在显微镜下用血球计数板计数ꎮ每个浓度处理取3皿平板ꎬ计数平均产孢量ꎬ计算产孢抑制率ꎮ351㊀第6期㊀㊀㊀㊀㊀㊀张希鹏ꎬ等:五种昆虫脱皮抑制剂与莱氏绿僵菌的相容性研究产孢抑制率(%)=(对照组产孢量-处理组产孢量)/对照组产孢量ˑ100ꎮ1.2.4㊀昆虫脱皮抑制剂对莱氏绿僵菌孢子萌发的影响㊀取新鲜绿僵菌孢子ꎬ用0.1%吐温80配制成浓度为1ˑ108个/mL的分生孢子悬浮液备用ꎮ称取100mg原药ꎬ加入2mL吐温80充分搅拌至糊状ꎬ然后加入少量丙酮搅拌至完全溶解ꎬ加入0.1%吐温80定容至50mLꎬ配制成高浓度的药剂母液备用ꎮ取适量药剂母液ꎬ用孢子悬浮液分别稀释成田间剂量4倍㊁2倍㊁1倍㊁50%㊁25%浓度的梯度药液(表1)ꎬ以不含药的液体作为对照ꎬ180r/min㊁25ħ摇床振荡培养48h后用血球计数板统计孢子萌发数量ꎬ每浓度重复3次ꎬ计算孢子萌发抑制率ꎮ孢子萌发抑制率(%)=(检查的总孢子数-萌发孢子数)/检查的总孢子数ˑ100ꎮ1.3㊀数据处理与分析试验数据用SPSS26.0(IBM)软件进行分析处理ꎬ采用Duncan s新复极差法分析比较差异显著性(P<0.05)ꎬ用GraphpadPrism8作图ꎮ2㊀结果与分析2.1㊀5种昆虫脱皮抑制剂对莱氏绿僵菌菌丝生长的影响莱氏绿僵菌孢子接种到带药平板后ꎬ第4天左右即可见到明显菌斑ꎬ此后菌丝越来越浓密ꎬ菌落直径缓慢增大ꎬ与对照相比ꎬ菌落直径没有明显变化ꎬ说明在供试剂量范围内ꎬ莱氏绿僵菌在5种药剂平板中均可生长ꎮ对各处理的菌落增长量进行方差分析ꎬ结果表明ꎬ各药剂不同浓度处理与对照间的菌落直径差异均不显著(图1)ꎬ说明莱氏绿僵菌对5种昆虫脱皮抑制剂的敏感性不强ꎬ适应范围比较广ꎬ即使在4倍田间剂量下菌丝的营养生长依然没有受到抑制ꎮ图中不同小写字母表示同种药剂不同浓度处理间差异显著(P<0.05)ꎬ下同ꎮ图1㊀莱氏绿僵菌经5种昆虫脱皮抑制剂处理的菌落直径增长量2.2㊀5种昆虫脱皮抑制剂对莱氏绿僵菌产孢量的影响数据分析结果(图2)表明ꎬ氟啶脲㊁虱螨脲和灭幼脲3种药剂处理的产孢量较高ꎬ与对照组无显著差异ꎬ说明在试验剂量范围内ꎬ这3种药剂对莱氏绿僵菌的生殖生长没有不利影响ꎮ氟铃脲和吡丙醚处理的孢子产量较低ꎬ在25%田间剂量浓度下ꎬ抑制率分别为66.97%㊁39.74%ꎬ在田间剂量浓度下抑制率分别为68.92%㊁54.50%ꎬ在4倍田间剂量浓度下抑制率分别为83.70%㊁61.05%ꎻ各浓度处理均显著低于对照组ꎬ并呈现药剂浓度越高抑制性越强的趋势ꎮ2.3㊀5种昆虫脱皮抑制剂对莱氏绿僵菌孢子萌发的影响氟啶脲㊁虱螨脲和灭幼脲3种药剂各浓度处理孢子均正常萌发ꎬ萌发量与对照组无显著差异ꎬ虱螨脲甚至还呈现出随着浓度的升高促进孢子萌发的现象(图3)ꎮ氟铃脲和吡丙醚处理的孢子萌发数量显著低于对照组ꎬ表现出较强的抑制性ꎬ且随着药剂浓度升高ꎬ对孢子萌发的抑制作用越强ꎮ在25%~4倍田间浓度下ꎬ氟铃脲对莱氏绿僵菌孢子的萌发抑制率为39.08%~68.69%ꎬ吡丙醚的抑制率为35.06%~60.45%ꎮ451山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀图2㊀莱氏绿僵菌经5种昆虫脱皮抑制剂处理的产孢量图3㊀莱氏绿僵菌经5种昆虫脱皮抑制剂处理的孢子萌发量3㊀讨论与结论害虫防治一直是农业生产中的重要内容ꎬ也是农业丰产㊁丰收的重要保障ꎮ目前对农业害虫的防治主要还是大量采用化学药剂ꎬ但化学农药使用的弊端日趋明显ꎬ不符合绿色农业㊁生态农业的发展趋势ꎬ因而亟需开发环境友好的绿色新型农药ꎮ随着农业技术的发展ꎬ越来越多的真菌制剂㊁植物农药等绿色农药相继问世ꎬ其中以白僵菌㊁绿僵菌为代表的真菌类生物农药ꎬ以其良好的防治效果和安全性而得到广泛应用ꎮ我国从20世纪70年代就开始运用绿僵菌防治农业害虫[25]ꎬ在绿僵菌的应用和研究方面积累了丰富经验ꎮ但是真菌杀虫剂存在见效慢和受环境影响大的缺点ꎬ这阻碍了绿僵菌的进一步应用ꎮ解决昆虫病原真菌杀虫速度慢的措施之一是与化学农药复配使用ꎮ李敏等[26]研究发现ꎬ昆虫真菌与杀虫剂的相容性高于与杀菌剂的ꎬ且低浓度优于高浓度ꎻ与化学药剂复配后对真菌的防治效果也具有一定的增效作用[27ꎬ28]ꎮ昆虫脱皮抑制剂作为一类作用机制独特的绿色农药ꎬ不但在生产上有广泛的应用ꎬ而且也是常用的复配药剂ꎬ但该类药剂与昆虫病原真菌的复配却鲜有研究ꎮ与昆虫脱皮抑制剂联合使用是提高莱氏绿僵菌杀虫速度的新途径ꎬ但首先需要明确二者之间有无抑制或拮抗作用ꎮ本研究选择了5种可以延缓或抑制昆虫脱皮的药剂ꎬ从菌落直径㊁孢子产量㊁孢子萌发量三方面评估药剂与莱氏绿僵菌的相容性ꎮ结果表明ꎬ氟啶脲㊁虱螨脲和灭幼脲与莱氏绿僵菌的相容性较好ꎬ对菌丝生长㊁产孢量和孢子萌发均没有抑制作用ꎬ虱螨脲还可以在一定程度上促进孢子萌发ꎬ因而可以与莱氏绿僵菌复配使用ꎮ氟铃脲和吡丙醚虽然对莱氏绿僵菌菌丝生长没有抑制作用ꎬ但对孢子萌发和产孢量具有很强的抑制作用ꎮ由于莱氏绿僵菌的致病机理主要是通过孢子萌发穿透体壁来侵染寄主[29]ꎬ而氟铃脲和吡丙醚对孢子萌发具有很强的抑制性ꎬ会严重影响莱氏绿僵菌的侵染成功率ꎬ导致防治效果下降ꎬ因而不宜作为复配药剂使用ꎮ本研究结果表明ꎬ氟啶脲㊁虱螨脲和灭幼脲与莱氏绿僵菌均有很好的相容性ꎬ下一步可以进行551㊀第6期㊀㊀㊀㊀㊀㊀张希鹏ꎬ等:五种昆虫脱皮抑制剂与莱氏绿僵菌的相容性研究两者的复配研究以提高莱氏绿僵菌的杀虫效率ꎬ既满足现代农业对生物防治手段的要求ꎬ又可以提高生产效率和产品品质ꎮ此外ꎬ本研究也可为其他病原真菌ꎬ如白僵菌的复配应用提供新的研究思路ꎬ对提高生物防治效果㊁减少化学药剂的使用具有深远意义ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[1]㊀BingLAꎬLewisLC.TemporalrelationshipsbetwenZeamaysꎬOstrinianubilalis(Lep.:Pyralidae)andendophyticBeauveriabasiana[J].Entomophagaꎬ1992ꎬ37(4):525-536. [2]㊀RamakuwelaTꎬHatingJꎬBockCꎬetal.EstablishmentofBeau ̄veriabassianaasafungalendophyteinpecan(Caryailli ̄noinensis)sedlingsanditsvirulenceagainstpecaninse ̄ctpests[J].BiologicalControlꎬ2020ꎬ140:104102.[3]㊀ToffaJꎬLokoYLEꎬKpindouOKDꎬetal.Endophyticcoloni ̄zationoftomatoplantsbyBeauveriabasianaVuilemin(Asco ̄mycota:Hypocreales)andleafdamageinHelicoverpaarmigera(Hübner)(Lepidoptera:Noctuidae)larvae[J].EgyptianJour ̄nalofBiologicalPestControlꎬ2021ꎬ31:82.[4]㊀MwamburiLA.EndophyticfungiꎬBeauveriabasianaandMetar ̄hiziumanisopliaeꎬconfercontrolofthefalarmywormꎬSpodopterafrugiperda(J.E.Smith)(Lepidoptera:Noctuidae)ꎬintwoto ̄matovarieties[J].EgyptianJournalofBiologicalPestControlꎬ2021ꎬ31:7.[5]㊀MantzoukasSꎬLagogiannisI.Endophyticcolonizationofpepper(Capsicumannum)controlsaphids(MyzuspersicaeSulzer)[J].AppliedSciencesꎬ2019ꎬ9(11):2239.[6]㊀RussoMLꎬJaberLRꎬScorsettiACꎬetal.Effectofento ̄mopathogenicfungiintroducedascornendophytesonthedevel ̄opmentꎬreproductionꎬandfodpreferenceoftheinvasivefallar ̄mywormSpodopterafrugiperda[J].JournalofPestScienceꎬ2021ꎬ94(3):859-870.[7]㊀KepenekciIꎬOksalEꎬSaglamHDꎬetal.IdentificationofTurk ̄ishisolateoftheentomopathogenicfungiꎬPurpureociliumlilaci ̄num(syn:Paecilomyceslilacinus)anditseffectonpotatopestsꎬPhthorimaeaoperculela(Zeler)(Lepidoptera:Gelechi ̄dae)andLeptinotarsadecemlineata(Say)(Coleoptera:Chry ̄somelidae)[J].EgyptianJournalofBiologicalPestControlꎬ2015ꎬ25(1):121-127.[8]㊀杨新军ꎬ林华峰ꎬ李茂业ꎬ等.莱氏野村菌Nr05菌株的培养性状及其对斜纹夜蛾的毒力[J].中国生物防治ꎬ2007ꎬ23(1):44-48.[9]㊀彭好文ꎬ黎起秦ꎬ林纬.生物防治研究及其应用概况[J].广西农业生物科学ꎬ2004ꎬ23(2):170-174.[10]周晓梅ꎬ黄炳球.斜纹夜蛾抗药性及其防治对策的研究进展[J].昆虫知识2002ꎬ9(2):98-102.[11]刘琴ꎬ徐健ꎬ殷向东ꎬ等.莱氏野村菌的生物学特性及其对甜菜夜蛾的致病力研究[J].江苏农业学报ꎬ2009ꎬ25(1):68-72.[12]李峰ꎬ谢明ꎬ万方浩ꎬ等.莱氏野村菌研究及应用进展[C]//第二届全国绿色环保农药新技术㊁新产品交流会论文集ꎬ厦门:中国植物保护协会ꎬ2003:77-84.[13]蒲哲龙ꎬ李增智.昆虫真菌学[M].合肥:安徽技术出版社ꎬ1996.[14]徐玲ꎬ艾薇ꎬ陈自宏.三种虫生真菌组合的协同生防效果[J].保山学院学报ꎬ2020ꎬ39(5):12-15.[15]代鹏ꎬ宋妍ꎬ许天委ꎬ等.绿僵菌的研究进展[J].热带农业科学ꎬ2005(2):73-77.[16]徐超民ꎬ李霜ꎬ孟祥晨ꎬ等.不同浓度增效剂对金龟子绿僵菌㊁黄绿绿僵菌和球孢白僵菌产孢的影响[J].中国生物防治学报ꎬ2020ꎬ36(5):737-743.[17]姜虹ꎬ闫凤超ꎬ于文清.微生物农药助剂研究进展[J].现代化农业ꎬ2020(1):2-6.[18]谢婷ꎬ景亮亮ꎬ张晓霞ꎬ等.八种常用农药与蜡蚧轮枝菌JMC-01的相容性及对烟粉虱若虫的毒力测定[J].应用昆虫学报ꎬ2020ꎬ57(3):682-689.[19]姜灵ꎬ洪波ꎬ王新谱ꎬ等.常用杀虫剂与球孢白僵菌的相容性及对温室白粉虱的协同防效[J].植物保护ꎬ2018ꎬ44(1):199-204.[20]秦长生ꎬ徐金柱ꎬ谢鹏辉ꎬ等.绿僵菌相容性杀虫剂筛选及混用防治椰心叶甲[J].华南农业大学学报ꎬ2008(2):44-46.[21]宋漳.化学杀虫剂对绿僵菌的影响及菌药混用研究[J].福建林学院学报ꎬ2001(4):308-311.[22]王定锋ꎬ陈焰冠ꎬ李慧玲ꎬ等.叶蝉球孢白僵菌Bb305与8种化学农药的相容性研究[J].茶叶学报ꎬ2017ꎬ58(2):46-50.[23]曹伟平ꎬ甄伟ꎬ陈丹ꎬ等.生长调节剂对球孢白僵菌产孢和分生孢子性能的影响[J].中国生物防治学报ꎬ2022ꎬ38(3):555-564.[24]谢婷ꎬ姜灵ꎬ洪波ꎬ等.球孢白僵菌与苦参碱混配对烟粉虱的毒力与田间防效[J].西北农业学报ꎬ2019ꎬ28(5):830-836.[25]王定锋ꎬ李良德ꎬ李慧玲ꎬ等.金龟子绿僵菌与4种植物源农药的相容性研究[J].茶叶学报ꎬ2016ꎬ57(3):153-156. [26]李敏ꎬ谢明ꎬ苏冬辉ꎬ等.四种常用化学杀虫剂与三种虫生真菌的相容性[J].北方园艺ꎬ2018(19):42-47. [27]柴军发ꎬ谢婷ꎬ景亮亮ꎬ等.球孢白僵菌与8种杀虫剂的相容性及其对烟粉虱的室内联合毒力[J].西北农业学报ꎬ2021ꎬ30(4):618-624.[28]杨华ꎬ赵丹阳ꎬ秦长生.绿僵菌与3种杀虫剂混配对樟巢螟的协同作用[J].环境昆虫学报ꎬ2020ꎬ42(6):1494-1501. [29]黄姗ꎬ孔丽娜ꎬ刘加顺.莱氏绿僵菌研究进展[J].产业与科技论坛ꎬ2018ꎬ17(10):77-78.651山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀。