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第十二单元生物技术与工程课前自主预习案2 微生物的培养技术及应用素能目标★考向导航基础梳理——系统化知识点一微生物的基本培养技术1．培养基2．无菌技术3．微生物的纯培养（1）概念：由繁殖所获得的微生物群体是纯培养物，获得的过程就是纯培养。
（2）过程：包括、灭菌、接种、分离和培养等步骤。
（3）常用方法：法和法。
（4）实例——酵母菌的纯培养知识点二微生物的选择培养和计数一、微生物的选择培养1．实验室中微生物筛选的原理人为提供有利于生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时其他微生物的生长。
2．稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释后，将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。
（1）系列稀释操作移液管需要经过灭菌。
操作时，试管口和移液管应离火焰1～2 cm处。
操作过程如下：（2）涂布平板操作）培养：待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板，放入中培养1～2 d。
二、微生物的数量测定1．稀释涂布平板法（1）计数原理：当样品的时，培养基表面生长的一个，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的，就能推测出样品中大约含有多少活菌。
（2）计数标准：为了保证结果准确，一般选择菌落数为的平板进行计数。
（3）计数方法：通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为、适于计数的平板。
在下，应至少对3个平板进行重复计数，然后求出。
（4）当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，统计结果一般用来表示。
2．显微镜直接计数法（1）计数原理：利用特定的或，在显微镜下观察、计数，然后再计算一定体积的样品中微生物的数量。
（2）优点：是一种常用的、的测定微生物数量的方法。
（3）缺点：统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。
三、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数基能过关——问题化一、判一判（判断正误并找到课本原话）（一）微生物的基本培养技术1．微生物在琼脂固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落。
医学实验室中的基础技术医学实验室是医疗行业中的重要组成部分。
从小药店到大型医院，都离不开医学实验室。
医学实验室是医生诊断疾病并给出治疗方案的关键所在。
医学实验室涉及的基础技术也很多，下面将分别介绍常见的实验室技术。
一、培养细菌培养细菌是医学实验室中最基本的实验室技术之一。
这项技术可帮助医生确定患者是否感染了细菌，从而选择适当的抗生素。
细菌培养需要用到培养基，不同种类的细菌需要不同种类的培养基。
培养基通常可以分为以下几类：富含营养物质的培养基、缺乏营养物质的培养基和选择性培养基。
富含营养物质的培养基是最常用的培养基之一。
我们可以使用这种培养基来培养一般细菌，如大肠杆菌和链球菌。
缺乏营养物质的培养基通常用于分离和培养特定类型的细菌，如肠杆菌科的沙门氏菌。
选择性培养基是为了分离或识别某些特定类型的细菌而制备的，如选择性培养基可用于筛查霍乱、鼠疫等疾病。
二、酶联免疫吸附法 (ELISA)酶联免疫吸附法是一种常用的试剂盒化学技术。
ELISA 可以用于测定抗原和抗体浓度。
ELISA 包括以下步骤：1、将特定抗体覆盖在微孔板上2、加入样品3、加入二抗（标记有酶的抗体）4、加入底物反应5、测定底物的吸收值通过这一技术，我们可以检测一些传染性疾病，如乙肝病毒、艾滋病病毒等。
三、聚合酶链式反应 (PCR)PCR 是一种针对 DNA 片段的放大技术。
PCR 可以用于检测某些基因的变异，从而帮助医生确定诊断。
PCR 的基本步骤包括以下几个步骤： DNA 片段的变性、引物结合、扩增和回收。
PCR 的应用范围非常广泛，如检测乙型肝炎、艾滋病、肺结核等。
四、血细胞计数 (CBC)血细胞计数是医生可以使用的最常见的实验室测试之一。
CBC 可以检测血样中的红细胞、白细胞和血小板数量以及其他诸如红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白浓度等指标。
CBC 可以用于检测和诊断贫血和其他血液病，如白血病和淋巴瘤。
五、组织切片及染色组织切片及染色技术可用于确定是否存在癌变，例如肺癌、前列腺癌和子宫颈癌等疾病。
微生物培养及实验基本操作技术一、培养基配制培养基是指人工配制的、适合于微生物生长繁殖或累积代谢产物所需的各种营养物的混合基质。
配制培养基是进行微生物检验工作的基础,甚至是任何与微生物有关工作的基础。
注意事項–灭菌锅的使用①加水盖过底部铁板—②放入东西—③关门—④調整溫度時間—⑤关紧泄压阀灭菌結束後，等压力降回零時才可打開門進入灭菌锅之物品，蓋子不可關太緊或太鬆拿滅菌後物品請記得帶耐熱手套培养基中的主要成分及其作用：营养物质：N源、C源、无机盐、生长因子、水常用的N源：蛋白胨、牛肉膏、肉浸汁、酵母膏常用的C源：糖、醇类物质（单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖；多糖：淀粉、纤维素、菊糖；醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油）水：用蒸馏水，不能用自来水凝固剂：琼脂、明胶、血清等抑制剂：1、作用：鉴定细菌、抑制杂菌的生长繁殖，增加待检菌的检出率2、种类：盐类：氯化钠、氯化锂、氰化钾、亚碲酸钾（钠）、亚硒酸钠等染色剂类：煌绿、蔷薇酸、结晶紫、孔雀绿、孟加拉红、玫瑰红胆盐类：猪（牛、羊）胆盐、混合胆盐、三号胆盐、去氧胆酸盐、胆石酸盐抗菌素：青霉素、链霉素、杆菌肽、多粘菌素指示剂1、作用：用于指示鉴别细菌可否利用分解糖醇类物质和含氮化合物，产酸产碱的能力。
2、常用的指示剂：酚红、溴甲酚紫、中性红、中国蓝、甲基红、复红、伊红、美蓝、孔雀绿等。
培养基的类型：●根据培养基的物理状态来区分：1、液体培养基：主要用于增菌培养、鉴别性培养2、固体培养基：用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定3、半固体培养基：观察微生物的动力，有时用来保藏菌种4、脱水(商品)培荞基：脱水培养基也称为商品培养基、预制干燥培养基。
●将各种营养成分按比例配制完全,制成脱水的干粉状,装瓶出售;使用时只需按比例加人定量的水溶化、灭菌便可。
●根据培养基的用途来区分：➢增殖培养基选择培养基鉴别培养基1、增殖培养基：在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。
微生物的基本培养技术[高中生物] 1.概述培养基的成分和配制方法。
2.区分消毒和灭菌，掌握不同物品的灭菌方法。
3.概述微生物纯培养的基本操作要求。
一、培养基的配制1．培养基的概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
2．作用：用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。
3．培养基种类Error!特别提醒 (1)固体培养基中的琼脂仅作为凝固剂，不能为微生物生长提供能量和碳源。
(2)病毒为非细胞结构生物，只能在活细胞中营寄生生活，目前不能利用人工培养基来培养。
4．培养基的营养构成(1)主要营养物质：水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。
(2)某种常见的细菌培养基——牛肉膏蛋白胨培养基的营养构成组分含量提供的主要营养牛肉膏 5 g碳源、磷酸盐和维生素等蛋白胨10 g氮源和维生素等NaCl 5 g无机盐H2O定容至1 000 mL水(3)还需满足微生物对pH、特殊营养物质以及O2的需求。
例如：在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，一般需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
判断正误(1)用于发酵的微生物主要指细菌和真菌( )(2)培养基中加入琼脂的目的是提供碳源( )(3)所有微生物在培养时，培养基中都需加入氮源( )(4)培养不同微生物的培养基成分完全一样( )答案 (1)√ (2)× (3)× (4)×探讨点 概述培养基的种类和营养构成资料一：配制培养酵母菌的培养基：称取去皮的马铃薯200 g，切成小块，加水1 000 mL，加热煮沸至马铃薯软烂，用纱布过滤。
向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替)、15～20 g琼脂，用蒸馏水定容至1 000 mL。
资料二：100 g马铃薯中含有80 g水、2 g蛋白质、16 g碳水化合物，还有维生素、无机盐等。
第二节细菌培养检测技术节概述细菌的培养技术是微生物实验中基本技术之一。
大多数细菌均可用人工方法培养，只有将细菌培养出来才能对它进行研究和鉴定知识点导航一.培养基的种类培养基（culture medium）是细菌生长繁殖所需要的各种营养物质的人工制品。
适宜的培养基能使细菌在体外迅速生长繁殖，便于对细菌进行分离和鉴别。
可分为基础培养基、营养培养基、选择培养基、鉴别培养基、厌氧菌用培养基和特殊培养基。
（一）基础培养基只含有细菌生长所需的最基本营养成分，应用最广泛，为制备多种培养基的基础，常见的有肉汤培养基、琼脂培养基。
（二）营养培养基在基础培养基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有机物，可供营养要求较高的细菌生长需要或增菌用。
如结核分枝杆菌培养基中添加鸡蛋、马铃薯、甘油等。
（三）选择培养基利用不同种类细菌对化学物质的敏感性不同而制成，使分离菌大量繁殖而抑制其它细菌生长的培养基。
培养基中含有的抑制剂能抑制非目的菌生长或使其生长不佳，有利于目的菌的检出和识别。
选择培养基多为固体平板，用于从标本中分离某些特定的细菌。
（四）鉴别培养基培养基中加有某些特定成分，如糖、醇类和指示剂等，用于检查细菌的各种生化反应，以资鉴别和鉴定细菌。
（五）厌氧菌用培养基专性厌氧菌须在无氧条件下才能生长，故需在培养基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸钠等还原剂，降低培养基中氧化还原电势，并应与外界空气隔绝，使培养基本身为无氧的环境。
（六）特殊培养基为某些需要在特殊条件下才能生长的细菌培养之用。
如高渗盐增菌培养基、高渗糖增菌培养基、改良Kagan氏培养基等。
二.培养基的制备制备一般培养基的主要过程基本相似，包括调配、溶化、调整pH、过滤、分装、灭菌及检定和保存。
三.细菌检验室的注意事项及无菌技术细菌培养必须随时为防止污染和病原菌的扩散而进行操作，即无菌操作。
细菌检验室的注意事项如下：1．细菌的培养应在接种罩或无菌室内进行。
有条件的实验室可在超净工作台内进行。
