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章末综合检测(四)[学生用书P97(单独成册)](时间：90分钟满分：100分)一、选择题(本题包括16小题，每小题3分，共48分)1．细胞破碎后，各种蛋白质就会释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行抽提。
下列关于蛋白质抽提的措施中，不正确的是( )A．酸性蛋白质可用偏碱性溶液抽提B．水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)抽提C．脂溶性蛋白质可用有机溶剂抽提D．碱性蛋白质可用强酸性溶液抽提解析：选D。
抽提蛋白质的基本原理是根据蛋白质的物理性质，加入不同的试剂后，使蛋白质溶于试剂中而抽提蛋白质。
强酸、强碱都会使蛋白质变性而沉淀。
2．在利用凝胶电泳法分离蛋白质时，一定要加入缓冲溶液，其作用主要是( ) A．使酶的活性最高B．使蛋白质的活性最高C．保持蛋白质所带的原有电荷D．使蛋白质带上电荷解析：选C。
蛋白质具有两性，在一定pH下，蛋白质分子的某些基团会带上正电荷或负电荷。
在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。
电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子量的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
因此，加缓冲溶液的目的是维持蛋白质所带的电荷不发生改变而不是使蛋白质带上电荷。
3．下列有关提取和分离血红蛋白的实验的叙述，错误的是( )A．该实验的材料必须选用鸡血B．通过透析法可以去除样品中相对分子质量较小的杂质，此为样品的粗提取C．凝胶色谱法是利用蛋白质的相对分子质量的大小分离蛋白质D．电泳法是利用各种分子带电性质的差异及分子的大小和形状不同进行分离解析：选A。
该实验的材料不能选用鸡血，而应用哺乳动物成熟的红细胞，因为后者没有细胞核和各种细胞器，有利于得到较纯净的血红蛋白。
4．萃取法利用的是植物芳香油的哪个特点( )A．化学性质稳定B．难溶于水C．易溶于水D．易溶于有机溶剂解析：选D。
植物芳香油的提取中，不适于用水蒸气蒸馏的原料，可以考虑使用萃取法。
第四章生物化学与分子生物学技术实践高二生物选修一第四章总复习导学案使用时间：编制人：【学习目标】知识总结：蛋白质的提取和纯化，DNA的粗提取和鉴定，PCR技术原理和过程。
应用能力。
【本章知识归纳】提取DNA的方法：实验材料的选取：实验设计破碎细胞，获取含DNA的滤液去除滤液中的杂质：DNA的粗提取 DNA的析出与鉴定：与鉴定以血液为材料要防止血液凝固：DNA和蛋白质技术操作提示加入洗涤剂后，动作要轻缓；加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓二苯胺试剂要现配现用结果分析与评价：PCR原理：基础知识 PCR的反应过程：多聚酶链式反实验操作应扩增DNA 操作提示：片段结果分析与评价：凝胶色谱法：血红蛋白的提基础知识缓冲溶液：取和分离电泳：样品处理：实验操作凝胶色谱操作：SDS—聚丙烯酰凝胶电泳：红细胞的洗涤：实验操作色谱主填料的处理：凝胶色谱柱的装填：蛋白质的分离：结果分析与评价：课前动手一试:1．下列关于基因的叙述中，正确的是 ( )A．每一个DNA片段都是一个基因 B．每一个基因都控制着一定的性状 C．有多少基因就控制着多少遗传性状 D．基因控制的性状都能在后代表现出来2．蛋白质工程是新崛起的一项生物工程，又称第二代基因工程。
下图示意蛋白质工程流程，图中 A、B在遗传学上依次表示 ( )A．转录和翻译 B．翻译和转录 C．复制和转录D．传递和表达3．在基因工程中，把选出的目的基因(共1 000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸460个)，放人DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放人胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是 ( ) A．540个 B．7 560个 C．8 100个 D．17 280个课堂检测：1．具有x个碱基对的一个DNA分子片段含有m个腺嘌呤，该片段利用PCR技术完成了第n个循环后需要多少个游离的胞嘧啶脱氧核苷酸？（）A. 2n(x-m)B. 2n-1(x-m )C.2n-1(x/2-m)D.2n(x/2-m)2. 在DNA复制过程中，保证复制准确无误进行的关键步骤是（）A. 游离核苷酸与母链碱基互补配对B. 破坏氢键并使DNA双链分开C.配对的游离核苷酸连接成子链D.子链与模板母链盘绕成双螺旋结构3. 哺乳动物和人的成熟的红细胞中的（）与氧气的运输有关。
第二节分子生物学技术[随堂检测] [学生用书P59]知识点一多聚酶链式反应程序1. 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
PCR过程一般经历30多次下述循环：90～95 ℃下使模板DNA变性、解链→55～60 ℃下退火(引物与DNA模板链结合)→70～75 ℃下引物链延伸。
下列有关PCR过程的叙述中，不正确的是( ) A．变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键B．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸C．退火过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成D．PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高解析：选B。
变性过程的目的是解链，与解旋酶的作用相同，所以变性过程中被切断的是DNA分子内碱基对之间的氢键，A项正确；PCR技术是在较高温度条件下进行的，该过程需要热稳定Taq DNA聚合酶，且由于该过程的产物是DNA，所以需要的原料是四种游离的脱氧核苷酸，故B项错误；退火过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成的，C项正确；PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高，D项正确。
2．下图是PCR反应过程中哪次循环的产物( )A．第一次循环B．第二次循环C．第三次循环D．第四次循环解析：选A。
在PCR反应中，以引物为标记，第一次循环时加入的DNA为模板，两条DNA 链可分别由引物Ⅰ和引物Ⅱ与其结合并在DNA聚合酶的作用下延伸，所以形成的每个子代DNA中只有一种引物。
知识点二目的DNA片段的体外扩增与鉴定3．下列关于DNA双链的叙述，错误的是( )A．通常将DNA的羟基末端称为5′端，而磷酸基团末端称为3′端B．通常将DNA的羟基末端称为3′端，而磷酸基团末端称为5′端C．通常DNA只能从3′端延伸DNA链D．通常DNA不能从5′端延伸DNA链解析：选A。
通常将DNA的羟基末端称为3′端，磷酸基团末端称为5′端。
4．下列关于操作过程的叙述中，错误的是( )A．PCR反应中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌B．PCR缓冲液和酶应分装成小份，在－20 ℃储存C．PCR所用缓冲液和酶从冰箱拿出之后，迅速融化D．在微量离心管中添加反应成分时，每吸取一种试剂后，移液器上的吸液枪头都必须更换解析：选C。
第1课时蛋白质的分离与提取[随堂检测] [学生用书P52]知识点一蛋白质分离技术1．凝胶色谱法分离蛋白质依据的原理是( )A．根据蛋白质分子与凝胶的亲和力的大小B．根据蛋白质相对分子质量的大小C．根据蛋白质所带电荷的多少D．根据蛋白质溶解度的大小解析：选B。
凝胶色谱法是根据蛋白质相对分子质量的大小分离蛋白质的一种方法。
2．下列有关透析的叙述，错误的是( )A．用于透析的薄膜要具有选择透过性B．透析膜是一种半透膜C．透析能使小分子自由出入，而将大分子保留在袋内D．透析膜可用于更换样品的缓冲液解析：选A。
透析膜能使小分子自由出入，大分子不能通过，具有半透性，但不具有选择性，A项错。
透析过程中小分子可自由出入，因此，可用于更换样品的缓冲液，B、C、D 项都正确。
3．电泳实现样品中各种蛋白质分子的分离是利用了( )A．各种分子带电性质的差异B．分子本身的大小不同C．分子形状的不同D．以上都正确解析：选D。
电泳是利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。
知识点二电泳法与凝胶色谱法分离蛋白质的过程4．如图为凝胶色谱法分离蛋白质示意图和SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳示意图。
据图分析不正确的是( )A．在装填图甲中凝胶色谱柱时一旦发现柱内有气泡存在，就需要重装B．图甲中大分子蛋白质因阻力大而移动慢，所以最后从层析柱中流出来C．图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小D．已知凝胶中的SDS带负电，则应在电泳槽的①处接电源负极，②处接电源正极解析：选B。
在装填凝胶色谱柱时，凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在，因为气泡会影响蛋白质洗脱的次序，A正确；图甲中大分子蛋白质因不容易进入凝胶内部的通道，路程短，移动速度快，所以最先从层析柱中流出来，B错误；SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳的迁移速率完全取决于分子大小，因此图乙中凝胶中加入的SDS可以使蛋白质迁移速率完全取决于分子大小，C正确；凝胶中的SDS带负电，所以电泳槽的①处接电源负极，②处接电源正极，D正确。
2019-2020年高中《生物技术实践》生物第四章生物化学与分子生物学技术实践第二节分子生物学技术苏教版拔高训练第一百篇第1题【单选题】PCR反应最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生．防止污染的办法不包括( )A、将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行B、吸样枪吸样要慢，吸样时尽量一次性完成，枪头小套、小离心管应一次性使用，以免交叉污染C、所有的PCR试剂都应放置于大瓶分装，以减少重复加样次数，避免污染机会D、PCR试剂、PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存，不应放于同一冰盒或同一冰箱【答案】：【解析】：第2题【单选题】DNA的羟基（－OH）末端称为( )A、3′端B、5′端C、1′端D、2′端【答案】：【解析】：第3题【单选题】在“菊花的组织培养”、“多聚酶链式反应扩增DNA片段”等实验操作中均需注意的问题之一是：注意保持材料用具等的无菌．这里所说的“菌”实指( )A、大肠杆菌B、细菌C、细菌和真菌D、全部微生物【答案】：【解析】：第4题【单选题】有关PCR技术的说法，不正确的是( )A、PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术B、PCR技术的原理是DNA双链复制C、利用PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列D、PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA【答案】：【解析】：第5题【单选题】下列属于PCR技术的条件的是( )①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦限制酶A、①②③⑤B、①②③⑥C、①②③⑤⑦D、①②④⑤⑦【答案】：【解析】：第6题【单选题】PCR利用了DNA热变性的原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器,对PCR过程中“温度的控制”的说法中错误的是( )A、酶促反应需要高的温度,是为了确保模板是单链B、延伸的温度必须大于退火温度,而小于变性温度C、DNA聚合酶不具热变性,要用耐高温的聚合酶D、DNA解旋酶不具热变性,为了确保模板是单链【答案】：【解析】：第7题【单选题】PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，下列有关PCR过程的叙述，不正确的是( )A、变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键B、复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成C、延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP，四种核糖核苷酸D、PCR与细胞内DNA复制相比所需要的酶的最适温度较高【答案】：【解析】：第8题【单选题】关于DNA的实验，叙述正确的是( )A、用兔的成熟红细胞可提取DNAB、PCR的每个循环一般依次经过变性﹣延伸﹣复性三步C、DNA溶液与二苯胺试剂混合，沸水浴后生成蓝色产物D、用甲基绿对人的口腔上皮细胞染色，细胞核呈绿色，细胞质呈红色【答案】：【解析】：第9题【单选题】下列有关PCR技术的说法不正确的是A、PCR技术是在细胞内完成的B、PCR技术是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术C、PCR技术的原理与DNA复制的原理相同D、PCR技术的前提是有一段已知的目的基因的核苷酸序列【答案】：【解析】：第10题【单选题】多聚酶链式反应（PCR）是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。
第1课时 蛋白质的分离与提取学习导航明目标、知重点难点掌握电泳法分离大分子的原理。
(重点) 运用常用的方法提取和分离蛋白质。
(重、难点)[学生用书P48]一、阅读教材P 71～72分析蛋白质的分离与纯化 1．生物细胞中的蛋白质提取(1)在提取蛋白质时，可以采用研磨与超声波结合的方法将生物组织或细胞完全破碎，使蛋白质从细胞中释放出来，并使其溶解在适当的抽提液中。
(2)抽提液的选择需要根据蛋白质的特性而定，一般酸性蛋白质用偏碱性溶液抽提，碱性蛋白质用偏酸性溶液抽提，脂蛋白等则可用有机溶剂抽提。
2．蛋白质的分离方法(1)离心沉降法：通过控制离心速度，使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层。
(2)薄膜透析法：利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，使蛋白质与其他小分子化合物分离的方法。
(3)凝胶色谱法①概念：根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法。
②原理a ．凝胶⎩⎪⎨⎪⎧形态：微小的多孔球体组成：大多由多糖类化合物构成结构：内部具有很细微的多孔网状结构b ．分离的过程进入凝胶颗粒内 部的难易程度路程移动速度小分子 蛋白质 容易较长 较慢大分子 蛋白质无法进入 较短 较快二、阅读教材P73～77完成血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及凝胶色谱法分离血红蛋白的操作1．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳配制试剂→准备器材→架滤纸桥→浸泡薄膜→细心点样→平悬薄膜→实施电泳→染色→漂洗→脱色。
2．凝胶色谱法分离血红蛋白样品处理→血红蛋白的释放、分离和透析→凝胶的制备→色谱柱的装填→样品的加入→洗脱与收集。
判一判(1)酸性蛋白质用酸性溶液抽提，水溶性蛋白质用透析液抽提，脂溶性蛋白质用稀碱性溶液抽提。
(×)(2)电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其电性相反的电极移动的过程。
(√)(3)电泳时泳动速度取决于带电颗粒的大小、形状、所带静电荷多少。
(√)(4)离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的原理是一样的。
(×)(5)凝胶色谱法是根据蛋白质分子量的大小而对其进行有效分离的方法。
(√)(6)醋酸纤维薄膜电泳是采用滤纸为支持物的电泳方法。
(×)蛋白质分离技术[学生用书P49]欲研究某种蛋白质的结构、性质和功能，需将这种蛋白质从组织细胞中分离、纯化出来。
结合教材P71第三段～P74内容完成以下探究。
探究1 完善下面示意图，理解离心沉降法分离蛋白质(1)原理：在离心力的作用下，分子大小、密度不同的分子沉降速度不同，从而被分离。
(2)目的：使分子大小、密度不同的不同种类的蛋白质发生沉降分层，彼此分离。
探究2 仔细观察下面示意图，分析薄膜透析法分离蛋白质(1)原理：蛋白质分子不能透过半透膜。
(2)目的：去除小分子化合物杂质，如无机盐、单糖、二糖以及氨基酸等。
(3)常用的半透膜：肠衣、玻璃纸等。
(4)步骤：将待纯化的蛋白质溶液装入透析袋内，再把透析袋放入透析液中即可。
探究3 完善下面示意图，分析凝胶色谱法分离蛋白质(1)大分子蛋白质不能进入凝胶内部而沿凝胶颗粒间的空隙移动，洗脱路程较短，移动速度较快，最先流出柱外。
(2)小分子蛋白质可以进入凝胶颗粒内部的多孔网状结构，洗脱路程较长，移动速度缓慢，以致需要较长时间才能流出柱外。
1．蛋白质的分离与提纯技术是蛋白质研究的重要技术，下列有关叙述不正确的是( )A．根据蛋白质分子不能通过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离B．根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳分离蛋白质C．根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质D．根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质解析：选A。
蛋白质分子不能通过半透膜，但溶液中的小分子物质则可以透过半透膜，因此可以将蛋白质和溶液中的小分子物质分离，A项错误；电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。
根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小，可通过电泳使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现蛋白质分子的分离，B项正确；凝胶色谱法的原理是：分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快，而分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢，所以可以根据蛋白质相对分子质量的大小，通过凝胶色谱法使大分子的蛋白质先洗脱出来，小分子的蛋白质后洗脱出来，从而实现蛋白质分子的分离，C项正确；根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法使不同密度的蛋白质分子位于不同层次的离心液中，从而实现蛋白质的分离，D项正确。
2．下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是( )A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B．采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷电性相同的电极方向移动解析：选D。
蛋白质是生物大分子，不能通过半透膜，而其他小分子可以通过半透膜，可以利用半透膜进行分离得到蛋白质，A、B正确。
分子大小、密度不同的蛋白质其离心速率不同，通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离，C正确。
蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷电性相反的电极方向移动，D错。
血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳[学生用书P50]结合教材，完善下表，理解血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳。
实验步骤操作方法配制试剂↓配制巴比妥缓冲液、染色液、漂洗液、透明液准备器材↓醋酸纤维薄膜、常压电泳仪、点样器等架滤纸桥↓取双层滤纸条，一端与支架前沿对齐，另一端浸入电泳槽的缓冲液中，待滤纸条湿润后，驱除气泡，使滤纸紧贴于支架上浸泡薄膜↓用镊子夹取醋酸纤维薄膜，识别出光泽面，并在光泽面的一角用笔做上记号，然后放在巴比妥缓冲液中浸泡20 min细心点样↓取出薄膜，吸去多余液体，平铺在玻璃板上，有记号的一面朝下，点样时将盖玻片在血清中蘸一下，在薄膜一端 2_cm处轻轻按下，点上细条状的血清样品，随即提起平悬薄膜↓将点样端平贴在电泳槽负极支架的滤纸桥上，有记号的一面朝上，另一端平贴于正极，呈绷直状态实施电泳↓盖上电泳槽盖，在醋酸纤维薄膜平衡约10 min后接通电源，电泳 60～90 min染色↓取下薄膜，放入染色液中浸泡5～10 min漂洗↓取出薄膜，在漂洗液中漂洗数次，直至蛋白质区底色脱净为止脱色用滤纸压平并吸干薄膜后，再浸入透明液中约5 min，取出后平贴于玻璃板上，待完全干燥后便形成透明薄膜图谱1．电泳的泳动规律带电颗粒直径越小、越接近于球形，所带净电荷越多，则在电场中的泳动速度越快；反之，则越慢。
2．关于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的几点说明(1)薄膜的浸润与选膜是电泳成败的关键之一。
(2)点样时，应将薄膜表面多余的缓冲液用滤纸吸去，吸水量以不干不湿为宜。
(3)点样时，动作要轻、稳，用力不能太大，以免损坏膜片或印出凹陷影响电泳区带分离效果。
(4)点样应点在薄膜的毛面上，点样量要适中，不宜过多或过少。
(5)电泳时应将薄膜的点样端置于电泳槽的负极端，且点样面向下。
(6)应控制染色时间。
时间长，薄膜底色不易脱去；时间太短，着色不易区分，或造成条带染色不均匀，必要时可进行复染。
1．仔细观察下面血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳图谱，所带负电荷少的球蛋白是( )A．α1球蛋白B．α2球蛋白C．β球蛋白D．γ球蛋白解析：选D。
对于几种球蛋白来说直径相差不大，引起泳动速度的差异主要来自于所带电荷多少，由图可知球蛋白由右向左泳动，因右侧为负极，且γ球蛋白距点样处最近，所以γ球蛋白所带负电荷最少。
2．下列关于血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳的说法中，不正确的是( )A．架滤纸桥时，待滤纸条湿润后，要驱除气泡，以便使滤纸紧贴于支架上B．浸泡薄膜时要识别出光泽面，并做记号C．平悬薄膜时，有记号的一面朝上D．从染色液中取出薄膜后，用滤纸条压平并吸干，再浸入透明液中脱色解析：选D。
薄膜染色后要先放入漂洗液中漂洗直至蛋白质区底色脱净为止，然后才用透明液脱色。
凝胶色谱法分离血红蛋白[学生用书P50]凝胶色谱法是根据蛋白质分子的大小，对其进行有效分离的方法。
结合教材P75第三段～P77内容完成下列过程(以哺乳动物红细胞为例)，学会凝胶色谱法分离血红蛋白。
1．样品处理：采集血样→低速短时间离心→取红细胞，倒入烧杯＋5倍体积生理盐水搅拌→低速离心→重复3次→洗净的红细胞。
2．血红蛋白的释放、分离和透析(1)血红蛋白的释放：红细胞＋蒸馏水＋甲苯搅拌，红细胞破裂而释放出血红蛋白。
(2)分离血红蛋白溶液：将混合液以2_000 r/min的速度离心10 min，试管中形成4层，取自上而下的第3层红色透明液体(血红蛋白水溶液)。
(3)透析：将盛有1 mL血红蛋白溶液的透析袋放入盛有物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液中透析12 h。
3．凝胶的制备：将交联葡聚糖凝胶用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液。
4．色谱柱的装填固定：将层析柱垂直固定在支架上↓装填：将凝胶悬浮液一次性缓慢倒入色谱柱内↓洗涤平衡：用20 mmol/L的磷酸缓冲液(pH＝7.0)充分洗涤平衡凝胶12 h，使凝胶装填紧密5．样品的加入(1)加样示意图(2)打开色谱柱下端的流出口，让凝胶面上的缓冲液缓慢下降到与凝胶面刚好平行，关闭出口。
用滴管小心吸取1 mL样品溶液沿柱壁轻轻地加入到色谱柱顶端，不能破坏凝胶面。
然后，打开流出口，使样品液逐渐渗入凝胶。
6．洗脱与收集(1)洗脱：洗脱液流速为每分钟 1_mL。
(2)收集：待红色的蛋白质接近色谱柱出口时，用试管收集洗脱液，每 5 mL收集一管，连续收集。
(1)凝胶色谱制备中严禁出现气泡，为什么？提示：气泡会打乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。
(2)用SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳对蛋白质的纯度鉴定时，为何仅仅取决于分子量的大小？提示：SDS可使蛋白质分子中的二硫键还原，十二烷基硫酸根所带的负电荷使各种蛋白质—SDS复合物都带上大大超过了蛋白质分子原有的负电荷量，所以不受蛋白质原有电荷的影响。
SDS与蛋白质的结合引起蛋白质构象改变，使不同蛋白质的SDS复合物的短轴长度都一样，所以不受蛋白质形状的影响。
故仅仅取决于蛋白质分子量的大小。
蛋白质分子在凝胶中的运动情况分析相对分子质量大相对分子质量小直径大小大于凝胶颗粒空隙直径小于凝胶颗粒空隙直径运动方式垂直向下运动不规则的扩散运动运动速度较快较慢运动路程较短较长洗脱次序先从凝胶柱中洗脱出来后从凝胶柱中洗脱出来突破1 血红蛋白提取和分离的过程及原理1．下列关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述，正确的是( )A．为了防止血液凝固，应在采血器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠B．红细胞洗涤使用5倍体积的蒸馏水，直到离心后上清液不呈现黄色为止C．利用0.9%的NaCl对血红蛋白溶液透析12小时，可以去除小分子杂质D．在凝胶柱中加入蛋白样品后即可连接缓冲溶液洗脱瓶进行洗脱和收集样品解析：选A。
