高效液相色谱法测定桔霉素

红曲霉桔霉素的检测和控制方法研究进展李培睿，张晓伟，曹依曼（许昌学院食品与药学院，河南省食品安全生物标识快检技术重点实验室，许昌 461000）摘要：红曲霉（Monascus）在我国已有一千年多的应用历史，其代谢产物红曲色素具有安全性高、着色力强、营养丰富的特点。

但由于同时产生的桔霉素对人体健康所造成危害毒性的问题，使红曲产品的应用得到了限制。

本文就红曲霉次生代谢产物桔霉素的检测和控制方法展开综述，比较了一些国家红曲相关产品中桔霉素的限量标准；介绍了国内外常用的桔霉素的检测方法及其特点；并对控制桔霉素的传统方法和生物方法进行了综述，以期为桔霉素的相关研究提供参考，促进红曲产业的更好发展。

关键词：红曲霉；桔霉素；检测方法；控制方法中图分类号：TS207.7/TS202.1 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2021）03-0100-06 doi：10.19804/j.issn1006-2513.2021.03.017Progress on detection and control of Monascus citrininLI Pei-rui，ZHANG Xiao-wei，CAO Yi-man（Key Laboratory of Biomarker Based Rapid-detection Technology for Food Safety of Henan Province，College of Food and Pharmacy，Xuchang University，Xuchang 461000）Abstract：Monascus has been used for more than a thousand years in China. Its metabolite Monascus pigment is a safe，strong food colorant and also rich in nutrition. However，due to toxicity caused by citrinin，the application of red yeast products has been limited. This article reviewed detection and control methods of citrinin，compared usage limits of citrinin in Monascus products in some countries，and discussed commonly detection methods and characteristics of citrinin at home and abroad. The review provides references for citrinin research and promotes development of red yeast industry.Key words：Monascus；citrinin；detection method；control method桔霉素（Citrinin）是红曲霉发酵产生的一种次级代谢产物，是一种具有潜在危害的真菌毒素［1-2］。

食品添加剂红曲红中桔霉素检测方法的研究3柴秋儿,田亚琼,钟其顶,李惠宜(中国食品发酵工业研究院,北京,100027)摘　要　食品添加剂红曲红中桔霉素限量问题已成为近年来国内外研究热点。

目前,国内缺乏专门针对红曲红色素中桔霉素检测的标准方法。

文中在综合分析国内外相关桔霉素检测方法技术资料的基础上,通过试验,对粉状样品预处理条件进行了优化,研究了适合我国生产的红曲红色素中桔霉素检测方法。

粉状红曲红样品先用体积分数50%乙醇配制成一定浓度的试样液,试样液在优化的树脂分离条件下进行洗脱,然后采用高效液相色谱法测定洗脱液中的桔霉素含量。

实验结果显示:优化的树脂分离条件能较好地洗脱样品中的桔霉素;配有荧光检测器的高效液相色谱仪能较灵敏地检出桔霉素含量,方法检测限为012μg/L ,基质加标平均回收率为10515%,相对标准偏差(RSD )为212%。

关键词　红曲红色素,桔霉素,预处理,高效液相色谱　第一作者:硕士,工程师(李惠宜高级工程师为通讯作者)。

3国家科技支撑计划课题(2006BA K02A05)　收稿日期:2008-09-10,改回日期:2008-10-13 红曲红是红曲霉在生长代谢过程中产生的红色物质,为酮类衍生物[1]。

我国红曲红常规生产方式有2种,1种是以红曲米为原料,经萃取、浓缩、精制而得到;另1种是以大米、大豆等为主要原料的液体培养基,经红曲霉(M onascus anka N akaz aw a et sato )菌液体发酵培养、提取、浓缩、精制而成[2]。

市售产品以液体深层发酵方法为主。

红曲红作为一种安全性高的天然色素广泛用于各类食品中。

日本是红曲红色素生产和使用较多的国家,在肉制品发达的欧美等国也有使用红曲类产品替代部分其他着色剂的需求。

1995年,法国人Blanc 博士证实红曲霉菌产生真菌毒素———桔霉素(Cit rinin )[3],至此,红曲红的食用安全性受到挑战。

桔霉素是一种真菌毒素,具有肾毒性,毒性比较明显,可引起实验动物的肾脏肿大、尿量增多,肾小管扩张和上皮细胞变性坏死等症状[4]。

高产莫纳可林 K低产桔霉素红曲霉菌株的筛选和发酵条件初步优化蒋冬花;冯青青;任浩;章婷;郑婕施;韩肖飞【摘要】278 Monascus strains were isolated from Monascus resources collection of Monacus products around the country.A Monascus strain (No:M-22) which produces higher monacolin K and lower citrinin was screened from the isolated strains with HPLC determination .Based on their ITS sequence and morphology characteristics , and referred to classification searching table of Monascus, the strain M-22 was classifiedas Monascus purpureus.Through factors opti-mization of the fermentation temperature , initial pH, carbon source, nitrogen source, ratio of carbon and nitrogen (C/N) etc.the suitable conditions for monacolin K production in shaking flask fermentation were:temperature 26℃, in-itial pH 5.0, 160r/min, glycerol as carbon source , peptone as nitrogen source , with C/N ratio at 5:1.The mona-colin K production was significantly increased with the highest at 107.16 mg/mL.With the same optimized fermenta-tion conditions applied to amplified fermentation in 5 L fermentation tank.The highest production of monacolin K was at 189.83 mg/mL, and the content of citrinin was 32.53 μg/L and monascus pigment value of was 16.38 U/mL.%采集全国各地红曲霉制品中的红曲霉资源，经分离获278株红曲霉菌株。

以合成桔霉素的关键基因为靶标的PCR检测方法与UPLC法检测红曲中桔霉素含量的一致性分析朱丽萍;冯鎏;黄艳春;邵彦春【摘要】为了解菌株中桔霉素生物合成基因与其发酵产品红曲中桔霉素含量的相关性,本实验以25株不同来源的红曲菌为研究对象,以桔霉素合成的关键基因为标靶,设计6对引物进行PCR扩增;同时采用传统生产工艺制备红曲,采用免疫亲和柱纯化与UPLC结合的方法测定红曲中桔霉素的含量.对比PCR扩增结果与UPLC检测结果表明,PCR方法得到的结果与UPLC检测结果具有高度一致性,即PCR扩增桔霉素合成关键基因为阳性的菌株,其发酵制备的红曲中桔霉素含量超过了QB/T 2847-2007功能性红曲米(粉)的桔霉素限量标准50 μg/kg,而PCR结果中桔霉素合成关键基因为阴性的,桔霉素含量均低于仪器检测限15.92 μg/kg,远低于QB/T 2847-2007功能性红曲米(粉)的桔霉素限量标准.结果表明,本研究采用的PCR方法可以作为判断传统工艺条件下生产的红曲产品中桔霉素是否超标的依据,也为了解菌株分泌桔霉素的能力提供了基本信息.【期刊名称】《食品工业科技》【年(卷),期】2019(040)007【总页数】6页(P138-143)【关键词】红曲菌;红曲;桔霉素基因;PCR扩增;UPLC【作者】朱丽萍;冯鎏;黄艳春;邵彦春【作者单位】华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉430070;华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉430070;华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉430070;华中农业大学食品科学技术学院,湖北武汉430070【正文语种】中文【中图分类】TS201.6红曲是以大米为主要原料,经红曲菌(Monascus spp.,也称红曲霉)[1]发酵而成的固态产物。

红曲在我国及东南亚地区已有近2千年的应用历史,被广泛用作食品着色剂[2]、防腐剂[3]、发酵剂[4]和中药配伍[5]等,同时也是我国的传统出口产品。

高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定甘桔冰梅片中桔梗皂苷D含量彭善贵;文永盛【摘要】Objective To determine the kikyosaponin D content in Ganjie Bingmei Tablets by HPLC - evaporative light scattering detector (ELSD) method. Methods The analytical column was Diamonsil C18 column (200 mm × 4. 6 mm, 5 μm), with acetonitrile - water(26 : 74) as the mobile phase at the flow rate of 1. 0 mL/min. The Waters 2424 - ELSD was adopted for detection. The drift tube temperature was 85 ℃ and the gas flow rate was 2. 9 SLPM/min. Results The sample size of kikyosaponin D in range of 0.952-11.900 μg showed good linear relationship ( r = 0. 999 2). The average recovery rate was 98.82％, RSD = 1. 74％ ( n = 6). Conclusion This method for determining the kikyosaponin content is accurate, reliable and easy to operate.%目的建立测定甘桔冰梅片中桔梗皂苷D含量的高效液相色谱-蒸发光散射检测器法.方法色谱柱为Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水(26:74),流速为1.0 mL/min;Waters 2424型蒸发光散射检测器,漂移管温度为85℃,气体流速为2.9 SLPM/min.结果桔梗皂苷D进样量在0.952～11.900tμg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 2),平均回收率为98.82％,RSD=1.74％(n=6).结论所建立的方法测定甘桔冰梅片中桔梗皂苷D的含量准确、可靠、操作简便.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2012(021)019【总页数】2页(P28-29)【关键词】甘桔冰梅片;高效液相色谱-蒸发光散射检测器法;桔梗皂苷D【作者】彭善贵;文永盛【作者单位】四川省成都市食品药品检测中心,四川成都 610045;四川省成都市食品药品检测中心,四川成都 610045【正文语种】中文【中图分类】R284.1;R286.0甘桔冰梅片是由桔梗、甘草、冰片、薄荷等8味中药加工制成的片剂，现执行标准为WS－10871(ZD－0871)－2002。