脊髓损伤后大鼠甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的达及甲基强的松龙干预后的变化
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《2024年大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》范文
《大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》篇一一、引言大鼠模型是研究脊髓损伤（SCI）的理想对象，因其在生理学、神经科学以及病理学上与人类有很高的相似性。
随着研究的深入，许多研究人员已认识到，脊髓损伤后神经递质系统的变化对损伤的恢复和神经功能的重建具有重要影响。
其中，芳香族氨基酸脱羧酶（AADC）细胞和其产物5-羟色胺（5-HT）在脊髓损伤后的恢复过程中扮演着重要角色。
本文旨在探讨大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究。
二、研究方法本研究以大鼠为研究对象，利用人工手段诱导脊髓损伤模型。
首先通过影像学技术观察并记录脊髓损伤部位和程度。
之后在多个时间点（如伤后即刻、伤后1天、3天、7天、14天等）进行取样，并采用免疫组化技术对AADC细胞进行定位和计数，同时利用荧光定量PCR和ELISA技术测定5-HT的含量。
三、实验结果（一）AADC细胞的分布与变化在正常大鼠脊髓中，AADC细胞主要分布在灰质和白质交界处。
在脊髓损伤后，AADC细胞的分布和数量发生了显著变化。
在伤后即刻，AADC细胞的数量明显减少，随着时间推移，AADC细胞的数量逐渐恢复，但始终未能达到正常水平。
此外，AADC细胞的分布也发生了改变，部分AADC细胞向损伤区域迁移。
（二）5-HT的含量变化在脊髓损伤后，5-HT的含量发生了显著变化。
在伤后即刻，5-HT的含量显著降低，这可能是由于AADC细胞的活性受到抑制或其合成过程受阻。
然而，随着时间推移，5-HT的含量逐渐恢复并达到正常水平。
值得注意的是，在恢复过程中，部分大鼠的5-HT含量始终低于正常水平。
四、讨论本研究表明，大鼠脊髓损伤后AADC细胞的数量和分布发生了显著变化，同时5-HT的含量也发生了相应变化。
这些变化可能与神经递质系统的重塑和神经功能的恢复密切相关。
在脊髓损伤后，AADC细胞可能通过调整其分布和数量来适应新的环境，从而维持神经递质的平衡。
脊髓损伤模型不同时期转录因子肌细胞增强因子2蛋白表达的变化
脊髓损伤模型不同时期转录因子肌细胞增强因子2蛋白表达的变化陆菡1 杨明亮2陈利海1 尤圣武1于布为11：上海交通大学医学院附属瑞金医院麻醉科2：湖北省监利县第二人民医院麻醉科摘要目的研究脊髓损伤后不同时期转录因子肌细胞增强因子2蛋白（MEF2）蛋白水平变化，探讨MEF2在脊髓损伤中的可能作用机制。
方法：成年雄性SD 大鼠，重物撞击大鼠脊髓T9制作脊髓撞击伤模型。
随机分为假手术组（Sham）、损伤4小时组（SCI4h）、损伤1天组（SCI1d）、损伤3天组（SCI3d）、损伤7天组（SCI7d）。
应用Western blot法检测脊髓T9 MEF2蛋白表达变化，免疫组化与免疫荧光检测MEF2的分布及表达情况。
结果Western blot示4h、1d、3d，MEF2蛋白均出现剪切片段，而假手术组和7d未检测到剪切片段。
与对照组比，4h、1d MEF2总蛋白含量有显著差异，p值<0.01，3d有明显差异，p值<0.05。
免疫组化显示MEF2正常情况位于胞浆，且表达量较低，损伤后3d表达明显增加，且位于核内。
而损伤7d后表达与定位与对照组无差异。
结论脊髓早期损伤4h至3d，MEF2除了被剪切以外，还存在着全长形式蛋白量的增加，这可能是机体的一种代偿机制。
而到7d，MEF2蛋白水平及剪切变化均和对照组相同，提示治疗的时间窗可能在损伤后3天内。
Expression of myocyte enhancer factor-2 after acute spinal cord injury in adult rat Lu Han1 Yang Mingliang2Chen Lihai1 You Shengwu1Yu Buwei11：Department ofAnesthesiology，Affiliated Ruifin Hospital of Shanghai Jiaotong University，Shanghai2：Department ofAnesthesiology，the second Renming Hospital of jianli, hubei.Abstract Objective To explore the possible mechanisms of myocyte enhancer factor-2（MEF2）in acute spinal cord injury(SCI) Methods Adult male SD rat received a moderate contusive SCI (a 10 g rod dropped at a height of 25 mm) at the ninth to tenth thoracic vertebral level using a widely used New York University impact device.There are five groups :sham, four hours after injury(SCI4h),one day after injury(SCI1d), three days after injury(SCI3d), seven days after injury(SCI7d).Protein were observed by in Western blot，immunohistochemical analysis an immunofluorescence analysis．Results Our study demonstrated that at the time of4h、1d、3d，there showed up cleaved MEF2 .While at the sham group and 7d group , not any cleaved MEF2 was detected. The full-length of MEF2 protein is largely increased at 4h and 1d compared to the sham group (p<0.01), and also increased at 3d (p<0.05).While get to the normal level at 7d group.Colocalization of MEF2 was found mainly in neurons. After injury MEF2 translocated to the nuclear at 3d, while at 7d group MEF2 located at the endochylema. Conclusion At the early stage of spinal cord injury ,MEF2 was cleaved and the full-length MEF2 was largely increased. This may be a compensatory mechanism for acute spinal cord injury.脊髓损伤(spinal cord injury，SCI)是一种危害全球人类健康的疾病，已成为全球性的医疗棘手问题[1]。
《2024年大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》范文
《大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》篇一一、引言脊髓损伤（SCI）是一种严重的神经系统损伤，常导致感觉和运动功能的丧失。
近年来，随着神经科学的发展，越来越多的研究开始关注脊髓损伤后的修复机制。
其中，芳香族氨基酸脱羧酶（AADC）细胞及其产物5-羟色胺（5-HT）在神经损伤修复过程中的作用逐渐受到重视。
本文旨在研究大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的情况，以期为临床治疗提供理论依据。
二、材料与方法1. 实验动物与模型本实验选用健康成年SD大鼠，建立脊髓损伤模型。
通过重物打击法造成大鼠脊髓损伤。
2. 实验方法（1）分组：将大鼠分为正常对照组和损伤后不同时间点（如：1天、3天、7天、14天）的损伤组。
（2）标本采集：分别在各时间点处死大鼠并取脊髓组织，用于后续的分子生物学检测。
（3）AADC和5-HT检测：采用免疫组化及荧光定量PCR等方法检测脊髓组织中AADC细胞及5-HT的含量。
三、结果1. AADC细胞变化在脊髓损伤后，AADC细胞的数量在损伤初期有所增加，随着时间推移，逐渐恢复至正常水平。
在损伤后的3-7天内，AADC细胞的活性达到高峰。
2. 5-HT含量变化在脊髓损伤后，5-HT的含量在损伤初期有所下降，随后逐渐上升，至7天左右达到峰值，之后逐渐恢复至正常水平。
3. AADC细胞与5-HT的关系通过对AADC细胞和5-HT的检测结果进行分析，发现二者之间存在明显的正相关关系。
即AADC细胞的活性越高，5-HT 的含量也越高。
这表明AADC细胞在脊髓损伤后参与5-HT的合成和释放过程。
四、讨论本研究表明，大鼠脊髓损伤后，AADC细胞的数量和活性发生变化，同时伴随着5-HT含量的变化。
这表明AADC细胞在脊髓损伤修复过程中发挥重要作用。
AADC细胞通过合成和释放5-HT，可能对神经元的再生和修复具有促进作用。
此外，我们还发现AADC细胞与5-HT之间存在正相关关系，进一步证实了AADC细胞在5-HT合成和释放过程中的作用。
脊髓损伤后自由基变化及丹参对自由基影响的实验研究
脊髓损伤后自由基变化及丹参对自由基影响的实验研究许翔;江曙
【期刊名称】《中国骨伤》
【年(卷),期】1999(12)5
【摘要】目的了解实验性脊髓损伤后血液和脊髓组织中自由基的变化及丹参对自由基的清除作用。
方法选用家兔 3 5只 ,分为正常组、损伤组、生理盐水对照组、丹参治疗组 A和 B等 5组 ,后 4组按 Allen氏法致伤造成脊髓损伤模型 ,后 3组术后分别立即静脉注射生理盐水 ,不同浓度丹参注射液。
2小时后取血液和脊髓组织测丙二醛 ( MDA)和超氧化物歧化酶 ( SOD) ,并观察脊髓病理变化。
结果脊髓损伤后血液和脊髓组织中 MDA升高 ,SOD下降 ,使用丹参后可使 MDA降
低 ,SOD升高。
结论脊髓损伤后血液和脊髓组织中自由基含量升高 ,丹参能够有效清除自由基 ,两个丹参治疗组之间的抗自由基作用无显著性差异。
【总页数】3页(P16-18)
【关键词】实验性;脊髓损伤;自由基;丹参;治疗
【作者】许翔;江曙
【作者单位】安徽省立医院;安徽医科大学附属医院
【正文语种】中文
【中图分类】R651.2
【相关文献】
1.脊髓损伤后脊髓自由基和超氧化物岐化酶的动态变化 [J], 郑望苟;潘卫红;郭卫春
2.脊髓损伤后血液及脊髓组织中自由基变化的实验研究 [J], 许翔;江曙
3.丹参对脊髓损伤早期自由基影响的实验研究 [J], 郭岱琦;杨雷;王大平;陈信;关弘;肖建德
4.自血光量子疗法对家兔脊髓损伤后自由基和抗氧化酶影响的实验研究 [J], 华兴一;江曙
5.髓复康调节脊髓半横断损伤后自由基变化的实验研究 [J], 赵永青;田伟;韩凤岳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大鼠脊髓损伤后谷氨酸和天冬氨酸含量的变化及其意义
大鼠脊髓损伤后谷氨酸和天冬氨酸含量的变化及其意义
曹晓建;罗永湘
【期刊名称】《南京医科大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】1998(000)005
【摘要】采用Ａｌｌｅｎ′ｓ打击法，以２５ｇｃｍ致伤大鼠Ｔ８脊髓，于伤后１０分及２、４、８、２４小时取伤段脊髓，用反相高效液相色谱技术测定谷氨酸（Ｇｌｕ）和天冬氨酸（Ａｓｐ）含量。
结果显示：脊髓损伤后１０分钟致伤组Ｇｌｕ、Ａｓｐ较对照组升高７４．６０％（Ｐ〈０．０１）和４５．９９％（Ｐ〈０．０１）。
Ｇｌｕ的含量在伤后８小时升高３７．５４％（Ｐ〈０．０１），在２、２４小时的含量低于正常对照组；Ａｓｐ的含量在伤
【总页数】1页(P396)
【作者】曹晓建;罗永湘
【作者单位】南京医科大学第一附属医院骨科;南京医科大学第一附属医院骨科【正文语种】中文
【中图分类】R651.202
【相关文献】
1.人参皂甙Rg1对老龄脑缺血再灌注损伤大鼠脑功能的保护及谷氨酸、天冬氨酸含量的影响 [J], 周媛媛;李超彦;李立
2.海人酸致(癎)大鼠海马及脑脊液谷氨酸及天冬氨酸变化的意义 [J], 吴春风;黄松明;郑帼;卢孝鹏
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4.大鼠脊髓损伤后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的表达及意义继发性脊髓损伤适宜干预时间窗的选择 [J], 易成腊;陈安民;徐卫国;白祥军;宋先舟
5.戊四氮致痫大鼠大脑皮质和海马内GFAP和cyclin D1表达的变化及脑和脑脊液天冬氨酸和谷氨酸含量的变化 [J], 王争艳;朱长庚;刘庆莹;王伟
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
脊髓损伤后细胞凋亡基因调控研究进展
Ｄ【ｍ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－７０８３．２０１０．０３．０２０
２０世纪初以来．脊髓损伤的死亡率由５０％逐年下降 至目前的６％。尽管在降低死亡率的同时临床治疗水平 不断提高，但在减轻病人神经损害程度上仍收效甚微【１］。 脊髓损伤以神经损害为主要表现．脊髓神经细胞死亡并 非源于脊髓直接损伤。而是脊髓损伤后细胞凋亡所致【２］。 细胞凋亡是一种基因控制的细胞自杀过程，它通过 清除死亡细胞和代谢产物来维持人体各系统组织的稳 定，而这种清除过程不伴有局部炎症是其最大的特点。 １３ａｒｄｅｅｓｙ等［３一研究证实，脊髓损伤后广泛存在细胞凋亡现 象。多项研究［｝６３证实，不管是人类还是动物。脊髓损伤 后出现的神经元和神经胶质细胞死亡均继发于细胞凋 亡。脊髓损伤后神经细胞发生凋亡的机制十分复杂，各 种刺激信号可通过多种途径诱导凋亡发生，同时涉及多 种病理生理过程，其机制总体上并不完全明了。随着分 子生物学的发展，对基因的深入了解，发现细胞凋亡与基 因调控密切相关。脊髓损伤后细胞凋亡是多基因参与的 调控过程，这些基因包括半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白 酶（ｃａｓｐａｓｅ）基因家族、凋亡相关蛋白Ｆａｓ及其配体ＦａｓＬ 系统、ｐ５３基因、凋亡相关基因Ｂｃｌ－２家族和即刻早基因 （ＩＥＧ）等。
５ⅡＢ
ｐ６３基因
ｐ５３基因控制细胞周期和ＤＮＡ修复，介导细胞凋 亡，野生型ｐ５３（ｗｔ－ｐ５３）诱导细胞发生凋亡，突变型ｐ５３ （ｍｒ－ｐ５３）抑制凋亡。Ｓａｉｔｏ等瞳１］在大鼠脊髓横断模型中 发现损伤３０ ｍｉｎ后横断脊髓邻近细胞有ｐ５３表达，２ ｄ内 表达ｐ５３的细胞数量先增加后下降，主要表达于细胞核 内，表达的细胞类型有少突胶质细胞、小胶质细胞、星形 胶质细胞，神经元不表达，而ｐ５３表达的细胞经ＴＵＮＥＬ 检测呈阳性反应，可见ｐ５３参与了脊髓损伤后的凋亡调 节。并在其中发挥重要作用。其作用机制可能包括以下 主要环节：①神经细胞ＤＮＡ轻微损伤，诱导ｐ５３于转录 和翻译水平大量表达。②调节相关基因表达，例如使 ＆卜２、胰岛素样生长因子一Ｉ受体（ＩＧＦ－ＩＲ）、癌基因ｃ－ｍｙｃ 等表达减少，而使Ｂａｘ、ｐ２１、Ｆａｓ等表达增加。③与其他 蛋白形成复合物，参与ＤＮＡ合成、复制及修复。总之， ｐ５３可能具有双向调控作用，即先参与损伤ＤＮＡ修复，
２０世纪初以来．脊髓损伤的死亡率由５０％逐年下降 至目前的６％。尽管在降低死亡率的同时临床治疗水平 不断提高，但在减轻病人神经损害程度上仍收效甚微【１］。 脊髓损伤以神经损害为主要表现．脊髓神经细胞死亡并 非源于脊髓直接损伤。而是脊髓损伤后细胞凋亡所致【２］。 细胞凋亡是一种基因控制的细胞自杀过程，它通过 清除死亡细胞和代谢产物来维持人体各系统组织的稳 定，而这种清除过程不伴有局部炎症是其最大的特点。 １３ａｒｄｅｅｓｙ等［３一研究证实，脊髓损伤后广泛存在细胞凋亡现 象。多项研究［｝６３证实，不管是人类还是动物。脊髓损伤 后出现的神经元和神经胶质细胞死亡均继发于细胞凋 亡。脊髓损伤后神经细胞发生凋亡的机制十分复杂，各 种刺激信号可通过多种途径诱导凋亡发生，同时涉及多 种病理生理过程，其机制总体上并不完全明了。随着分 子生物学的发展，对基因的深入了解，发现细胞凋亡与基 因调控密切相关。脊髓损伤后细胞凋亡是多基因参与的 调控过程，这些基因包括半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白 酶（ｃａｓｐａｓｅ）基因家族、凋亡相关蛋白Ｆａｓ及其配体ＦａｓＬ 系统、ｐ５３基因、凋亡相关基因Ｂｃｌ－２家族和即刻早基因 （ＩＥＧ）等。
５ⅡＢ
ｐ６３基因
ｐ５３基因控制细胞周期和ＤＮＡ修复，介导细胞凋 亡，野生型ｐ５３（ｗｔ－ｐ５３）诱导细胞发生凋亡，突变型ｐ５３ （ｍｒ－ｐ５３）抑制凋亡。Ｓａｉｔｏ等瞳１］在大鼠脊髓横断模型中 发现损伤３０ ｍｉｎ后横断脊髓邻近细胞有ｐ５３表达，２ ｄ内 表达ｐ５３的细胞数量先增加后下降，主要表达于细胞核 内，表达的细胞类型有少突胶质细胞、小胶质细胞、星形 胶质细胞，神经元不表达，而ｐ５３表达的细胞经ＴＵＮＥＬ 检测呈阳性反应，可见ｐ５３参与了脊髓损伤后的凋亡调 节。并在其中发挥重要作用。其作用机制可能包括以下 主要环节：①神经细胞ＤＮＡ轻微损伤，诱导ｐ５３于转录 和翻译水平大量表达。②调节相关基因表达，例如使 ＆卜２、胰岛素样生长因子一Ｉ受体（ＩＧＦ－ＩＲ）、癌基因ｃ－ｍｙｃ 等表达减少，而使Ｂａｘ、ｐ２１、Ｆａｓ等表达增加。③与其他 蛋白形成复合物，参与ＤＮＡ合成、复制及修复。总之， ｐ５３可能具有双向调控作用，即先参与损伤ＤＮＡ修复，
丹参酮II A影响大鼠急性脊髓损伤HSP70神经元的表达
丹参酮II A影响大鼠急性脊髓损伤HSP70神经元的表达陈杨;张承馨【期刊名称】《中国现代药物应用》【年(卷),期】2014(000)017【摘要】目的：通过对Wistar大鼠给予尾静脉注射丹参酮ⅡA,影响大鼠急性脊髓损伤热休克蛋白质70(HSP70)神经元水平的表达。
方法采用Allen’s打击法建立急性脊髓损伤(ASCI模型),观察丹参酮ⅡA组(STS组)、甲基强的松龙组(MP组)、安慰剂对照组(NS组)、不给药对照组(NO组),观察在伤后1、2、4、8 h时间点HSP70阳性表达。
结果四组HSP70在ASCI后组织中显著存在,且各组HSP70表达趋势随着各个时段上升呈上升趋势。
①急性脊髓损伤大鼠不做任何处理或给予生理盐水的情况下, HSP70表达差异无统计学意义(P>0.05)。
②当注射丹参酮ⅡA或甲基强的松龙时,脊髓组织中HSP70表达差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。
组间比采取t检验,其结果显示：①给脊髓损伤模型注射生理盐水和不给药时,对脊髓组织中HSP70表达是一致的(P>0.05)。
②给强的松龙治疗脊髓损伤作用优于丹参酮ⅡA注射液(P<0.05)。
结论①急性脊髓损伤过程中神经元受到损伤致使HSP70表达增高是产生应激性保护的一种标志,该标志在HSP 70表达中对受损神经元起到保护作用,也使得HSP70在ASCI后表达增强。
②脊髓损伤后各组的HSP70表达均呈增加趋势。
STS组和MP组HSP70随时段上升阳性神经元细胞表达上升,亦呈连续性, STS组数值虽低于MP组数值,但具有可比性。
所以二者在急性脊髓损伤后HSP70阳性神经元表达层面上具有相同作用。
【总页数】5页(P231-235)【作者】陈杨;张承馨【作者单位】550002 贵阳中医学院第一附属医院急诊科;550002 贵阳中医学院第一附属医院急诊科【正文语种】中文【相关文献】1.丹参酮ⅡA对脑缺血再灌注损伤大鼠神经元L-型钙通道表达的影响 [J], 王金华;刘佩芳2.醒神解毒方预处理对全脑缺血再灌注大鼠海马神经元HSP70表达的影响 [J], 祁丽丽;韩振翔;魏江磊;钱义明;朱亮;程俊3.间歇性低压低氧预处理对大鼠全脑缺血/再灌注后海马CA1区神经元DND及HSP70表达的影响 [J], 刘杰;吴穹;刘辉琦;刘瑞欣;庞明泉4.姜黄素对HIV-1 gp120多肽诱导的大鼠神经元HSP70 mRNA表达的影响 [J], 巫金娜;黄莉文5.丹参酮IIA对神经性痛大鼠脊髓背角Bcl-2和Bax表达的影响 [J], 游明灿; 申采薇; 徐玉英; 任秀花; 游言文因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
《2024年大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》范文
《大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》篇一摘要：本文旨在研究大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC（芳香族氨基酸脱羧酶）细胞产生5-HT（5-羟色胺）的变化情况，以及其可能涉及的生理和病理机制。
研究采用不同时间点观察AADC细胞的表达及5-HT含量的变化，以探索大鼠脊髓损伤后恢复过程的生物学特征，为脊髓损伤的治疗提供新的思路。
一、引言脊髓损伤是一种常见的神经系统疾病，其治疗一直是医学研究的重点和难点。
近年来，随着神经生物学和分子生物学的发展，越来越多的研究开始关注脊髓损伤后的神经修复机制。
其中，AADC细胞及其产生的神经递质5-HT在脊髓损伤修复过程中扮演着重要角色。
因此，研究大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的变化情况，对于理解脊髓损伤的恢复机制具有重要意义。
二、材料与方法1. 实验动物与模型本实验选用健康成年SD大鼠作为实验对象，建立脊髓损伤模型。
2. 实验方法（1）模型建立：采用标准的大鼠脊髓夹伤模型进行实验。
（2）时间点设置：分别在损伤后1天、3天、7天、14天、28天进行观察和取样。
（3）AADC细胞及5-HT检测：采用免疫组化及高效液相色谱法检测各时间点AADC细胞的表达及5-HT含量。
三、结果1. AADC细胞表达变化在脊髓损伤后，AADC细胞的表达量在早期（1-3天）出现明显下降，随后逐渐恢复，至28天时接近正常水平。
2. 5-HT含量变化与AADC细胞表达变化相似，5-HT含量在损伤后也出现明显下降，随后逐渐上升，至28天时基本恢复至正常水平。
3. 相关性分析通过统计分析发现，AADC细胞的表达与5-HT含量在脊髓损伤后具有显著的正相关性，表明AADC细胞在产生5-HT过程中发挥重要作用。
四、讨论本研究表明，大鼠脊髓损伤后AADC细胞的表达及5-HT含量均出现明显变化，且二者之间存在正相关关系。
这表明AADC 细胞在脊髓损伤后的恢复过程中发挥重要作用。
脊髓损伤后大鼠结肠血管活性肠肽能神经元表达的变化
文献标识码 ： Ａ 文章编号 ：０ １ １４ （０ ２ 一 ２ ０ ０ — ４ １０ — ２ ２ ２ １ ）０ — １ ３ ０ 中图分 类号 ： ６ １ ， ４ ３ Ｒ ５ ． Ｒ ９ ２
Ｓ ｕ ｙ ｏ ｈ ｈ ｎ ｅ ｏ ａ ｏ ｃ ｉ ｅ ｎ ｅ ｔ ａ ｅ ｔｄ ｒ ｉ ｅ ｒ ｎ ｘ ｒ ｓ ｉ ｎ ｉ ａ 。 ｃ ｌ ｎ ｆ ｌ ｗｉ ｇ ｓ ｉ ａ ｔ ｄ ｎ ｔ ｅ ｃ ａ ｇ ｆ ｖ ｓ ａ ｔｖ ｉ ｔ ｓｉ ｌ ｐ ｐ ｉ ｅ ｇ ｃ ｎ ｕ ｏ ｓ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｎ ｒ ｔ ｏ ｏ ｏ ｌ ｎ ｐ ｎ ｌ ｎ Ｓ ｏ
达变化 。
结 果 ： 鼠Ｓ Ｉ 大 Ｃ 后结肠黏膜充 血 、 水肿 、 糜烂 ， 毛减少 、 绒 倒伏 、 脱落 ， 结肠组织 中ＶＩ 的 ｍ Ｎ Ｐ Ｒ Ａ及蛋 白表 达水 平显 著下
调， 与假手术组 、 照组相 比差异具有显著性 （ ＜ ．５ 。 对 Ｐ 经元表达变化 可能是导致 大 鼠Ｓ Ｉ Ｎ Ｄ的病理机制之一 。 Ｃ后 Ｂ 关键词 脊髓损 伤 ； 血管活性肠肽 ； 神经源性肠道功能 障碍
中 复学 匍窟 匡 磐矗 ２１ ［第２卷， 期 ０ ＆， ７ 第２ ２￣
・
基础 研 究 ・
脊髓损伤后大 鼠结肠血管活性肠肽能神经元表达的 变化术
龙 志 华 徐
摘 要
青
王
磊
刘文 国
目的 ： 分析大 鼠脊 髓损伤 （Ｃ ） Ｓ Ｉ后结肠壁 病理结构及结肠 肌间神经丛 内血管 活性 肠肽能ｆ Ｉ） ｖ Ｐ神经元表 达变 化 ， 探讨 脊髓损伤所致神经源性肠 道功能障碍（ Ｂ ） Ｎ Ｄ 的病理机制 。 方法： 实验 动物分 为假 手术组 、 Ｎ Ｄ（ 非 Ｂ 对照组 ） Ｎ Ｄ（ 和 Ｂ 模型组 ） 大 鼠氯胺 酮 （０ ／ｇ 腹腔注射麻 醉 ， 用 Ｎ Ｙ ； ６ ｍｇ ） ｋ 利 ｕ
Ｓ ｕ ｙ ｏ ｈ ｈ ｎ ｅ ｏ ａ ｏ ｃ ｉ ｅ ｎ ｅ ｔ ａ ｅ ｔｄ ｒ ｉ ｅ ｒ ｎ ｘ ｒ ｓ ｉ ｎ ｉ ａ 。 ｃ ｌ ｎ ｆ ｌ ｗｉ ｇ ｓ ｉ ａ ｔ ｄ ｎ ｔ ｅ ｃ ａ ｇ ｆ ｖ ｓ ａ ｔｖ ｉ ｔ ｓｉ ｌ ｐ ｐ ｉ ｅ ｇ ｃ ｎ ｕ ｏ ｓ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｎ ｒ ｔ ｏ ｏ ｏ ｌ ｎ ｐ ｎ ｌ ｎ Ｓ ｏ
达变化 。
结 果 ： 鼠Ｓ Ｉ 大 Ｃ 后结肠黏膜充 血 、 水肿 、 糜烂 ， 毛减少 、 绒 倒伏 、 脱落 ， 结肠组织 中ＶＩ 的 ｍ Ｎ Ｐ Ｒ Ａ及蛋 白表 达水 平显 著下
调， 与假手术组 、 照组相 比差异具有显著性 （ ＜ ．５ 。 对 Ｐ 经元表达变化 可能是导致 大 鼠Ｓ Ｉ Ｎ Ｄ的病理机制之一 。 Ｃ后 Ｂ 关键词 脊髓损 伤 ； 血管活性肠肽 ； 神经源性肠道功能 障碍
中 复学 匍窟 匡 磐矗 ２１ ［第２卷， 期 ０ ＆， ７ 第２ ２￣
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基础 研 究 ・
脊髓损伤后大 鼠结肠血管活性肠肽能神经元表达的 变化术
龙 志 华 徐
摘 要
青
王
磊
刘文 国
目的 ： 分析大 鼠脊 髓损伤 （Ｃ ） Ｓ Ｉ后结肠壁 病理结构及结肠 肌间神经丛 内血管 活性 肠肽能ｆ Ｉ） ｖ Ｐ神经元表 达变 化 ， 探讨 脊髓损伤所致神经源性肠 道功能障碍（ Ｂ ） Ｎ Ｄ 的病理机制 。 方法： 实验 动物分 为假 手术组 、 Ｎ Ｄ（ 非 Ｂ 对照组 ） Ｎ Ｄ（ 和 Ｂ 模型组 ） 大 鼠氯胺 酮 （０ ／ｇ 腹腔注射麻 醉 ， 用 Ｎ Ｙ ； ６ ｍｇ ） ｋ 利 ｕ
《2024年大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》范文
《大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的相关研究》篇一一、引言随着神经科学的飞速发展，脊髓损伤（SCI）的治疗和康复成为了医学领域的重要研究方向。
近年来，人们发现5-羟色胺（5-HT）在脊髓损伤的恢复过程中扮演着关键角色。
AADC（芳香族氨基酸脱羧酶）是5-HT的合成关键酶，因此，研究大鼠脊髓损伤后不同时间点AADC细胞产生5-HT的情况，对于理解脊髓损伤的恢复机制及治疗策略的制定具有重要意义。
二、材料与方法1. 实验动物与分组本实验采用成年SD大鼠作为研究对象，随机分为正常对照组和脊髓损伤组。
2. 脊髓损伤模型制作采用常用的脊髓打击模型，模拟大鼠脊髓损伤的场景。
3. 实验流程对大鼠进行脊髓打击后，分别在损伤后不同时间点（如：1天、3天、7天、14天）取样，对AADC细胞及其产生的5-HT进行检测和分析。
4. 检测方法利用免疫组化、荧光定量PCR及Western Blot等技术手段，对AADC细胞及5-HT的表达进行定量和定性分析。
三、实验结果1. AADC细胞表达变化在脊髓损伤后，AADC细胞的表达量呈现先降低后升高的趋势。
在损伤初期（如1-3天内），AADC细胞表达量显著降低；随着时间推移，其表达量逐渐上升，至两周时基本恢复至正常水平。
2. 5-HT表达变化与AADC细胞表达变化相似，5-HT的表达量在脊髓损伤后也呈现先降低后升高的趋势。
在损伤初期，5-HT的合成减少；随着时间推移，其合成逐渐增加，至两周时达到正常水平。
3. 不同时间点的比较分析通过对比不同时间点的数据，我们发现AADC细胞及5-HT 的合成在损伤后早期受到明显抑制，而随着时间的推移，两者均呈现出恢复的趋势。
其中，7天和14天的时间点最为关键，此期间内AADC细胞和5-HT的合成量恢复速度最快。
四、讨论本实验结果显示，大鼠脊髓损伤后AADC细胞及5-HT的合成量呈现出先降低后升高的趋势。
这一现象可能与脊髓损伤后的炎症反应、神经元修复等生理过程有关。
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脊髓损伤后大鼠甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的达及甲基强的松龙干
预后的变化
目的：研究大剂量甲基强的松龙对脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶（glycylproline dipeptidyl aminopeptidase，GPDA）基因表达变化的影响。
方法：Sprague-Dawley大鼠36只。
将所有大鼠随机分为三组，假手术组、脊髓损伤未使用药物干预组（创伤组）、脊髓损伤+甲强龙干预组（甲强龙组）。
在大鼠脊髓损伤后24 h将损伤的脊髓组织切取，进行逆转录PCR反应并检测GDPA的表达。
结果：假手术组GDPA的mRNA的表达的相对丰度为1.5403±0.1604；脊髓损伤24 h后创伤组GDPA的表达的相对丰度为0.5994±0.3414，与假手术组相比差异有非常显著统计学意义（P＜0.01）；GDPA在脊髓损伤后使用甲强龙干预组中的表达相对丰度为1.8432±0.1294，与创伤组比较差异有非常显著统计学意义（P＜0.01）。
结论：大剂量甲基强的松龙的早期使用能促进脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达恢复，发挥细胞保护作用。
脊髓損伤后，神经细胞增生肥大，胞浆呈嗜酸性，突起变粗，分支增多。
这些改变可起到减轻损伤及填补组织损伤而形成的空洞等作用，为神经再生创造条件；但聚集的星形胶质细胞所形成的胶质性瘢痕及其所分泌和表达的抑制性因子形成机械及化学屏障对上下行神经元轴突的再生有明显的阻碍作用[1]。
N2末端为甘氨酰2脯氨酰的肽键能被GDPA特异地水解，而该肽键正是构成胶质的基本结构[2]，因此，推测GPDA在缓解星形胶质细胞所构成的机械和化学屏障中起到作用，从而改善脊髓继发性损伤的进一步发展。
本文对GDPA基因在多种情况下表达的变化进行研究，并探讨脊髓损伤早期，GDPA对继发性脊髓损伤的影响，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 动物及分组Sprague-Dawley大鼠（中科院上海实验动物中心提供，10周龄）36只，体重180～240g。
根据随机表分为三组。
假手术组、脊髓损伤未使用药物干预组（创伤组）、脊髓损伤+甲强龙干预组（甲强龙组）。
每组12只。
在大鼠脊髓损伤后24 h将损伤的脊髓组织切取，进行逆转录PCR反应。
检测GDPA的表达。
1.2 手术方法腹部消毒后腹腔内注射戊巴比妥钠30 mg/kg麻醉，腰背部备皮消毒，充分暴露T8～9脊髓腰膨大。
采用改良的Allen打击法（5 g×5 cm）制作脊髓损伤模型，甲强龙组大鼠静脉注射甲基强的松龙（30 mg/kg），假手术组未做任何处理关闭切口，创伤组大鼠静脉内注射等量的0.9%氯化钠溶液。
24 h 后切除脊髓损伤部位上下1 cm的脊髓组织切取，进行RT-PCR反应。
1.3 逆转录PCR反应
1.3.1 脊髓神经细胞总的RNA使用Trizol液提取1 ml Trizol液中加入1 g组织，反复吹打数次。
混合均匀后加入0.2 ml氯仿，并予以离心（12 500 r/min，10 min）。
吸取上部清液，加入0.5 ml异丙醇，离心（12 500 r/min，10 min）。
沉淀物加入30 μl DEPC溶化。
1.3.2 RNA定量和鉴定紫外分光光度计定量RNA，计算OD260、OD280及比值。
取总RNA3 μg，电泳（琼脂糖凝胶）30 min，使用紫外光显示28 s及18 s 两条rRNA带，说明RNA提取完整性好。
1.3.3 以Vector NTI Suite软件设计检测引物引物序列：正义：5’TTGCGTGCTGCTATAGTGG 3’，反义：
5’ACTGCGCCACGAATTTGGG 3’，扩增产物长度：
254bp。
β-Actin检测引物序列如下：正义：5’GGGCAATGG
TCAGTAGGAT 3’（176-196），反义：5’CAGTGTGTGACGAG
TCCGT 3’（277-257）。
扩增长度为264 bp。
1.3.4 用One-tube RT-PCR system（Roche公司）进行一步法反转录和扩增。
1.4 取5 μl PCR扩增产物电泳，扫描DNA密度，分析基因表达的相对丰度。
1.5 统计学处理采用SPSS 11.0统计软件在计算机上进行分析。
计量资料以（x±s）表示，两组间采用t检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
假手术组GDPA的mRNA的表达的相对丰度为1.5403±0.1604；脊髓损伤24 h后创伤组GDPA的表达的相对丰度为0.5994±0.3414，与假手术组相比差异有非常显著统计学意义（P＜0.01）；GDPA在脊髓损伤后使用甲强龙干预组中的表达相对丰度为 1.8432±0.1294，與创伤组比较差异有非常显著统计学意义（P＜0.01）。
表明大剂量甲基强的松龙的早期使用能促进脊髓损伤后甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达恢复，发挥细胞保护作用。
（表1，图1）。
β-Actin的RT-PCR 结果见图2，甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的RT-PCR结果见图3。
表1 脊髓损伤后24 h二肽氨基肽酶表达情况（x±s）
组别表达相对丰度
假手术组 1.5403±0.1604
创伤组 0.5994±0.3414
甲强龙组 1.8432±0.1294
图1 GPDA表达的相对丰度
图2 β-Actin的RT-PCR结果
图3 甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶mRNA的RT-PCR结果
注：M1：50bp ladder，sangon 公司产品；M2：DL-2000 marker，Takara 公司产品
3 讨论
外伤后脊髓的功能完全恢复的可能性是比较小的，在受到外伤后很短时间内就会发生继发性的损伤，所以给予早期保护治疗非常的重要。
甲基强地松龙为激素类药物，其可对此疾病进行治疗，现今多应用于急性脊髓损伤的早期治疗。
早在1966年，Hopsu-Havu等[3]发现甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶。
而后多位专家经过分析证明了该酶的活性[4]。
为了探索其他哺乳动物组织中是否含有此酶，他们首先以鼠肝为样品进行了研究，同样证实在鼠肝和鼠肾中都存在这种新的二肽氨基肽酶，即现在所称的GPDA[5-6]。
文中建立的模型应用打击法，造成模型脊髓损伤，此模型和人体受到外伤的情况比较相似，相关性比较好。
本研究发现脊髓组织有甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达，脊髓损伤24 h后，甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达显著降低，大剂量甲基强的松龙能促进甘氨酸脯氨酸二肽氨基肽酶的表达，到达治疗效果。
参考文献
[1] Park S J，Oh I S，Kwon J Y，et al.The effect of irradiation and methylprednisolone in spinal cord injured rats[J].Spine，2011，36（6）：434-440.
[2] Hall E D.Antioxidant therapies for acute spinal cord
injury[J].Neurotherapeutics，2011，8（2）：152-167.
[3] Hopsu-Havu V K，Glenner G G.A new dipeptide naphthylamidase hydrolyzing glycyl-prolyl-beta-naphthylamide[J].Histochemie，1966，7（3）：197-201.
[4] Liu H D，Ni R Z，Xiao M B，et al.Clinical significance of serum GPDA-F determined by immunoelectrophoresis in diagnosis of hepatocellular carcinoma[J].Immunology，2006，5（2）：247-249.
[5] Thompson Coon J，Rogers G，Hewson P，et al.Surveillance of cirrhosis for hepatocellular carcinoma：systematic review and economic analysis[J].Health Technol Assess，2007，11（34）：201-206.
[6] Stammers A T，Liu J，Kwon B K.Expression of inflammatory cytokines following acute spinal cord injury in a rodent model[J].J Neurosci Res，2012，90（4）：782-790.。