医学检验·检查项目：血清甘氨酰脯氨酰-二肽氨基肽酶(GPDA)_课件模板

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)测定标准操作程序1.摘要血清或血浆样本中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶的活力，用于临床相关疾病的辅助诊断。

2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)的活力。

3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)活力的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)试剂盒采用的是速率法5.原理−+G PD AOH2−→−甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺甘氨酰脯氨酰对硝基苯+胺甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)催化底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺水解产生甘氨酰脯氨酸和对硝基苯胺（PNA），PNA在405nm附近有吸收峰，所以，可以通过监测405nm附近的吸光度变化值计算样本中的GPDA的活力。

6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1：二甘肽、防腐剂；R2：柠檬酸、甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺。

7.3试剂稳定性：未开瓶试剂在2-8℃避光保存，有效期为12个月，试剂开瓶后冷藏于分析仪中可以保存14天。

7.4试剂准备：试剂为即用式。

8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。

每日在测定前做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)测定的临床意义上海海员医院中心实验室张抗万雄萍早在1966年，Hopsu-Havu和Glenner等在鼠的肝、肾组织中发现了一种新的二肽氨基肽酶。

这种酶能水解甘氨酰-脯氨酰-B-萘胺，释放二肽甘氨酰脯氨酸，而被称为甘氨酰脯氨酸-B-萘胺酸〔1〕。

由于甘氨酰脯氨酰-B-萘胺有致癌作用，Nagatsu等合成了新底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺〔2〕，并为大家广泛接受，这种酶也一度被称为甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺酶，现已通称为甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(Glycyl proline dipeptidyl aminopeptidase,GPDA)。

GPDA分布于肝、肾、结缔组织、唾液腺和血清、唾液等体液中，但其生理功能尚不清楚。

由于GPDA能特异地水解释放肽链N-末端的甘氨酰-脯氨酸(Gly-Pro)，而胶原分子中富含有这种Gly-Pro结构，提GPDA的生理作用可能与胶原肽降解有关。

七十年代，血清GPDA测定被逐渐引入到临床应用。

一、血清GPDA对肝癌鉴别诊断的价值在若干学者发现肝胆疾病病人血清GPDA升高之后，Kojima等首先报道了原发性肝癌(PHC)病人血清GPDA活性(198±110.4U/L,n=53)不仅显著高于健康对照组(77.5±17.1U/L,n=100)，而且显著高于慢性肝炎，肝硬变和其他胆道疾病(如胆石症、阻赛性黄疸等)病例组〔3〕。

部分肝癌病人的血清GPDA 超过200U/L，而20例超过200U/L的病例中，除一例总胆管结石外，其余都是肝癌。

综合国内外文献报道，原发性肝癌病人血清GPDA约为健康人的1.5～2.5倍〔3～7〕；阳性率在57～100%不等。

原发性肝癌病人血清GPDA水平与转移性肝癌病人无显著差异〔3〕。

但Hutchinson等报道，转移性肝癌病人血清GPDA高达健康对照的3.3倍，阳性87.5%(14/16)；其中一例67岁老年女病人在血清GPDA升高一周后，血清转氨酶活性才出现高，提示血清GPDA对早期发现肝细胞损伤，可能比转氨酶更加敏感。

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(GPDA)测定的临床意义上海海员医院中心实验室张抗万雄萍早在1966年，Hopsu-Havu和Glenner等在鼠的肝、肾组织中发现了一种新的二肽氨基肽酶。

这种酶能水解甘氨酰-脯氨酰-B-萘胺，释放二肽甘氨酰脯氨酸，而被称为甘氨酰脯氨酸-B-萘胺酸〔1〕。

由于甘氨酰脯氨酰-B-萘胺有致癌作用，Nagatsu等合成了新底物甘氨酰脯氨酰对硝基苯胺〔2〕，并为大家广泛接受，这种酶也一度被称为甘氨酰脯氨酸对硝基苯胺酶，现已通称为甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(Glycyl proline dipeptidyl aminopeptidase,GPDA)。

GPDA分布于肝、肾、结缔组织、唾液腺和血清、唾液等体液中，但其生理功能尚不清楚。

由于GPDA能特异地水解释放肽链N-末端的甘氨酰-脯氨酸(Gly-Pro)，而胶原分子中富含有这种Gly-Pro结构，提GPDA的生理作用可能与胶原肽降解有关。

七十年代，血清GPDA测定被逐渐引入到临床应用。

一、血清GPDA对肝癌鉴别诊断的价值在若干学者发现肝胆疾病病人血清GPDA升高之后，Kojima等首先报道了原发性肝癌(PHC)病人血清GPDA活性(198±110.4U/L,n=53)不仅显著高于健康对照组(77.5±17.1U/L,n=100)，而且显著高于慢性肝炎，肝硬变和其他胆道疾病(如胆石症、阻赛性黄疸等)病例组〔3〕。

部分肝癌病人的血清GPDA 超过200U/L，而20例超过200U/L的病例中，除一例总胆管结石外，其余都是肝癌。

综合国内外文献报道，原发性肝癌病人血清GPDA约为健康人的1.5～2.5倍〔3～7〕；阳性率在57～100%不等。

原发性肝癌病人血清GPDA水平与转移性肝癌病人无显著差异〔3〕。

但Hutchinson等报道，转移性肝癌病人血清GPDA高达健康对照的3.3倍，阳性87.5%(14/16)；其中一例67岁老年女病人在血清GPDA升高一周后，血清转氨酶活性才出现高，提示血清GPDA对早期发现肝细胞损伤，可能比转氨酶更加敏感。

GPDA（甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶）
GPDA（甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶）
临床意义：原发性肝癌（PHC）和继发性肝癌病人血清中GPDA活性明显高于慢性肝炎、肝硬化、胆石症、阻塞性黄疸及正常对比组。

急性肝炎、慢活肝、肝硬化、阻塞性黄疸等，血清GPDA可有不同程度升高，升高幅度不及肝癌病人。

但重症肝炎、酒精性肝炎时，血清GPDA可高于肝癌病人。

血清GPDA升高，可以排除肝血管瘤的诊断。

胃癌病人血清GPDA明显下降，一般在正常人的1/2左右。

其他良性胃肠道病变。

GPD A也可略有下降。

下降幅度较大的为胃溃疡，依次为慢性胃炎和十二指肠球部溃疡。

胃癌切除后，病人血清GPDA有回升趋势。

类风湿关节炎（RA）病人病程在15个月
以上者，血清GPDA活性显著低于健康对照，酶活性与病程长短呈负相关。

系统性红斑狼疮（SLE）病人血清也显著降低，但酶活性与临床表现不相关。

急性淋巴细胞性白血病、淋巴肉瘤和霍奇金病病人，血清GPDA显著降低。

血清GPDA测定对鉴别肝脏良恶性病变、监测癌的肝转移和胃癌的检测，均具有意义。

药物性肝损害、原发性胆汁性肝硬化引起肝内胆汁郁积者，血清GPDA活性升高，临床应用中应予以注意。

注意事项：血清标本在2～8°C酶可稳定1周，-20°C可稳定3个月以上。

参考值：44～116 U/L。

甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶:苷氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（Glycyl proline dipeptidyl aminoeptidase,GPDA）主要分布在肝,肾,结缔组织,唾液腺及血清,唾液等体液中,以额下腺含量最为丰富.【正常参考值】44~116 U/L【临床意义】1. 肝胆疾病:原发性肝癌病人血清GPAD平均活性多在对照参考值的2倍以上,继发性肝癌病人血清GPDA活性均值在对照参考值3倍以上,急性肝炎时不管有无黄疸,血清GPDA仅轻度升高,且恢复正常的时间快.慢性肝炎或肝硬变时异常率低于急性肝炎患者.酒精性肝炎时的酶活性和异常率高于肝硬变者.药物性肝损害或原发性肝汁性肝硬变引起肝内胆汁郁积的病人,其血清GPDA明显升高,阳性率也显著高于其它肝病,这有一定的特异性和诊断价值.2.胃肠疾病:胃癌病人血清GPDA活性明显低于对照组.对血清GPDA活性明显降低的胃十二指肠疾病患者,应考虑到胃癌的诊断.胃癌经切除后,病人血清GPDA有上升趋势.3.其它疾病:急性淋巴细胞性白血病,淋巴肉瘤和淋巴网状细胞瘤病人的血清GPDA活性明显降低.类风湿性关节炎病人的血清GPDA活性略低,但重症病人下降明显.全身性红斑狼疮病人的血清GPDA活性显著降低.4.尿液GPDA:慢性肾小球肾炎患者尿中GPDA活性显著升高.血清甲胎蛋白(AFP)临床意义诊断原发性肝癌。

检测AFP的含量是诊断原发性肝癌的重要手段之一,较目前较常用的诊断肝癌的B型超声波、同位素扫描和血液生化测定等方法敏感。

用琼脂扩散法能检出1-3mg/L以上,阳性率可达75%左右。

反向血凝法较琼脂扩散法灵敏度高100-200倍；放射免疫法能检出纳克水平的AFP，较琼脂扩散法灵敏1000倍，可使原发性肝癌阳性检出率达90%左右。

其他消化道肿瘤，如胃癌、胰腺癌、结肠癌、胆管细胞癌等也可导致AFP升高，但肝转移癌却极少增高。

一、急性肝炎和肝硬化的鉴别诊断急性肝炎和肝硬化的鉴别诊断:放射免疫法可在一些肝病患者血清中测得较高含量的AFP。