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第六章_一般毒性作用及其试验与评价方法

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[医学]第六章 化学毒物的一般毒性作用-亚慢性和慢性毒性

[医学]第六章 化学毒物的一般毒性作用-亚慢性和慢性毒性

二、蓄积作用的研究方法
目的：通过蓄积试验求出蓄积系数K，了解化学 物蓄积毒性的强弱，并作为慢性毒性试验及其 它有关毒性试验的剂量选择提供参考。 蓄积系数法 生物半衰期法
（一）蓄积系数法
蓄积系数(accumulation coefficient)：指多次染毒使半数 动物出现某种效应的总量与一次染毒的半数效量之比值。 一般采用大鼠或小鼠，以死亡作为效应指标。 K=ED50(n)/ED50(1) 或 K=LD50(n)/LD50(1) ED50(n):以慢性方式多次接触受试物时产生预期效应的 累积剂量之和。 ED50(1):一次接触该物质产生相同效应的一次剂量。
＊1. 实验动物的选择 ＊2. 剂量设计与分组 ＊3. 染毒途径与时限 ＊4. 观察指标
五、长期毒性试验的注意事项
重视实验项目管理：选择经验丰富的专业人员对项目的设计和实施 进行管理，保证仪器设备状态良好，工作人员专业培训。
实验室环境的要求：注意动物饲养和试验环境的规范化，符合 GLP 。
蓄积系数的评价
蓄积系数（Ｋ） 蓄积作用分级
<1
高度蓄积
1-
明显蓄积
3-
中等蓄积
5-
轻度蓄积
1. 固定剂量法
方法：
（1）急性毒性实验
LD50(1)
（2）1/20-1/5LD50 每日染毒
LD50(n)
（ 50%动物死亡时累计染毒的总量）
（3）计算K值：K=LD50(n)/LD50(1)
若累计染毒量已达到5个LD50，动物仍未死亡或死 亡未达到半数，可终止实验，其Ｋ值按 ＞５作为结果。
蓄积库（depot）：化学物蓄积的组织器官部位。常见 的蓄积库包括： 血浆蛋白 脂肪组织 肝脏、肾脏 骨骼

07第6章 一般毒性

07第6章 一般毒性


1.2 急性毒性试验的目的
确定受试物使一种或几种实验动物死亡的剂量水平 （LD50），以初步估计该化合物对人类毒害的危险 性。为进一步的蓄积毒性试验、亚慢性与慢性毒性 试验及特殊毒性试验提供剂量和判断指标的依据。 阐明一种化合物的相对毒性、作用方式和特殊毒性 表现，找出量-效关系，以便其毒性包括临床症状、 生理生化和病理变化、毒性性质和可能的靶器官等 有初步了解。 确定机体在环境中接触的受试物侵入机体的途径， 研究受试物的代谢动力学过程。 研究受试物急性中毒的预防和急救治疗措施。

1 急性毒性作用及其评价
新外源化合物首先需必须阐明其急性毒性的
强度及特征。 1.1 基本概念 1.2 急性毒性试验的目的 1.3 急性毒性试验设计 1.4 急性毒性评价
1.1 基本概念
急性毒性（acute toxicity）是指机体一次接触或 在24小时内多次接触外来化学物后所引起的快速剧 烈的中毒效应（结构与功能变化）。 一次接触因给予途径不同定义不同：口服和注射指 瞬间将受试物给予机体；吸入和皮肤接触指在特定 期间内（24小时）机体持续接触受试物。 短期试验（Short-term test）指在数日内（7-14 天），每天使试验机体接触一次受试物的试验。以 探讨较大剂量和较短时间的毒性作用。其与急性毒 性试验不同。

1.3.5.3 经皮肤接触
液态、粉尘态和气态外来化学物均有接触皮
肤的机会。不仅与外露皮肤接触并被吸收， 有的还能穿透衣服经皮肤吸收。 外来化学物经皮肤吸收是指角质层完整的皮 肤，若皮肤破损，化学物经真皮直接吸收， 而与静脉吸收的机制相似。
1.3.6 试验周期
急性毒性试验除计算受试物的LD50/LC50外，

第六章 一般毒性3.6

第六章 一般毒性3.6

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(六) 观察时间和周期

测定外源化学物的 LD50(LC50) ，一般要 求计算实验动物接触化学物之后两周 （14天）内的总死亡数 对于一些速死性化学物求其 LD50(LC50) 也可仅计算24小时的死亡率

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四、急性毒性分级和评价

急性毒性试验主要目的之一是对化学物的急 性毒性进行分级，评价化学物的急性毒性强 弱，用于比较其急性毒性大小。 WHO于2003年公布《全球化学品统一分类和 标签制度》（ GHS ）， 2005 年修订， 2008 年 GHS将全面实施。 GHS 对急性毒性分级以 LD50/LC50 值为依据 划分。
在观察期间应注意观察其体重变化。
这有助于了解受试化学物所致的中毒 效应是短暂的或较长期的效应
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4.病理检查和其它指标观察
应当重视病理组织学检查
凡中毒死亡动物应及时解剖做病理学检查，
检查器官有无充血、出血、水肿或其它改变， 并对有变化的脏器作病理组织学检查
对存活动物于观察期结束后应做病理学检查
24
3.性别
急性毒性试验所用的动物应当是雌、雄
各半
如果在研究中发现待测化学物对雌、雄
动物的毒性大小有明显差异时，应分别 求出雌性与雄性动物各自的LD50值
如果试验是为致畸试验作剂量准备，也
可仅做雌性动物的LD50试验
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4．实验动物分组和数量
在利用不同的方法测定化学物LD50时，
实验设计中对动物数的要求不同
狗
5～15 2～5 5～15 3～10
40
0.1～0.2 0.2～0.5 0.2～0.5 0.2～0.5 0.1～0.5 1～2 0.5～1 1～5 0.5～2

食品毒理学第六章化学毒物的一般毒性作用

食品毒理学第六章化学毒物的一般毒性作用

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二、急性毒性试验方法的要点
(一)试验动物
[原则]：
①急性毒性试验要求选择对化学毒物的代谢和毒效 应表现与人的反应尽可能一致的试验动物。
②动物易于获得
③品系纯化
④价格较低和易于饲养等条件。
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二、急性毒性试验
试
急性毒性试验 蓄积毒性试验
急性非致死试验
了解对机体毒作用靶点和指标
亚急性毒性试验
亚慢性毒性试验
（≤3个月） （3~6个月）
确定阈值和阈下剂量
慢性毒性试验
（6个月至终身）
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§1 急性毒性作用(acute toxicity)
一、急性毒性和急性毒性试验的目的
二、急性毒性试验
③ 静脉：1ml/kg(5min以上)；
④ 肌肉注射：0.5ml/kg(一个部位)；
⑤ 眼睛：0.01ml/每眼；
⑥ 直肠：0.5ml/kg；
⑦ 阴道：大鼠0.2ml，兔lml；
⑧ 吸入：2mg/L； ⑨ 鼻：猴或犬每鼻孔0.1ml。
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二、急性毒性试验
（二）试验动物的饲养环境
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一、急性毒性和急性毒性试验的目的
目的
①测试和求出化学毒物对一种或几种试验动物的致死量(以 LD50表示)以及其它的急性毒性参数，了解急性毒作用强度。
②并通过观察动物中毒表现和死亡的情况，了解急性毒作用性质、 可能的靶器官和致死原因，提供化学毒物的急性中毒资料、初步评 价对人体产生损害的危险性。

第六章 化学毒物的一般毒性作用

第六章 化学毒物的一般毒性作用
可反映急性阈剂量距离LD50的宽窄，
即表示引起实验动物的死亡剂量与最低毒
作用剂量之间剂量范围的宽窄。其越大，
表示化学物引起急性死亡的危险性越小。
(三) 其它上、下限指标 LD84/LD16(或LC84/LC16)： 灵敏性好、重复性强而且容易求。 剂量反应曲线斜率 ( 即剂量 - 死亡曲线的概率单位直线的斜 率)。图
2．是化学物毒理学安全性评价和危险度评 定的基础； 3．对防治化学毒物中毒、制订标准以及管 理毒理学等有重要意义。
第一节 急性毒性作用及其评价
一．基本概念 急性毒性(acute toxicity) 是指机体 ( 人或实验动物 ) 一次接触或 24小时内多次接触化学物后在短期(最长到 14天)内所发生的毒性效应，包括一般行为、 外观改变、大体形态变化以及死亡效应。
对人可能致死的剂量 g/kg <0.05 0.05~ 0.5~ 5~ >15 总量 （g/60kg） 0.1 3 30 250 >1000
剧毒 高毒 中等毒 低毒 实际无毒
表 6-3 化学物质急性毒性(LD50)剂量分级 ___________________________________________________________________ 级 别 大鼠口服 LD50 相当于人的致死剂量 (mg/kg) __________________________ mg/kg g/人 ___________________________________________________________________ 极 毒 < 1 稍尝 0.05 剧 毒 1 ～ 50 500 ～ 4000 0.5 中 等 毒 51 ～ 500 4000 ～ 30000 5 低 毒 501 ～ 5000 30000 ～ 250000 50 实际无毒 5001 ～ 15000 250000 ～ 500000 500 无 毒 > 15000 > 500000 2500 ____________________________________________________________________ 引自 GB15193.3-94 食品安全性毒理学评价程序和方法

第六章-一般毒性作用

第六章-一般毒性作用

◆ 结果
举例
◆ 结果 联合作用评价结果
举例
举例
◆ 讨论 LD50 ： 四 硼 酸 钠 对 雌 、 雄 性 大 鼠
1470mg/kg 。 亚 硒 酸 钠 对 雄 性 大 鼠 14.70mg/kg ， 对 雌 性 大 鼠 6.81mg/kg 。 联 合对大鼠的急性毒性，雄性大鼠为 1727.10mg/kg，雌性大鼠1717.94mg/kg
常用大鼠
染毒方式： • 脱毛：化学或机械法脱毛（体表面积 的10%） • 染毒：局部涂敷或大鼠、小鼠浸尾法
染毒方法
经注射途径染毒 注射药品、机制研究、毒物代谢动力学 分类：
（四） 剂量选择
参考新化学物的理化性质
参考相关资料
先用少量动物，以较大的剂量间隔染毒，找 出10%-90%（或0%-100%）的致死剂量范 围，然后设计正式实验的剂量和分组
根据试验所选的LD50计算方法确定剂量组数
剂量选择
各组剂量的计算
i =（lgLD90-lgLD10）/（n-1） 或 i =（lgLD100- lgLD0）/（n-1）
i为组距，n为设计的剂量组数。以最 低剂量值（LD0或LD10）的对数剂量加上 一个i值，即是第二个剂量组的对数剂量， 依次类推直至最高剂量组
举例
1 Introduction 2 Method and materials 3 Results 4 Discussions
举例
◆ 前言 单独的硒、单独的硼均有抗氟作用，有研 究表明硼硒联合作用使氟中毒大鼠的康复 效果较好。因此，我们在硼硒抗氟药效实 验研究的基础上，为了解硼硒联合毒性作 用，为现场人群应用硼硒联合防治氟中毒 提供试验依据，我们就硼硒联合对大鼠的 急性毒性及亚慢性毒性进行试验研究

毒理学 第六章-一般毒性作用(人卫)

毒理学 第六章-一般毒性作用(人卫)

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6. 生理与健康状况
健康、未产未孕 给药前检疫观察 大、小鼠、兔、豚鼠1周，犬、猴2~3周 ①适应新环境，减少环境和生理条件变化可 能对试验结果的影响 ②筛检健康状况不符合试验要求的动物
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（二） 染毒方式
最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。 ❖ 工业化学物：经皮肤和呼吸道 ❖ 农用化学物：经口、经皮肤和呼吸道 ❖ 药品：经口和注射 ❖ 食品：经口 ❖ 环境污染物：经口、皮肤和呼吸道
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3.急性毒性分级法 （acute toxic class method）
选用剂量(25、200、2 000 mg/kg)之一，单性别3只动物进 行试验，确定动物的生死后再进行下一步试验。 有3种可能的结局：
a. 不需进一步试验即可分级， b.下一阶段以相同剂量再做另一性别试验， c.下一阶段以较高或较低的剂量水平进行。 根据在某一染毒剂量下，死亡发生的数量来判定大致的 LD50值范围，直接进行危害评估和毒性分级。
有关急性毒性试验设计及方法
曲线拟合：概率 单位法，即Bliss 法
插值法：寇氏法
中，不正确的是
A．采用寇氏法和 Bliss 法一般 设5～8组 B．寇氏法和 Bliss 法一般以
一般设5～8个剂量 组；霍恩法固定设4 个剂量组。
i=(LD100 –LD0 )/(n-1)公式计算 组距 C．使用霍恩氏法固定设4个剂 量组
种属和品系
性别、年龄、体重
微生物学等级 饲养环境
动物数目 实验前处理
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实验动物
种属和品系 首选大鼠 还需选择一种非 啮齿动物：狗
性别、年龄、体重
雌雄各半 刚成年、健康、未曾 交配和受孕的动物
大鼠180～240g 小鼠18～25g 家兔2～2.5kg

毒理学基础 第六章 化学物的一般毒性作用

毒理学基础 第六章 化学物的一般毒性作用

〔四〕慢性实验设计要点
1.实验动物 2.染毒途径与期限
3.剂量分组: 高剂量组：1/5-1/2 LOAEL〔亚慢〕 中剂量组：1/50-1/10LOAEL 低剂量组：1/100 LOAEL或：1/1000-1/10LD50 阴性对照：
4.观察指标 同亚慢，但精，为亚慢显现靶的指标。
〔五〕结果评价
染毒使半数动物出现相同效应〔或死亡〕的剂量[ED50(1)]
的比值，K 即= 蓄ED5积0(n)系数。
ED50(l)
LD50(n
K
=
)
LD50(l
)
1)固定剂量法 2)剂量递增法
〔2〕生物半减期法
用毒物动力学原理描述化学毒物在机体内的蓄积作用 化学物的蓄积极限：
a.半减期的测定 b.计算蓄积极限
第六章 化学物的一般毒性作用
急性毒性 一般毒性亚慢性毒性
慢性毒性
急性毒性试验 亚慢性毒性试验 慢性毒性试验
第一节 急性毒性作用
一、急性毒性的概念
➢ 急性毒性(acute toxicity) ：是指机体〔实验动物或人〕 一次或24小时内屡次接触外源化学物后在短期内所引 起的毒性效应。
➢ 包括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡效应 ➢ 说明： ➢ 1.接触的次数：一次/屡次 ➢ 2.毒效应出现时间： ➢ 3.中毒效应的强度：
〔二〕染毒途径
1.经消化道染毒 2.经呼吸道染毒 3.经皮肤染毒 4.经注射染毒
〔三〕剂量选择及分组
1.剂量范围确实定： 动物死亡率0％－100％ 〔或10％-90%〕的致死剂量范围
2.分组及剂量确实定： 窛氏法：6－8组为宜，各组剂量呈等比级数 霍恩氏法：4组，各组剂量呈等比级数
〔四〕毒作用观察

第六章一般毒性作用及其试验与评价方法

第六章一般毒性作用及其试验与评价方法
大、小鼠等小动物每组数量通常为 不少于10只，家兔每组不少于8只， 犬等大动物每组不少于6只。
严格按照随机分组进行。
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（三）受试物及处理
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受试物的接受、分样、保管、称量、配制以及 在此过程中严格的质量保证是急性毒性试验成 功与否的重要环节。
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（五）染毒方法
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4、经注射途径染毒
对注射药品或需作比较毒性观察 的药品进行急性毒性试验时，须 作经注射途径染毒。
注射途径可分为静脉注射或滴注、 腹腔注射(ip)、肌内注射(im)、 皮下注射(sc)、皮内注射(id)、椎 管内注射等。
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Wistar大鼠 特 点： 抗病力强，自 发性肿瘤发病率低， 多用于肿瘤、免疫、 药理、内分泌。
SD大鼠 特点 ：白色，产仔多， 生长发育较Wistar大 鼠快，对疾病的抵抗 力较强，尤以对呼吸 道疾病的抵抗力强。
（一）实验动物的选择和要求
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2、实验动物的年龄和体重
通常要求刚成年的动物，且为健 康未受孕的动物。
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（五）染毒方法
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3、经皮肤染毒
经皮肤染毒的方式：先使用化学法 脱毛（常用脱毛剂为硫化钡加滑石 粉1：4或硫化钠加淀粉1：4）或机 械法脱毛（剪剃去毛），将动物脊 柱两侧背毛脱去，去毛面积常为体 表面积的10％。
局部涂敷受试物并以玻璃纸覆盖固 定一定时间接触染毒。
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（五）染毒方法
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1、经口（胃肠道）染毒 灌胃 喂饲 吞咽胶囊

6 第6章 一般毒性作用及其试验与评价方法

6 第6章 一般毒性作用及其试验与评价方法

粘膜
其它
结膜或口腔中分泌物增多，充血、苍白、黄疸
直肠或脚爪部皮肤温度降低或升高；姿势异常，消瘦等
5、LD50的计算方法：
（1）改进寇氏法 P127
• 改进寇氏法：计算简便，结果可靠。
• 试验设计要求：组内动物数相等、组间剂量等比例 设计、死亡率正态分布、最低剂量组死亡率 <20% ， 最大剂量组死亡率>80% • 计算公式：logLD50=Xκ- i(Σp - 0.5)
‘一次接触’
(P122)
经口接触和各种方式的注射接触，“一次接触”，是指 在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内；
而经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次接触”是指在一
个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程; 此外，当化学物毒性较低时，需要给予动物较大剂量时， 可在 24 小时内分多次给予，这时的急性接触即为“多 次”。
第一节
急性毒性作用及其评价
一、基本概念。（P122）
急性毒性（acute toxicity）是指机体(人或实验 动物)一次接触(或24小时内多次接触)受试物后， 在短期内所产生的效应及反应，包括一般行为、 外观改变及形态改变，甚至死亡效应。 观察时间：一般为7天，也可连续观察14～28天。
4日接触总剂量 （LD50）
累积接触总剂 量（LD50）
0.40
1.00
1.90
3.26
5.26
8.26
12.74
蓄积毒性试验的目的：
• 求出外源化学物的蓄积系数，了解蓄积毒性大小
• 为慢性毒性试验和其它有关毒性试验的剂量选择提 供参考依据 • 为制定有毒物质在食品中的卫生限量标准时，为安 全系数的选择提供参考 • 确定该受试物可否用于食品供人类长期食用

一般毒性作用及其试验与评价方法

一般毒性作用及其试验与评价方法
、皮肤等途径进 入生物体，影响其正常生理功能。
毒性作用的预防与控制
01
风险评估
对有毒化学品的潜在风险进行评 估，以确定其对人群健康的危害 程度。
预防措施
02
03
控制策略
采取有效措施降低人群暴露于有 毒化学品的程度，如加强监管、 改进生产工艺等。
制定和实施控制策略，以减少有 毒化学品的环境释放和暴露，保 护人群健康。
慢性毒性试验
总结词
慢性毒性试验是在长期（通常为3个月以上）的时间范围内评估物质对生物体的 毒性作用。
详细描述
慢性毒性试验旨在检测受试物在长期暴露下引起的慢性毒性效应，如致癌性、致 畸性和致突变性等，为制定安全限值和风险管理措施提供依据。
生殖毒性试验
总结词
生殖毒性试验是评估物质对生物体生殖功能和后代发育的毒 性作用。
毒性作用机制研究进展
细胞凋亡机制
研究化学物质诱导细胞凋亡的机制，了解其对 细胞生存的影响。
氧化应激机制
研究化学物质引起的氧化应激反应，揭示其对 细胞和组织的损伤作用。
信号转导机制
研究化学物质对细胞内信号转导通路的干扰，探讨其对细胞功能的影响。
毒性作用影响因素研究进展
暴露条件与毒性作用
研究不同暴露条件下化学物质的吸收、分布、代谢和排泄过程，以 及这些过程对毒性作用的影响。
危险度评价
危险度评价是在剂量-反应关系评价和暴露评价的基础上，综合分析受试物的潜在危害，并对其所致 健康影响的可能性及严重程度进行预测。
危险度评价需要考虑多种因素，如受试物的理化性质、暴露特征、毒性作用机制等，同时需要参考类 似化合物的毒理学资料和数据。根据危险度评价的结果，可以制定相应的风险管理措施，以降低受试 物对人类健康的潜在危害。

卫生毒理学――第六章 化学毒物的一般毒性作用

卫生毒理学――第六章 化学毒物的一般毒性作用

卫生毒理学――第六章化学毒物的一般毒性作用急性毒性(acute toxicity)是指机体(人或实验动物)一次接触或24小时内多次接触化学物后在短期(最长到14天)内所发生的毒性效应，包括一般行为、外观改变、大体形态变化以及死亡效应。

急性毒性试验(acute toxicity tests)是基础毒理研究的主要内容之一．其目的是：①测试和求出化学毒物对一种或几种实验动物的致死量(以LD50表示)以及其它的急性毒性参数，了解急性毒作用强度．②并通过观察动物中毒表现和死亡的情况，了解急性毒作用性质、可能的靶器官和致死原因，提供化学毒物的急性中毒资料、初步评价对人体产生损害的危险性。

③探求化学毒物急性毒性的剂量―反应关系与中毒特征。

④为亚慢性、慢性毒性作用试验的研究及其他毒理试验提供接触剂量和观察指标的选择提供参考依据。

⑤为毒理学机制研究提供线索。

常用参数最常用的是半数致死量(LD50)和急性毒作用带(Zac)。

Zac值的大小可反映急性阈剂量距离LD50的宽窄，即表示引起实验动物的死亡剂量与最低毒作用剂量之间剂量范围的宽窄。

zac值越大、表明化学物引起急性死亡的危险性越小，反之表明引起急性死亡的危险性越大。

实验方法的要点(一)实验动物[原则]：①急性毒性试验要求选择对化学毒物的代谢和毒效应表现与人的反应尽可能一致的实验动物。

②动物易于获得③品系纯化④价格较低和易于饲养等条件。

1．实验动物的种属不同种属的动物对化学物的反应可能有很大的差别，最好用两种种属的动物，包括啮齿类和非啮齿类。

实际工作中啮齿类多选用小鼠和大鼠，有些试验也可选用豚鼠或家兔，非啮齿类一般选用狗或猴。

一般来说，急性皮肤毒性试验可选用成年大鼠、豚鼠或家兔，优先考虑白色家兔．而急性吸人毒性试验和经口急性毒性试验则优先考虑大鼠。

2．实验动物的年龄急性试验动物不宜过老或过幼，通常要求选择刚成年动物进行实验，而且须是未曾交配和受孕的动物。

由于小动物年龄与体重相关．一般用体重表示。

第六章 化学毒物的一般毒性作用-急性毒性

第六章 化学毒物的一般毒性作用-急性毒性

某化学物预实验剂量表
组别 1. 2. 3. 4. 5. 剂量(mg/kg) 剂量 15.625 25 40.0 64 102.4 对数剂量 1.6021-2×0.2 × 1.6021-0.2 1.6021 1.6021+0.2 1.6021+2×0.2 ×
2）按预实验求得大概剂量范围后（即10%-90%或0-100% ）再按下式 ）按预实验求得大概剂量范围后（ 或 求正式试验的组距。 求正式试验的组距。 i = log LD 90 − log LD10
3．有关急性毒性试验常见的参数
急性毒性上限参数，以死亡为终点： 急性毒性上限参数，以死亡为终点： 半数致死剂量或浓度（LD50或LC50）； 半数致死剂量或浓度（ 绝对致死剂量或浓度（ 绝对致死剂量或浓度（LD100或LC100）； 最小致死剂量或浓度（MLD，LD01或MLC，LC01）； 最小致死剂量或浓度（ ， ， 最大耐受剂量或浓度（ ），或称为 最大耐受剂量或浓度（MTD，LD0或MTC），或称为 ， ）， 最大非致死剂量（MNLD）。 最大非致死剂量（ ）。 急性毒性下限参数，以非致死性急性毒作用为终点： 急性毒性下限参数，以非致死性急性毒作用为终点： 观察到有害作用的最低水平（急性毒性 观察到有害作用的最低水平（急性毒性LOAEL）； ）； 未观察到有害作用的水平（急性毒性 未观察到有害作用的水平（急性毒性NOAEL）。 ）。
2．急性毒性试验的目的
测定毒物的致死剂量以及其他急性毒性参数， 测定毒物的致死剂量以及其他急性毒性参数，LD50为最主 要的参数，并根据LD 值进行急性毒性分级。 要的参数，并根据 50值进行急性毒性分级。其他毒性参 数还有LD 数还有 100、LD01、LD0等。 通过观察动物中毒表现，毒作用强度和死亡情况，初步评 通过观察动物中毒表现，毒作用强度和死亡情况， 价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量-反应 效应） 反应（ 价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量 反应（效应） 和对人类的潜在危险性程度。 和对人类的潜在危险性程度。 为重复剂量、 为重复剂量、亚慢性和慢性毒性研究及其他毒性试验提供 接触剂量的设计依据，并为观察指标的选择提出建议。 接触剂量的设计依据，并为观察指标的选择提出建议。 为毒理学机制研究提供初步线索。 为毒理学机制研究提供初步线索。

[工学]第六章 一般毒性作用及其实验与评价方法1

[工学]第六章 一般毒性作用及其实验与评价方法1

此法剂量准确。灌胃法是用灌胃器将所应投给 动物的药灌到动物胃内。 小鼠的灌胃针长约4～5cm，直径为1mm，大鼠 的灌胃针长约6～8cm，直径约1.2mm。 灌胃针的尖端焊有一小圆金属球，金属球为中 空的。焊金属球的目的是防止针头刺入气管或 损伤消化道。针头金属球端弯曲成 20°左右的 2/24/2019 角度，以适应口腔、食道的生理弯曲度走向 41
2/24/2019 23
依据GB14922-2001《实验动物微生物学等级 及监测》划分的实验动物等级，并与寄生虫 学等级对应：
1，将实验小鼠和大鼠的微生物等级分为清洁 级、无特定病原体级（SPF）和无菌级三个 级别，普通级的实验小鼠和大鼠原则上不再 使用； 2，豚鼠、地鼠和兔分为普通级、清洁级、SPF 级和无菌级四个级别。 3，犬和猴分为普通级和SPF级二个级别。
同一批实验动物体重变异范围不应超过该批动物平均
体重的20％。
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二、急性毒性实验
3.实验动物的性别：
急性毒性实验的主要内容是求LD50，除特殊要求外，
一般急性毒性实验对动物性别要求为雌雄各半。 如果在预实验时发现化学毒物(如农药)对雌、雄 动物毒效应的敏感性有明显差异，则应单独分别 求出雌性与雄性动物各自的LD50。如果实验是为致
②动物易于获得
③品系纯正 ④价格较低和易于饲养等条件。
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实验动物-蛙和蟾蜍
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实验动物-鸡、鸽
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实验动物-小鼠
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实验动物-猴
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普通实验动物
遗传学分类： 1，近交系（inbred strain） 2，封闭群（closed colony） 3，杂交群（hybrid stock） 4，突变系（mutation gallery）

化学物的一般毒性及其评价

化学物的一般毒性及其评价

(六)观察时间和周期
• 急性毒性的观察周期一般为１４天，LD50计 算时以观察周期内各组动物的总死亡数为依 据．不同化学物其中毒体征出现的时间和特 点各有不同，而且引起动物死亡的时间也存 在很大的个体差别．如氰化物多数动物在染 毒后几分钟至几个小时内死亡；羰基镍染毒 早期出现上呼吸道体征，很快就缓解，但２ －３天后甚至更迟些又出现明显的中毒体征， 表现为严重的肺水肿，呼吸困难，然后死 亡．
四．急性毒性分级和评价
急性毒性试验求出LD50值，通过LD50值 进行毒性分级，评价毒物的急性毒性强弱， 比较毒物的急性毒性大小．
14—5—3外来化合物急性毒性分级(WHO)
毒性分级
大鼠一经口 LD50 (mg/kg)
6只大鼠吸入４h， 死亡２-４只的 浓度(ppm)
兔经皮 LD50 (mg/kg)
组别
剂量 mg/kg 对数 1.1761
动物数 死亡数 死亡率 存活率 （n） 10 （n） 0 p 0 q 1
pq
1
15
0
2
3
18
21.7
1.2561
1.3361
10
10
2
5
0.2
0.5
0.8
0.5
0.16
0.25
4
5
26.1
31.3
1.4161
1.4961 i=0.08
10
10
7
9
0.7
0.9 ∑p=2.3
狗 5.0-15.0
2.0-5.0 3.0-10.0
（四）染毒剂量与分组
急性毒性试验的重要目的是测定LD50， 欲求一个未知毒性的受试物的LD50 ，必须 设计好分组数与染毒剂量，这往往需要通 过预实验来确定。 预实验: 先查阅相关文献, 弄清该化学物 的理化特性和与该化学物结构及理化性质 相似化学物的LD50．用少量动物，以较大 剂量间隔染毒，找出10%-90%或0%-100% 的致死剂量范围

食品毒理学总复习题答案

食品毒理学总复习题答案

第一章绪论1. 有毒有害物质可分为几大类?生物性、化学性和物理性。

2. 食品中毒物的主要来源和途径。

（1）农药污染：有机氯农药、有机磷农药、氨基甲酸酯类农药、菊酯类农药等；（2）工业三废污染：工业三废是指废水、废气、废渣。

它们通过污染食品或通过生态系统在食物链中的迁移，造成在某些动植物产品中的富集，最终影响人体健康；（3）霉菌污染：霉菌对食品污染的危害，一是食品变质，二是产生毒素；（4）兽药残留污染：有些兽药在使用后不易排泄，残留量高，从而使产品达不到安全标准，有些则是养殖户违反规定而造成不合格残留；（5）运输污染：运输食品的火车不干净，或食品与一些有毒有害物品同车混合运输造成污染；（6）加工污染：主要是在加工过程中滥用添加剂，此外一些不良加工方式或不良包装材料也会造成有毒有害物质污染；（7）事故性污染：食品加工企业或餐馆由于管理不善，工作马虎，误用或超量使用一些化学物质造成中毒事故。

第二章食品毒理学基本概念1.LD50：半数致死剂量，是指引起受试动物组中一半动物死亡的剂量，也称致死中量。

2.LD0：最大耐受剂量（MTD），指全组受试动物全部存活的最大剂量。

3. NOEL：未观察到作用剂量也称最大无作用剂量（MNED）或未观察到损害作用剂量（NOAEL），是指受试物在一定时间内，以一定的方式和途径与机体接触，根据现今的认识水平，用目前最灵敏的进侧方法和观察指标，未检查出对动物造成血液型、化学性、临床或病理性改变等损害作用的最大剂量，即未能观察到对机体造成任何损害作用或使机体出现任何异常反应的最高剂量。

4. ADI：每日允许摄入量，指人终生每日摄入某种化学物质，对健康没有任何已知的各种急性、慢性毒害作用等不良影响的剂量。

5. MRL：最高容许残留量，也称最高残留限量，是指允许在食物表面或内部残留药物或化学物质的最高含量。

6. RfD：参考剂量，是环境介质中，外源化学物质的日平均接触剂量的估计值。

7. BMD：基准计量法，依据动物试验取得的剂量-反应关系的结果，用一定的统计学模式求得的引起一定比例（常为1%~10%）动物出现阳性反应剂量的95%可信区间的下限值。

第六章化学毒物的一般毒性作用ppt课件

第六章化学毒物的一般毒性作用ppt课件
Toxicology
三、急性毒性试验设计
对于和人类生活密切接触的化学物如新的食品、 药品、农药、化妆品、工业毒物等毒理学安全 性评价，通常是必做的试验，是评估毒性大小 的第一步工作。
总体原则和要点:包括实验动物、染毒途径、
染毒剂量、观察周期、观察指标的选择、计算 方法和评价等。
Toxicology
急性毒性： 亚急（慢）性毒性： 慢性毒性： 按接触化学毒物时间长短所进行的哺乳动物 试验以观察毒效应、评价化学毒物综合毒性的试 验即为急性毒性试验、亚慢性毒性试验和慢性毒 性试验。
Toxicology
• 根据以上试验结果对化学毒物的毒性进行评 价称为一般毒性评价（evaluation for general toxicity）。
受孕的动物。 大鼠 180～240 g 小鼠 18～25 g 家兔 2～2.5 k g 豚鼠 200～250 g Beagle犬 4～6 kg 杂种犬 8～15 kg
Toxicology
3.实验动物的性别：通常要求为雌雄各半。 4.实验动物分组与数量 ：急性毒性试验所用
动物的数量根据组数和每组数量来决定。 分组必须遵循随机化原则。 5.实验动物的预检 ：大鼠、小鼠、啄鼠、 兔的检疫期为1周，犬、猴等适当地延长至 2～3周。
最常用的参数是： • 半数致死量（LD50）: • 急性毒作用带（Zac）: • LD84／LD16 的比值: • 化学毒物的剂量--反应曲线斜率:
Toxicology
(一)实验动物的选择和要求 急性毒性试验选择动物的主要原则：尽量 选择急性毒性反应与人近似的动物；易于 饲养管理、试验操作方便的动物；繁殖生 育力较强，数量较大能够保障供应；价格 较低，易于获得的动物。 寿命相对较短。
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真观察和记录。 分析中毒死亡时间的分布规律，也可以提供 重要信息。
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3、体重
实验动物体重变化指标，可以反映动物中毒后
综合性整体变化，是一个比较客观简便的量化
指标。 因此在观察实验动物中毒体征的同时，对存活 动物应定期多次称量动物的体重变化，一般为 每周1次或2次。
（一）实验动物的选择和要求
尽量选择急性毒性反应与人近似的动物；
易于饲养管理、试验操作方便的动物；
繁殖生育力较强，数量较大能够保障供应；
价格较低，易于获得的动物。
实验动物的选择包括物种和品系、年龄、体重、 数量等方面，必须按照其规范要求进行。
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（一）实验动物的选择和要求
⑦吸入2mg/L；
⑧鼻：猴或犬每鼻孔0.1ml。
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（五）染毒方法
染毒途径（exposure routes）的选择需考虑：
1. 模拟人在生活和生产环境中实际接触受试物的
途径和方式；
2. 有利于不同化学物之间急性毒性大小的比较；
3. 受试物的性质和用途；
4. 各种受试物毒性评价程序的要求等。
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（一）实验动物的选择和要求
5、实验动物的给药前禁食处理
采用经口途径染毒，实验动物胃肠 道内食物存留量对化学毒物的毒性 可产生较明显的干扰，因此在试验 给药前应作禁食处理。
大鼠在前一天傍晚下班时或晚间将 饲料撤掉。 小鼠由于其消化吸收和代谢速度较 快，可隔夜禁食也可禁食4h以上。
Wistar大鼠 特 点： 抗病力强，自 发性肿瘤发病率低， 多用于肿瘤、免疫、 药理、内分泌。
SD大鼠 特点 ：白色，产力较强，尤以对呼吸 道疾病的抵抗力强。
（一）实验动物的选择和要求
2、实验动物的年龄和体重
通常要求刚成年的动物，且为健 康未受孕的动物。 通常大鼠180～240g、小鼠18～
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三、急性毒性试验设计
包括实验动物、染毒途径、染毒剂
量、观察周期、观察指标的选择、
计算方法和评价等。 一般来说，一个新化学物在研制初 期就要进行急性毒性试验。 如果急性毒性试验通不过，则后面
的所有试验都不必进行了。
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1 2 3 4 5 6
LgLD0
LgLD0+i
LgLD0+2i LgLD0+3i
LgLD0+4i
•••
（六）剂量选择
对未知毒性的化学物，估计毒性较低时，预试验也 可以5g/kg剂量进行摸索，来决定是否需正式求 LD50。一般来说，化学物LD50如大于5g/kg已表明 毒性不大。
我国药品的毒理研究指导原则规定要以最大容积最 高浓度给予动物后未见死亡，方可不进一步试验求 出LD50值。 急性毒性试验除设立几个剂量组外，是否设正常和 溶剂对照组，根据需要确定。
第六章 一般毒性作用及其试验与评价方法
第一节 急性毒性作用及其试验与评价
第二节亚慢性毒性作用及其试验与评价方 法 第三节 蓄积毒性作用及其试验与评价
第四节 慢性毒性作用及其试验与评价
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外来化学物在一定剂量、一定接触时间和接 触方式下对试验动物产生的综合毒效应称为 一般毒性作用。 一般毒性作用根据接触毒物的时间长短又可 分为急性毒性、亚慢性毒性和慢性毒性。
经皮肤染毒的方式：先使用化学法 脱毛（常用脱毛剂为硫化钡加滑石 粉1：4或硫化钠加淀粉1：4）或机 械法脱毛（剪剃去毛），将动物脊 柱两侧背毛脱去，去毛面积常为体 表面积的10％。 局部涂敷受试物并以玻璃纸覆盖固 定一定时间接触染毒。
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（五）染毒方法
4、经注射途径染毒 对注射药品或需作比较毒性观察 的药品进行急性毒性试验时，须 作经注射途径染毒。 注射途径可分为静脉注射或滴注、 腹腔注射(ip)、肌内注射(im)、 皮下注射(sc)、皮内注射(id)、椎 管内注射等。
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（六）剂量选择
一般来说，化学结构和性质比较近似的毒 物，毒性也比较近似。通过以上资料从而 对受试物毒力做出估计，以预期毒性剂量 设计预实验方案。 每个剂量组间的组距可大些，以便寻找出 受试物的致死剂量范围。
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一、急性毒性的概念
急性毒性是指机体（实验动物或人）一次或24h 内多次接触外源化学物后在短期内所产生的毒性
效应，包括一般行为和外观改变、大体形态变化
以及死亡效应。
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急性毒性概念中的几个问题
1、急性接触的次数
（一次或多次） 24h内
2、中毒效应出现的时间（一般为7-28d）
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（七）毒性作用观察
急性毒性试验一般是以死亡为主要记录内容。 除此之外还要注意： 中毒体征及发生过程； 死亡情况和时间分布； 体重 病理形态学变化。
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（七）毒性作用观察
1、中毒体征及发生过程
应详细观察和记录动物出现的中毒体征、
发生时间和体征发展的经过。
机体对毒物作用的反应可以表现出各个
系统的特征。
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2、死亡情况和时间分布
急性毒性试验中实验动物的死亡数是计算
LD50值的依据，动物死亡数量每增加或减少
一只都会对LD50值产生明显影响，因此应认
1、实验动物的物种和品系
急性毒性试验一般首先选择哺乳动物， 选择两种或两种以上的动物。包括啮齿 类和非啮齿类。啮齿类以大鼠、小鼠为 最常用。非啮齿类以犬或猴最常用。
急性毒性试验所用大鼠的品系以 Sprague-Dawley（SD）、Wistar为主， 小鼠则以昆明种、NIH、ICR为多。
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25g、家兔2～2.5kg、豚鼠200～
250g、Beagle犬4～6kg、杂种犬
8～15kg。
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（一）实验动物的选择和要求
3、实验动物的性别
通常要求为雌雄各半。
但如有资料或预试验发现试验品对
雌、雄动物毒效应有明显的性别差
异，则应单独分别试验并求出雌性
和雄性动物各自的LD50值。
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体重可以反映动物中毒后的整体变化。 对存活动物尤其是对低于LD50剂量组的存活动物。 应在观察期28天内称量其体重的变化,以便了解受 试物引起毒效应的持续时间。
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③根据预试验的死亡资料确定组距。
可根据以下公式计算出剂量分组：
i=(lgLD90-lgLD10)／(n-1) 或：
i=(lgLD100-lgLD0)／(n-1) 公式中i为组距(相邻的两个剂量组对数剂量之差)；n 为设计的剂量组数。
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正式试验
一般来说、根据试验设计所选用的LD50计算方法来确 定组数。例如寇氏法、几率单位法一般设6～10个剂 量组；霍恩法固定设4个剂量组。求得i值后，以最低 剂量组(LD0或LD10)的对数剂量加上一个i值，即是第 二个剂量组的对数剂量，依此类推直至最高剂量组， 查各自的反对数即得出各组剂量的真实值。
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（六）剂量选择
查阅文献
①了解化学毒物的结构式、分子量、常温常压下的状态、 熔点、沸点、密度、闪点、挥发度、蒸气压、水溶性和脂 溶性等理化特性，生产批号及纯度，杂质成分与含量等。
②确定使用哪一种计算方法求LD50，然后再设计剂量分组。 LD50的计算方法常用改良寇氏法、概率单位法、霍恩氏法 等。 ③找出与受试化学毒物结构与理化性质近似的化学物的毒 性资料，并以文献资料中相同的动物种系和相同接触途径 所测得的LD50(LC50)值作为受试化学物的预期毒性中值。
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（四）染毒剂量及分组
一般推荐，染毒最大量为：
①经口20ml/kg（对空腹动物）； ②经皮2ml/kg（根据体表面积计算，限于染毒的 准确性）； ③静脉1ml/kg（5min以上）； ④肌内注射0.5ml/kg（一个部位）； ⑤每眼0.01ml； ⑥直肠0.5ml/kg；
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第一节 急性毒性作用及其试验与评价方法
一、急性毒性的概念 二、急性毒性试验的目的
三、急性毒性试验方法的要点
四、急性毒性分级和评价
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第一节 急性毒性作用及其试验与评价方法
急性毒性效应一般是指机体接触化学物后，在
较短时间内观察到的毒性症状。
3、中毒效应的强度
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二、急性毒性试验的目的
1、测试和求出毒物的致死剂量以及其他急性毒 性参数，通常以LD50为最主要的参数； 2、初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、 剂量-反应（效应）关系和对人体产生损害的危 险性； 3、研究受试物在动物体内的动力学变化规律； 4、为亚慢性、慢性毒性试验研究以及其他毒理 试验提供接触剂量和观察指标选择的依据。