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CFX96实时荧光定量PCR仪操作规程1 目的建立一个CFX96实时荧光定量PCR仪的标准操作程序。
2 适用范围适用于CFX96实时荧光定量PCR仪的使用及维护。
3 依据《CFX96实时荧光定量PCR仪操作说明书》。
4 职责仪器操作人员确保对CFX96实时荧光定量PCR仪进行正确使用和维护。
5 操作程序5.1 检测环境5.1.1 仪器安置房间应清洁无尘，无易燃易爆和腐蚀性气体，室内排风良好。
5.1.2 仪器工作台应平稳，周围无强烈机械振动和电磁干扰，仪器有良好接地。
5.1.3 环境温度15℃～31℃，最大相对湿度80％（非冷凝），适宜最高海拔2000米。
5.2 设备操作流程及注意事项5.2.1 开始运行仪器5.2.1.1 打开电脑5.2.1.2 打开定量PCR仪底座开关5.2.1.3 启动CFX Manager软件5.2.2 放置样品将 PCR 反应体系加入到 0.2ml 低缘八联管，盖上管盖；或加入低缘 96 孔板，用光学级封膜封好。
注意，必须带一次性塑料手套，不要让手指接触到反应管表面。
将反应管按顺序放入仪器的加热孔中。
5.2.3 设置程序，运行实验定量 PCR 软件操作基本步骤为：设置热循环程序文件（Protocol Tab）→设置反应板文件（Plate Tab）→点击“Start Run”键，运行程序5.2.3.1 热循环程序文件（Protocol Tab）设置指南：点击 Edit（编辑）或 CreateNew（创建新程序）。
5.2.3.2 反应板设置文件（Plate Tab）设置指南：选择本次实验所要使用的荧光染料种类；单击样品类型；如要某些反应孔第一荧光染料对应的样品类型为标准品（Standard），点击“Dilution Series”键可设置其标准品浓度及稀释倍数。
5.2.3.3 点击“Start Run”键。
单击 open lid（打开热盖）或 Close lid（关闭热盖）放置样品；单击 Start Run，保存文件，开始运行程序。
F96荧光分光光度计软件使用说明书上海棱光技术有限公司二〇〇三年一月在阅读此说明书前请行看仔细阅读主机说明书和Windows 98操作手册。
一、软件的使用环境要求1.建议硬件配置CPU P2 Celeron 600以上，内存不低于64M，硬盘应有足够的运行空间（约200M），电脑的两个串行口应运行正常，并且系统中没有中断冲突的情况。
图象分辨率800*600以上，颜色：增强16位以上。
2.软件要求使用Windows 98第二版。
电脑运行时要求关闭屏幕保护程序；关闭BIOS 中的电源管理程序，以保证F96软件能正常运行。
二、软件的安装把光盘放入光驱中，计算机会自动安装应用程序。
如无自动安装，则打开X：\（双击）SETUP.EXE文件，（应用程序），出现SETUP窗口后，点击键入姓名和公司名称，再次点击动请直接点击若要修改路径点击之后出现的将是项目名对话框，默认名称是“F96荧光分光光度计软件包”，可以直接点击毕后，重新启动计算机即可运行程序。
注：所使用的光盘有序列号，不能与其他机器的光盘交叉使用。
如交叉使用，软件将无法正常运行。
三、软件的使用1.F96主机与电脑的联接F96的主机的9针端口通过联接线与电脑的串行口相联接，在联接时确认你的软件设置的串行口号与实际相一致。
2.端口设置点击端口设置图标，出现端口设置对话框，正确选择端口号或名称应与你3.联机操作（开机）步骤a.先打开F96的氙灯电源，点亮氙灯。
b.用右手按住F96面板上任意键不放，同时左手打开F96的主机电源，F96面板上出现“F96”时放开右手，这时显示出现“F96C”主机联机成功。
c.再打开电脑，运行F96的软件，出现“是否要联机”对话框，点击（若点击d.仪器进入初始化状态,在数据监视窗口中，数字会从小到大再由大到小地变化。
（大约需要2至3分钟时间）。
（注意初始化时，请勿将样品放入样品室内）。
e.通过初始化过程后，程序进入扫描窗口。
快捷键四、 软件的操作1. 仪器通过初始化后直接进入波长扫描状态窗口，在菜单栏下有小图标，将鼠标指针，移至图标上便可知其作用，在屏幕的下方有五个“快捷键”，其功能如下：“开始扫描”是启动键，点击后开始按所设置扫描图谱。
F96荧光分光光度计软件使用说明书上海棱光技术有限公司二〇〇三年一月在阅读此说明书前请行看仔细阅读主机说明书和Windows 98操作手册。
一、软件的使用环境要求1.建议硬件配置CPU P2 Celeron 600以上，内存不低于64M，硬盘应有足够的运行空间（约200M），电脑的两个串行口应运行正常，并且系统中没有中断冲突的情况。
图象分辨率800*600以上，颜色：增强16位以上。
2.软件要求使用Windows 98第二版。
电脑运行时要求关闭屏幕保护程序；关闭BIOS 中的电源管理程序，以保证F96软件能正常运行。
二、软件的安装把光盘放入光驱中，计算机会自动安装应用程序。
如无自动安装，则打开X：\（双击）SETUP.EXE文件，（应用程序），出现SETUP窗口后，点击键入姓名和公司名称，再次点击动请直接点击若要修改路径点击之后出现的将是项目名对话框，默认名称是“F96荧光分光光度计软件包”，可以直接点击毕后，重新启动计算机即可运行程序。
注：所使用的光盘有序列号，不能与其他机器的光盘交叉使用。
如交叉使用，软件将无法正常运行。
三、软件的使用1.F96主机与电脑的联接F96的主机的9针端口通过联接线与电脑的串行口相联接，在联接时确认你的软件设置的串行口号与实际相一致。
2.端口设置点击端口设置图标，出现端口设置对话框，正确选择端口号或名称应与你3.联机操作（开机）步骤a.先打开F96的氙灯电源，点亮氙灯。
b.用右手按住F96面板上任意键不放，同时左手打开F96的主机电源，F96面板上出现“F96”时放开右手，这时显示出现“F96C”主机联机成功。
c.再打开电脑，运行F96的软件，出现“是否要联机”对话框，点击（若点击d.仪器进入初始化状态,在数据监视窗口中，数字会从小到大再由大到小地变化。
（大约需要2至3分钟时间）。
（注意初始化时，请勿将样品放入样品室内）。
e.通过初始化过程后，程序进入扫描窗口。
快捷键四、 软件的操作1. 仪器通过初始化后直接进入波长扫描状态窗口，在菜单栏下有小图标，将鼠标指针，移至图标上便可知其作用，在屏幕的下方有五个“快捷键”，其功能如下：“开始扫描”是启动键，点击后开始按所设置扫描图谱。
荧光分光光度计的说明---以960MC 、960CRT为例一．特点（一）960CRT荧光分光光度计1. 发射单色仪采用1200L/mm凹面光栅，大孔径非球面反射镜，灵敏度特别高。
2. 采用150W大功率汞灯，激发能量强。
3. 采用光源监控技术，测量结果稳定。
4. 高性能的光电倍增管，可获得最佳信号噪声比。
5. 具有自诊断功能，工作可靠。
6. EM带宽小于10nm。
（二）960CRT型1. 配置Windows95计算机工作站，仪器故障率小，可靠性强。
2. 工作站采用中文对话视窗，操作方便。
3. 利用鼠标可舒适地进行扫描测定；定量分析；运算；制表和记录等系列操作。
4. 可方便地选择联机或脱机工作方式。
二．主要技术指标1. EX波长选择范围：365nm（干涉滤光片）2. EM波长范围：200nm～800nm3. 波长示值误差：EM±2nm4. 波长重现性：EM±1nm5. 信噪比：蒸馏水喇曼峰S/N≥比50，响应时间2S6. 测定方式：a.波长扫描b.时间扫描c.定量分析三．960CRT型(配计算机)功能1. 光谱处理功能连续扫描测定；1～4阶导数光谱；计算峰面积；波峰检索；图谱运算；图谱窗口处理；图谱保存及调出；图谱打印输出。
2. 定量测定样品定量分析；时间扫描，绘制标准曲线（1～3次）；浓度直读；自动测定S/N比及稳定性；自动背景扣除；定量分析打印输出。
四．选配件1. 光源：150W氙灯2. 干涉滤光片（汞灯光源）：254nm、313nm、405nm、436nm、546nm3. 干涉滤光片（氙灯光源）：250nm～700nm间任选。
荧光分光光度计光谱测定操作规程
一．开仪器的电源开关。
二．开计算机，至WINDOWS界面出现。
三．双击桌面RF-530XPC快捷键，打开软件。
仪器自动进行自检。
四．测定光谱：
1．在主菜单上选择Acquire Mode > Spectrum，进入光谱测定模式。
选择configure > Spectrum parameters，出现如下图所示的对话框，设置测定参数：
或
2．设置参数之后，按自动调零键，然后设置样品，按开始键，开始测试。
在测试过程中，如果要中断测试，可按键。
3．保存文件。
可选择File > Save 或Save as，或选择File > Channel > Save Channel。
如果通道占满，可删掉不需要的数据。
方法如下：File > Channel > Erase Channel。
五．数据处理：
1．在主菜单上选择Manipulate > Peak Pick、Point Peak或Peak Pick，可显示峰、手动找峰或计算峰面积等。
2．四则运算：在主菜单中选择Manipulate > Arithmetic，可将图谱加、减、乘、除某一常数。
3．在主菜单中选择Output > Graphic Print，可打印图谱；选择Output > Print Table可打印表格；选择Output > Save Table可保存表格。
六．关机：
测试结束后，退出软件，关闭仪器电源、关闭电脑。
荧光分光光度计操作规程
一、开机
1、确保分光光度计与个人电脑是通过随机配带的USB数据线连接
2、将电脑打开，打开荧光分光光度计的电源开关。
3、检查表示氙灯是否被点着及仪器处于工作状态的批示灯是亮的。
4、双击桌面上荧光分析软件快捷图标。
5、等待程序初始化，系统将自检，如果出现错误提示，立即关闭荧光分光光度计，过15
分钟再重新启动。
二、关机
1、选择文件菜单里的“关闭”命令，点击“是”终止联机。
2、出现是否关机的图示，点击“是”关灯并退出荧光分析软件。
3、等氙灯充分冷却后再关荧光分光光度计。
三、操作
1、创建一个分析方法
从工具菜单中，选择配置命令来设置分析条件。
扫描类型选择波长扫描，根据标准再设定扫描模式、数据模式、发射波长、激发波长等参数。
2、测量样品
选择好测量方法后，进入波长测量界面，将样品入入指定的样品槽，点击菜单工具－扫描进行测量或点击扫描按钮进行测量，如果中途暂停测量，点击工具条上的停止按钮。
扫描完毕后，图谱处理窗口或打印窗口将会自动弹出。
峰值表将显示峰数、峰的起始位置、峰的终止位置、峰高值、谷位置、谷值、半峰宽等信息。
3、谱图处理
对样品和标准按照同样的方法进行处理，并对数据结果进行打印。
技术参数：*1、单色器：机刻凹面衍射光栅,900g/mm,F2.2校正像差，且可见光区高的光通量,提高检测灵敏度。
2、闪跃波长：激发300nm，发射400nm。
*3、检测器测量波长范围：200~750nm和零次光；带自增益功能：连续可调（0-1000V）4、分辨率：最低分辨率1.0nm。
5、波长准确度：最低要求±1.0nm。
*6、波长扫描速度：30~60000nm/min，调节步距1nm，亦可按时间收集数据。
7、光谱带宽：EX：1，2.5，5，10，20nm；EM：1，2.5，5，10，20nm8、光源：150w连续光源氙灯。
*9、水平狭缝，最小试样体积：0.6mL(使用标准10mm池)，微量池最小体积0.2ml。
*10、水拉曼检测激发波长350nm，带宽5nm，响应时间2.0s，取水拉曼峰处噪声，灵敏度大于800：1（RMS）；11、可进行时间扫描和定量分析，三维荧光图谱。
*12、具有全波长预扫描功能，能自动、快速地寻找到最佳的激发和发射波长。
*13、线性动态范围：6个数量级；14、全波段的光谱校正，排除仪器的依赖性，确保高精度的数据。
15、控制系统和软件15.1计算机一台：计算机配置不低于i3处理器、2GB内存、500GB硬盘、DVD可刻录光驱、22英寸LED显示器，Windows7操作系统。
15.2分析软件：定性及定量分析软件，以及与此有关的应用分析软件。
16、固体支架：配套的标准固体支架。
17、恒温样品支架17.1、冷却循环水系统：与仪器标配套的标准的国产冷却循环水系统。
18、滤光片1套，带通滤光片250-390nm，低通截止滤光片，295、320、370、395、420nm19、氙灯1支20、激光打印机1台，满足仪器使用。
21、附件、配件按正常实验配齐，安装调试后能够正常进行实验。
技术参数1 技术规格1.1 电源电压：220V，50Hz1.2 温度：10~35℃1.3 相对湿度：45~85%2 现场免费培训，各项性能指标达到技术要求，由供需双方共同签字认可，现场验收，仪器验收合格后，供方须提供整机一年免费保修，并提供终身维修服务。
f98荧光分光光度计说明书概述1. 引言：概述：本文是《f98荧光分光光度计说明书》的概述部分。
本部分将简要介绍该说明书的结构、目的以及主要内容，以便读者更好地理解并使用该荧光分光光度计。
文章结构：本说明书主要包括引言、正文、f98荧光分光光度计的使用指南、常见问题解答和故障排除、结论和展望等几个部分。
引言部分为整篇文章的开头，为读者提供了对全文内容的基本了解。
目的：该说明书旨在向用户详细介绍f98荧光分光光度计及其工作原理、特点和功能。
同时，通过使用指南和常见问题解答，帮助用户正确操作仪器，并解决在实验过程中可能遇到的问题和故障。
接下来，我们将逐一介绍“1. 引言”中所列出的各小节内容。
2. 正文:2.1 什么是f98荧光分光光度计:f98荧光分光光度计是一种专门用于测量和分析样品中的荧光特性的仪器。
它通过激发样品中的荧光物质并测量其产生的荧光信号来获取关于样品的信息。
f98荧光分光光度计可以广泛应用于许多领域，如生物学、化学、医学等。
2.2 f98荧光分光光度计的工作原理:f98荧光分光光度计使用一定波长范围内的激发源来激发样品中的荧光物质。
这些激发源可以是可见或紫外线的灯管或激光器。
当样品被激发时，其中的荧光物质会吸收能量并重新辐射出以较长波长的荧光信号。
f98荧光分光仪通过检测和记录这些荧光信号的强度来测量样品中所含有的荧-4.3 数据处理与结果解读”: {不要使用markdown,不要包含网址亮物质。
该仪器还可以根据用户需求进行专门设置和调整，以提高测量的准确性和灵敏度。
2.3 f98荧光分光光度计的主要特点和功能:- 高灵敏度：f98荧光分光光度计具有极高的灵敏度，可以检测到样品中微量的荧光物质，并提供准确的测量结果。
- 宽波长范围：该仪器可在可见光至紫外线范围内进行测量，适用于不同波长下的荧光样品。
- 多种测量模式：f98荧光分光仪支持多种不同的测量模式，如荧光强度、寿命等，方便用户根据需求进行选择。
荧光分光光度计（分子荧光）Fluores_cence •1楼1、基本原理在室温下分子大都处在基态的最低振动能级，当受到光的照射时，便吸收与它的特征频率相一致的光线，其中某些电子由原来的基态能级跃迁到第一电子激发态或更高电子激发态中的各个不同振动能级，这就是在分光光度法中所述的吸光现象。
跃迁到较高能级的分子，很快通过振动弛豫、内转换等方式释放能量后下降到第一电子激发态的最低振动能级，能量的这种转移形式，称为无辐射跃迁。
再由第一电子激发态的最低振动能级下降到基态的任何振动能级，并以光的形式放出它们所吸收的能量，这种光便称为荧光。
荧光分析法具有灵敏度高、选择性强、需样量少和方法简便等优点，它的测定下限通常比分光光度法低2~4个数量级，在生化分析中的应用较广泛。
荧光分析法是测定物质吸收了一定频率的光以后，物质本身所发射的光的强度。
物质吸收的光，称为激发光；物质受激后所发射的光，称为发射光或荧光。
如果将激发光用单色器分光后，连续测定相应的荧光的强度所得到的曲线，称为该荧光物质的激发光谱（ex citation spectrum）。
实际上荧光物质的激发光谱就是它的吸收光谱。
在激发光谱中最大吸收处的波长处，固定波长和强度，检测物质所发射的荧光的波长和强度，所得到的曲线称为该物质的荧光发射光谱，简称荧光光谱（fluorescence spectrum）。
在建立荧光分析法时，需根据荧光光谱来选择适当的测定波长。
激发光谱和荧光光谱是荧光物质定性的依据。
某些物质的分子能吸收能量而发射出荧光，根据荧光的光谱和荧光强度，对物质进行定性或定量的方法，称为荧光分析法（fluoresc ence analysis）。
对于某一荧光物质的稀溶液，在一定波长和一定强度的入射光照射下，当液层的厚度不变时，所发生的荧光强度和该溶液的浓度成正比，这是荧光定量分析的基础。
2、检测荧光的仪器测定荧光可用荧光计和荧光分光光度计，其二者的结构复杂程度不同，但其基本结构是相似的。
F96荧光分光光度计使用注意事项初次安装使用F96荧光分光光度计前，必须仔细阅读使用说明。
开机时，请先开氙灯电源，再开主机电源。
每次开机后请先确认一下一起两边排热风扇工作正常，以确保仪器正常工作，发现风扇有故障，应停机检查。
主机工作时顶部排热器温度很高,切勿触摸,以免受伤.氙灯点亮后需一定时间稳定，故进行精密测试应在30分钟以上。
当氙灯未能触发，并连续发生“吱吱”高频声或“叭叭”打火声时，请立即关掉氙灯电源，稍后数秒重新触发。
请尽量减少不必要的氙灯触发次数，避免氙灯在高压下反复触发。
关闭氙灯电源后，若要重新使用，请等待60秒以后重新触发。
运行未知浓度的样品测试时，灵敏度设置请从低位向高围（0-7）逐步设置，当灵敏度较高时（>3），为了保护光电倍增管，请拥护勿将强光置入样品室内。
当（仅当）操作者错误操作或其他干扰引起微机错误时，应该立即关断主机电源，重新启动，但无须关断氙灯电源。
单色器内用螺丝紧固处不得松动，光学器件和仪器运行环境需保护清洁。
清洁仪器外表时,请勿使用乙醇乙醚等有机溶剂,请勿在工作中清洁,不使用时请加防尘罩.比色皿保持清洁。
三、注意事项1、测量时必须将样品池外壁留有的残液用擦镜纸吸干后方可放入样品池支架中，以保持样品室的洁净。
2、保持仪器表面的清洁，可使用软布擦拭，任何溢出于样品室的样品需马上擦拭干净，但勿擦拭石英窗。
3、测试结束后应将样品从样品池倒出，不要在样品池内存有样品的状态放置。
4、实验结束后，要做好仪器使用情况登记，若用故障，请及时反映。
荧光物质的效率、强度、光谱与稳定性特性荧光物质（fluorescentmaterial）又称为荧光素（fluorescein或luciferin）、荧光色素或荧光探针，是指能够吸收光并能在较短时间内发射荧光，而且能作为染料的化合物。
荧光素通常具有芳香环结构。
（1）荧光效率：荧光色素能发出荧光，除具备合适的能量外，还须具备高荧光效率。
荧光效率（fluorescence efficiency）即荧光量子产率，是指荧光物质吸收光后发射出的荧光光量子数与其所吸收激发光光量子数之比。
