细胞工程学专业复习资料
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细胞工程复习题答案1. 细胞工程的定义是什么?细胞工程是指应用细胞生物学、遗传学、生物化学和分子生物学等多学科知识,通过体外操作细胞来改变生物体的遗传特性,以实现改良品种、生产生物制品等目的的一门综合性科学技术。
2. 细胞工程的主要技术有哪些?细胞工程的主要技术包括细胞培养技术、细胞融合技术、细胞核移植技术、基因转移技术等。
3. 什么是动物细胞培养?动物细胞培养是指在无菌条件下,将动物细胞从体内取出,放入含有营养成分的培养基中,使其生长和繁殖的过程。
4. 动物细胞培养的基本条件有哪些?动物细胞培养的基本条件包括无菌、无毒的环境,适宜的温度和pH值,充足的营养物质和生长因子,以及必要的气体环境。
5. 植物细胞培养与动物细胞培养有哪些不同?植物细胞培养与动物细胞培养的主要区别在于培养基的成分和配比,植物细胞培养需要更多的碳水化合物和植物激素,而动物细胞培养则需要更多的氨基酸和生长因子。
6. 细胞融合技术在哪些领域有应用?细胞融合技术在制备单克隆抗体、生产重组蛋白、研究细胞功能和遗传特性等方面有广泛应用。
7. 什么是细胞核移植技术?细胞核移植技术是指将一个细胞的细胞核移植到另一个去核的卵细胞中,使其重新获得全能性并发育成一个新的个体。
8. 基因转移技术有哪些方法?基因转移技术的方法包括显微注射法、电穿孔法、脂质体介导法、病毒载体法等。
9. 什么是基因编辑技术?基因编辑技术是指利用特定的酶或蛋白质,对生物体的基因序列进行精确的修改、插入或删除,以达到改变生物体性状或功能的目的。
10. 细胞工程在医学领域的应用有哪些?细胞工程在医学领域的应用包括组织工程、细胞治疗、基因治疗、药物筛选等。
细胞工程复习资料细胞工程复习资料细胞工程是一门研究利用生物技术手段改造和利用细胞的学科,是生物工程领域的重要分支之一。
它涉及到细胞的培养、分离、操纵和应用等方面,对于生物医学、药物研发、农业和环境保护等领域都具有重要意义。
本文将从细胞工程的基本原理、技术方法和应用领域等方面进行综述。
一、细胞工程的基本原理细胞工程的基本原理是通过改变细胞的遗传物质和表达谱,使其具备特定的功能或性状。
其中,基因工程技术是细胞工程中最常用的手段之一。
通过基因工程技术,可以将外源基因导入到目标细胞中,使其产生特定的蛋白质或表现出特定的性状。
例如,利用基因工程技术,可以将人类生长激素基因导入到大肠杆菌中,使其产生人类生长激素。
除了基因工程技术外,细胞工程还包括细胞培养、细胞分离和细胞操纵等技术。
细胞培养是指将细胞放置在适宜的培养基中,提供适当的营养物质和环境条件,使其在体外继续生长和繁殖。
细胞分离是指将混合的细胞群体分离成单个的细胞或纯化的细胞群体。
细胞操纵是指通过物理或化学手段对细胞进行操作,如细胞融合、细胞转染等。
二、细胞工程的技术方法细胞工程的技术方法主要包括基因工程技术、细胞培养技术和细胞操纵技术等。
基因工程技术是细胞工程中最重要的技术之一,它包括基因克隆、基因转染、基因敲除等多种方法。
基因克隆是指将特定的基因从一个生物体中复制出来,并导入到另一个生物体中。
基因转染是指将外源基因导入到目标细胞中,使其产生特定的蛋白质或表现出特定的性状。
基因敲除是指通过基因编辑技术,将目标基因从细胞中删除或失活。
细胞培养技术是细胞工程中最基础的技术之一,它包括细胞培养基的配制、细胞培养条件的优化和细胞培养设备的选择等方面。
细胞培养基是细胞培养的基础,它包含了细胞所需的营养物质和生长因子等。
细胞培养条件的优化是指通过调节培养基的成分和培养条件的控制,使细胞在体外获得最佳的生长和繁殖条件。
细胞培养设备的选择是指选择适合细胞培养的培养器具和设备,如细胞培养箱、生物反应器等。
细胞工程知识点汇总第一章细胞工程简介细胞工程(Cell engineering)是指主要以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型的一门综合性科学技术。
主要人物或事件:1)温特(Went)、高特里特(Gautheret)和诺比考特(Nobercourt)一起成为植物组织培养的奠基人。
2)1958年,史都华德和赖纳特发现胡萝卜体细胞可以分化成体细胞胚。
也即是说可以从细胞水平上到组织器官水平上的分化。
从而验证了细胞全能性学说。
3)1953年,沃森(Watson)和克里克(Crick)提出DNA双螺旋结构模型,标志着分子生物学诞生。
4)1997年,英国利用成年动物体细胞克隆出绵羊“多莉”,证明了高等动物体细胞的全能性,这是细胞工程历史上的一个里程碑式的成果。
细胞工程的应用(可出分析题)第二章细胞工程理论基础细胞全能性(totipotency):是指分化细胞保留着全部的核基因组,具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息具有发育成完整个体的潜能。
细胞分化:(理解)是指细胞在形态、结构和功能上发生差异的过程,包括时间上和空间上的分化和空间上的分化。
时间上的分化:是指一个细胞在不同的发育阶段可以形成不同的形态和功能空间上的分化:是指同一种细胞由于所处的环境或部位不同可以形成不同的形态和功能细胞分化能力的强弱称为发育潜能。
形态发生(Morphogenesis):是指通过细胞增殖、分化和行为塑造组织、器官和个体形态的过程。
细胞分化与形态发生是相互联系在起的。
细胞分化的实质:是奢侈基因按照一定顺序表达的结果,是基因的差异表达(Differential expression)脱分化(Dedifferentiation):又称去分化,是指分化细胞失去特有的结构和功能变为具有未分化细胞特性的过程,即分化的细胞在适当条件下转变为胚性状态而重新获得分裂能力的过程。
细胞工程复习资料一:名词解释(20分)细胞分化:是指发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化出形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程。
即由于细胞的分工而导致其结构和功能改变或发育方式改变的过程。
看护培养:配置好花粉粒悬液和固体培养基后,将完整的花药或花药愈伤组织置于琼脂培养基上,再将灭菌后的滤纸放在花药或愈伤组织上,然后再将欲培养的花粉置于滤纸上培养的方法。
细胞杂交:是指在人工控制条件下,不经过有性过程将不同类型的两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。
外植体:从植物体上分离下来的用于离体培养的材料。
人工种子:就是将离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。
花粉培养:又称小孢子培养,或游离小孢子培养,指在无菌条件下,将花粉从花药中分离出来使其成为分散或游离态,发育成单倍体植株的过程。
条件培养基:培养过程中,有些细胞可能会分泌活性物质到培养液中,这种培养过某种细胞以后,含有细胞分泌物的培养液称为条件培养基。
植物脱毒:利用物理、化学、生物学等方法除去寄生的病毒的无毒植物。
成批培养:将一定量的细胞或细胞团接种到一定容积的液体培养基中进行密封培养的方法。
体细胞杂交:又称原生质体融合,是指在人工控制条件下,不经过有性过程两种体细胞原生质体相互融合产生杂种细胞。
胚胎培养:是指在离体条件下使胚或具胚器官发育成幼苗的培养技术。
体细胞胚:又称胚状体,是指离体培养植物的体细胞,也可经胚胎发生过程形成在形态上与合子胚相似的结构,这种结构同样具有再生出完整植株的能力。
幼胚培养:是指处于原胚期、球形期、心形期、鱼雷期的胚培养。
互补选择:两个具有不同生理或遗传特性的亲本,在一定的培养条件下形成杂种细胞时能产生互补作用,根据这一特性进行杂种细胞选择的方法称为互补选择法。
悬浮培养:是指将游离的单细胞或小的细胞团,按照一定的细胞密度,悬浮在液体培养基中进行培养的方法。
细胞工程学复习题细胞工程学是一门综合性学科,涉及到细胞生物学、生物工程学和材料科学等多个领域的知识。
通过利用工程原理和技术手段,细胞工程学致力于研究和应用细胞的生物功能以及与之相关的工程应用。
以下是一些关于细胞工程学的复习题,希望能帮助你回顾和巩固相关知识。
1. 什么是细胞工程学?2. 细胞工程学的研究对象主要是哪些细胞类型?3. 请列举细胞工程学的主要应用领域。
4. 细胞工程学中常用的细胞培养技术有哪些?5. 什么是细胞培养基?它对细胞的生长和分化有什么影响?6. 细胞工程学中常用的细胞筛选技术有哪些?7. 请简要介绍细胞工程学中常用的细胞培养槽和生物反应器。
8. 什么是细胞培养的规模化生产?有哪些常用的规模化生产方法?9. 细胞工程学在组织工程和再生医学中的应用有哪些?10. 细胞工程学在药物筛选和药物递送系统中的应用有哪些?11. 请简要介绍细胞工程学在生物传感和生物芯片领域的应用。
12. 细胞工程学中常用的细胞植入技术有哪些?它们在治疗方面有何作用?13. 请简要介绍细胞工程学中常用的干细胞技术和基因工程技术。
14. 细胞工程学中的质量控制和质量保证措施有哪些?15. 细胞工程学的发展趋势和前景如何?以上是关于细胞工程学的一些复习题,希望能够帮助你进行知识回顾和巩固。
细胞工程学作为一门新兴的学科,其在医学、生物技术和生物工程领域的应用前景广阔,相信随着科学技术的不断进步,细胞工程学将会取得更加重要的突破和进展,为人类健康和福祉做出更大的贡献。
希望大家能够认真复习,掌握细胞工程学的基本理论和技术方法,为将来的学习和科研打下坚实的基础。
第一章细胞工程:是指以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
细胞工程的应用细胞工程是现代生物技术的基础。
细胞是大部分生命体存在的基本结构,而现代生物技术(如基因工程蛋白质工程等)无不是对细胞或细胞的物质进行改造而达到获取目的产物影响生物什么状态的目的,在这里,细胞都是这些技术开展的平台和基础。
第三章无菌技术灭菌方法:物理灭菌法、化学灭菌法、使用抗生素。
物理方法:干热、湿热、射线/微波/紫外线处理、过滤、离心沉淀、大量无菌水冲洗等。
化学方法:各种灭菌剂。
抗生素的使用:青霉素、链霉素、卡那霉素、制霉菌素等,主要用于细胞培养过程中。
细胞冷冻方法:1.缓慢冷冻法——将处于0°C或其他预处理温度的材料以1~2°C/min的降温速度从起始温度降到-100°C,稳定1h后投入液氮中保存或以此降温速度连续降温至-196°C。
按1mL每安瓿的量分装细胞悬液,在火焰下将安瓿封口。
将封口的安瓿放入慢冻机内,添加保护剂的细胞悬液按照一定梯度降低温度进行缓慢冷冻。
当温度在-25°C 以上时,可以按照1~2°C/min的梯度降温;当温度达-25°C以下时,可以按照5~10°C/min的梯度降温。
2.预冷冻法——包括两步冷冻、逐级冷冻两种,前者是将预处理后的材料先通过缓慢冷冻法降温至-40°C,保存一段时间(约30min)后,再投入液氮中保存。
后者将经过预处理的材料先制备成不同温度等级的溶液,如-10°C、-15°C、-23°C、-35°C及-40°C,并在每级温度中停留一定时间(4~6min),然后将材料投入液氮中保存。
3.快速冷冻法——将材料从0°C或者其他预处理温度直接投入液氮中保存。
生物工程复习第一讲一、模块:动植物人工繁殖技术、新品种培育技术、生物制品技术、干细胞与组织工程。
二、细胞工程(Cell engineering)是指主要以细胞为对象,应用生命科学理论,借助工程学原理与技术,有目的地利用或改造生物遗传性状,以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。
三、研究对象:动植物细胞(原生质体),也包括细胞器、染色体、细胞核、胚胎。
四、细胞工程研究内容:a)动植物快速繁殖:植物组织培养、人工种子、试管动物、克隆动物等。
b)细胞重组与新品种培育:细胞水平上的原生质体诱变、细胞融合技术;细胞器水平上的细胞重组;染色体水平上的多倍体、单倍体育种等。
c)细胞工程生物制品::以杂交瘤细胞培养大量制备单克隆抗体、动物细胞培养生产疫苗、转基因动植物生物反应器等。
d)细胞疗法与组织修复:利用培养的细胞或者离体再造的组织修复受损细胞、组织或器官的技术,属于细胞工程最新发展领域之一。
植物人工繁殖一、1.植物组织培养的理论基础是什么?a)细胞全能性。
二、2.植物经组织培养的再生途径有哪两种?a)器官发生途径:成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。
b)体细胞胚发生途径:成熟细胞→分生细胞→胚状体→完整植株。
c)概念:•体细胞胚(Somatic embryo)又叫胚状体,是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。
体细胞胚发生途径:是指体细胞在离体培养过程中经过了胚胎发育过程。
体细胞胚起源于非合子细胞,因此不同于合子胚。
三、3.激素在细胞分化中是如何调节器官分化?a)生长素主要用来刺激细胞分裂和诱导根的分化。
b)分裂素的生理作用主要是诱导芽的分化促进侧芽萌发生长、促进细胞分裂与扩大。
多用于诱导不定芽的分化和茎、苗的增殖,而在生根培养时使用较少或用量较低。
c)四、1。
细胞全能性、细胞分化与脱分化a)细胞全能性(totipotency):是指分化细胞保留着全部的核基因组,具有生物个体生长、发育所需要的全部遗传信息,具有发育成完整个体的潜能。
细胞工程第一章论绪1、细胞工程:按照一定的设计方案,通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作,获得重构的细胞、组织、器官及个体,创造优良品种和产品的综合性生物工程。
(1)分类a.按生物类型分为:动物细胞工程、植物细胞工程、微生物细胞工程b.按实验操作对象分为:细胞与组织培养、细胞融合、细胞核移植、染色体操作、转基因工程。
(2)操作水平:细胞整体水平或细胞器水平(3)目的:定向改变遗传物质或获得细胞产品(4)理论基础:细胞全能性(5)依据:生物体的每一个干细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质。
2、植物细胞工程包括:植物体细胞杂交、植物组织培养。
3、动物细胞工程包括:动物细胞融合、动物细胞培养、单克隆抗体技术、核移植、胚胎移植。
4、细胞工程研究内容(1)细胞与组织培养(离体培养):是细胞工程的最基本技术。
(2)细胞融合(细胞杂交):自然融合、人工诱导融合。
试管婴儿 单克隆抗体技术(3)细胞核移植:克隆羊多莉(4)染色体工程:多倍体育种(5)胚胎工程:以生殖细胞和胚胎细胞为对象,包括体外受精、胚胎移植、胚胎切割。
(6)干细胞与组织工程:胚胎干细胞、组织细胞。
人工培养的肌肉、器官。
5、细胞工程的应用:a.快速繁殖b.种苗脱毒c.动物胚胎工程快速繁殖优良、濒危品种d.利用动植物细胞培养生产活性产物、药品(生物反应器工程),如利用动物细胞融合形成单克隆抗体,利用植物细胞培养次生代谢产物。
e.新型动植物品种的培育f.供医学器官修复或移植的组织工程g.珍稀动植物资源的保存与保护h.在遗传学、发育生物学领域的理论研究第二章细胞全能性与形态发生1、名词解释:◆细胞全能性:细胞经分裂和分化后仍具有形成完整个体的潜能或特性。
❖极性:指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。
♦离体器官发生:培养条件下的组织或细胞团(愈伤组织)分化形成不定根、不定芽等器官的过程。
⌧细胞分化:导致细胞形成不同结构或引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。
生物细胞工程必背知识点生物细胞工程是一门综合性学科,涉及到细胞、生物学、生物化学、遗传学、工程学等多个领域的知识。
下面是生物细胞工程的一些必背知识点,供参考。
1.细胞结构:生物细胞工程要求对细胞的结构有深入的理解,包括质膜、核膜、线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器的形态和功能。
2.细胞生理过程:了解细胞的代谢、分裂、信号传导、蛋白质合成等生理过程。
包括细胞的呼吸、光合作用、三磷酸腺苷(ATP)合成等。
3.生物分子:了解细胞内的生物分子,包括蛋白质、核酸、碳水化合物、脂类等。
理解它们在细胞功能和代谢中的作用。
4.基因组学:了解基因组结构和功能,包括DNA序列、基因编码、DNA复制和转录等。
5.蛋白质工程:了解蛋白质的结构和功能,包括蛋白质的折叠、修饰、定位等。
掌握蛋白质工程的方法和技术。
6.遗传工程:了解基因的遗传规律和遗传变异的机制。
掌握基因工程的基本原理和技术,包括基因克隆、基因表达等。
7.细胞培养技术:了解细胞培养的基础知识,包括培养基的配方、细胞传代、细胞凋亡等。
掌握细胞培养的实验技术和设备操作。
8.细胞工程应用:了解细胞工程在医学、农业、环境保护等领域的应用。
包括组织工程、干细胞治疗、转基因植物等。
9.生物伦理学:了解生物伦理学的基本概念和原则,包括生物实验伦理、生命伦理等。
掌握生物实验的伦理标准和操作规范。
10.研究方法:了解常用的实验方法和技术,包括PCR、蛋白质电泳、免疫细胞化学等。
掌握实验的设计和数据分析的方法。
11.研究文献:了解生物细胞工程领域的前沿研究和重要文献。
掌握查阅文献的方法和技巧。
12.安全知识:了解生物安全的概念和方法,包括实验室安全、实验废物处理等。
掌握实验室安全规范和操作流程。
以上是生物细胞工程的一些必背知识点,但仅仅了解这些知识还不足以掌握生物细胞工程的实践操作和理论研究。
这些知识需要通过实验实践和阅读相关文献来加深理解和应用。
希望这些知识点对你有所帮助。
细胞工程学第三版知识点总结归纳一、细胞工程概述。
1. 定义。
- 细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。
2. 研究内容。
- 动植物细胞与组织培养,细胞融合(如植物体细胞杂交、动物细胞融合),细胞核移植,染色体工程,胚胎工程等。
3. 细胞工程的发展历程。
- 起步阶段:20世纪初,植物组织培养技术开始发展,Haberlandt提出细胞全能性概念,为细胞工程奠定了理论基础。
- 发展阶段:20世纪中叶后,植物细胞工程取得了一系列成果,如植物体细胞杂交等。
动物细胞工程也逐渐兴起,包括动物细胞培养技术的不断完善等。
- 现代细胞工程:随着基因工程等现代生物技术的发展,细胞工程与之相结合,在生物制药、动植物品种改良等多方面发挥着越来越重要的作用。
二、植物细胞工程。
1. 植物细胞的全能性。
- 概念:植物的每个细胞都包含着该物种的全部遗传信息,从而具备发育成完整植株的遗传能力。
- 实现全能性的条件:细胞处于离体状态、提供适宜的营养物质(如大量元素、微量元素、有机物等)、植物激素(如生长素和细胞分裂素的比例合适)、适宜的环境条件(温度、光照、pH等)。
2. 植物组织培养。
- 基本过程。
- 外植体选取:通常选择植物的幼嫩组织或器官,如茎尖、根尖、叶片等。
- 消毒:对外植体进行严格的消毒处理,以防止微生物污染。
- 接种:将消毒后的外植体接种到含有营养物质和植物激素的培养基上。
- 脱分化:外植体在适宜条件下形成愈伤组织,愈伤组织细胞的特点是排列疏松、无规则,是一种高度液泡化的薄壁细胞。
- 再分化:愈伤组织在一定条件下重新分化形成根、芽等器官,进而发育成完整植株。
- 培养基的组成。
- 大量元素:包括N、P、K、Ca、Mg、S等,提供植物生长所需的基本营养。
- 微量元素:如Fe、Mn、Zn、Cu、B、Mo、Cl等,虽然需求量少,但对植物生长发育不可或缺。
绪论一.细胞工程〔CellEngineering〕:〔定义〕是应用细胞生物学和分子生物学方法,借助工程学的实验方法或技术,在细胞水平上研究改造生物遗传特性和生物学特性,以获得特定的细胞、细胞产品或新生物体的有关理论和技术方法的学科。
分类〔包括〕:〔填空〕植物细胞工程和动物细胞工程植物细胞工程:〔定义〕以植物细胞组织为全然单位,在离体条件下进行培养、生殖或人为的精细操作,使细胞的某些生物学特性按人们的意愿发生改变,从而先进品种或制造新物种,或加速生殖植物新个体,或获得有用物质的过程。
动物细胞工程:〔定义〕是依据细胞生物学及工程学原理,定向改变动物细胞内的遗传物质从而获得新型生物或特种细胞产品的一门技术。
二.〔填空〕细胞学讲的提出:施旺,施莱登〔1838年〕三.1902年,Haberlandt提出了细胞全能性学讲。
第一章全然技术一.湿热灭菌:103-137kPa(121-126°C),15-30min.二.干热灭菌:利用烘箱加热到位60-180°C三.培养基全然成分:无机盐〔大量元素,微量元素〕,有机成分〔激素,植物生长调节剂〕,水常用有机成分:糖类〔蔗糖〕,维生素,肌醇,腺嘌呤,氨基酸激素:生长素〔根〕,细胞分裂素〔芽〕,赤霉素〔细胞伸长〕四.全然培养基种类:MS,B5,N6,White(P26)〔1〕高盐平衡培养基:MS培养基、LS培养基、BL培养基、BM培养基和ER培养基。
特点:无机盐浓度较高,元素间的比例适当,离子平衡性好,具有较强的缓冲性;营养丰富;微量元素种类全,浓度高。
〔2〕高硝态氮培养基:B5培养基,N6培养基及SH培养基等。
特点:硝酸钾的含量高,氨态氮的含量低,含有较高的盐酸硫胺素。
〔3〕中盐培养基:H培养基、Nitsch培养基、Miller培养基和Blaydes培养基。
特点:大量元素无机盐约为MS的一般,微量元素种类减少而含量增高,维生素种类比MS多。
〔4〕低盐培养基:White培养基、WS培养基、HE培养基、先进Nitsch培养基及HB培养基等。
特点:无机盐含量低,有机成分含量相对也特别低。
五.培养基配制:1000ml母液需100ml大量元素(10*),10ml微量元素(100*)……1培养基母液配制无机盐按大量元素、微量元素和铁盐3局局限不配制。
大量元素一般配制成〔10-20〕×母液,微量元素和铁盐那么配制成〔100-200〕×母液。
有机成分最好单独配制。
配好的母液需贮存于2-4℃冰箱中。
植物激素使用的浓度特别低,因此,一般分不配制成L浓度的溶液。
2培养基制备制备培养基时是依据实际需要配制,首先按大量元素、微量元素、铁盐及有机成分的顺序,依次吸取各母液的需要量,参加一适当体积的烧杯或其它配制培养基的容器中,再参加适当体积的蒸馏水,并称取相应量的蔗糖放进其中溶解,调节pH值,参加琼脂,加热使其完全融化,最后用蒸馏水定容并分装。
六.外植体:指用于离体培养的活的植物组织,器官等材料。
三种来源:1.生长在自然环境下的植物2.在温室操纵环境条件下生长的植物3.无菌环境下培养的植物〔最优〕。
第二章细胞全能性与形态发生一.细胞全能性:〔定义〕一个细胞所具有的产生完整个体的固有能力称之为细胞的全能性。
细胞全能性的表达是通过细胞脱分化和再分化实现的,在大多数情况下,脱分化是细胞全能性表达的前提,再分化是细胞全能性表达的最终表达。
二.细胞脱分化〔celldedifferentiation〕:〔定义〕培养条件下使一个已分化的细胞回复到原始无分化状态或分生细胞状态的过程确实是根基细胞脱分化。
分化细胞脱分化分生细胞再分化分化细胞静止细胞启动分裂是分化细胞成功脱分化的重要标志。
蛋白体的出现和细胞质密度增加被认为是细胞开始脱分化的标志。
三.细胞分化〔Differentiation〕:〔定义〕是指导致细胞形成不同结构,引起功能改变或潜在发育方式改变的过程。
四.极性〔polarity〕:〔定义〕是指植物的器官、组织、甚至单个细胞在不同的轴向上存在的某种形态结构以及生理生化上的梯度差异。
五.激素是离体培养条件下调控细胞脱分化和再分化的要紧因素。
先用生长素处理,后用细胞分裂素处理,有利于细胞分裂而不利于细胞分化;反之,那么有利于细胞分化。
要是两者同时处理,那么可促使分化频率的提高。
六.〔简答〕植物的离体器官发生:是指培养条件下的组织或细胞团〔愈伤组织〕分化形成不定根、不定芽等器官的过程。
不定根、不定芽:是指在一些非正常发生部位形成的根或芽,离体培养中通常是指从愈伤组织上发生的根或芽。
器官发生方式:1〕先芽后根:先分化芽,芽形成后,在芽的基部长出根进而形成完整植株。
2〕先根后芽:先分化根,再在根上产生不定芽进而形成完整植株。
3〕在愈伤组织的不同部位形成芽和根,再通过维管组织的联系形成完整植株。
七.愈伤组织:实质上是一团无序生长的细胞,这些细胞大多处于随机分裂的状态。
〔器官、组织培养时细胞分裂首先发生在伤口部位〕八.体细胞胚或胚状体〔定义〕:离体培养下没有通过受精过程,但通过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物〔不管培养的细胞是体细胞依旧生殖细胞〕,统称为体细胞胚或胚状体。
界定:1〕体细胞胚是离体培养的产物,只限于离体培养范围使用,以区不于无融合生殖胚。
2〕体细胞胚起源于非合子细胞,以区不于合子胚。
3〕体细胞通过了胚胎发育过程,以区不于离体培养中器官发生形成个体的途径。
研究体细胞胚的模式植物:胡萝卜。
九.体细胞胚的形成途径:〔简答〕1.体细胞胚从外植体上直截了当发生:诱导时期;胚胎发育时期2.间接发生:A.通过愈伤组织的体细胞胚的形成:诱导愈伤组织的形成→诱导愈伤组织胚性化→体细胞胚的形成2,4-D(浓度高)2,4-D(浓度低)2,4-D(浓度更低)B.通过悬浮细胞的体细胞胚的形成:诱导愈伤组织的形成→诱导愈伤组织胚性化→悬浮培养的胚性细胞团→体细胞胚的形成。
十.植株再生的两种方式:器官发生,体细胞胚发生。
第三章体细胞遗传变异一.体细胞无性系:由任何形式的细胞培养所产生的植株统称为体细胞无性系。
体细胞无性系变异:由体细胞无性系表现出来的变异。
从对生物遗传的碍事而言,细胞工程技术本身即包含了双重性:遗传稳定性和变异性。
二.离体培养中的遗传与变异特点:遗传稳定性;变异的普遍性;变异的局限性;嵌合性三.非遗传变异突变体的选择:〔1〕直截了担任择〔2〕间接选择:第四章植物组织细胞培养一.植物脱毒:利用植物组织培养技术脱出植物细胞中侵染的病毒,生产健康的生殖材料。
二.脱毒全然原理:病毒在植物体内的分布具有不均匀性。
三.脱毒苗制备流程:索取材料的病毒检测外植体的选择及预处理茎尖分生组织培养再生植株脱毒效果检测脱毒苗的保持与生殖四.〔填空、简答〕培养物的增殖方式:1.腋芽增殖2.不定芽增殖3.体细胞胚增殖4.愈伤组织增殖五.花药培养〔定义〕:把发育到一定时期的花药接种在人工培养基上,使其发育和分化成为植株的过程。
从培养类型来讲,花药培养仍然属于器官培养的范畴。
花粉培养〔定义〕:又喊小孢子培养,是从花药中不离除花粉粒,使之成为分散的或游离的状态,通过培养使花粉粒脱分化,进而发育成完整植株的过程。
花粉培养属于细胞培养的范畴。
花粉培养取材时期:四分体小孢子时期;花药培养取材时期:单核晚期,双核早期。
六.花药培养的全然程序:外植体选择—外植体预处理—外植体消毒—剥取花药—接种—诱导培养—分化培养。
七.花粉不离方法:〔1〕机械不离法:将花药置于盛有少量液体培养基或与培养基等渗的蔗糖溶液的培养皿中,用平头的玻璃棒或注射器内管轻轻挤压花药,使其散出花粉。
〔2〕花药漂移培养自然释放法:将通过一定时刻低温处理的花药,接种于液体培养基中,培养数天后,花药开裂,释放出花粉粒。
〔3〕磁拌法:将花药接种于含有液体培养基的三角瓶中,然后放进一根磁棒,置于磁力搅拌器上,低速转至花药呈透明状。
八.依据在培养中所取的外植体的部位不同,植物胚胎培养包括:胚培养,胚乳培养,胚珠培养,子房培养。
九.幼胚培养的要害技术:取材时期:多为球形胚至鱼雷形胚时期。
十.幼胚离体培养的常见的生长发育方式:胚性发育,早熟萌发,愈伤组织。
十一.悬浮培养:是细胞培养的全然方法,是将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。
应用:1.愈伤组织诱导:要求:松散性好、增殖快、再生能力强。
其外瞧一般是色泽鲜艳的乳白或淡黄色,呈细小颗粒状,疏松易碎。
诱导愈伤组织选择适宜的外植体:幼胚、胚轴、子叶是最常使用的外植体。
诱导愈伤组织选择适宜的培养基:较高浓度激素浓度;必要的附加物质。
2.悬浮系的建立与继代培养:一个成功的悬浮细胞培养体系必须满足三个条件〔简答〕:A.悬浮培养物分散性良好,细胞团较小,一般在30-50个细胞以下,在实际培养中特别少会有完全由单细胞组成的植物细胞悬浮体系。
B.均一性好,细胞外形和细胞团大小大致相同。
悬浮体系外瞧为大小均一的小颗粒,培养基清亮透亮,细胞色泽呈鲜艳的乳白色或淡黄色。
C.细胞生长迅速,悬浮细胞的生长量一般2-3天甚至更短时刻便可增加一倍。
3.悬浮细胞的生长动态:P89图5-6〔填空——五个时期〕延滞期,对数生长期,直线生长期,减慢期,静止期。
〔在减慢期进行继代培养〕4.悬浮培养细胞的同步化:细胞同步化:同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。
〔填空〕同步化的方法:分选法;饥饿法;抑制剂法;低温法P91十二。
单细胞培养方法:1、平板培养2、瞧护培养3、微室培养4、双层滤纸植板培养5、悬浮培养(简答)P86十三。
培养条件下的植物细胞次生产物积存特性:1.生长偶联型:产物合成与细胞生长成正比。
如长春花碱、烟碱的合成2.中间型:产物仅在细胞生长下落时合成,细胞处于指数生长期或停止生长产物都不合成。
如蒽醌类物质合成的植物细胞3.非生长偶联型:产物合成在细胞生长停止以后。
如紫草宁的合成。
第五章原生质体培养及杂交一.原生质体〔protoplast〕:除往细胞壁的裸露细胞。
二.原生质体的纯化方法:〔填空〕1、沉落法:甘露醇作渗透压调节剂,低速离心,原生质体沉落于管底。
2、漂移法:蔗糖作渗透压调节剂,离心,原生质体漂移于溶液外表。
3、梯度离心法:利用比重不同的溶液,离心,原生质体处在两液相的界面之间。
三.原生质体培养方法:〔P118〕1。
液体浅层培养2。
固体平板培养3。
固液双层培养4.琼脂糖珠培养〔摇床震荡〕5.悬滴培养法:在培养皿盖上滴悬浮液,皿底参加培养液,皿盖翻过来盖于皿底上,封口培养。
6.微滴培养法:悬浮液滴于皿底,封口培养。
7.饲养层培养法:又称瞧护培养。
先制备饲养层,再在其上培养有活力的原生质体。
四.原生质体活力测定方法:〔P114〕1.形态识不法2.荧光素双醋酸酯〔FDA〕染色法:有活力的原生质体产生绿色荧光。