生化检验中的定标
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精心整理定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)PS:A表示吸光度以K值就得到了其浓度值。
因此,KK值的决定因素:我们看看K值会受到什么影响呢?K值是准确的,用这K值的稳定性由仪器与试剂决定,多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值:一是计算出来的理论K值;K=(TV×1000)/(SV×L×ε)二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。
生化检验中的各种空白概念时间:2009-5-8 9:54:09,点击:?61 对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论(包括本论坛高手们发表的一些意见)并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充:2、样本空白:???由于溶血、脂血、黄疸等情况,会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。
所以对样本本身吸光度的测量,即样本空白,可以去除这方面的影响。
测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量。
自动生化仪上,很难界定样本空白。
生化定标及质控操作说明生化定标及质控操作说明1. 引言本文档旨在提供生化定标及质控操作的详细说明,以确保实验室能够正确进行定标和质控工作,保证测试结果的准确性和可靠性。
2. 定标操作2.1 准备材料- 生化定标试剂盒- 样本- 定标曲线试剂- 定标曲线标准品2.2 实验操作步骤2.2.1 准备定标曲线- 使用定标曲线试剂与定标曲线标准品按照试剂盒说明书进行稀释。
- 取不同浓度的定标曲线标准品,将其按照试剂盒说明书分别加入到不同的孔中。
- 使用微量定标仪读取各个浓度的吸光度值。
2.2.2 定标操作- 取适量的样本,将其加入试剂盒中。
- 按照试剂盒说明书将所有试剂按顺序加入到样本中。
- 使用适量的定标曲线试剂对样本进行定标。
- 使用微量定标仪测量样本的吸光度值。
3. 质控操作3.1 准备质控样本- 准备不同浓度的质控样本。
- 使用相同的操作步骤和试剂对质控样本进行定标。
3.2 质控分析- 每次进行测试之前,使用质控样本进行验证,确保仪器的准确性。
- 将质控样本加入到测试中,并记录各个质控样本的测试结果。
- 分析质控样本的结果,判断测试的可靠性和准确性。
4. 附件- 附件1:生化定标试剂盒说明书- 附件2:定标曲线标准品浓度表5. 法律名词及注释- 定标:根据已知浓度的标准溶液制作的浓度与光度曲线之间的关系,在样本中确定所测物浓度的方法。
- 质控:使用已知浓度的样本或标准品对仪器和测试方法进行验证,确保测试结果的准确性和可靠性。
定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准-A试剂空白) PS:A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。
任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。
K值的决定因素:我们看看K值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。
第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K 值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。
K值的真面目:K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值:一是计算出来的理论K值;K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。
生化检验中的定标集团标准化办公室:[VV986T-J682P28-JP266L8-68PNN]定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。
K 值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)PS:A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。
任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。
K值的决定因素:我们看看K值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。
第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。
K值的真面目:K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值:一是计算出来的理论K值;K=(TV×1000)/(SV×L×ε)二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。
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它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准-A试剂空白) PS:A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。
任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。
K值的决定因素:我们看看K值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。
第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K 值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。
K值的真面目:K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值:一是计算出来的理论K值;K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。
定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准-A试剂空白) PS:A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。
任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。
K值的决定因素:我们看看K值会受到什么影响呢?第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。
第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的?一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。
K值的真面目:K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适?这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值:一是计算出来的理论K值;K = (TV × 1000)/(SV ×L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。
生化检验中的定标 Document number:PBGCG-0857-BTDO-0089-PTT1998定标的意义:定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准-A试剂空白) PS:A表示吸光度标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。
任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。
K值的决定因素:我们看看K值会受到什么影响呢第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。
第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。
K值的真面目:K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值:一是计算出来的理论K值;K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。
定标的意义:
定标就是要找出一个参考点,就是一个K值(或F值)。
它是由仪器与试剂共同确定下来。
当我们测定一个标本时,无论是手工或全自动生化分析仪,测出来的值只是一个吸光度,这个吸光度对我们没有什么意义,我们要把这个吸光度转化成一个浓度或是酶的活性,那就要乘上一个K值,计算出来的结果对我们就有意义了。
K值就是我们通过定标找出来的。
一般来说测定K值的最低要求是用标准品和试剂空白来测定,经过仪器测定出这两个吸光度,即标准品的吸光度和试剂空白的吸光度。
K=标准浓度/(A标准-A试剂空白) PS:A表示吸光度
标准液的浓度我们是知道的,这两个吸光度可以由仪器测出,这样就得出一个K值。
任何标本,用其吸光度乘以K值就得到了其浓度值。
因此,K值具有非常决定性的意义,可以决定标本的准确性。
K值的决定因素:
我们看看K值会受到什么影响呢?
第一,标准液的浓度一定要准确(标准液最好与标本一样是以血清为基质的)。
第二,标准液的吸光度与试剂空白的吸光度一定要准确。
吸光度受仪器、试剂的影响,如果仪器稳定,试剂也稳定,那K值就稳定。
仪器和试剂是影响K值的主要因素。
如何确定K值是准确的?
一般我们用质控血清来检查,最好是两种水平的质控来检查,如果质控结果很好,可以说K 值是准确的,用这个K值计算出来病人的结果也是准确的,所以K值非常关键。
K值的真面目:
K值实际上代表了斜率,截距代表试剂空白,试剂空白每天都在变化,所以K值的稳定性由仪器与试剂决定,如果仪器与试剂都十分稳定,那K值也很稳定。
多长时间定一次标合适?
这要看您试剂的稳定性,质控结果不好,有些项目做试剂空白可以解决,有些项目要做两点定标。
酶的项目如何确定K值:
一是计算出来的理论K值;
K = (TV × 1000)/(SV × L × ε)
二是用有酶项目的定标液得出K值(K=标准浓度/(A标准-A试剂空白)):目前各公司可以提供多项目的定标液,不仅有底物类的项目,也有酶类的项目。
生化检验中的各种空白概念
时间:2009-5-8 9:54:09,点击:61 对所谓"试剂空白""样本空白""水空白""杯空白"等"空白"名词,有些同行可能感到困惑.特此汇集了一下各种言论(包括本论坛高手们发表的一些意见)并结合自己的理解,总结如下,希望大家指正和补充:
空白概念区别要点:**空白=只含**的空白(只含**的吸光度)
1、试剂空白:
由于生化测试测量的吸光度为相对吸光度,所以从理论上说,所有终点法的测试都需要把试剂本身的吸光度扣除,试剂本身的吸光度就是试剂空白。
测量方法是按照正常测试的试剂和样本量,把样本换成蒸馏水来测量。
在传统手工方法中,每次测定都要做至少三个管:测定管、标准管、空白管。
其中空白管是试剂加蒸馏水,测出来也就是试剂空白。
因为操作环境、仪器状态、试剂稳定性等变异,所以要求每次都要测定试剂空白,称为实时试剂空白。
在全自动分析仪上,大体上是模拟手工操作。
但许多全自动分析仪为追求速度,在设计上采用一些折中方法来测定试剂空白。
以日立全系列生化仪为例。
该系列分析仪是做不了实时试剂空白,因为它们全是先加入样本后加试剂,为了折中,只好在定标时做一个试剂空白,保存起来,需要扣除试剂空白时再减这个预先保存的值。
这种做法,对于比较稳定的试剂来讲,对结果影响不大。
通俗的讲,日立的仪器工作流程中首先是将标本加入到比色杯中,然后依次加入R1
试剂、R2试剂,所以试剂空白在每个测定项目曲线中是无法看到的。
但是7170从CALIBRATION 中是可以看到的,S1ABS就是代表试剂空白吸光度,在CALIBRAT ION画面里的下方找到Reaction Monitor(反应监察),其中STD(1)就是代表试剂空白反应曲线.为了减小误差,日立仪器会连续做两次测定,所以你看到 FIRST和SECOND两条,计算时是取他们的平均值。
做试剂空白目的之一就是观察试剂是否稳定,积极采取措施纠正。
对于日立的这种试剂空白测定很多仪器都采用这种方法,也叫做试剂空白校准。
总的说来,自动生化仪上的试剂空白一般表现为零点吸光度,该吸光度是通过校准确立的。
2、样本空白:
由于溶血、脂血、黄疸等情况,会导致样本本身的吸光度对测试结果造成影响。
所以对样本本身吸光度的测量,即样本空白,可以去除这方面的影响。
测量方法是按照正常测试的试
剂和样本量,把试剂换成蒸馏水或生理盐水来进行测量。
自动生化仪上,很难界定样本空白。
消除样本空白有关的大约有如下几点:
a).在双试剂测定时,加入试剂1和样品后的吸光度可一定程度上扣除样本空白,所以有单试剂不能扣除样本空白的说法。
b).现在优质的试剂的抗干扰能力都比较强,比如有些双试剂,R1加入后先和样本孵育一段时间,将血红蛋白、脂肪、胆红素等反应掉,再加入R2开始测定反应。
在一定范围内都可以消除样本空白。
c).现代全自动生化仪大多采用双波长测定.双波长测定的原则是根据干扰组分和待测物质吸收光谱的峰形特征,选择两个波长和,使干扰组分在这两个波长处的吸光系数相等,而使待测物质在两波长处的吸光系数有显著差别。
以两波长分别测定分析溶液的吸光度,以两个吸光度值之差(△A)计算。
这也可以扣除一部分样本空白.
d).有些仪器,例如日立系列,有专门的“血清信息”功能的设置。
做法都是单独占用一个空白通道来计算,这也叫做样品空白校准。
3、水空白:
比色杯在加入水以后的吸光度。
水空白的意义主要是对光路系统进行检查和校正,如光源,比色杯等,同时在计算中起到消除“杯差”的作用。
日立7060中的Cell Blank(杯空白)测定的就是水空白。