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江苏农业学报(Jiangsu J.qfAgr.Sci.),2020,36(6)：1551~1558http：//1551吴海霞，田志芳.银杏果实(白果)多糖提取工艺优化及其抑菌活性分析[J].江苏农业学报,2020,36(6)：1551-1558.doi：10.3969/j.issn.1000-4440.2020.06.027银杏果实(白果)多糖提取工艺优化及其抑菌活性分析吴海霞1,田志芳2(1.运城学院生命科学系/特色农产品加工山西省重点实验室，山西运城044000； 2.山西省农业科学院农产品加工研究所,山西太原030031)摘要：以银杏(Ginkgo biloba L.)果实(白果)为原料，利用响应面分析法优化白果多糖的提取工艺，并分析白果多糖的抑菌活性。
以多糖得率为指标，通过单因素试验及响应面分析，探讨液料比、提取温度及提取时间等因素对白果多糖得率的影响，从而建立白果多糖的提取工艺模型,得出其最佳提取工艺条件;结合牛津杯法及二倍稀释法,分析白果多糖的抑菌活性及最小抑菌质量浓度。
结果表明，白果多糖的最佳提取工艺条件如下:液料比45ml: 1g,95t浸提3.Oh,在该条件下多糖得率为19.67%。
抑菌试验结果表明，白果多糖对细菌有一定的抑制活性，对枯草芽抱杆菌(Bacillus subtilis)的抑制活性最强，最小抑菌质量浓度为2.50mg/ml;白果多糖对大肠杆菌(Escherichia coli)的抑制活性也较强，当白果多糖质量浓度为15.00mg/ml时，抑菌圈直径约为2.25cm；白果多糖对真菌几乎无抑制活性,因而不具有广谱抑菌活性。
关键词：银杏果实(白果)；多糖；响应面分析；抑菌活性中图分类号：S792.950.1文献标识码：A文章编号：1000-4440(2020)06-1551-08Optimization of extraction technology of polysaccharides from Ginkgo biloba L.fruit(Ginkgo biloba seed)and antibacterial activityWU Hai-xia1,TIAN Zhi-fang2(1.Department of Life Science,Yuncheng University/Shanxi Key Laboratory qf Characteristic Agro-Products Processing,Yuncheng044000,China； 2.Institute of Agro-Products Processing,Shanxi Academy of Agricultural Sciences,Taiyuan030031,China)Abstract:Ginkgo biloba seed was used as raw material,the conditions of extracting polysaccharides were optimized based on response surface method(RSM),and the antibacterial activity was studied.The yield of polysaccharide was used as the index,single factor tests and RSM were performed to study the effects of liquid-to-solid ratio,extraction temperature and extraction time on polysaccharide yield.The mathematical model of polysaccharides extraction was established,and the optimum extraction conditons were obtained.The antibacterial activity and minimum inhibitory concentration of polysaccharides were analyzed by Oxford cup method and double dilution method.The results showed that the optimum extraction con-收稿日期：2020-05-18基金项目：山西省高等学校科技创新项目(2019L0865)；山西省“1331”工程重点学科项目(098-091704)；运城学院博士科研启动项目(YQ-2017010)；运城学院学科群学科研究项目(XK-2018001、XK-2019034)；特色农产品加工山西省重点实验室开放课题项目；山西省重点研发计划重点项目(201903D211006)作者简介:吴海霞(1980-),女，山西河津人,博士，副教授，主要研究方向为植物活性成分及其构效关系。
银杏叶多糖提取、纯化及其含量的测定【摘要】目的研究银杏叶多糖的提取纯化及含量测定。
方法通过对不同的提取次数、固液比及提取时间等实验，以及对粗多糖纯化的研究，确立各因素条件，采用苯酚-硫酸法测定其多糖含量。
结果各因素条件为浸提温度80℃，提取时间3 h，固液比1∶30，提取2次，用活性炭纯化。
由此得银杏叶中粗多糖的得率为12.2%，纯化后的多糖得率为9.8%。
测定提取的粗多糖中多糖含量为35.7%，纯化后的多糖含量为43.3%，多糖含量测定相对标准偏差小于3.0%。
结论该方法纯化效果好，测定重现性好，得出银杏叶中多糖含量为4.3%。
【关键词】银杏叶多糖提取纯化多糖测定Abstract:ObjectiveThe extraction and purification methods for polysaccharide in Gingko leaves were studied and the content of polysaccharide in it was determined.MethodsThe condition of each factor for extraction and pruification from the leaves of Gingko was established through the experiments of extraction times， different ratios of material to extraction solvent and extraction time.The method of phenol-sulfuric acid was applied to determination of the content of the polysaccharide.ResultsThe conditions of the factors were extraction temperature 80℃，extraction time 3h，material to extraction solvent1:30 ，extraction 2 times and activated carbon for purification.Raw polysaccharide in gingko leaves was 12.2%，the polysaccharide after prurified was 9.8%， the content of polysaccharide in the raw polysaccharide was 35.67%，and in the pure one was 43.32%，ConclusionThe purification method is efficient and stable. The content of polysaccharide in gingko leaves is 4.3%.Key words:Ginkgo leaves； Polysaccharide； Extraction；Purification； Determination of polysaccharide多糖又称多聚糖（polysaccharide），是构成生命活动的四大基本物质之一，不仅是机体主要供能物质，同时还具有多种多样的生物学功能，在生命活动中参与了细胞的各种活动。
银杏叶多糖的分离纯化及鉴定
黄桂宽;李毅
【期刊名称】《中国生化药物杂志》
【年(卷),期】1996(017)004
【摘要】银杏叶经水提、醇沉等得到银杏叶多糖（ＬＧＢＰ）。
将ＬＧＢＰＨＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００层析柱，分离得到ＬＧＢＰ－Ａ和ＬＧＢＰ－Ｂ两种多糖，经电泳与凝胶柱柱层析鉴定均为单一多糖。
平均分子量分别为１１×１０＾４和２×１０＾４。
经纸层析与高效液相色谱证实其单糖组成分别是：ＬＧＢＰ－Ａ：Ｄ－葡萄糖，Ｌ－鼠李糖、Ｄ－木糖；ＬＧＢＰ－Ｂ：Ｄ－葡萄糖。
【总页数】3页(P157-159)
【作者】黄桂宽;李毅
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R914.1
【相关文献】
1.银杏叶水溶性多糖的分离、纯化、初步鉴定及活性研究 [J], 杨静峰;张旭;梁忠岩;张丽霞
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4.胶红酵母Rhodotorula mucilaginosa CM-1菌株的鉴定及胞外多糖的分离纯化[J], 马文锦;李梅林;王博;周彦兵;张永显;于长青;彭涛
5.植物多糖提取、分离纯化及鉴定方法的研究进展 [J], 陈红;杨许花;查勇;宋礼;高丹丹
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银杏中有效成分的提取与纯化随着人们健康意识的不断提高和科学技术的不断发展，对于中药材中的有效成分提取和纯化越来越受到研究者的重视。
银杏是一种常见的中药材之一，它具有丰富的营养价值和多种医疗作用，其中的有效成分有提高脑功能、降低血脂、抗氧化等作用。
因此，银杏中有效成分的提取与纯化一直是研究者关注的重点问题。
一、银杏中的有效成分银杏叶中含有可溶性和不溶性两种有效成分。
其中可溶性成分包括银杏酚酸和儿茶酚类物质，不溶性成分主要是酯类和糖类物质。
银杏酚酸是银杏叶中最主要的有效成分。
它具有很强的抗氧化作用，对于抵御自由基的侵害具有非常重要的作用。
此外，银杏叶中的儿茶酚类物质也具有一定的抗氧化作用，对于保护人体细胞的健康有一定的帮助。
二、银杏中有效成分的提取方法目前，银杏中有效成分的提取主要有以下几种方法：1.传统水煎法：将银杏叶粉末与水混合，然后煮沸，使银杏叶中的有效成分溶解于水中。
这种方法提取效率相对较低，但是操作简单、成本低，适用于家庭或小规模生产。
2.超声波提取法：将银杏叶粉末与水混合后，利用超声波进行振荡，可以有效地提取银杏叶中的有效成分。
这种方法提取效率比传统水煎法高，但是设备成本较高，适用于中小规模生产。
3.微波辅助提取法：将银杏叶粉末与溶剂混合后，利用微波进行辅助提取，能够快速高效地提取银杏叶中的有效成分。
该方法提取效率最高，但是操作复杂、设备成本较高，适用于大规模生产。
三、银杏中有效成分的纯化方法在提取出银杏叶中的有效成分之后，还需要对其进行纯化处理，才能够得到高品质的银杏营养素制品。
常见的银杏中有效成分的纯化方法主要有以下几种：1.溶剂沉淀法：将银杏中的水溶性成分与有机溶剂混合后，通过冷却或加热使溶剂中的成分沉淀出来，再进行过滤或离心分离，得到高纯度的有效成分。
2.分子筛吸附法：将银杏中有效成分溶于稀酸中后，通过分子筛吸附作用提取出有效成分，并进行洗脱和干燥等处理，得到高纯度的有效成分。
3.色谱层析法：通过色谱技术将银杏叶中的有效成分进行分离纯化，具有高效、高分离度、高纯度等优点，是目前最常用的有效成分纯化方法之一。
判断银杏多糖提取工艺的优良,可以从以下几个方面考虑: ①银杏多糖的得率。
②所提粗银杏多糖的含糖量。
③整个工艺流程是否经济。
④保持所提的银杏多糖具有活性。
1 水煮醇沉法多糖的提取通常采用水煮醇沉的常规方法。
银杏(包括银杏叶、白果和外种皮)中多糖提取一般先用石油醚脱脂，再经热水提取乙醇沉淀得多糖。
多糖加水复溶，透析去除小分子化合物，再去蛋白、醇沉可得粗多糖。
1.1银杏多糖的提取100g烘干粉碎银杏叶于索氏提取器中用石油醚(沸程30～60℃和60～90℃)连续抽提至无色[2]，风干后分三次加入3000ml 水，90℃浸提6h。
合并滤液，90℃恒温蒸发浓缩至过滤液原体积的30%。
浓缩液3000r/min 离心15min，上清液加入3 倍体积95% 乙醇沉淀多糖。
多糖沉淀加水复溶，透析、S e v a g 法去蛋白。
样液再以4倍体积9 5 % 乙醇沉淀多糖，最后经无水乙醇脱水，丙酮、乙醚洗涤，得灰白色银杏叶多糖粉末S e v a g 法去蛋白法操作步骤：取干燥银杏粗多糖6份，每份10g,加入10ml蒸馏水溶解，配置成溶液。
按氯仿：正丁醇为5：1配置S e v a g,试剂，多糖溶液与S e v a g,试剂按5：1混合后，剧烈震荡20min,使蛋白质变质而生成凝胶物，2000r/min离心10min中后除去两相界面处的蛋白质。
分别操作0 1 2 3 4 5次，收集上层滤液，用乙醇醇沉至含水量为80%，4℃静置24小时后，离心收集沉淀，真空干燥，即得到去蛋白后的银杏多糖。
1.2不同溶剂提取银杏多糖的比较称取处理的当归20 g 3份,分别加入溶剂0. 3 mol/L的盐酸、0. 3 mol/L的氢氧化钠,蒸馏水各10 mL,浸泡1. 5 h,于恒温水浴下回流1. 5 h,提取2次,过滤,合并滤液离心,取上清,减压浓缩至30 mL ,加95%的乙醇使最终乙醇浓度为75% ,静置一夜,抽滤取沉淀,将沉淀用无水乙醇,乙醚,丙酮洗涤,干燥得银杏多糖粗品。
银杏果实多糖的提取工艺摘要：银杏果含有多种微量元素和营养物质，既可药用，又可食用，可以有效疏通血管，促进体内代谢，美容养颜。
国内外研究人员大部分都在对银杏果的其他成分进行研究，银杏果实多糖的报道相对来说较少。
本论文以银杏果实为原料，借用蒽酮硫酸比色法进行银杏果实多糖含量测定，来确定热水浸提法是否能够更好的提取银杏果多糖。
对具体研究的结果进行了简单的论述：通过采取实验法，即单因素法，从中得出水浴温度和料液比以及浸取时间的最佳提取量范围，经过调整单因素，控制其他变量，最终得出结论。
关键词：银杏果实；提取多糖；蒽酮硫酸比色法；正交试验1 引言银杏果的价值一直被人们所重视，这也将银杏果的有效成分慢慢地被大家看见，而银杏果实中的多糖，也被研究员们发现，银杏果中的多糖为酸性多糖，并不是“白果有毒”的凶手，它没有细胞毒性，也具有植物多糖的免疫调节、抗氧化、抑菌等药理活性。
水提法是传统提取植物多糖的首选方法，但是该方法的提取率较低，为了克服这个缺点，逐渐也产生了酶解提法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法、超临界萃取法等新型提取技术。
本课题以银杏果为原材料，借助蒽酮硫酸比色法进行多糖含量测定，经过单因素试验、正交试验，目的是为了确定热水浸提法提取白果多糖的最佳工艺。
2 相关概述2.1 银杏果简介银杏(Ginkgo biloba)属银杏科银杏属裸子植物。
自古，就被视为珍贵树种，并在我国大范围推广种植,其产量占全世界的70%。
之所以称其为珍贵树种，是因为它用途广泛，不仅可以作为食品、药材、木材、化妆品等原料，发挥其经济功能，而且可以美化环境，发挥其生态功能，同时也具有极高的观赏价值。
现代银杏树的分布主要靠人工栽培、人工移植，我国是最大的栽植培育基地。
其他国家归根究底都是从中国移植得银杏树种。
目前已知有银杏树分布的国家有日本，加拿大，俄罗斯，朝鲜，美国等。
因为银杏树生长本需要土壤等其他外界环境因素，所以在我国种植银杏树的地方都集中在广西柳州，安徽砀山、山东临沂，江苏邳州以及浙江等地。
银杏多糖的提取与抗氧化活性研究随着人们对健康意识的提高，寻求食品中营养的方法正变得越来越流行。
寻求天然物质潜在健康效益的方法已成为许多研究人员的热门方向。
银杏多糖是一种营养成分，近年来受到越来越多的研究关注。
本文将探讨银杏多糖的提取方法和抗氧化活性研究。
银杏多糖的提取方法银杏多糖是一种由多种单糖组成的多糖类物质。
多糖类物质因结构复杂，提取困难，使银杏多糖的提取成为研究的难点之一。
幸运的是，许多研究已经开发出了有效的提取方法。
水提取法是当前最常用的银杏多糖提取方法之一。
在水下加热、搅拌和超声波等条件下，银杏叶片和其他部位的粉末可以被高效提取出来。
给水基质添加离子液体也是一种提取银杏多糖的方法。
离子液体能够形成有利于银杏多糖提取的介质环境并提高提取率。
另一种常用的提取方法是酶解法。
利用酶解方法可获得较高纯度的银杏多糖。
酶解剂作为一种降解分子结构的酶，较为特异性地针对链胡萝卜素等，具备选择性和高效性。
酶解法根据研究机构不同，可采用弱碱性、多酶、高温、超声波等条件，同时可通过酯化等化学修饰手段，实现打开或拆分银杏多糖的链式结构，使其性质和用途更多样化。
抗氧化活性的研究许多研究已经证明，银杏多糖中含有大量的多糖类物质，且这些多糖类物质具有很强的抗氧化活性。
这一发现提示着银杏多糖的潜在增强健康和预防疾病的效益。
近年来，有数不清的研究证实了银杏多糖的抗氧化活性，并推测了其对有害细胞和慢性疾病的保护作用。
实验表明，银杏多糖可以通过增强人体免疫系统的功能来保护人体健康。
多项研究发现，银杏多糖有着可以增加白细胞数量的效果，这有助于预防各种器官感染和疾病发生。
抗氧化能力已证实为保护人类健康的重要因素之一。
抗氧化效应可以通过银杏多糖的多糖成分来实现。
银杏多糖可以通过消除自由基等方式，减轻慢性疾病或衰老因素引起的细胞氧化损伤。
在多项相关研究中也发现，银杏多糖能够通过保护DNA修复过程和恢复基因表达，来保障细胞稳健的自我修复功能。
