动物实验的基本技术和方法 完
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第二章动物实验的基本操作与技术动物实验方法是多种多样的,在医学的各个领域内都有其不同的应用,其中一些基本方法都是共同性的,如动物的选择、抓取、固定、麻醉、脱毛、给药、采血、采尿、急救、处死、尸检等,不管是从事何种课题的医学研究都要用这套基本方法,因此,动物实验基本方法,已成为医学科技工作者必须掌握的一项基本功。
第一节实验动物的抓取固定方法一、小鼠抓取固定方法小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤(见图2-1之一),将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可(图2-1之二)。
有经验者可直接用左手小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。
这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。
如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时,则需将小鼠作一定形式的固定,解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位(必要时先行麻醉),再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。
尾静脉注射时,可用小鼠尾静脉注射架固定(图2-2),先根据动物大小选择好合适的固定架,并打开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动物头对准鼠筒口并送入筒内,调节鼠筒长短合适后,露出尾巴,固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。
图2-1 小鼠的抓取固定方法图2-2 小鼠尾静脉注射方法二、大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取方法基本同小鼠,只不过大鼠比小鼠牙尖性猛,不易用袭击方式抓取,否则会被咬伤手指。
抓取时为避免咬伤,可带上帆布手套。
如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时,同样可采用左手固定法,只是用拇指和食指捏住鼠耳,余下三指紧捏鼠背皮肤,置于左掌心中,这样右手即可进行各种实验操作。
也可伸开左手之虎口,敏捷地从后一把抓住。
若做手术或解剖等,则需事先麻醉或处死,然后用细棉线绳活结缚腿,背卧位绑在大鼠固定板上;尾静脉注射时的固定同小鼠(只需将固定架改为大鼠固定盒)。
动物实验的基本操作技术实验报告实验报告一、实验目的1.学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术2.掌握健康小鼠的外观检查方法、性别鉴定、捉拿和固定方法、小鼠灌胃给药与小鼠腹腔注射给药等技术3.掌握小鼠颈椎脱臼法处死方法、小鼠脏器系数的概念及其测定方法、病理学意义4.熟悉小鼠的标记、小鼠解剖步骤及正常脏器观察5.了解实验动物的被毛去除方法、实验动物粪、尿的收集、小鼠血液样本采集方法二、实验材料和器材1.动物:小鼠2.器材:鼠笼、天平、注射器、灌胃针、止血钳、手术剪、平皿、托盘、烧杯若干。
三、实验方法1.对小鼠进行观察观察的指标主要包括:小鼠的体型、发育情况;毛发是否清洁浓密有光泽,是否顺贴不蓬乱;行动是否迅速,反应是否灵敏;眼睛是否明亮有神,瞳孔是否清晰等圆;天然孔道是否干净、有无分泌物。
2.小鼠的捉拿右手提起鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉,小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。
此时迅速用左手拇指和食指捏任小白鼠颈背部皮肤,并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部,固定于手中。
3.小鼠性别鉴定主要观察肛门与生殖器之间的距离。
雄性大鼠的距离较大,雌性的距离较小,且成年雄鼠尾部可见睾丸,成年雌鼠可见乳头。
4.小鼠称重打开电子天平,待读数显示稳定后,将平皿置于天平上,去皮;将小鼠置于平皿中,待读数显示稳定后,读数得25.95g。
5.小鼠灌胃1)准备灌胃针头,将注射器针头拔下,更换为灌胃针头;根据小鼠的体重,按0.1ml/10g 灌胃量计算:V=25.950*0.1/10=0.26ml用注射器取0.26ml液体(自来水);2)按“三-2-1)”的方法抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线;3)灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后即可推注药液,然后原方向将灌胃针抽出。
6. 腹腔注射1)吸取液体(自来水),将针头向上,吸取一段气体后,再缓慢排除气体,以达到取出气泡的效果。
实习二动物实验的基本操作技术一、实训目的:掌握常用实验动物的捉拿、保定方法,为临床诊疗工作打下基础。
二、器材准备:灌胃导管,一次性注射器,小鼠灌胃器,药勺,酒精棉球,脱脂棉,生理盐水,实验动物(家兔、小白鼠)三、方法步骤1、兔的捉拿和保定方法:连同耳部抓取兔颈背部毛皮一起提起,然后用另一只手托住兔臀部使其体重主要落在这只手上。
兔一般不咬人,但其爪锐利,当挣扎时,极易抓伤操作人员,故应防避其四肢的活动。
另外,不能只提兔双耳或双后腿,也不能仅抓腰、提背部皮毛,以避免造成耳、肾、颈椎的损伤或皮下出血.麻醉后的兔的保定一般采用盒式保定架或台式保定架,这类保定方法适用于采血、注射、外科手术等。
绑缚兔四肢时,应将粗棉带打成活结,不能系死结,以免在紧急情况下迅速松绑困难,造成动物四肢骨折或其它部位的损伤。
上图家兔抓取方法中,1、2、3均为不正确的抓取方法(1.可损伤两肾,2.可造成皮下出血,3.可伤两耳),4、5为正确的抓取方法。
颈后部的皮厚可以抓,并用手托兔体。
附:毛巾保定法(1)将兔置于一条大毛巾的中央,用毛巾的一角确实地裹住兔的颈部和一条前腿,用毛巾的另一角再确定裹住兔。
只把头留在外面2.小鼠的捉拿、保定捉拿小鼠的方法是,从笼盒内将小鼠尾部捉住并提起,放在笼盖(或表面粗糙的物体)上,轻轻向后拉鼠尾,在小鼠向前挣脱时,用左手(熟练者也可用同一只手)拇指和食指抓住两耳和颈部皮肤,无名指、小指和手掌心夹住背部皮肤和尾部,并调整好动物在手中的姿势。
这类捉拿方法多用于灌胃以及肌肉、腹腔和皮下注射等。
如若进行心脏采血、解剖、外科手术等实验时,就必须要固定小鼠。
使小鼠呈仰卧位(必要时先进行麻醉),用橡皮筋将小鼠固定在小鼠实验板上。
如若不麻醉,则将小鼠放人保定架里,固定好保定架的封口。
注意事项:抓取实验动物时注意安全,不要被动物咬伤。
实验报告一、实验目的1.学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术2.掌握健康小鼠的外观检查方法、性别鉴定、捉拿和固定方法、小鼠灌胃给药与小鼠腹腔注射给药等技术3.掌握小鼠颈椎脱臼法处死方法、小鼠脏器系数的概念及其测定方法、病理学意义4.熟悉小鼠的标记、小鼠解剖步骤及正常脏器观察5.了解实验动物的被毛去除方法、实验动物粪、尿的收集、小鼠血液样本采集方法二、实验材料和器材1.动物:小鼠2.器材:鼠笼、天平、注射器、灌胃针、止血钳、手术剪、平皿、托盘、烧杯若干。
三、实验方法1.对小鼠进行观察观察的指标主要包括:小鼠的体型、发育情况;毛发是否清洁浓密有光泽,是否顺贴不蓬乱;行动是否迅速,反应是否灵敏;眼睛是否明亮有神,瞳孔是否清晰等圆;天然孔道是否干净、有无分泌物。
2.小鼠的捉拿右手提起鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉,小白鼠则将前肢固定于粗糙面上。
此时迅速用左手拇指和食指捏任小白鼠颈背部皮肤,并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部,固定于手中。
3.小鼠性别鉴定主要观察肛门与生殖器之间的距离。
雄性大鼠的距离较大,雌性的距离较小,且成年雄鼠尾部可见睾丸,成年雌鼠可见乳头。
4.小鼠称重打开电子天平,待读数显示稳定后,将平皿置于天平上,去皮;将小鼠置于平皿中,待读数显示稳定后,读数得25.95g。
5.小鼠灌胃1)准备灌胃针头,将注射器针头拔下,更换为灌胃针头;根据小鼠的体重,按0.1ml/10g 灌胃量计算:V=25.950*0.1/10=0.26ml用注射器取0.26ml液体(自来水);2)按“三-2-1)”的方法抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线;3)灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后即可推注药液,然后原方向将灌胃针抽出。
6. 腹腔注射1)吸取液体(自来水),将针头向上,吸取一段气体后,再缓慢排除气体,以达到取出气泡的效果。
2)按“三-2-1)”的方法捉拿小鼠,并使小鼠腹腔向上;3)事先吸取好液体的注射器针尖平面朝上,平行扎入皮内后,注射器与腹腔呈45度角刺入腹腔,感觉针尖部分可以移动,将注射针向后抽出一点,注射样品。
动物实验的基本技术和方法动物实验是科学研究中常用的一种手段,通过对动物进行实验,可以了解生物体的生理、病理、药理等信息,对人类疾病的预防和治疗起到重要作用。
下面将介绍动物实验的基本技术和方法。
1.动物选择:选择适合进行实验的动物是进行动物实验的首要任务。
常用的实验动物有小鼠、大鼠、兔子、猪、狗等。
根据研究目的的不同,可以选择不同品种、不同年龄、不同性别的动物进行实验。
2.动物养护:对于实验动物的养护是确保实验结果可靠的重要环节。
动物应在适宜的温度、湿度和光照条件下饲养,并提供适宜的饲料和水源。
为了防止交叉感染,需要实施严格的无菌操作和动物消毒。
3.动物注射:动物注射是常用的动物实验技术之一、通过针筒和注射器将药物或其他物质注射到动物体内,以研究其作用机制。
常见的注射方式有皮下注射、肌肉注射和静脉注射。
4.动物手术:动物手术是进行生理、病理研究的重要手段。
常见的动物手术包括造模手术、器官移植手术和腹腔镜手术等。
在进行动物手术时,需要注意术前麻醉、手术操作的细节和术后的护理。
5.动物观察:动物观察是动物实验中重要的实验方法之一、通过观察动物行为、体征和疾病发展等,了解其生理和病理状态。
动物观察可以采用直接观察和间接观察的方法,比如记录动物的活动情况、进食量、体重变化等。
6.动物取样和检测:在动物实验中,需要采集动物的组织、血液、尿液等样本进行检测。
常用的动物取样方式有穿刺、切片、摘取组织等。
取样后,可以进行生化分析、免疫表型分析等检测方法进行进一步研究。
7.数据统计和分析:对于动物实验的结果,需要进行数据统计和分析,以得出科学的结论。
常用的统计分析方法有t检验、方差分析、回归分析等。
通过数据的处理和分析,可以确定实验结果的可靠性和显著性。
8.动物伦理:在进行动物实验时,需要遵循动物伦理原则,确保动物的福利和权益。
包括动物的合理饲养和管理、注重动物的生理和心理健康、减少动物的痛苦和不适等。
同时,需要通过伦理审查机构的审批,确保实验符合伦理要求。
三、动物实验的基本技术(一)实验动物的捉持方法1.青蛙和蟾蜍通常用左手握持,以食指和中指夹住左前肢,大拇指压住右前肢,右手将下肢拉直并固定于无名指和小指之间。
毁脑和脊髓时,左手食指和中指夹持青蛀或蟾蜍的头部,右手将探针经枕骨大孔向前刺入颅腔,左右摆动探针捣毁脑组织。
如需破坏脊髓,毁脑后退回探针刺入椎管即可。
2.小鼠右手提起鼠尾,放在鼠笼(或其它粗糙面)上,向后轻拉其尾,小鼠即固定于鼠笼上,迅速用左手拇指和食指捏住小鼠头颈部皮肤,并以左手小指、无名指压其尾部于手掌尺侧。
另一方法是只用左手,先用食指和拇指抓住小鼠尾巴后用手掌尺侧和小指夹住尾根部,然后用左手拇指和食指捏住头颈部皮肤。
3.大鼠捉持方法与小鼠相似。
因大鼠容易被激怒咬人,捉持时左手应戴防护手套。
右手抓住鼠尾,再用左手拇指和食指握住头部,其余手指与手掌握住脊部和腹部。
注意不要捏其颈部,以防用力过大、过久,造成窒息死亡。
4.豚鼠以左手直接从背侧握持前部躯干,右手托住臀部或抓住两后肢。
体重小者,可用单手捉持。
5.家兔一只手抓住兔颈背部皮肤,将兔轻轻提起,另一只手托住臀部,使兔呈蹲坐姿势。
切不可用手握持双耳提起兔子。
(二)实验动物的性别辨认、标记和去毛方法1.性别辨认鼠类:雄性小鼠和大鼠性器官与肛门距离较远,其间有被毛,阴囊明显可见。
雌性小鼠和大鼠性器官与肛门距离较近,其间无被毛,腹部乳头明显可见。
豚鼠性别辨认方法与小鼠和大鼠相同;家兔:雄兔泄殖孔附近,可见阴囊,用拇指和食指挤压泄殖孔部位,可露出阴茎。
雌兔腹部5对乳头明显可见。
2.标记小鼠、大鼠和兔多采用染色法,一般用1%的苦味酸溶液(黄色)或5%中性红溶液(红色)涂于动物体表不同部位的皮毛处,代表不同号码。
编号原则是先左后右,自前到后。
例如1号涂左前肢;2号涂左侧腹部;本号涂后肢;4号涂右前肢;5号涂右侧腹部;6号涂右后肢;7号涂头部;8号涂背部;9号涂尾部;10号不涂色。
如10只以上动物作标记时,可用两种不同颜色溶液,一种颜色作为个位数,另一种颜色作为十位数,涂在不同部位。
动物实验基本操作技术1. 什么是动物实验?动物实验,顾名思义,就是用动物来做实验。
这可是个很有争议的话题,有人觉得这是科学进步的必要步骤,有人则认为这样对小动物太不公平。
其实,动物实验在医学、心理学、毒理学等领域都扮演着重要角色,就像是科学界的小伙伴,帮助我们找到很多问题的答案。
它让我们在研发新药、测试产品之前,先看看这些东西对生命的影响。
嘿,谁会愿意拿自己去试验呢,对吧?2. 动物实验的基本操作2.1 准备工作开始实验前,咱们得做好充分的准备工作。
想象一下,你准备去野外露营,得先把帐篷、食物、睡袋全都备齐,动物实验也是一样。
首先,你得了解实验的目的,确保你知道自己要干嘛。
接着,选好实验动物,常见的有小鼠、大鼠、兔子等。
它们可是咱们的实验小明星哦!要确保动物的健康状况良好,毕竟,咱们可不能让小动物们在实验中受苦。
2.2 操作过程好了,准备工作都做好了,咱们就可以开始操作了。
在实验过程中,保持冷静和专注是关键。
比如说,给小动物打针的时候,手一定要稳,不然就像大厨切菜时不小心切到手一样,得不偿失。
此外,注意观察动物的反应,如果它们表现得很不舒服,那可得立即停止实验。
记住,咱们不是要折磨它们,而是要让它们帮助我们获取知识。
3. 实验后的处理3.1 数据记录实验结束后,别急着松一口气,咱们还有一项重要工作——记录数据。
好比你考试后要整理笔记,数据记录能帮助咱们分析实验结果。
确保每一个细节都被记录下来,包括动物的状态、实验条件等等,这些都是今后研究的重要参考。
没有记录,实验就像是没吃过的榴莲,香味全无,完全没办法享受。
3.2 动物的安置最后,咱们得考虑动物的安置问题。
根据实验的性质,有些动物可能需要被安乐死,而有些则可以继续观察一段时间。
无论怎样,处理动物的时候一定要尊重它们。
动物也有生命,它们的价值不仅仅在于实验数据,更在于它们是这个地球上的一部分。
我们得对它们负责,尽量给它们一个体面的归宿。
4. 总结动物实验虽然重要,但这并不意味着我们可以随意对待小动物。
动物实验技术动物实验的基本操作动物实验是科研和医学领域常用的手段,用于评估新药、疫苗、治疗方法和理解生物学机制等。
但是,动物实验是具有伦理争议的,因为涉及到动物权益和福利。
因此,在进行动物实验时,需要遵循一定的伦理原则和严格的实验操作。
以下是动物实验的基本操作:1.实验动物的选择:在选择实验动物时,需要根据研究目的和方法来选择适合的动物模型。
常用的实验动物包括小鼠、大鼠、兔子、狗等。
2.动物的饲养和管理:实验动物需要提供适宜的饲养环境,包括合适的温度、湿度和气流等,并提供适宜的饮食和水源。
此外,实验动物还需要定期检查其健康状态,并按照相关规定进行处理。
3.实验操作的准备:在进行动物实验前,需要准备好实验所需的器械、药物和试剂等。
此外,还需要制定详细的实验方案,确定实验的具体步骤和时间,以确保实验的可重复性和准确性。
4.麻醉和镇痛:在进行动物实验时,有时需要对实验动物进行麻醉或镇痛,以减轻它们的痛苦和压力。
这需要根据具体的实验操作来选择合适的麻醉和镇痛方法。
5.试验操作:根据实验目的和方法,进行相应的操作,如采集血液、组织和器官,注射药物,进行手术,观察行为等。
在进行试验操作时,需要注意操作的准确性和规范性,以保证实验结果的可靠性。
6.数据记录与分析:在进行动物实验时,需要对所得到的结果进行准确的记录,并进行数据的分析和统计。
这将有助于研究者对实验结果进行解读和理解,并做出相应的结论。
7.实验结束和动物处理:在实验完成后,需要根据相关规定对实验动物进行处理。
对于无疾病和伤残的动物,可以选择放归或继续饲养。
对于疾病严重或造成较大伤害的动物,可以选择安乐死或处理。
总而言之,动物实验是一项复杂的科研工作,需要研究者具备较高的科学素养和操作技能。
在进行动物实验时,需要始终将动物福利放在首位,并遵循严格的伦理和法规要求,以确保实验的科学性和可靠性。
动物实验基本技术和方法
细胞培养与分离
细胞培养技术是实验室中使用最广泛的技术之一,在分子生物学领域中,它是可以在实验室环境控制的条件下培养活细胞的技术。
它是将细胞
及其产物从原始组织中分离出来,使细胞生长、增殖、繁殖,明确细胞形态、核型和功能结构.
细胞培养的基本技术包括:
1.细胞收集技术:通常是用生化组织学技术,以腹腔注射、血液抽取、经鼻粘膜术等从动物身体中取得细胞,在此过程中要避免注射液等外界刺
激引起的炎症反应带来的细胞损伤。
2.细胞的解剖分离:利用生化操作,如断裂、打散等,获得单细胞或
少量细胞的集合。
3.细胞培养和培养条件:细胞培养采用两种培养方式,即细胞培养皿
和玻片培养,一般就细胞培养瓶选用50mlPA金属瓶,玻片培养的固有形
态较好,容易观察到细胞的形态、核型、细胞器以及胞质的结构。
在培养
液中添加一定量的葡萄糖、酮类、低聚糖以及多种微量元素等,另外,还
要控制培养瓶或玻片中使用的氧气浓度,使培养条件趋于理想。
4.细胞实验的操作:此部分包括一些相关技术,如PH信号检测、染
色检测、血清学检测、冷冻封存及免疫检测等。
动物实验的基本技术操作方法动物实验是一种科学研究的重要手段,也是科学发展和医学进步的必要步骤之一、在进行动物实验时,研究人员需要掌握一系列基本的技术操作方法。
下面将介绍几种常见的动物实验技术操作方法。
1.动物麻醉操作:动物麻醉是进行动物实验的前提条件,可以减少动物的痛苦和压力,保证实验结果的可靠性。
常用的麻醉方法包括静脉麻醉、吸入麻醉和局部麻醉。
研究人员需要掌握药物的剂量、给药途径和监测动物麻醉深度的方法。
2.动物手术技术:在进行一些复杂的实验时,需要进行动物手术操作。
手术技术操作包括皮肤消毒、手术切口、血管或器官的外露和缝合等。
研究人员需要掌握无菌操作的技巧和手术操作的规范,以确保手术的成功和动物的生存率。
3.器械使用和数据记录:在动物实验中,研究人员需要掌握各种生物学实验仪器的使用方法,如离心机、显微镜、血液分析仪等。
同时,需要准确记录实验过程中的数据,包括动物身体指标、实验参数和操作步骤等。
4.体内注射技术:动物实验中常用的一项技术是体内注射,包括静脉注射、皮下注射和腹腔注射等。
研究人员需要掌握注射针头的选择、皮肤局部麻醉的方法和注射位置的确定等。
5.血液采集技术:在一些实验中需要进行动物的血液采集,以获取血液样本进行化验或分析。
血液采集技术包括尾脉、静脉和心脏穿刺等。
研究人员需要掌握相应的采血器具的使用方法,以及合理的采血量和采血速度。
6.器官取材和组织处理技术:在一些器官相关的实验中,需要对动物进行器官取材和组织处理。
器官取材技术包括猝死动物器官取材和活体器官取材。
组织处理技术包括固定处理、包埋和切片等。
研究人员需要掌握无菌操作技术和组织处理的标准流程,以获得有效的实验结果。
7.动物分组和饲养技术:在进行动物实验前,需要对动物进行分组和饲养。
分组技术包括随机分组和对照组的设计等。
饲养技术包括提供适宜的饲料和水源、维持良好的生活环境等。
研究人员需要了解动物的生理特点和各种实验动物的饲养要求,以保证动物的健康状态和实验的可靠性。