培养基模拟灌装试验

培养基模拟灌装试验方案（无菌粉末分装粉针剂）目录1.目的 (3)2.范围 (3)3.验证组织及职责 (3)4.方案说明 (4)5.工艺概述 (4)6.验证前检查 (5)7.验证内容 (6)8.验证周期 (13)9.验证总结、评价与建议 (14)10.验证报告的审核批准 (14)11.验证合格证 (14)1.目的对于无菌生产来说，即使所有与产品无菌性有关的设备部件、容器以及原料都经过有效地灭菌处理，但当这些生产要素在实际工艺条件下组合在一起时，仍有可能因各种原因导致产品被污染。

对于非最终灭菌的无菌生产工艺必须进行培养基灌装来验证。

培养基灌装是用于评估整个无菌工艺过程，用于表明如果严格按照工艺要求生产，产品的无菌性有可靠保证。

2.范围本验证方案适用于无菌粉末分装粉针剂生产线的培养基模拟灌装试验。

3.验证组织及职责3.1验证职责3.2验证方案的培训验证实施前，QA部门对验证相关人员培训，填写《员工培训记录表》。

4.方案说明4.1验证过程中偏差处理的要求执行《偏差管理规程》4.2验证过程中变更的要求执行《变更管理规程》4.3验证过程中记录填写的要求执行《记录管理规程》4.4其他要求5.工艺概述5.1产品：5.1.1性状：白色结晶或结晶性粉末。

5.1.2规格：0.25g/瓶。

5.1.3包装：10ml西林瓶。

5.1.4批量：24000瓶。

5.2胶塞处理：纯化水清洗、硅化、注射用水清洗、灭菌。

（121℃，20分钟）5.3西林瓶处理：纯化水清洗、注射用水清洗、压缩空气吹干、隧道烘箱灭菌。

（灭菌段温度320℃≥5分钟，冷却温度﹤40℃）5.4铝盖干热灭菌。

（180℃，120分钟）5.5无菌药粉通过分装机充填到西林瓶中，盖胶塞、轧铝盖、灯检、贴签、包装。

5.6工艺流程图如下：6.验证前检查6.1人员的确认确认参与验证人员均接受过微生物知识、更无菌衣、无菌操作、培养基模拟灌装试验方案的培训，同时确认参与验证人员的健康体检情况，详见附件1《员工体检和培训确认表》。

培养基模拟灌装试验验证方案培养基模拟灌装试验验证方案(10ml)2011年08月培养基模拟灌装试验验证方案(10ml)验证方案的起草与审批验证小组成员方案起草验证委员会审阅会签方案批准目录1概述 (3)2.验证目的 (4)3风险评估 (4)4验证参考标准 (5)5.验证范围 (5)6.验证职责 (5)7验证前提条件 (6)8 验证批次和时间 (7)9 验证步骤 (8)10培养基的培养和检查 (14)11试验结果评价 (14)12试验结果分析 (15)13风险的评估与接受 (15)14验证结果评审和结论 (15)15方案修改记录 (15)16再验证周期 (15)17附件 (15)1概述本次培养基模拟灌装试验验证是以灭菌的乳糖粉末分装到10ml西林瓶中，整个过程模拟正常的粉针剂品种的分装状态，在盖塞前将胰蛋白胨大豆肉汤培养基灌入瓶内，压塞轧盖后进行培养，确认无菌分装工艺的无菌可靠性。

2.验证目的在各种干扰和最差条件下，评估灭菌工艺、人员更衣、行为习惯、A/B级气流模式、无菌环境的建立、消毒维持方法和物料的传递控制等整个流程的无菌保证水平。

3风险评估经验证小组人员共同对培养基模拟灌装试验验证进行风险评估，对存在的质量风险提出了预防和纠正措施建议，具体见下表：评估人年月日4.验证参考标准4.1 药品生产质量管理规范（2010年版）4.2 药品生产质量管理规范（2010年版）指南4.3 中国药典2010年版（二部）4.4 药品生产验证指南（2003年版）5.验证范围本方案适用粉针车间生产的全过程。

包括：人员更衣、各房间的清洁消毒、物料传递、容器工具的处理、内包材的处理、中控取样、动态下环境监测、无菌分装、轧盖过程，并在分装过程中模拟正常与非正常干扰活动。

方案中还规定瓶子、胶塞和铝盖灭菌后存放有效期的验证。

6.验证职责6.1验证委员会6.1.1负责验证方案的审批，质量副总进行批准。

6.1.2负责验证的协调工作，以保证本验证方案的顺利实施。

无菌模拟灌装试验报告一、试验目的本试验旨在验证无菌模拟灌装工艺的可行性，确保产品在灌装过程中不受到污染。

二、试验装置和材料1.试验装置：包括模拟灌装设备、无菌隔离操作台、培养箱等。

2.材料：试剂瓶，注射器，无菌器具，无菌培养基等。

三、试验步骤1.准备工作a.检查试验设备是否清洁完整，灌装装置是否进行过无菌处理。

b.准备所需的无菌材料和培养基，确保无菌状态。

c.对试验人员进行洗手、穿戴无菌服装等无菌操作准备。

2.模拟灌装操作a.将试剂瓶放入无菌隔离操作台中。

b.打开无菌操作台的无菌室，取出无菌注射器。

c.将无菌注射器插入模拟灌装设备中，调整灌装速度和灌装容量。

d.操作人员向试剂瓶内注射无菌培养基，确保无菌操作。

e.停止模拟灌装设备的运行。

f.将模拟灌装装置的灌装采样口取出，送入无菌培养基中进行培养。

3.培养基培养a.将采样口的培养基培养于37℃下，并定期观察培养基的生长情况。

b.观察培养基是否有细菌生长，如有则说明模拟灌装过程存在污染。

四、试验结果经过培养一定时间后，观察到培养基中出现了细菌生长。

根据菌落的数量和类型，可以判断模拟灌装过程中存在细菌污染。

五、试验分析1.可能的污染原因a.灌装设备未进行充分的无菌处理，造成细菌污染。

b.操作人员的操作技术不熟练，未能保证无菌操作的完整性。

c.无菌材料的质量不符合标准，存在细菌污染。

2.解决方案a.对灌装设备进行充分的无菌处理，确保设备的无菌性。

b.加强对操作人员的培训，提高无菌操作技术。

c.对无菌材料的供应商进行验证，确保无菌材料符合标准。

六、试验结论通过本次试验发现在模拟灌装过程中存在细菌污染的问题，但可以通过加强设备无菌处理、操作人员培训和供应商验证等措施解决。

本试验报告可作为无菌模拟灌装工艺改进的依据，以确保产品在灌装过程中不受到污染，保障产品质量和安全。

七、试验建议在进行下一次无菌模拟灌装试验时，建议加强管理控制，确保试验中的环境无菌，并提前进行试验装置的验证，以减少可能的污染风险。

分发部门：培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺验证小组一、概述厂区无菌操作生产线，按2010版GMP 及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最终灭菌产品生产使用。

某某产品因无法进行F 0≥8分钟湿热灭菌，以达到SAL ≤10-6，但处方可以通过微生物滞留过滤器过滤，故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。

无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，确保产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训 ②无菌工艺验证。

按SFDA 化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装验证是对设备、环境以及人员操作的一种系统验证，是判断无菌保证水平的关键手段。

故在正式生产前必须按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装验证。

1 本次验证关键生产工艺流程图2 验证原理将培养基暴露于设备、容器密封系统的表面和关键环境条件中，并模拟实际生产完成工艺操作。

对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并评价结果，确定实际生产中产品污染的可能性。

对于失败的验证进行菌种分析并调查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行验证。

3验证次数按2010版GMP 附录1要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次验证，故需进行连续三个批次的验证活动。

二、验证目的1通过该工艺验证活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求；2通过该工艺验证活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险；3通过该工艺验证活动确保生产符合现行GMP法规要求。

三、验证范围和实施时间1本验证方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装验证活动；2计划验证实施时间为2013年3月~4月连续三个批次。

四、验证小组和职责1 验证小组根据验证的内容和验证管理文件要求，成立验证小组，验证小组成员见下表，小组人员应在最终验证报告中签名确认。

在验证实施前，方案起草人应对所有相关参与人员进行验证方案的培训，做好培训记录，并将记录附于验证报告后。

××××××××粉针车间冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验验证方案粉针车间冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验是对粉针车间使用F2000/12/600型灌装机在局部百级工作环境中进行冻干粉针剂灌装过程中所采用的各种方法和各种规程防止微生物污染的水平可以达到可接受的合格标准的能力。

通过检查确认找出粉针车间进行冻干粉针剂灌装作业过程中的控制要求，为今后对粉针车间进行冻干粉针剂灌装作业管理确定依据。

一、该方案的实施由下述单位负责进行：二、方案实施单位责任人：三、验证小组成员：冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验验证方案方案制订：制订日期：方案批准：批准日期：目录1.概括 (1)1.1目的 (1)1.2范围 (1)1.3责任 (1)2.确定可接受的合格标 (2)3.培养基性能测试 (2)3.1微生物生长性能试验 (2)3.2培养基无菌性试验 (2)4 模拟分装用无菌粉末 (2)4.1模拟分装用无菌粉末应具有的特性 (2)4.2 无菌性试验 (3)4.3 抑菌性试验 (3)4.4 溶解性试验 (3)5 模拟分装过程操作规程及操作人员控制 (3)6 操作过程及无菌环境控制与监测 (4)6.1 模拟分装使用西林瓶及胶塞无菌性检测 (4)6.2 微生物控制与监测 (4)6.3 尘埃粒子监测 (5)7 取样计划及取样点 (5)7.1 取样计划 (5)7.2 取样点 (6)8 模拟分装 (6)8.1 无菌粉针剂模拟分装方法 (6)8.2 液体培养基制备及进入无菌分装区方法 (6)8.3 液体培养基分装工具的选用及处理使用方法 (6)8.4 无菌粉针剂模拟分装试验 (7)8.5 液体培养基分装 (7)9 微生物培养 (7)9.1 阴性对照 (7)9.2 阳性对照 (7)9.3 试验样品培养 (7)10 试验结果评价 (8)11 验证制度及再验证时间安排 (8)12 确认方案执行日期 (9)1、概括冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验是在其他各个系统（诸如灭菌系统、公用系统、无菌环境保持系统、设备验证、设备清洗过程验证等）验证工作完成的基础上进行的。

1 主题内容与适用范围本文件规定了培养基模拟灌装试验的程序和要求。

本文件适用于培养基模拟灌装试验的管理。

2 引用标准《药品生产质量管理规范》2010年修订3 术语培养基模拟灌装试验（以下简称试验）：英文名称MFT——Media Fill Test的英文缩写，是用一种模拟替代物质来模拟整个无菌生产过程，在所得的模拟产品中加注培养基，再对所得的全部培养基样品进行无菌培养。

培养基模拟试验是无菌生产工艺的验证手段，是任何非最终无菌药品生产必须进行的一项验证。

最差条件：导致工艺及产品失败的概率高于正常工艺的条件或状态，即标准操作规程范围以内工艺的上限和下限。

但这类最差条件不一定必然导致产品或工艺的不合格。

4 职责4.1 生产部门负责试验方案的制定、组织实施、试验报告的撰写、偏差的报告等。

4.2 质监中心负责试验培养基的促生长试验、灌装物的培养等。

4.3 质量保证部负责试验过程的监督管理。

5 管理规定5.1 试验目的：规范公司培养基模拟灌装试验，评估无菌原料药和无菌制剂的生产工艺，为所生产产品无菌性的可信限度达到可接受的合格标准提供证据，证明其具有生产无菌原料药和无菌制剂的能力并具有可重现性，符合现行GMP要求和相关技术指南要求。

5.2 试验要求5.2.1 试验频次培养基模拟灌装试验的首次验证，每班次应当连续进行3次合格试验。

培养基模拟灌装试验按照生产工艺每班次半年进行1次，每次至少一批。

单一规格品种再验证周期为半年，正常生产的多规格品种每一规格再验证周期为一年。

每位无菌操作人员每年至少参加一次成功的培养基模拟灌装试验。

空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后，应当重复进行培养基模拟灌装试验。

5.2.2 试验批量及容器的数量、装量培养基灌装批量及容器的数量、装量应当足以保证评价的有效性。

批量较小的产品，培养基灌装的数量应当至少等于产品的批量。

无菌原料药容器数量不少于被模拟产品的实际包装量，模拟物装量尽量接近实际值，不超过容器体积的70%，培养基装量应能满足微生物的生长；粉针制剂灌装数量每种规格不少于5000支。

培养基模拟灌装试验的定义培养基模拟灌装试验，这听起来是个有点专业又神秘的事儿呢。

那到底啥是培养基模拟灌装试验呢？咱打个比方吧，你要开个蛋糕店，在正式卖蛋糕之前，你得试试你的整个做蛋糕、包装蛋糕、送到顾客手里这个流程顺不顺，有没有可能让蛋糕沾到脏东西或者坏掉。

培养基模拟灌装试验就有点像这个试营业的过程。

在制药或者食品等很多行业里，产品的生产就像一场精密的舞蹈。

培养基就像是那些要被加工的原材料，而模拟灌装就是把这些原材料按照正式生产的流程走一遍。

比如说制药的时候，真正的药品生产过程那可是要求特别高的，一点差错都可能让药变成毒药。

那怎么知道这个生产过程是不是靠谱呢？这时候培养基模拟灌装试验就上场了。

这个试验就是用培养基来代替真正的药品或者食品原料，然后完全按照正常生产的步骤，从原料进入设备开始，经过各种机器的加工、灌装到最后的包装。

这就像是一场假戏真做的表演，只不过演员不是人，是培养基。

那为啥要用培养基呢？培养基这东西啊，就像个特别敏感的小侦探。

如果在这个模拟灌装过程中，有细菌或者其他脏东西混进来，培养基就会像个报警器一样，它会让细菌在里面生长繁殖。

这就好比你在家里养了一盆花，只要有点灰尘或者害虫，花就会有反应，不是叶子黄了就是长虫了。

培养基也是这样，一旦有不干净的东西进来，它就会出现变化。

你可能会想，这有啥难的呢？其实这里面门道可多了。

整个模拟灌装的环境得和正式生产一模一样。

设备的状态、操作人员的动作、甚至厂房里的温度湿度都得和正常生产一样。

这就好比你参加一场考试，考试的环境、桌子椅子的摆放、监考老师的状态都得和正式考试一样，这样考出来的成绩才是真正能反映你水平的。

要是在模拟灌装的时候，环境宽松了，那测出来的结果就不准了。

再比如说，在模拟灌装过程中，灌装的速度、量的多少，这些细节都不能马虎。

就像你包饺子，每个饺子包多少馅，包的速度快慢，都会影响到最后饺子的质量。

如果在模拟灌装的时候，灌装的量一会儿多一会儿少，那就和正式生产的时候对不上号了，这就可能隐藏着大问题。