实验十二 淀粉分解菌的检验

一、实验目的1. 验证淀粉在唾液淀粉酶的作用下能够分解为麦芽糖。

2. 探究不同温度对淀粉分解反应的影响。

3. 了解酶促反应的特点。

二、实验原理淀粉是一种多糖，由大量葡萄糖分子通过α-1,4-糖苷键和α-1,6-糖苷键连接而成。

唾液淀粉酶是一种消化酶，能够将淀粉分解为较小的糖类，如麦芽糖。

淀粉与碘反应会产生蓝色复合物，而麦芽糖与碘不反应，因此可以通过颜色变化来判断淀粉是否被分解。

三、实验材料1. 实验试剂：淀粉糊、清水、唾液、碘液、37℃温水。

2. 实验仪器：烧杯、试管、温度计、滴管。

四、实验步骤1. 准备实验材料：取两支试管，分别编号为甲和乙。

在甲试管中加入2ml淀粉糊，乙试管中加入等量的清水。

将两支试管放入37℃温水中预热。

2. 加入唾液：在甲试管中加入2ml唾液，乙试管中加入等量的清水。

3. 观察颜色变化：将两支试管静置10分钟后取出，冷却。

分别向甲乙试管中滴加碘液，观察颜色变化。

4. 温度梯度实验：将上述实验重复进行，分别将甲乙试管放入0℃、25℃、50℃、75℃的水浴中，静置10分钟后取出，冷却。

分别向各试管中滴加碘液，观察颜色变化。

5. 记录实验结果：记录各试管中淀粉分解情况，并进行分析。

五、实验结果与分析1. 常温下，甲试管中的淀粉糊与唾液混合后，滴加碘液，颜色未变蓝，说明淀粉已被分解为麦芽糖；乙试管中的淀粉糊与清水混合后，滴加碘液，颜色变蓝，说明淀粉未被分解。

2. 温度梯度实验中，随着温度的升高，淀粉分解速度逐渐加快。

在25℃时，甲试管中的淀粉糊与唾液混合后，滴加碘液，颜色未变蓝，说明淀粉已被分解为麦芽糖；乙试管中的淀粉糊与清水混合后，滴加碘液，颜色变蓝，说明淀粉未被分解。

在75℃时，甲试管中的淀粉糊与唾液混合后，滴加碘液，颜色未变蓝，说明淀粉已被分解为麦芽糖；乙试管中的淀粉糊与清水混合后，滴加碘液，颜色变蓝，说明淀粉未被分解。

3. 通过实验结果可以看出，唾液淀粉酶在37℃时对淀粉的分解作用最强，温度过高或过低都会影响酶的活性。

淀粉水解试验鉴别菌株方法步骤淀粉水解试验听起来有点儿高大上吧？其实说白了，就是一个通过观察细菌对淀粉的分解情况来鉴别不同菌株的小实验。

这个实验可是非常“接地气”的，操作简单，效果却很直接，能迅速帮你分辨某些细菌的特点。

咱们今天就来聊聊，这个“淀粉水解试验”到底是咋个回事，有啥步骤，也顺便看看这个小实验背后是不是藏着一些“大智慧”。

咱们要准备好实验材料。

首先当然得有淀粉了。

大多数情况下，咱们用的淀粉是那种普通的马铃薯淀粉，为什么呢？因为它能很好地与细菌发生反应。

如果你身边没有马铃薯淀粉，别担心，玉米淀粉也是可以的。

然后呢，需要准备的是一些固体培养基。

通常用的是琼脂培养基，琼脂这东西有个好处，就是能在固态下把细菌“关”在里面，方便观察细菌活动。

咱们就要搞定那些“细菌们”了，得先从培养物里挑选出你想要研究的菌株。

别急，这时候你可能觉得步骤很多，其实它们都挺简单的。

就是关键的一步了，给细菌提供“淀粉大餐”。

这个过程非常直观，把淀粉溶液与琼脂混合，然后将它涂抹到培养皿中，晾干。

再将那些待检测的细菌点到培养基上。

这一步听起来简单，但也得讲点技巧。

细菌可不是闹着玩的，它们都有自己的一套生存规则，什么地方能“安家”，什么地方得“低调”点，全看你怎么安排。

要点到位，细菌们才会乖乖开始“吃”淀粉。

说到这，咱就得聊聊水解了。

细菌的水解能力就是能否把淀粉“消化”掉，分解成更简单的糖分。

细菌如果能分解淀粉，它就会在培养基上周围留下一个透明的“空地”。

这就叫水解区，是不是很神奇？想象一下，细菌吃掉淀粉之后，培养基上的那块地方就变得清晰透明，像被小小的“细菌大军”攻占过一样，其他地方还保持着原本的浑浊。

透明的区域，越大，说明水解能力越强，越能证明这个细菌能把淀粉吃个干净。

如果一开始就没有变化，那就表明这个细菌可能没那么“能干”，没有分解淀粉的能力。

就是等结果了。

通常这一步需要大约24到48小时的时间。

你得把培养皿放在温暖的地方，给细菌提供一个适宜的“家”，让它们能够在这个小小的培养基上肆意发挥。

细菌淀粉水解试验
细菌淀粉水解试验，是一种用于检验细菌对于淀粉的水解能力的实验
方法。

淀粉水解能力是一些生物的特有能力，通过此方法可以确认细
菌是否具有这种能力。

该试验的基本步骤如下：将含有淀粉物质的培养基分装入试管中，加
入已经生长好的细菌，置于恒温箱中培养，一段时间后取出试管，加
入Lugol碘酒，观察试管中出现的黑蓝色淀粉蓝色复合物的颜色变化
来判定细菌是否具有淀粉水解能力。

细菌淀粉水解试验主要分为两种结果，正反应和消极反应。

当细菌具
备淀粉水解能力时，淀粉被水解成糖类成分，而Lugol碘酒会和淀粉
形成复合物，在试管中会变成蓝色或黑蓝色，这被称为正反应；当细
菌无法水解淀粉时，试管中的Lugol碘酒与淀粉将不会形成淀粉蓝复
合物，试管中的颜色将保持为原始的黄色或棕色，这被称为消极反应。

细菌淀粉水解试验主要用于鉴定革兰氏阳性菌是否能够水解淀粉。

革
兰氏阳性菌中，可发现很多淀粉酶。

不同细菌之间水解淀粉的能力也
不尽相同，因此，经常用于鉴定不同的菌种。

此外，淀粉水解能力在医学领域中也有很多应用。

例如，肠球菌的淀
粉水解能力可以用于对肠球菌菌株可能导致的疾病进行鉴定，如败血症、肠炎等。

此外，在食品科学中，淀粉水解能力也可以用于鉴定特定微生物是否存在于食品中，为食品卫生保障提供评估依据。

总之，细菌淀粉水解试验是一种常用的鉴定细菌淀粉水解能力的实验方法，通过观察试管中淀粉蓝复合物的出现与否，可以判定细菌是否具有淀粉水解能力，为鉴定不同菌种以及医学、食品科学等领域提供了重要指标。

检验淀粉水解的操作
检验淀粉水解的操作流程如下：
1、试管1中加入0.5g淀粉和4ml水，试管2中加入0.5g淀粉和4ml20%的硫酸溶液。

加热两试管3~4min。

2、把试管2中的部分溶液倒入试管3中，留作下一步实验用。

3、向试管1和试管2中加入几滴碘溶液，观察现象。

发现试管1的溶液呈蓝色（淀粉遇碘变成蓝色），而试管2无明显现象。

4、向试管3中滴入10%的氢氧化钠溶液，调节溶液pH值至9~10。

5、另取一只试管4加入3ml氢氧化钠溶液，滴入4滴2%的硫酸铜溶液，立即有蓝色的氢氧化铜沉淀生成。

再滴入试管3中的水解液1ml，混合均匀后，加热煮沸，溶液颜色有蓝色——黄色——绿色——红色等一系列变化，最终有红色沉淀生成。

淀粉在酸的催化作用下，能发生水解。

（试管1中的淀粉未水解，淀粉遇碘变成蓝色；试管2中淀粉在酸的催化作用下水解了，所以无明显现象；不同现象的原因就是淀粉在酸性条件并加热的条件下发生了水解反应）。

微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察一、结果观察1、葡萄糖发酵实验直接观察试管：试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌，不变者为阴性菌。

2、V. P. 反应和甲基红试验:将培养好的液体培养基分装于两个干净的小试管中,在一管中滴入2-3滴甲基红试剂, 溶液变红的为甲基红阳性菌,不变的为甲基红阴性菌. 在另一管中加入V. P. 试剂,在37℃保温15分钟, 变红者为阳性菌,不变者为阴性菌。

3、吲哚实验在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌。

4、硝酸盐还原实验在点滴板上滴入革里斯试剂A液和B液，如过溶液变红说明有亚硝酸盐，为硝酸盐还原阳性菌，如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂，如果变蓝，说明此菌为阴性菌；如果不变色，说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌。

5、柠檬酸盐实验直接观察斜面，斜面变兰色者为柠檬酸盐利用阳性菌，不变者为阴性菌。

6、明胶水解向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌。

7、淀粉水解实验向培养好的淀粉培养基平板上加入碘液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为淀粉水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌。

8、硫化氢产生实验直接观察培养好的培养基，出现黑色沉淀者为阳性菌，不变者为阴性菌。

二、实验结果1、葡萄糖发酵实验阳性：大肠杆菌（半固体培养基变黄，左图）阴性：恶臭假单胞菌（保持紫色不变，右图）2、V. P. 反应和甲基红试验：（1）V．P．实验阳性：大肠杆菌（加入40%的KOH溶液10～20滴，再加入等量的α-萘酚溶液，放入37℃恒温箱中保温15～30分钟，培养液出现红色，右图）阴性：产气杆菌（同上操作，培养基不变色，左图）（2）甲基红试验阳性：产气杆菌（加入 M．R．试剂3-4滴后变红，左图）阴性：大肠杆菌（加入 M．R．试剂3-4滴后不变色，右图）3、吲哚实验阳性：大肠杆菌（乙醚层呈现玫瑰红色，右图）阴性：产气杆菌（左图）4、硝酸盐还原实验阳性：大肠杆菌（滴入革里斯试剂后变红，左下图）阴性：恶臭假单胞菌（滴入二苯胺试剂后变蓝，右上图）5、柠檬酸盐利用实验阳性：产气杆菌（溴麝香草酚蓝的斜面呈蓝色，右图）阴性：大肠杆菌（斜面培养基不变色，左图）6、明胶水解实验阴性：大肠杆菌（菌落周围没有出现透明圈，上图）7、淀粉水解实验阳性：枯草杆菌（加入碘液，菌落周围出现透明圈，下图）阴性：大肠杆菌（菌落周围没有出现透明圈，上图）8、产硫化氢实验阳性：变形杆菌（出现黑色沉淀，左图）阴性：大肠杆菌（未出现黑色沉淀，右图）思考题1、你的实验结果与实验预期是否相同？如果不同试分析原因。

一、实验目的1. 了解酵母菌分解淀粉的原理。

2. 掌握酵母菌分解淀粉的实验方法。

3. 通过实验验证酵母菌分解淀粉的过程。

二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌，具有较强的发酵能力。

在适宜的条件下，酵母菌可以将淀粉分解为葡萄糖，进而产生酒精和二氧化碳。

本实验通过观察酵母菌分解淀粉的过程，验证其发酵作用。

三、实验材料1. 实验仪器：玻璃瓶、导管、橡皮塞、凡士林、碘液、淀粉溶液、蒸馏水、澄清石灰水、酒精灯、镊子、试管等。

2. 实验试剂：酵母菌、淀粉、碘液、澄清石灰水等。

四、实验步骤1. 将适量淀粉溶液倒入玻璃瓶中，加入蒸馏水稀释至适宜浓度。

2. 加入少量酵母菌，用玻璃棒搅拌均匀。

3. 将瓶口和导管用凡士林密封，防止氧气进入。

4. 将导管另一端通入盛有澄清石灰水的试管中。

5. 将实验装置放在温暖的地方，等待一段时间。

6. 观察试管中澄清石灰水的变化，记录实验现象。

五、实验结果与分析1. 试管中澄清石灰水变浑浊，说明产生了二氧化碳气体。

2. 打开玻璃瓶，嗅到酒味，说明产生了酒精。

实验结果表明，酵母菌在分解淀粉的过程中，产生了二氧化碳和酒精。

这是因为酵母菌细胞内含有淀粉酶，可以将淀粉分解为葡萄糖，进而产生酒精和二氧化碳。

六、实验结论1. 酵母菌具有分解淀粉的能力，可以将淀粉分解为葡萄糖。

2. 酵母菌分解淀粉的过程中，产生了酒精和二氧化碳。

3. 本实验验证了酵母菌在发酵过程中的重要作用。

七、实验注意事项1. 实验过程中要注意无菌操作，避免污染。

2. 实验装置密封要严实，防止氧气进入。

3. 实验过程中要控制好温度，避免过高或过低影响实验结果。

4. 实验结束后，要及时清洗实验器材，保持实验室卫生。

八、实验拓展1. 探究不同浓度淀粉溶液对酵母菌分解淀粉的影响。

2. 比较不同种类的酵母菌在分解淀粉过程中的差异。

3. 研究酵母菌分解淀粉的机理，为食品发酵工业提供理论依据。

淀粉的水解及其产物的检验实验
一、实验目的
掌握淀粉水解反应原理及检验淀粉水解产物的方法。

二、实验原理
淀粉是由α-葡萄糖分子组成的多糖，其化学结构为线性链和支链。

淀粉酶能够催化淀粉分子中α-1,4-糖苷键的水解，形成含有2-10个葡萄糖分子的低聚糖。

同时，α-1,6-糖苷键也会被切断，使得支链上的葡萄糖分子被释放出来。

最终产生的产物为葡萄糖、麦芽糖和低聚糖等。

三、实验步骤
1.将1g干淀粉加入100ml三角瓶中，加入50ml稀盐酸
（0.5mol/L），摇匀后放置在水浴中加温反应2小时。

2.反应结束后，在试管中取适量反应液，加入少量碘液进行检验。

3.将试管放在白色背景下观察颜色变化。

四、实验注意事项
1.稀盐酸具有强腐蚀性，操作时需戴手套和护目镜。

2.反应过程中需加温，注意不要使水浴沸腾。

3.碘液具有毒性，操作时需小心，避免皮肤接触。

五、实验结果及分析
淀粉水解反应后的产物主要为葡萄糖、麦芽糖和低聚糖等。

在检验产物时，可以使用碘液进行检验。

碘液能够与淀粉形成复合物，在淀粉存在的情况下呈现出蓝黑色。

而在淀粉被水解后，其结构发生改变，无法与碘形成复合物，因此检测出来的颜色会变为红棕色或黄棕色。

六、实验拓展
除了使用碘液进行检验外，还可以使用比色法或高效液相色谱法等方法进行淀粉水解产物的检测。

其中比色法是一种简单易行的方法，只需要将产物溶于水中，并加入苏丹三号试剂后与标准曲线比较即可确定产物种类和含量。

而高效液相色谱法则是一种更为准确、灵敏的方法，能够同时检测多种低聚糖和单糖，具有广泛的应用前景。