广东虫草多糖的提取及含量测定

天然冬虫夏草多糖的提取及其抗氧化活性研究
郭新铭;赖志荣
【期刊名称】《临床合理用药杂志》
【年(卷),期】2018(11)15
【摘要】目的探讨天然冬虫夏草多糖的提取方法及其抗氧化活性。

方法从天然冬虫夏草粉末中提取粗多糖成分,利用单因素水平对照试验对多糖的提取条件(水的温度、加水体积倍数、浸提时间、浸提次数、浸提pH)进行优化,测定粗多糖的含量及粗多糖清除DPPH的能力。

结果热水提取冬虫夏草粗多糖的优化条件为:水的温度为80℃,浸提时间为2 h,浸提加水比为45:1,浸提pH为7,浸提2次,则冬虫夏草粗多糖提取率可达24.03%。

清除DPPH实验表明,粗多糖质量浓度为12 mg/ml 时,对DPPH的清除率达92.32%。

结论优化的方法获得的冬虫夏草多糖提取率高,且冬虫夏草多糖具有较好的抗氧化活性。

【总页数】3页(P32-34)
【作者】郭新铭;赖志荣
【作者单位】中山大学附属第五医院
【正文语种】中文
【中图分类】R285
【相关文献】
1.乌鳢分泌多糖和黏多糖的提取及其抗氧化活性研究
2.冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的抗氧化活性研究
3.冬虫夏草多糖抗氧化活性及其单糖组成的研究
4.表面活性
剂协同双频超声波辅助提取香菇多糖工艺及抗氧化活性研究5.冬虫夏草中多糖提取、纯化及抗氧化性能的研究
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虫草发酵液胞外多糖的提取工艺研究
一、引言
虫草是一种珍贵中药材，具有多种保健功效。

经过研究发现，虫草发酵液中含有丰富的胞外多糖，具有一定的药用价值。

因此，对虫草发酵液胞外多糖的提取工艺进行研究，有助于提高虫草的利用价值。

二、实验方法
本实验采用水提和酸提两种方法提取虫草发酵液胞外多糖，比较两种方法的提取效果。

1.水提法
将虫草发酵液与等量的蒸馏水混合，轻轻搅拌后加热至沸腾，继续加热4小时，过滤后得到胞外多糖。

2.酸提法
将虫草发酵液与等量的1.2%的硫酸混合，放置60℃水浴中反应24小时，过滤后得到胞外多糖。

三、实验结果
经过比较，我们发现酸提法获得的胞外多糖总含量更高，达到了
2.34g/100g，而水提法只有1.69g/100g。

同时，酸提法提取的胞外多糖
比水提法更具有活性，可以显著提升人体的免疫功能。

四、结论
通过本实验的研究，我们可以得出以下结论：
1.酸提法是提取虫草发酵液胞外多糖的更佳方法，可以获得更高含量的胞外多糖。

2.提取的胞外多糖可以用于制作具有免疫调节作用的保健品。

3.虫草作为保健材料，具有广泛的应用前景。

综上所述，虫草发酵液胞外多糖的提取工艺研究具有重要的现实意义，可以为保健品的研发提供新的思路和方向。

同时，也可以更好地发挥
虫草的价值，推动中药材的利用与发展。

虫草多糖的分离纯化及含量测定目的采用发酵法从冬虫夏草发酵液及菌丝体中提取、分离虫草多糖。

方法采用乙醇沉淀法分离冬虫夏草发酵液和菌丝体中的多糖；采用苯酚硫酸法测定样品中多糖含量。

结果采用此法进行制备、检测，方法简单快速，结果准确，适宜推广使用。

结论此法无需多糖纯品，具有快速简单、精确度高、灵敏度高、重现性较好的优点，是检测虫草多糖含量的较优方法之一。

标签：发酵液；虫草多糖；菌丝体虫草多糖；分离纯化；含量测定Purification and determination of Cordyceps polysaccharideCUI?Lixun1??ZHANG?Aihua1??SUN?Shouying21.Heilongjiang Biotechnology V ocational College，Harbin 150025，China；2.Heilongjiang New Yisheng Pharmaceutical Co.，Ltd，Jixi 158200，China[Abstract] Objective Using the method of inoculated fermentation to extract and separate the Cordyceps polysaccharide from the zymotic fluid and mycelium of Chinese caterpillar fungus. Methods Separated the polysaccharide of Chinese caterpillar fungus’ zymotic fluid and mycelium in ethanol precipitation；survey and evaluate the polysaccharide content of samples in phenol-sulfuric acid method. Results It is profitable for using widely because of the fast，easy method and exact result for producing and detecting. Conclusion This method is one of excellent ways for detectin g the Cordyceps polysaccharide contents and it doesn’t need the polysaccharide from pure product. The advantages are fast and easy，high accuracy and sensitivity，and good reproducibility.[Key words] Fermentation broth；Cordyceps polysaccharide；Mycelium of Cordyceps polysaccharide；Separation and purification；Content determination 冬虫夏草首载于本草从新，味甘，性温，归肺、肾经，具补肺益肾，止血化痰之功效。

广东虫草菌丝体多糖的提取、分离纯化及结构初步研究的
开题报告
1. 研究背景和意义：
广东虫草是一种珍贵的中草药材，具有很高的药用价值，常被用于滋补强身、改善免疫和提高生活质量。

目前已有不少研究表明，广东虫草中含有多种生物活性成分，其中多糖是其重要的成分之一。

因此，对广东虫草菌丝体多糖进行提取、分离纯化及
结构初步研究，不仅有利于更好地发挥其药用价值，也对广东虫草的开发利用具有重
要的现实意义。

2. 研究内容和方法：
本研究将采用超声波辅助提取的方式，提取广东虫草菌丝体中的多糖，并通过醇沉、离子交换层析和凝胶层析等方法进行分离纯化。

最终通过红外光谱、紫外光谱、
高效液相色谱和核磁共振等技术手段，对多糖的化学结构进行初步研究。

3. 研究重点和难点：
本研究的重点是对广东虫草菌丝体多糖进行高效提取、分离纯化，并对其结构进行初步研究。

其中，多糖的提取和分离纯化在技术上有一定难度，需要反复优化实验
条件才能得到较理想的结果。

而对多糖的结构研究，则需要掌握较高的核磁共振技术
和化学分析技能。

4. 研究预期结果和意义：
本研究预期可以得到广东虫草菌丝体多糖的高效提取、分离纯化和初步结构研究结果，并对其药理作用、保健功能以及产业化开发具有重要的参考价值。

同时也为更
深入地揭示广东虫草中的细胞成分和生物活性物质提供了技术支持，推动广东虫草的
研究和应用发展。

Ｚ ｅｇＢｓｅｇ，Ｔ ｎ ａ ｇｏ ｇ，Ｙ ｈＷｅｊａ。 ｉ ａ ｕ ｈ ｎ ｉ ｎ ａｇＦ ｙｎ ａ ｎ ｎ，Ｌ ｉ ｉ ｈ ｎ ｕ Ｔｈ
（ ． ｌ ｇ ｆＬｇ ｔＩｄ ｓ ｙａ ｄ Ｆ ｏ ｃｅ ｃ １ Ｃｏｌ ｅｏ ｉｈ ｎ ｕ ｔ ｎ ｏ ｄＳ ｉｎ ｅ，Ｓ ｕｈＣｈｎ ｎｖ ｒｉ ｆ ｅｈ ｏｏ ｙ ｅ ｒ ｏ ｔ ｉａＵ ｉｅｓｔ ｏ ｃ ｎ ｌｇ ，Ｇｕ ｎｚ ｏ ｙ Ｔ ａ ｇｈ ｕ， Ｇ ａ ｇ ｏ ｇ５ ６ ０ ｕ ｎ ｄ ｎ ４ ， １ ０
Ｍｉｒｂｏｏ ， Ｇｕ ｎ ｚ ｏ ｃｏ ｉｌｇ ｙ ａ ｇｈ ｕ，Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ０ ０， Ｃ ｉａ ａ ｇ ｏ ｇ５ ７ １ ０ ｈｎ ）
Ａｂ ｔ ｃ ： Ｐ ｌｓ ｃ ａ ｉｅ ｒ ｍ ｕ ｎ ｄ ｎ ｏ ｄ ｃ ｐ ｃ ｌ ｍ． ｎ ｔｅ ｐ ｐ ｒ ｔ ｅ ｒ ｅ ｎ ｄ ａ ｄ ｔ ｅ ｅｅ ｔｄ ａ ｅ ｓｒ ｔ ａ ｏｙ ａ ｈ ｒ ｓ ｆ ｃ ｄ ｏ Ｇ ａ ｇ ｏ ｇ ｃ ｒ ｙ ｅ ｓｍｙ ｅｉ ｕ Ｉ ｈ ａ ｅ ， ｈ ｙ ｗｅｅ ｒｆ ｅ ｎ ｈ ｎ ｓ ｌｃｅ ｓ ａ ｒ — ｉ
摘 要 ： 以精 制 后 的广 东 虫 草 菌 丝体 多糖 为研 究 对 象 ，通 过 单 因 素 实 验 ，对 苯 酚一 硫 酸 法 测 定 广 东 虫 草 菌 丝体 精制 多 糖含量的显色条件进行优选 ，并对该法 的精密度 、稳定性 、加样 回收率 ，以及多糖液 中色素 、蛋 白质的干扰 等进行 了研 究 。结 果 表 明 ，该 测 定 方 法 简便 灵 敏 ，准 确 性 高 ，稳 定 性 好 ，测 定 结 果 可 靠 ，且 不 受 色 素 及 蛋 白质 的影 响 。用
ｐ ｏ ｅ ｅ ｓ ｌ ， ｃ ｎ ｅ ｉｎ ， ａ ｃ ｒｔ ｎ ｔｂ ｅ ｈ ｏ ｔｎ ｆ ｏｙ ａ ｃ ａｉ ｅ ｎ Ｇｕ ｎ ｄ ｎ ｏｄ ｃ ｐ ｃ ｌ ｍ ｓ ｒｖ ｄｔ ｂ ｉ ｅ ｏ ｍｐ ｏ ｖ ｎｅ ｔ ｃ ｕ ａｅ ａ ｄ ｓａ ｌ ，ｔ ｅ ｃ ｎｅ ｔｏ ｌｓ ｃ ｈ ｒ ｓｉ ａ ｇ ｏ ｇ ｃ ｒ ｙ ｅ ｓｍｙ ｅｉ ｗａ ｐ ｄ ｕ

以柱层析法测定样品的分子量 , PC Ⅰ分子量约 为 35万 , PCA Ⅰ分子量约为 55. 6 万 , PCA Ⅱ分子 量约为 1 670, PCB Ⅰ分子量约为 6万 , PCC Ⅰ分子 量约为 5. 7万 , PCC Ⅱ分子量太小未测出 。
采用纸层析定性测定了部分样品的单糖组成 , 以气相色谱分析法定性和定量测定了单糖组成及比 例 。 PC Ⅰ中所含甘露醇 、半乳糖 、葡萄糖的摩尔比 为 1ζ 0. 65ζ 0. 30; PCA Ⅰ中含甘露糖和半乳糖的 摩尔比为 1ζ 1; PCB Ⅰ中含甘露糖和半乳糖的摩尔 比为 1ζ 0. 73; PCA Ⅱ中含甘露糖 、半乳糖 、葡萄糖 的摩尔比为 1ζ 0. 71ζ 0. 42; PCB Ⅱ中含甘露糖 、半 乳糖 、葡萄糖的摩尔比为 1ζ 0. 51ζ 0. 50。
多糖 (以葡萄糖计 ) (m g /100 mL )
=V1
/100
A ×V2
×1
000
×100
式中 : A 多糖含量 , V1 样品取样量 , V2 样品处
理液吸取体积 。
冬虫夏草多糖是一种复合多糖 ,葡聚糖含量高 , 可采用 490 nm 的葡萄糖比色范围比色 。当然 ,总多 糖的测定与葡萄糖有差别 ,需用换算因子换算 。 1. 2 蒽酮 2硫酸法 采用蒽酮 2硫酸法测定多糖的 含量 ,反应原理为多糖在浓硫酸作用下 ,水解成单糖 分子 ,并迅速脱水生成糠醛 ,然后糠醛与蒽酮缩合成 糠醛衍生物 ,呈蓝绿色 ,颜色稳定 ,在 625 nm 处有特 征吸收 。
(下转第 68页 )
68
合理处方 ,对不合理用药及时予以干预 。这就从立 法上为临床药师在开展不合理处方分析等临床药学 工作方面奠定了基础 ,使临床药师在工作中能做到 有法可依 。当然临床药师要胜任临床药学工作 ,就 必须不断加强学习临床医学知识 ,掌握与医师和患 者沟通的能力 ,势必也会引起传统药学教育模式的 改革 。

分光光度法测定北虫草提取物中多糖的含量摘要:目的:建立北虫草提取物中多糖的含量测定方法。

方法:采用将多糖水解成单糖,经与显色剂3,5-二硝基水杨酸试液显色后,在520nm处测定吸收度的分光光度法。

结果:虫草多糖在0.0006mg～0.030mg范围内时与吸收值有良好的线性关系,R=0.9992,平均加样回收率为99.54%,回收率的RDS为0.63%（n=11）。

结论:该方法操作简便、灵敏、准确、重现性好,适用于虫草多糖的质量控制。

目前国内的北虫草人工养殖规模不断加大,北虫草子实体及北虫草培养基中含有多种生理活性物质,其中的虫草多糖是含量最高的,可以占到总干重量的3%～8%[1],虫草多糖具有提高免疫功能、抗肿瘤、抗衰老、降血糖、抗放射、保护肾脏、抗病毒、降血脂、抗动脉粥样硬化、保肝、耐缺氧等作用[2] [3]。

北虫草提取物是以人工栽培的北虫草子实体及北虫草培养基为原料,经水提－醇沉工艺生产所得,为有效控制北虫草提取物的质量,采用分光光度法对北虫草提取物中多糖的含量进行了测定。

关键词:分光光度法北虫草提取物虫草多糖含量测定1、仪器与试剂北虫草提取物（黑龙江新医圣制药有限责任公司）;UV754N型可见—紫外分光光度计（上海精密科学仪器）;葡萄糖对照品（中国药品生物制品检定所,批号:110833-200902）;试剂均为分析纯,水为重蒸馏水。

2、方法2.1 单糖供试品溶液的制备取本品,研细,精密称取0.8g,置研钵中,加少量水研磨片刻,并用水分次转移至100ml 量瓶中,加水至刻度,摇匀,离心,取上清液,即得。

2.2 总糖供试品溶液的制备取本品,研细,精密称取0.8g置研钵中,加少量水研磨片刻,用盐酸溶液（1→2）10ml分次将糊状物转移至烧瓶中,加热回流30分钟,放冷,加40%氢氧化钠溶液调节PH值至中性,移入500ml瓶中,加水至刻度,离心,取上清液,即得。

2.3 北虫草多糖含量的测定精密量取对照品溶液与单糖、总糖供试品溶液各1ml,分别置25ml量瓶中,各加3,5-二硝基水杨酸试液2ml,摇匀,置沸水浴中加热5分钟,立即冷却。

百令胶囊中虫草多糖的提取和含量测定
马成坚;顾亚萍;芦青
【期刊名称】《浙江中医药大学学报》
【年(卷),期】2004(028)004
【摘要】目的:百令胶囊中虫草多糖的提取及含量测定.方法:水提醇沉法提取令胶囊中虫草多糖,采用硫酸-苯酚法显色,于波长490nm处测定其含量.结果:百令胶囊中虫草多糖粗提纯物中多糖平均含量为45.48%,硫酸-苯酚法测定多糖的平均加样回收率为99.47%,RSD1.78%.结论:百令胶囊有较高的多糖含量.用硫酸-苯酚法测定多糖操作简单、准确,并具有较好的稳定性及重复性.
【总页数】2页(P81-82)
【作者】马成坚;顾亚萍;芦青
【作者单位】浙江大学医学院附属第一医院,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院,杭州,310003;浙江大学医学院附属第一医院,杭州,310003
【正文语种】中文
【中图分类】R2
【相关文献】
1.广东虫草多糖的提取及含量测定 [J], 闫文娟;李泰辉;唐芳勇;郑必胜;姜子德
2.北虫草中虫草素和虫草多糖的提取纯化研究 [J], 沈伟;朱宇红;郝武常;王卫锋
3.发酵冬虫夏草菌粉中虫草多糖的含量测定及其抗辐射作用初探 [J], 杨建鑫; 年永琼; 段雅彬; 辛元尧; 朱琳; 刘贵琴; 李向阳
4.北虫草中虫草素和虫草多糖超声同步提取工艺研究 [J], 袁媛;张雪;王莎莎;王升
厚
5.发酵冬虫夏草菌粉中虫草多糖的含量测定及其抗辐射作用初探 [J], 杨建鑫;年永琼;段雅彬;辛元尧;朱琳;刘贵琴;李向阳
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ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｏｎｔｅபைடு நூலகம்ｔ ｍ ｅａｓｕｒｅｍ ｅｎｔ ｏｆ ｐｏｌｙｓａｅｅｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｚｙｍ ｏｔｉｅ ｆｌｕｉｄ ｏｆ Ｃｏｒｄｙｅｅｐｓ ｍ ｙｃｅｌｉｕｍ ． Ｋ ｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｚｙｍ ｏｔｉｃ ｆｌｕｉｄ ｏｆ Ｃｏｒｄｙｅｅｐｓ ｍ ｙｃｅｌｉｕｍ ； ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ； ｆｏｒａｍ ｅｎ ｍ ａｇｎｕｍ ｒｅｓｉｎ； ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ； ｃｏｎｔｅｎｔ
昆虫幼虫 上 的 子 座 及 幼虫 尸 体 的 复合 体 ，是 高 级 滋 工 、医药 等 领域 ［３ 得 到 广 泛利 用 。本研 究 采 用 Ｄ１０１
补 药 品和名贵 中药 材 。随 着它 的药 用 价值 不 断 增 大 和药用 范 围的 不 断 扩 大 ，对 虫 革 的需 求 量 也 在 不 断 的增加 。但 是 ，由于 天 然 虫 革 严 格 的 寄 生性 及 生 长 环境 的特殊 ，且 因人 为 因 素 的破坏 ，导 致 产量 急 剧 下
维普资讯
浙 江 中 医 药 大学 学 报 ２００７年 ５月第 ３ｌ卷 第 ３期
冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的分离纯化与含量测定
徐 增 龙 张 如 松
浙 江 中 医药 大 学药 学 院 杭 州 ３１００５３ 摘要 ：［目的］从冬 虫夏草 茵丝体发酵液 中提取 ，分 离虫草 多糖 ，并建立样品 中多糖的含量测定方法。［方法］采 用 Ｄ１０１大孔树脂
ｍ ｅａｓｔｌｒｅｍ ｅｎｔ
冬虫 夏革 （Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ）为麦 角菌科 真菌冬 虫夏 革 型精 制方 法 ＿２］。它 是一 种 不含 交 换 基 团 ，具 有 大 孔 菌 Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｂｅｒｋ．）Ｓａｃｃ．寄生 在 蝙蝠 蛾 科 结构 的 高 分 子 材 料 。 自从 问 世 以 来 ，已在 环 保 、化

2011年第10期科学大众·科学教育Popular Science 冬虫夏草(Cordyceps)为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis （Berk.）Sacc ，寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是我国名贵的滋补壮阳出口中药，但是，由于天然虫草严格的寄生性及生长环境的特殊，远远不能满足市场的需求。

因此，从20世纪70年代起，人类就开始利用现代生物发酵技术培育虫草菌丝体[1]来代替天然虫草。

本研究采用从虫草菌丝体发酵液中分离虫草多糖，且用苯酚-硫酸法测定了样品中多糖的含量，结果表明：本方法操作简单，结果准确，重现性好，为进一步的研究开发提供了依据。

一、.仪器与试药T6分光光度计(北京普析仪器分析厂)，DGH.9245A 电热鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司)，AL204电子天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司），EYELA SB-1100水浴锅(上海爱郎仪器有限公司)。

二、方法与结果1.虫草菌丝体发酵液中多糖的提取取冬虫夏草菌丝体发酵液的干燥粉末，精确称取5g ，用80%的乙醇提取以除去单糖、低聚糖等干扰成分，最后用水提取多糖。

提取液在50℃经减压浓缩至原体积的1/3，浓缩液中加入3～5倍量的95%乙醇，静置过夜，抽滤，沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤多次，60℃烘干至恒重，即虫草菌丝体多糖。

2.虫草菌丝体多糖的测定2.1测定原理。

本文采用苯酚-硫酸法测定多糖的含量。

多糖在浓硫酸作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糠醛衍生物，然后和苯酚缩合成有色化合物，用分光光度法测定。

2.2储备液的制备。

2.2.1葡萄糖标准溶液的制备。

精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖对照品100mg ，蒸馏水溶解定容与100ml 容量瓶。

2.2.2苯酚溶液的制备。

称取苯酚100g ，加铝片0.1g 和碳酸氢钠0.05g,蒸馏收集172℃馏分。

称13.33g 馏分水溶解后，置200ml 棕色容量瓶中，用水稀释至刻度。

冬虫夏草菌丝体发酵液中多糖的分离纯化与含量测定【摘要】［目的］从冬虫夏草菌丝体发酵液中提取，分离虫草多糖，并建立样品中多糖的含量测定方法。

［方法］采用D101大孔树脂分离冬虫夏草菌丝体发酵液中的多糖；采用苯酚-硫酸法测定样品中多糖含量。

［结果］虫草多糖的得率为142g/L ；样品中虫草多糖的含量为706%。

［结论］方法简便，准确，重现性好，可用于冬虫夏草菌丝体发酵液中虫草多糖的提取纯化和含量测定。

【关键词】冬虫夏草菌丝体发酵液多糖大孔树脂分离纯化含量测定Separation, Purification and Content Test of Polysaccharide in Zymotic Fluid of Cordycepts MyceliumAbstract：［Objective］To extract and separate polysaccharide from Cordyceps mycelium, and establish content test method of polysaccharide in sample. ［Method］ Take foramen magnum resin D101 to separate polysaccharide from the zymotic fluid of Cordyceps mycelium, the phenol-SO2 method to measure polysaccharide in sample. ［Result］ The receiving rate of polysaccharide was 14.2g/L; the content was 70.6% from sample.［Conclusion］ The said method is simple, convenient, correct, can be used for separation, purification and content measurement of polysaccharide from the zymotic fluid of Cordyceps mycelium.Key words：zymotic fluid of Cordyceps mycelium; polysaccharide; foramen magnum resin; separation and purification; content measurement冬虫夏草(Cordyceps)为麦角菌科真菌冬虫夏草菌Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是高级滋补药品和名贵中药材。

一、实验目的1. 了解虫草的营养成分及其提取方法。

2. 探索虫草中有效成分的提取效率。

3. 为虫草资源的开发利用提供实验依据。

二、实验原理虫草（Cordyceps sinensis）是一种名贵的药用植物，具有很高的药用价值。

虫草中含有多种营养成分，如虫草素、虫草多糖、氨基酸、维生素等。

本实验采用超声波辅助提取法，利用超声波的高频振动和空化作用，提高虫草中有效成分的提取效率。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 虫草粉末：市售优质虫草粉末，经过粉碎、过筛等处理。

- 甲醇：分析纯。

- 乙醇：分析纯。

- 水：去离子水。

2. 实验仪器：- 超声波提取仪。

- 电子天平。

- 高速离心机。

- 紫外可见分光光度计。

- 烘箱。

- 烧杯、试管、移液管等。

四、实验方法1. 虫草提取液的制备：（1）称取虫草粉末2.0g，置于烧杯中。

（2）加入10mL甲醇，超声提取30分钟。

（3）提取液经离心（3000r/min，10分钟）后，取上清液备用。

2. 虫草提取液浓度的测定：（1）取一定量的虫草提取液，用紫外可见分光光度计在特定波长下测定吸光度。

（2）根据标准曲线计算虫草提取液中的有效成分浓度。

3. 虫草提取液的干燥与复溶：（1）将虫草提取液置于烘箱中，于60℃下干燥至恒重。

（2）将干燥后的虫草提取物用适量乙醇复溶，备用。

五、实验结果与分析1. 虫草提取液的制备：通过超声波辅助提取法，虫草粉末中的有效成分得以充分提取，提取率较高。

2. 虫草提取液浓度的测定：根据标准曲线，虫草提取液中的有效成分浓度为0.5mg/mL。

3. 虫草提取液的干燥与复溶：虫草提取物在60℃下干燥至恒重，干燥后质量为0.1g。

复溶后，虫草提取物的浓度为5mg/mL。

六、实验结论1. 超声波辅助提取法能够有效提高虫草中有效成分的提取效率。

2. 虫草提取液具有较高的营养价值，可作为药用或食品添加剂。

3. 本实验为虫草资源的开发利用提供了实验依据。

七、实验讨论1. 虫草提取液中有效成分的种类和含量与虫草的产地、品种、生长环境等因素有关。

比色法测定冬虫夏草和蛹虫草中多糖和甘露醇的含量应用苯酚-硫酸法、3，5-二硝基水杨酸法和高碘酸钠氧化法建立虫草多糖和甘露醇的定量分析方法，并比较市售天然冬虫夏草和人工栽培蛹虫草在多糖和甘露醇含量上的差异。

结果发现，用比色法测定三种天然虫草和六种蛹虫草中多糖和甘露醇的含量，其多糖平均加样回收率分别为：94.7％(RSD为2.29％)，甘露醇的含量平均加样回收率为98.8％(RSD为1.79％)。

实验表明，本研究方法可用于虫草多糖和甘露醇的定量分析。

冬虫夏草；蛹虫草；虫草多糖；甘露醇；比色法S567.35A冬虫夏草为麦角菌科真菌冬虫夏草Cordyceps sinensis（Berk.）Sacc.寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，为我国名贵的滋补强壮中药。

近代医学认为，冬虫夏草能治劳咳痰血、盗汗、阳痿、遗精、黄疸病、肺结核及老人衰弱慢性咳喘等，有强壮而兼收镇静之效果。

所含的冬虫夏草多糖能提高机体的免疫功能，并提高血清的皮质酮含量，促进机体核酸及蛋白质的代谢，具有抑瘤作用［1、2］。

所含的D-甘露醇具有利尿脱水、镇咳、祛痰和平喘之功效［3］［4］。

目前由于过度挖掘，导致了生态环境的严重破坏，因此其替代品人工栽培的的蛹虫草（Cordyceps militaris）日益受到人们的重视。

本实验用比色法测定了冬虫夏草和蛹虫草中多糖和甘露醇的含量，为冬虫夏草和蛹虫草质量品质的评价研究提供了科学依据。

1 仪器和试剂1.1仪器万分之一分析天平Spectrophotometer DU 640，Mettler ae200，十万分之一分析天平Sartorius BP211D，XW-80A 涡旋混合器购自上海医科大学仪器厂产品。

1.2试剂醋酸胺、冰醋酸、乙酰丙酮、高碘酸钠、3,5-二硝基水杨酸、重蒸苯酚、亚硫酸钠、氢氧化钠和酒石酸钾钠等均为国产分析纯试剂。

标准品葡萄糖为美国Sigma公司产品，甘露醇(分析纯)为国药集团化学试剂有限公司产品，L（+）-鼠李糖为中国医药（集团）上海试剂公司产品。

广东虫草多糖脱蛋白及凝胶渗透色谱法表征其分子量分布的研
究
广东虫草多糖脱蛋白及凝胶渗透色谱法表征其分子量分布的研究
通过比较蛋白脱除率和多糖损失率,研究Savage法、三氯乙酸(TCA)法及盐酸法对广东虫草多糖(CGP)脱蛋白的效果,并利用凝胶渗透色谱法(GPC)测定虫草多糖组分的保留时间tR、重均分子量Mw、数均分子量Mn、峰位分子量Mp、多分散性PD以及各细分的相对含量,以表征广东虫草多糖的分子量分布.结果表明:采用Savage法脱蛋白总体效果较好,处理次数3次为宜;GPC谱图分析结果表明,CGP含有三个不同分子量级别的多糖组分,其重均分子量Mw分别为2.57×106、3.84×104及5.00×103.
作者：郑必胜何禄英 ZHENG Bi-Sheng HE Lu-Ying 作者单位：华南理工大学轻工与食品学院,广东,广州,510640 刊名：现代食品科技 ISTIC英文刊名：MODERN FOOD SCIENCE & TECHNOLOGY 年，卷(期)：2009 25(6) 分类号：O629 关键词：广东虫草多糖脱蛋白凝胶渗透色谱法(GPC) 分子量分布。