常见的市售酸碱的浓度
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1%酚酞所需药品:酚酞用途:酸碱指示剂配制方法:称取1g酚酞,用100mL无水乙醇溶解0.1%甲基红所需药品:甲基红用途:配制甲基红-溴甲酚绿混合指示剂配制方法:称取1g甲基红,用1000mL无水乙醇溶解0.1%溴甲酚绿所需药品:溴甲酚绿用途:配制甲基红-溴甲酚绿混合指示剂配制方法:称取1g溴甲酚绿,用1000mL无水乙醇溶解用途:测蛋白质用指示剂配制方法:临用时按0.1%甲基红:0.1%溴甲酚绿=1:5体积比混合而成1%淀粉指示剂所需药品:可溶性淀粉用途:活性氯测定指示剂配制方法:称取1.0g可溶性淀粉,加少量RO水搅匀,随后一面搅拌一面加入热水约60mL再将此溶液煮沸2-3min,静置冷却,加NaCl20g,溶解后再加RO水至100mL(可冷藏备用)3%硼酸溶液所需药品:硼酸用途:测定蛋白质配制方法:称取3.0g硼酸,用RO水溶解并定溶至100mL40%NaOH溶液所需药品:NaOH用途:测定蛋白质配制方法:称取416.7g NaOH,溶解于583.3g RO水中邻联甲苯胺溶液所需药品:分析纯Hcl、邻联甲苯胺用途:检测水中余氯配制方法:量取150mL浓盐酸用RO水稀释至500mL。
称取1.00g邻联甲苯胺(或1.35g邻联甲苯胺盐酸盐),并吸取5mL配制好的盐酸一同放入玻璃研钵器中研成糊状。
然后置入1000mL的容器中加150mL蒸馏水稀释,同时加入495mL稀盐酸并用玻璃棒充分搅拌,最后用蒸馏水稀释至1000mL。
0.1mol/L NaOH标准溶液配制:称取4.17gNaOH(纯度96%),加蒸馏水溶解,并稀释至1000mL。
标定:精确称取0.2g在105-110℃烘至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾,溶于50mL 新煮沸过的冷水中,加2滴酚酞指标剂,用配制好的NaOH溶液滴定至溶液呈粉红色。
同时作空白试验。
结果表示C(NaOH)=式中:C(NaOH):氢氧化钠标准溶液之物质的量浓度,mol/Lm:邻苯二甲酸氢钾之质量,gV1:氢氧化钠溶液之用量,mLV2:空白试验氢氧化钠溶液之用量,mL0.2042:与1.00mL NaOH标准溶液[C(NaOH)=1.000mol/L]相当的基准邻苯二甲酸氢钾的质量(g)0.1mol/L HCl标准溶液配制量取9mLHCl,加适量水并稀释至1000mL。
试剂的配制和取用1.常用试剂的规格化学试剂的门类很多,世界各国对化学试剂的分类和分级的标准不尽一致。
国际标准化组织(ISO)近年来已陆续建立了很多种化学试剂的国际标准。
我国化学药品的等级是按杂质含量的多少来划分的。
如表1-1所示。
此外,还有基准试剂,光谱纯试剂,色谱纯试剂等试剂在普通化学实验中配配试剂常用的市售浓酸,碱溶液的浓度见表1-2。
试剂的配制应该根据节约的原则,按实验的要求,分别选用不同规格的试剂。
不要认为试剂越纯越好,超越具体条件盲目追求高纯度而造成浪费。
当然也不能随意降低规格而影响测定结果的准确度。
2.试剂的保管试剂或者保管不当,会变质失效,不仅造成浪费,甚至会引起事故。
一般的化学试剂应保存在通风良好、干净、干燥的房子里,以防止被水分、灰尘和其他物质污染。
同时,应根据试剂的不同性质而采取不同的保管方法。
容易侵蚀玻璃而影响试剂纯度的试剂,如氢氟酸、含氟盐(氟化钾、氟化钠、氟化铵)和苛性碱(氢氧化钾、氢氧化钠),应保存在聚乙烯塑料瓶或涂有石蜡的玻璃瓶中。
见光会逐渐分解的试剂,(如过氧化氢、硝酸银、焦性没食子酸、高锰酸钾、草酸、铋酸钠等),与空气接触易逐渐被氧化的试剂(如氯化亚锡、硫酸亚铁、硫代硫酸钠、亚硫酸钠等),以及易挥发的试剂(如溴、氨水及乙醇等),应放在棕色瓶内置冷暗处。
吸水性强的试剂,如无水碳酸盐、苛性钠、过氧化钠等应严格密封(应该蜡封)。
相互易作用的试剂,如挥发性的酸与氨,氧化剂与还原剂应分开存放。
易烯的试剂,如乙醇、乙醚、苯、丙酮与易爆炸的试剂,如高氯酸、过氧化氢、硝基化合物,应分开贮存在阴凉通风、不受阳光直射的地方。
剧毒试剂,如氰化钾、氰化钠、氢氟酸、二氯化汞、三氧化二砷(砒霜)等,应特别注意由专人妥善保管,严格做好记录,经一定手续取用,以免发生事故。
极易挥发并有毒的试剂可放在通风橱内,当室内温度较高时,可放在冷藏室内保存。
3.试剂滴液的配制配制试剂溶液时,首先根据所配制试剂纯度的要求,选用不同等级试剂,再根据配制溶液的浓度和数量,计算出试剂的用量。
实验室安全操作规程一、实验室安全守则(一)分析人员必须认真学习分析规程和有关的安全技术规程,了解设备性能及操作中可能发生事故原因,掌握预防和处理事故的方法。
(二)玻璃管与胶管、胶塞等拆装时,应先用水润湿,手上垫棉布,以免玻璃管折断扎伤. (三)稀释浓硫酸的容器要放在塑料盆中,只能将浓硫酸慢慢到入水中,不能相反!必要时用水冷却。
(四)蒸馏和提纯时不能离人,以防温度过高或冷却水突然中断。
(五)化验室每瓶试剂必须贴有明显的与内容物相符的标签。
严禁将用完的原装试剂空瓶不更换标签而装入别种试剂。
发现试剂瓶上标签掉落或将要模糊时应立即贴好标签.(六)不准使用绝缘损坏或老化的线路及电器设备。
保持电器及电线的干燥.(七)正确操作闸刀开关,应使闸刀处于安全合上或完全拉断的位置,不能若即若离,以防接触不良打火花.(八)使用酒精灯时,注意酒精切勿装满,应不超过容量的2/3,灯内酒精不足1/4容量时,应灭火后添加酒精。
燃着的灯焰应用灯冒盖灭,不可用嘴吹灭,以防引起灯内酒精起燃。
酒精灯应用火柴点燃,不应用另一正燃的酒精灯来点,以防失火。
(九)若局部起火,应立即切断电源,用湿抹布或石棉布覆盖熄灭。
若火势较猛,应立即与有关部门联系,请求救援.(十)打开浓盐酸、浓硝酸、浓氨水试剂瓶塞时应戴防护用具。
(十一)打开高温烘箱前,须确认箱内温度小于100℃后方可打开。
(十二)若遇酸碱液灼烧时,速用大量自来水冲洗患处。
属酸液烧伤,用2%碳酸氢钠冲洗;属碱液烧伤,用2%硼酸冲洗,再用清水冲洗。
二、化学试剂的分类和规格(一)化学试剂按其用途分为一般试剂、基准试剂、无机离子分析用有机试剂、色谱试剂与制剂、指示剂与试纸等。
(二)实验室最常见试剂的规格1.基准试剂是一类用于标定滴定分析标准溶液的标准参考物质,可作为滴定分析中的基准物用,也可精确称量后直接配制标准溶液.主成分含量一般在99.95%—100.05%,杂质含量略低于优级纯或与优级纯相当.标签颜色为浅蓝色.2.优级纯试剂,也称为保证试剂,其成分高,杂质含量低,主要用于精密的科学研究和测定工作,简称GR级。
一、实验室基础知识一、实验室安全守则(一)分析人员必须认真学习分析规程和有关的安全技术规程,了解设备性能及操作中可能发生事故原因,掌握预防和处理事故的方法。
(二)玻璃管与胶管、胶塞等拆装时,应先用水润湿,手上垫棉布,以免玻璃管折断扎伤。
(三)稀释浓硫酸的容器要放在塑料盆中,只能将浓硫酸慢慢到入水中,不能相反!必要时用水冷却。
(四)蒸馏和提纯时不能离人,以防温度过高或冷却水突然中断。
(五)化验室每瓶试剂必须贴有明显的与内容物相符的标签。
严禁将用完的原装试剂空瓶不更换标签而装入别种试剂。
发现试剂瓶上标签掉落或将要模糊时应立即贴好标签。
(六)不准使用绝缘损坏或老化的线路及电器设备。
保持电器及电线的干燥。
(七)正确操作闸刀开关,应使闸刀处于安全合上或完全拉断的位置,不能若即若离,以防接触不良打火花。
(八)使用酒精灯时,注意酒精切勿装满,应不超过容量的2/3 ,灯内酒精不足1/4 容量时,应灭火后添加酒精。
燃着的灯焰应用灯冒盖灭,不可用嘴吹灭,以防引起灯内酒精起燃。
酒精灯应用火柴点燃,不应用另一正燃的酒精灯来点,以防失火。
(九)若局部起火,应立即切断电源,用湿抹布或石棉布覆盖熄灭。
若火势较猛,应立即与有关部门联系,请求救援。
(十)打开浓盐酸、浓硝酸、浓氨水试剂瓶塞时应戴防护用具。
(十^一)打幵高温烘箱前,须确认箱内温度小于100C后方可打幵。
(十二)若遇酸碱液灼烧时,速用大量自来水冲洗患处。
属酸液烧伤,用2%碳酸氢钠冲洗;属碱液烧伤,用2%硼酸冲洗,再用清水冲洗。
二、化学试剂的分类和规格(一)化学试剂按其用途分为一般试剂、基准试剂、无机离子分析用有机试剂、色谱试剂与制剂、指示剂与试纸等。
(二)实验室最常见试剂的规格1. 基准试剂是一类用于标定滴定分析标准溶液的标准参考物质,可作为滴定分析中的基准物用,也可精确称量后直接配制标准溶液。
主成分含量一般在99.95 %—100.05 %,杂质含量略低于优级纯或与优级纯相当。
附录附录1洗涤液的配制及使用1. 铬酸洗液主要用于去除少量油污,是无机及分析化学实验室中最常用的洗涤液。
使用时应先将待洗仪器用自来水冲洗一遍,尽量将附着在仪器上的水控净,然后用适量的洗液浸泡。
配制方法:称取25g化学纯K2Cr2O7置于烧杯中,加50 mL水溶解,然后一边搅拌一边慢慢沿着烧杯壁加入450 mL工业浓H2SO4,冷却后转移到有玻璃塞的细口瓶中保存。
2. 酸性洗液工业盐酸(1:1),用于去除碱性物质和无机物残渣,使用方法与铬酸洗液相同。
3. 碱性洗液1%的NaOH水溶液,可用于去除油污,加热时效果较好,但长时间加热会腐蚀玻璃。
使用方法与铬酸洗液相同。
4. 草酸洗液用于除去Mn,Fe等氧化物。
加热时洗涤效果更好。
配制方法:5~10g草酸溶于100 mL水中,再加入少量浓盐酸。
5. 盐酸-乙醇洗液用于洗涤被染色的比色皿、比色管和吸量管等。
配制方法:将化学纯的盐酸与乙醇以1:2的体积比混合。
6. 酒精与浓硝酸的混合液此溶液适合于洗涤滴定管。
使用时,先在滴定管中加入3 mL酒精,沿壁再加入4 mL 浓HNO3,盖上滴定管管口,利用反应所产生的氧化氮洗涤滴定管。
7. 含KMnO4的NaOH水溶液将10 g KMnO4溶于少量水中,向该溶液中注入100 mL 10% NaOH溶液即成。
该溶液适用于洗涤油污及有机物,洗后在玻璃器皿上留下的MnO2沉淀,可用浓HCl或Na2SO3溶液将其洗掉。
附录2市售酸碱试剂的浓度及比重附录3常用指示剂(1)酸碱指示剂(2)混合指示剂(3)配位滴定指示剂附录4不同温度下,稀溶液体积对温度的补正值附录5化学试剂纯度分级表①以20%乙醇为溶剂,配成0.1%(W / V)溶液。
除此之外,还有高纯试剂,色谱纯试剂,光谱纯试剂,生化试剂等。
高纯试剂(EP):包括超纯、特纯、高纯、光谱纯,配制标准溶液。
此类试剂质量注重的是:在特定方法分析过程中可能引起分析结果偏差,对成分分析或含量分析干扰的杂质含量,但对主含量不做很高要求。
实验室安全操作规程一、实验室安全守则(一)分析人员必须认真学习分析规程和有关的安全技术规程,了解设备性能及操作中可能发生事故原因,掌握预防和处理事故的方法。
(二)玻璃管与胶管、胶塞等拆装时,应先用水润湿,手上垫棉布,以免玻璃管折断扎伤。
(三)稀释浓硫酸的容器要放在塑料盆中,只能将浓硫酸慢慢到入水中,不能相反!必要时用水冷却。
(四)蒸馏和提纯时不能离人,以防温度过高或冷却水突然中断。
(五)化验室每瓶试剂必须贴有明显的与内容物相符的标签。
严禁将用完的原装试剂空瓶不更换标签而装入别种试剂。
发现试剂瓶上标签掉落或将要模糊时应立即贴好标签。
(六)不准使用绝缘损坏或老化的线路及电器设备。
保持电器及电线的干燥。
(七)正确操作闸刀开关,应使闸刀处于安全合上或完全拉断的位置,不能若即若离,以防接触不良打火花。
(八)使用酒精灯时,注意酒精切勿装满,应不超过容量的2/3,灯内酒精不足1/4容量时,应灭火后添加酒精。
燃着的灯焰应用灯冒盖灭,不可用嘴吹灭,以防引起灯内酒精起燃。
酒精灯应用火柴点燃,不应用另一正燃的酒精灯来点,以防失火。
(九)若局部起火,应立即切断电源,用湿抹布或石棉布覆盖熄灭。
若火势较猛,应立即与有关部门联系,请求救援。
(十)打开浓盐酸、浓硝酸、浓氨水试剂瓶塞时应戴防护用具。
(十一)打开高温烘箱前,须确认箱内温度小于100℃后方可打开。
(十二)若遇酸碱液灼烧时,速用大量自来水冲洗患处。
属酸液烧伤,用2%碳酸氢钠冲洗;属碱液烧伤,用2%硼酸冲洗,再用清水冲洗。
二、化学试剂的分类和规格(一)化学试剂按其用途分为一般试剂、基准试剂、无机离子分析用有机试剂、色谱试剂与制剂、指示剂与试纸等。
(二)实验室最常见试剂的规格1.基准试剂是一类用于标定滴定分析标准溶液的标准参考物质,可作为滴定分析中的基准物用,也可精确称量后直接配制标准溶液。
主成分含量一般在99.95%—100.05%,杂质含量略低于优级纯或与优级纯相当。
常用试剂的配方常用贮液与溶液 (1)1mol/L亚精胺(Spermidine) (1)1mol/L精胺(Spermine) (1)10mol/L乙酸胺(ammonium acetate) (1)10mg/ml牛血清蛋白(BSA) (1)1mol/L二硫苏糖醇(DTT) (1)8mol/L乙酸钾(potassium acetate) (1)1mol/L氯化钾(KCl) (1)3mol/L乙酸钠(sodium acetate) (1)0.5mol/L EDTA (1)1mol/L HEPES (1)1mol/L HCl (1)25mg/ml IPGT (1)1mol/LMgCl2 (1)100mmol/L PMSF (1)20mg/ml蛋白酶K(proteinase K) (1)10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase) (1)5mol/L氯化钠(NaCl) (1)10N氢氧化钠(NaOH) (1)10%SDS(十二烷基硫酸钠) (1)2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol) (2)100%三氯乙酸(TCA) (2)2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷) (2)100×Denhardt试剂(Denhardt’s regent) (2)10×标准DNA连接酶缓冲液(standard DNA ligase buffer)(粘端、平端连接) (2)100 mmol/L dNTP 溶液(dNTP solutions) (2)20%PEG 8000/2.5M NaCl (2)20×SSC (2)DEPC(焦碳酸二乙酯)处理水 (3)甲酰胺(deionized formamide) (3)TE(用于悬浮和贮存DNA) (3)Tris缓冲液(Tris-HCl buffer) (3)30%丙烯酰胺溶液 (3)40%丙烯酰胺 (3)放线菌素D溶液 (4)0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液 (4)10mol/L乙酸酰溶液 (4)10%过硫酸铵溶液 (4)BCIP溶液 (4)2×BES缓冲盐溶液 (4)1mol/L CaCl2溶液 (5)2.5mol/L CaCl2溶液 (5)1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液 (5)脱氧核苷三磷酸(dNTP)溶液 (5)0.5mol/L EDTA(pH8.0)溶液 (6)2×HEPES缓冲盐溶液 (6)IPTG溶液 (6)1mol/L乙酸镁溶液 (6)1mol/L MgCl2溶液 (6)β-巯基乙醇(BME)溶液 (7)NBT溶液 (7)酚/氯仿溶液 (7)10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液 (7)磷酸盐缓冲溶液(PBS)溶液 (7)1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液 (8)乙酸钾溶液(用于碱裂解) (8)3mol/L乙酸钠(pH5.2和pH7.0)溶液 (8)5mol/L NaCl溶液 (8)10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液 (8)20×SSC溶液 (8)20×SSPE溶液 (9)100%三氯乙酸溶液 (9)1mol/L Tris溶液 (9)Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/L Tris) (9)X-gal溶液 (9)PBS: (10)TBS: (10)枸橼酸盐缓冲液(Citrate buffer): (10)胰酶(Trypsin): (10)胃酶(Pepsin): (10)DAB: (10)AEC: (10)RIPA: (11)9、Blotto A: (11)10、Blotto B: (11)电泳缓冲液、染料和凝胶加样液 (11)电泳缓冲液 (11)染料 (11)10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide) (11)凝胶上样液(gel loading solutions) (12)6×聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存) (12)6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存) (12)6×甘油凝胶上样液(4℃贮存) (12)6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存) (13)10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存) (13)常用培养基 (13)LB培养基 (13)SOC培养基 (13)TB培养基 (14)YPD培养基 (14)常用抗生素 (14)羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml) (14)甲氧西林(methicillin)(100mg/ml) (14)卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml) (14)氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml) (14)链霉素(streptomycin)(50mg/ml) (14)萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml) (15)四环素(tetracyyline)(10mg/ml) (15)实验室常用贮存液的配制参数 (15)一、核酸及蛋白质常用数据 (15)2.常用核酸的长度与分子量 (15)3.常用核酸蛋白换算数据 (16)4.常用蛋白质分子量标准参照物 (17)5.常用DNA分子量标准参照物 (17)二、常用缓冲液 (18)1.分子克隆常用缓冲液 (18)2.磷酸缓冲液 (18)3.电泳缓冲液 (20)4.凝胶加样缓冲液 (21)5.各种pH值的Tris缓冲液的配制 (22)7.温度对常用缓冲液pH的影响 (24)三、常用酶的配制 (25)1.溶菌酶 (25)2.蛋白水解酶类 (25)3.无DNA酶的RNA酶 (25)四、常用抗生素溶液 (25)五、杂交试验中用于降低背景的封闭剂 (26)六、常用凝胶的技术参数 (27)1.葡聚糖凝胶的某些技术数据 (27)2.聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 (29)3.琼脂糖凝胶的技术数据 (29)4.各处凝胶所允许的最大操作压 (30)5.琼脂糖凝胶浓度与线性DNA分辨范围 (30)6.染料在变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (30)7.染料在非变性聚丙烯酰胺凝胶中的迁移速度 (31)七、氨基酸的特性 (31)八、遗传密码 (32)九、常用酸碱技术参数 (33)1.常见的市售酸碱的浓度 (33)2.各种浓度的酸碱贮存液的近似pH值 (34)常用贮液与溶液1mol/L亚精胺(Spermidine)溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。