液相色谱示差折光法测定蜂蜜中的果糖葡萄糖蔗糖和麦芽糖pdf

[作者简介 ] 蔡欣欣 (1968-, 女 , 大学本科 , 副主任技师 , 主要从事食品卫生理化检验研究。

=论著 >高效液相色谱蒸发光散射检测法测定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和麦芽糖蔡欣欣 , 张秀尧(浙江省温州市疾病预防控制中心 , 浙江温州 325001[摘要 ] 目的 :建立简便、准确、灵敏的测定食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖和麦芽糖的高效液相色谱蒸发光散射检测方法。

方法 :样品经水提取 , 乙腈沉淀 , 并过 C 18SPE 柱 , 以乙腈 :水 (75:25, v /v 为流动相 , 经 A lltech P reva il T MCa rbohy drate ES(250@416mm, 5L m 柱分离 , 蒸发光散射检测器检测。

结果 :果糖、葡萄糖和蔗糖的测定范围分别为 :20~320m g/L、 25~400m g/L和 25~400m g/L, 检出限分别为 4m g/L、 5mg /L和5m g/L, 乳糖和麦芽糖的测定范围为 50~800m g/L, 检出限为 15m g/L, 5种糖的回收率在 9712%~10614%之间 , 测定的相对标准偏差在 0156%~211%。

结论 :该法操作简便、快速、准确 , 适用于多种食品中糖的分析。

[关键词 ] 高效液相色谱 ; 激光蒸发光散射检测 ; 食品 ; 果糖 ; 葡萄糖 ; 蔗糖 ; 麦芽糖 ; 乳糖[中图分类号 ] O65717+2 [文献标识码 ] A [文章编号 ] 1004-8685(2007 06-0968-03Ana lysis of fructose , glucose , sucrose , lactose and m a ltose in food by h igh per form an ce liqu id chro m a tography w ith evapora tive light sca tter i n g detectorCa i Xin 2xin , Zha ng X i u 2yao(W enzhou Center f or Disease Co ntrol and P reventi on , W enzhou 325001, Ch i na[Ab stra ct] O bjective :To establis h a si m p l e , accurate and sensitive m ethod for dete r m ina ti on of fructose , gl ucose , sucrose , l ac 2tose and ma ltose in foo d by h i gh per f or m ance li quid chro m atography w i th evaporati ve li ght sca tter i ng detector 1M e thods :The sug 2a rs i n food sa m ples were extrac ted w it h wate r and t he extracts were dil uted with ace t on itril e to re m ove aqueous sol ub l e i m puri 2ti es 1F urt her c l eanup was perfor m ed on a C 18cartr i dge t o re m ove the nonpol ar co mponents 1The carbo hydra tes were separated o nA lltech P reva il T M Carbohydrate ES colu mn (250@416mm, 5L m by usi ng acetonitr ile :water (75:25, v/vas the m obil ephase 1R es u lts :The linear range was 20~320m g/L, 25~400m g/L, 25~400m g/L, 50~800m g/L, 50~800m g/Lw ith the detectio n ij m it of 4mg/L, 5m g/L, 5mg /L,15mg/L, 15m g/Lfor fructose , gl ucose , sucrose , lactose and m altose , respecti ve 2ly1The average recove ries f or all fi ve analytes ranged fro m 9712%to 10614%and the re lati ve standard devi a tio n was 0156%~211%(n =6 1C onc l u si on :This m ethod is f ound to be si m ple , f ast , and accurate f or ana lysis of fructose , gl ucose , sucrose , l ac 2tose and ma ltose in foo d 1[K ey wor ds] H i gh perfor mance li qui d chro m atography ; Evaporative lig h t sca tter i ng de tecti on ; Food ; F ruc t ose ; G l ucose ; Su 2crose ; Lactose ; M a lt ose糖是食品的重要成分之一 , 由于各种糖测定比较困难 , 目前食品中涉及糖的项目 , 多以还原糖或总糖来表示。

蜂蜜中果糖和葡萄糖含量测定问题的研究蒲晓亚;杜旭升;刘泊;张华【摘要】利用液相色谱示差折光检测法和碱性酒石酸铜试液直接滴定法,对相同蜂蜜中果糖和葡萄糖含量进行了检测,发现两者的检测结果存在较大差异,液相色谱法比滴定法测出的结果平均下降了约9.5％.对2种检测方法及检测结果做了比较、分析和讨论,液相色谱法测的是蜂蜜中的果糖和葡萄糖单体,而滴定法测的是蜂蜜中的还原糖类别,因此两者存在较大差异是有可能的.由于样品少,条件有限,检测结果不一定有代表性,但希望检测机构和蜂产品企业同行能够引起重视,在制定标准时,能够充分考虑基层、一线企业的实际情况,标准尽量科学、严谨、简单、通用、易于操作、便于推广、成本低廉、普及性强,并能保障食品质量的安全可靠.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(043)032【总页数】2页(P147-148)【关键词】蜂蜜;果糖;葡萄糖;检测【作者】蒲晓亚;杜旭升;刘泊;张华【作者单位】甘肃省产品质量监督检验东部分中心,甘肃天水741000;甘肃省产品质量监督检验东部分中心,甘肃天水741000;天水维尔康蜂业科技有限公司,甘肃天水741022;天水维尔康蜂业科技有限公司,甘肃天水741022【正文语种】中文【中图分类】S896.82011年4月，国家卫生部发布GB 14963－2011《食品安全国家标准—蜂蜜》，其中理化指标果糖和葡萄糖含量要求每100 g蜂蜜中不得少于60 g，检验方法按GB/T 18932．22《蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法—液相色谱示差折光检测法》(简称液相色谱法)进行测定。

在SN/T 0852－2012《进出口蜂蜜检验规程》中，果糖和葡萄糖含量测定采用GB/T 18932．22规定的液相色谱法或GB/T 5009．7《食品中还原糖的测定》中规定的碱性酒石酸铜试液直接滴定法和高锰酸钾滴定法，《中华人民共和国药典》2010年版一部337页《蜂蜜》标准项下的还原糖测定采用碱性酒石酸铜试液直接滴定法(统称滴定法)。

HPLC示差折光分析法测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖含量田艳铃;王浩;刘艳琴;杨红梅;殷晓燕【期刊名称】《中国食品添加剂》【年(卷),期】2006(000)006【摘要】本文利用高效液相示差折光分析法测定饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖含量.方法采用Agilent Carbohydrate柱,流动相为乙腈+水(75 ∶25),流速0.6mL/min,检测器池温度:35℃,柱温25℃,进样量15μL.方法的检出限0.5%,加标回收率92.0%110.0%,相对标准偏差为4.13%.该法具有样品预处理简单,灵敏度高,分析时间短等优点,可用于饮料样品的直接测定.【总页数】3页(P187-189)【作者】田艳铃;王浩;刘艳琴;杨红梅;殷晓燕【作者单位】北京市海淀区产品质量监督检验所,北京,100083;北京市海淀区产品质量监督检验所,北京,100083;北京市海淀区产品质量监督检验所,北京,100083;北京市海淀区产品质量监督检验所,北京,100083;北京市海淀区产品质量监督检验所,北京,100083【正文语种】中文【中图分类】TS2【相关文献】1.液相色谱-示差折光法测定蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖的改进研究 [J], 汪良清;胡桂标2.HPLC示差折光分析法测定D-氨基葡萄糖盐酸盐中的N-乙酰-D-氨基葡萄糖 [J], 王英锋;晏利芝;郭雪清3.高效液相色谱-示差折光检测法测定辅助生殖培养液中果糖及葡萄糖的含量 [J], 孙雪;黄元礼;柯林楠;4.高效液相色谱-示差折光检测法测定辅助生殖培养液中果糖及葡萄糖的含量 [J], 孙雪;黄元礼;柯林楠5.HPLC示差折光分析法测定人参果蔬发酵饮料中果糖、葡萄糖、蔗糖含量 [J],刘洪亮;张念洁;汪浩因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

万方数据　万方数据　万方数据　万方数据液相色谱示差折光法测定蜂蜜中的果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖作者：张书芬， 史萍萍， 王全林， 沈坚， 傅晓， ZHANG Shu-fen， SHI Ping-ping， WANG Quan-lin， SHEN Jian， FU Xiao作者单位：宁波市产品质量监督检验所,浙江,宁波,315041刊名：食品科学英文刊名：FOOD SCIENCE年，卷(期)：2008,29(6)被引用次数：2次1.GB 18796-2005.蜂蜜2.SN/Y 0852-2000.出口蜂蜜检验方法3.AOAC编译委员会.国家出入境检验检疫局公定分析方法 19914.GB/T 18932.22-2003.蜂蜜中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖含量的测定方法--液相色谱示差折光检测法5.崔鹤.李戈登离子色谱脉冲安培法测定蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖[期刊论文]-化学分析计量 2001(01)6.王荔.陈巧珍.宋国新高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法测定烤烟中的水溶性葡萄糖、果糖和蔗糖[期刊论文] -色谱 2006(02)7.YOUNG C S用HPLC和蒸发光散射检测对糖类分析的方法学 2002(02)8.饶震红.李民赞.吉海彦短波近红外光谱法同时定量分析水溶液中葡萄糖、果糖和蔗糖[期刊论文]-光谱学与光谱分析 2006(04)9.单瑞峰毛细管电泳电化学检测法测定南瓜中糖类物质[期刊论文]-山东化工 2006(02)10.孙兰.黎淑端.聂木海一起食品中还原糖测定结果异常的原因分析[期刊论文]-中国卫生检验杂志 2005(09)1.满娟娟.申勋宇.李宏军高效液相色谱法测定上面发酵法小麦啤酒麦汁中可发酵糖[期刊论文]-食品工业科技2010(3)2.盛文胜.江军山.王训斌.李树岚.万丹不同蜂蜜中果糖·葡糖糖和蔗糖含量的测定[期刊论文]-安徽农业科学2010(30)本文链接：/Periodical_spkx200806059.aspx。

食品安全国家标准食品中果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖㊁乳糖的测定1范围本标准规定了食品中果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖㊁乳糖的测定方法㊂本标准第一法适用于食品中果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖㊁乳糖的测定,第二法适用于食品中蔗糖的测定㊂第一法 高效液相色谱法,本法适用于谷物类㊁乳制品㊁果蔬制品㊁蜂蜜㊁糖浆㊁饮料等食品中果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖的测定㊂第二法 酸水解-莱因-埃农氏法,本法适用于食品中蔗糖的测定㊂第一法高效液相色谱法2原理试样中的果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖经提取后,利用高效液相色谱柱分离,用示差折光检测器或蒸发光散射检测器检测,外标法进行定量㊂3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B/T6682规定的一级水㊂3.1试剂3.1.1乙腈:色谱纯㊂3.1.2乙酸锌[Z n(C H3C O O)2㊃2H2O]㊂3.1.3亚铁氰化钾{K4[F e(C N)6]㊃3H2O}㊂3.1.4石油醚:沸程30ħ~60ħ㊂3.2试剂配制3.2.1乙酸锌溶液:称取乙酸锌21.9g,加冰乙酸3m L,加水溶解并稀释至100m L㊂3.2.2亚铁氰化钾溶液:称取亚铁氰化钾10.6g,加水溶解并稀释至100m L㊂3.3标准品3.3.1果糖(C6H12O6,C A S号:57-48-7)纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质㊂3.3.2葡萄糖(C6H12O6,C A S号:50-99-7)纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质㊂3.3.3蔗糖(C12H22O11,C A S号:57-50-1)纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质㊂3.3.4麦芽糖(C12H22O11,C A S号:69-79-4)纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质㊂3.3.5乳糖(C6H12O6,C A S号:63-42-3)纯度为99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质㊂3.4标准溶液配制3.4.1糖标准贮备液(20m g/m L):分别称取上述经过96ħʃ2ħ干燥2h的果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖各1g,加水定容于50m L,置于4ħ密封可贮藏一个月㊂3.4.2糖标准使用液:分别吸取糖标准贮备液1.00m L㊁2.00m L㊁3.00m L㊁5.00m L于10m L容量瓶㊁加水定容,分别相当于2.0m g/m L㊁4.0m g/m L㊁6.0m g/m L㊁10.0m g/m L浓度标准溶液㊂4仪器和设备4.1天平:感量为0.1m g㊂4.2超声波振荡器㊂4.3磁力搅拌器㊂4.4离心机:转速ȡ4000r/m i n㊂4.5高效液相色谱仪,带示差折光检测器或蒸发光散射检测器㊂4.6液相色谱柱:氨基色谱柱,柱长250mm,内径4.6mm,膜厚5μm,或具有同等性能的色谱柱㊂5试样的制备和保存5.1试样的制备5.1.1固体样品取有代表性样品至少200g,用粉碎机粉碎,并通过2.0mm圆孔筛,混匀,装入洁净容器,密封,标明标记㊂5.1.2半固体和液体样品(除蜂蜜样品外)取有代表性样品至少200g(m L),充分混匀,装入洁净容器,密封,标明标记㊂5.1.3蜂蜜样品未结晶的样品将其用力搅拌均匀;有结晶析出的样品,可将样品瓶盖塞紧后置于不超过60ħ的水浴中温热,待样品全部溶化后,搅匀,迅速冷却至室温以备检验用㊂在融化时应注意防止水分侵入㊂5.2保存蜂蜜等易变质试样置于0ħ~4ħ保存㊂6分析步骤6.1样品处理6.1.1脂肪小于10%的食品称取粉碎或混匀后的试样0.5g~10g(含糖量ɤ5%时称取10g;含糖量5%~10%时称取5g;含糖量10%~40%时称取2g;含糖量ȡ40%时称取0.5g)(精确到0.001g)于100m L容量瓶中,加水约50m L溶解,缓慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5m L,加水定容至刻度,磁力搅拌或超声30m i n,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,后续滤液用0.45μm微孔滤膜过滤或离心获取上清液过0.45μm微孔滤膜至样品瓶,供液相色谱分析㊂6.1.2糖浆㊁蜂蜜类称取混匀后的试样1g~2g(精确到0.001g)于50m L容量瓶,加水定容至50m L,充分摇匀,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,后续滤液用0.45μm微孔滤膜过滤或离心获取上清液过0.45μm微孔滤膜至样品瓶,供液相色谱分析㊂6.1.3含二氧化碳的饮料吸取混匀后的试样于蒸发皿中,在水浴上微热搅拌去除二氧化碳,吸取50.0m L移入100m L容量瓶中,缓慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5m L,用水定容至刻度,摇匀,静置30m i n,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,后续滤液用0.45μm微孔滤膜过滤或离心获取上清液过0.45μm微孔滤膜至样品瓶,供液相色谱分析㊂6.1.4脂肪大于10%的食品称取粉碎或混匀后的试样5g~10g(精确到0.001g)置于100m L具塞离心管中,加入50m L石油醚,混匀,放气,振摇2m i n,1800r/m i n离心15m i n,去除石油醚后重复以上步骤至去除大部分脂肪㊂蒸发残留的石油醚,用玻璃棒将样品捣碎并转移至100m L容量瓶中,用50m L水分两次冲洗离心管,洗液并入100m L容量瓶中,缓慢加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液各5m L,加水定容至刻度,磁力搅拌或超声30m i n,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,后续滤液用0.45μm微孔滤膜过滤或离心获取上清液过0.45μm微孔滤膜至样品瓶,供液相色谱分析㊂6.2色谱参考条件色谱条件应当满足果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖之间的分离度大于1.5㊂色谱图参见附录A 中图A.1和图A.2㊂a)流动相:乙腈+水=70+30(体积比);b)流动相流速:1.0m L/m i n;c)柱温:40ħ;d)进样量:20μL;e)示差折光检测器条件:温度40ħ;f)蒸发光散射检测器条件:飘移管温度:80ħ~90ħ;氮气压力:350k P a;撞击器:关㊂6.3标准曲线的制作将糖标准使用液标准依次按上述推荐色谱条件上机测定,记录色谱图峰面积或峰高,以峰面积或峰高为纵坐标,以标准工作液的浓度为横坐标,示差折光检测器采用线性方程;蒸发光散射检测器采用幂函数方程绘制标准曲线㊂6.4试样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱仪中,记录峰面积或峰高,从标准曲线中查得试样溶液中糖的浓度㊂可根据具体试样进行稀释(n)㊂6.5 空白试验除不加试样外,均按上述步骤进行㊂7 分析结果的表述试样中目标物的含量按式(1)计算,计算结果需扣除空白值:X =(ρ-ρ0)ˑV ˑn m ˑ1000ˑ100 (1)式中:X 试样中糖(果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖)的含量,单位为克每百克(g/100g );ρ样液中糖的浓度,单位为毫克每毫升(m g /m L );ρ0 空白中糖的浓度,单位为毫克每毫升(m g /m L );V样液定容体积,单位为毫升(m L );n 稀释倍数;m试样的质量,单位为克(g)或毫升(m L );1000 换算系数;100 换算系数㊂糖的含量ȡ10g /100g 时,结果保留三位有效数字,糖的含量<10g /100g 时,结果保留两位有效数字㊂8 精密度在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂9 其他当称样量为10g 时,果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖检出限为0.2g /100g㊂第二法 酸水解-莱因-埃农氏法10 原理本法适用于各类食品中蔗糖的测定:试样经除去蛋白质后,其中蔗糖经盐酸水解转化为还原糖,按还原糖测定㊂水解前后的差值乘以相应的系数即为蔗糖含量㊂11 试剂和溶液除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为G B /T6682规定的三级水㊂11.1 试剂11.1.1 乙酸锌[Z n (C H 3C O O )2㊃2H 2O ]㊂11.1.2 亚铁氰化钾{K 4[F e (C N )6]㊃3H 2O }㊂11.1.3盐酸(H C l)㊂11.1.4氢氧化钠(N a O H)㊂11.1.5甲基红(C15H15N3O2):指示剂㊂11.1.6亚甲蓝(C16H18C l N3S㊃3H2O):指示剂㊂11.1.7硫酸铜(C u S O4㊃5H2O)㊂11.1.8酒石酸钾钠(C4H4O6K N a㊃4H2O)㊂11.2试剂配制11.2.1乙酸锌溶液:称取乙酸锌21.9g,加冰乙酸3m L,加水溶解并定容于100m L㊂11.2.2亚铁氰化钾溶液:称取亚铁氰化钾10.6g,加水溶解并定容至100m L㊂11.2.3盐酸溶液(1+1):量取盐酸50m L,缓慢加入50m L水中,冷却后混匀㊂11.2.4氢氧化钠(40g/L):称取氢氧化钠4g,加水溶解后,放冷,加水定容至100m L㊂11.2.5甲基红指示液(1g/L):称取甲基红盐酸盐0.1g,用95%乙醇溶解并定容至100m L㊂11.2.6氢氧化钠溶液(200g/L):称取氢氧化钠20g,加水溶解后,放冷,加水并定容至100m L㊂11.2.7碱性酒石酸铜甲液:称取硫酸铜15g和亚甲蓝0.05g,溶于水中,加水定容至1000m L㊂11.2.8碱性酒石酸铜乙液:称取酒石酸钾钠50g和氢氧化钠75g,溶解于水中,再加入亚铁氰化钾4g,完全溶解后,用水定容至1000m L,贮存于橡胶塞玻璃瓶中㊂11.3标准品葡萄糖(C6H12O6,C A S号:50-99-7)标准品:纯度ȡ99%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质㊂11.4标准溶液配制葡萄糖标准溶液(1.0m g/m L):称取经过98ħ~100ħ烘箱中干燥2h后的葡萄糖1g(精确到0.001g),加水溶解后加入盐酸5m L,并用水定容至1000m L㊂此溶液每毫升相当于1.0m g葡萄糖㊂12仪器和设备12.1天平:感量为0.1m g㊂12.2水浴锅㊂12.3可调温电炉㊂12.4酸式滴定管:25m L㊂13试样的制备和保存13.1试样的制备13.1.1固体样品取有代表性样品至少200g,用粉碎机粉碎,混匀,装入洁净容器,密封,标明标记㊂13.1.2半固体和液体样品取有代表性样品至少200g(m L),充分混匀,装入洁净容器,密封,标明标记㊂13.2保存蜂蜜等易变质试样于0ħ~4ħ保存㊂14分析步骤14.1试样处理14.1.1含蛋白质食品称取粉碎或混匀后的固体试样2.5g~5g(精确到0.001g)或液体试样5g~25g(精确到0.001g),置250m L容量瓶中,加水50m L,缓慢加入乙酸锌溶液5m L和亚铁氰化钾溶液5m L,加水至刻度,混匀,静置30m i n,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用㊂14.1.2含大量淀粉的食品称取粉碎或混匀后的试样10g~20g(精确到0.001g),置250m L容量瓶中,加水200m L,在45ħ水浴中加热1h,并时时振摇,冷却后加水至刻度,混匀,静置,沉淀㊂吸取200m L上清液于另一250m L容量瓶中,缓慢加入乙酸锌溶液5m L和亚铁氰化钾溶液5m L,加水至刻度,混匀,静置30m i n,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用㊂14.1.3酒精饮料称取混匀后的试样100g(精确到0.01g),置于蒸发皿中,用(40g/L)氢氧化钠溶液中和至中性,在水浴上蒸发至原体积的14后,移入250m L容量瓶中,缓慢加入乙酸锌溶液5m L和亚铁氰化钾溶液5m L,加水至刻度,混匀,静置30m i n,用干燥滤纸过滤,弃去初滤液,取后续滤液备用㊂14.1.4碳酸饮料称取混匀后的试样100g(精确到0.01g)于蒸发皿中,在水浴上微热搅拌除去二氧化碳后,移入250m L容量瓶中,用水洗蒸发皿,洗液并入容量瓶,加水至刻度,混匀后备用㊂14.2酸水解14.2.1吸取2份试样各50.0m L,分别置于100m L容量瓶中㊂14.2.1.1转化前:一份用水稀释至100m L㊂14.2.1.2转化后:另一份加(1+1)盐酸5m L,在68ħ~70ħ水浴中加热15m i n,冷却后加甲基红指示液2滴,用200g/L氢氧化钠溶液中和至中性,加水至刻度㊂14.3标定碱性酒石酸铜溶液吸取碱性酒石酸铜甲液5.0m L和碱性酒石酸铜乙液5.0m L于150m L锥形瓶中,加水10m L,加入2粒~4粒玻璃珠,从滴定管中加葡萄糖标准溶液约9m L,控制在2m i n中内加热至沸,趁热以每两秒一滴的速度滴加葡萄糖,直至溶液颜色刚好褪去,记录消耗葡萄糖总体积,同时平行操作三份,取其平均值,计算每10m L(碱性酒石酸甲㊁乙液各5m L)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量(m g)㊂注:也可以按上述方法标定4m L~20m L碱性酒石酸铜溶液(甲㊁乙液各半)来适应试样中还原糖的浓度变化㊂14.4试样溶液的测定14.4.1预测滴定:吸取碱性酒石酸铜甲液5.0m L和碱性酒石酸铜乙液5.0m L于同一150m L锥形瓶中,加入蒸馏水10m L,放入2粒~4粒玻璃珠,置于电炉上加热,使其在2m i n内沸腾,保持沸腾状态15s,滴入样液至溶液蓝色完全褪尽为止,读取所用样液的体积㊂14.4.2精确滴定:吸取碱性酒石酸铜甲液5.0m L和碱性酒石酸铜乙液5.0m L于同一150m L锥形瓶中,加入蒸馏水10m L,放入几粒玻璃珠,从滴定管中放出的(转化前样液14.2.1.1或转化后样液14.2.1.2)样液(比预测滴定14.4.1预测的体积少1m L),置于电炉上,使其在2m i n内沸腾,维持沸腾状态2m i n,以每两秒一滴的速度徐徐滴入样液,溶液蓝色完全褪尽即为终点,分别记录转化前样液(14.2.1.1)和转化后样液(14.2.1.2)消耗的体积(V)㊂注:对于蔗糖含量在0.x%水平的样品,可以采用反滴定的方式进行测定㊂15分析结果的表述15.1转化糖的含量试样中转化糖的含量(以葡萄糖计)按式(2)进行计算:R=Aˑ100 (2)mˑ50250ˑV100ˑ1000式中:R 试样中转化糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);A 碱性酒石酸铜溶液(甲㊁乙液各半)相当于葡萄糖的质量,单位为毫克(m g);m 样品的质量,单位为克(g);50 酸水解(14.2)中吸取样液体积,单位为毫升(m L);250 试样处理(14.1)中样品定容体积,单位为毫升(m L);V 滴定时平均消耗试样溶液体积,单位为毫升(m L);100 酸水解(14.2)中定容体积,单位为毫升(m L);1000 换算系数;100 换算系数㊂注:样液(14.2.1.1)的计算值为转化前转化糖的质量分数R1,样液(14.2.1.2)的计算值为转化后转化糖的质量分数R2㊂15.2蔗糖的含量试样中蔗糖的含量X按式(3)计算:X=(R2-R1)ˑ0.95 (3)式中:X 试样中蔗糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);R2 转化后转化糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);R1 转化前转化糖的质量分数,单位为克每百克(g/100g);0.95 转化糖(以葡萄糖计)换算为蔗糖的系数㊂蔗糖含量ȡ10g/100g时,结果保留三位有效数字,蔗糖含量<10g/100g时,结果保留两位有效数字㊂16精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%㊂17其他当称样量为5g时,定量限为0.24g/100g㊂附录A色谱图果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖标准物质的蒸发光散射检测色谱图见图A.1㊂图A.1果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖标准物质的蒸发光散射检测色谱图果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖标准物质的示差折光检测色谱图见图A.2㊂图A.2果糖㊁葡萄糖㊁蔗糖㊁麦芽糖和乳糖标准物质的示差折光检测色谱图。

分析检测高效液相色谱法测蜂蜜中的4种水溶性糖彭礼枚1，谭丽君2（1.广电计量检测（湖南）有限公司，湖南长沙 410000；2.中国电建集团中南勘测研究院有限公司，湖南长沙 410000）摘 要：目的：建立快速检测蜂蜜中的水溶性糖的方法。

方法：用振荡方式提取蜂蜜中的水溶性糖，用XBridgeTM糖柱分离，示差折光检测器检测，色谱峰面积外标法定量。

结果：4种水溶性糖的质量浓度在0.5～10.0 mg·L-1与其对应的色谱峰面积线性关系良好，相关系数均大于0.999，检出限为0.04～0.28 mg·L-1，回收率为99.0%～104.5%，RSD为0.44%～3.30%（n=5）。

结论：该方法样品处理简便，可用于蜂蜜中的水溶性糖含量的检测。

关键词：可溶性糖；蜂蜜；高效液相色谱Four Soluble Sugars in Honey were Measured by HighPerformance Liquid ChromatographyPENG Limei1, TAN Lijun2(1.Hunan Division of GRG Metrology and Test, Changsha 410000, China; 2.Power China ZhongnanEngineering Corporation Limited, Changsha 410000, China)Abstract: Objective: To establish a new method to quickly detect the soluble sugars in honey. Method: Soluble sugars from honey were extracted by oscillations, separated by a XBridgeTM sugar column, detected by a differential refractive detector, and quantified by peak area external calibration. Result: The mass concentration of the four soluble sugars had a good linear relationship ranging from 0.5 mg·L-1 to 10.0 mg·L-1, with the correlation coefficient not less than 0.999, and the detection limit was 0.04～0.28 mg·L-1. The average recovery rate was 99.0% to 104.5%, and the RSD was 0.44% to 3.30%(n=5). Conclusion: This method is simple for sample processing and can be used to detect the soluble sugar content in honey.Keywords: soluble sugar; honey; high performance liquid chromatography目前，测定蜂蜜中的水溶性糖的方法主要有高效液相色谱法[1-3]（检测器主要有示差折光检测器和蒸发光散射检测器等）、化学法和离子色谱法[4-6]等。