新佐剂——Montanide ISA 50V2在马免疫中的应用研究
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鸭坦布苏病毒病防制研究进展王小庆;蔡丝丝;魏平华【摘要】鸭坦布苏病毒病也称为"鸭黄病毒病",2010 年春季开始在我国主要蛋鸭养殖区传播,是一种新的禽传染病.该病临床表现为蛋鸭采食量减少,卵泡变形、变性,卵泡膜出血、充血.产蛋鸭发病率高达100 %,死亡率在5 %~15 %之间,给我国养禽业带来了严重影响.2015年以来,除蛋鸭发生鸭坦布苏病毒以外,产蛋鹅、肉鹅、肉鸭、野鸡和鸡也能发生该病,鸭坦布苏病毒对肉雏鸭的致病性主要体现在对雏鸭全身组织器官损伤,最终使雏鸭代谢和免疫功能紊乱,表现为采食下降、神经症状和腹泻等,有研究表明雏鸭死亡率高于20 %.自本病发生以来,我国学者对该病病原学、检测技术、疫苗、抗体等方面进行了大量研究,取得了一定的进展.本文对鸭坦布苏病毒病疫苗和抗体的研究现状进行综述,以期为临床上有效预防和控制该病提供科学依据.【期刊名称】《广东畜牧兽医科技》【年(卷),期】2017(042)005【总页数】3页(P1-3)【关键词】鸭坦布苏病毒;疫苗;抗体【作者】王小庆;蔡丝丝;魏平华【作者单位】广州格雷特生物科技有限公司,广东广州 510640;广州格雷特生物科技有限公司,广东广州 510640;广州格雷特生物科技有限公司,广东广州 510640【正文语种】中文【中图分类】S855.3鸭坦布苏病毒属于黄病毒科黄病毒属蚊媒性病毒类,是恩塔亚病毒群成员之一,其外形为球形,病毒粒子直径为40~50 nm,病毒基因组为有囊膜的单股正链RNA。
单股正链RNA分子约由10990个核苷酸组成,病毒基因组由5’端,3’端的非编码区和中间的一个开放阅读框组成[1]。
鸭坦布苏病毒、登革病毒、日本脑炎病毒都是属于黄病毒科,其基因同源性较高,登革病毒和日本脑炎病毒是重要的人兽共患传染病病原。
鸭坦布苏病毒作为黄病毒科新成员,严重影响养鸭业的发展。
到目前为止,该病毒是否会对人类产生致病性还未知,应加强对鸭坦布苏病毒生物学特性研究,有效预防和控制该病的发生[2]。
山东畜牧兽医2016年第37卷兽用免疫佐剂浅谈李宁王应玉(山东省威海市文登区张家产畜牧兽医工作站 264407)王亮(山东省威海市文登区畜牧兽医局)中图分类号:S851.33 文献标识码:C 文章编号:1007-1733(2016)11-0048-02免疫佐剂具有增强免疫效应的作用,与疫苗配合使用,延长免疫时间,减少免疫次数,提高免疫效果,在畜牧生产上有重要意义。
1 油乳佐剂油乳佐剂是用矿物油、乳化剂(如span-80,Tween-80)及稳定剂(如硬脂酸铝)、水按一定比例混合制备而成。
有油包水型(W/O)和水包油型(O/W)。
油乳佐剂作为储存库,抗原被包藏其中,注射体内后起到缓释作用,免疫持久。
油乳佐剂在灭活疫苗生产中用广泛。
1.1 弗氏佐剂分为弗氏不完全佐剂(FIA)和弗氏完全佐剂(FCA)。
弗氏不完全佐剂(FIA)是将矿物油(石蜡油)和乳化剂(羊毛脂、Tween-80)混合制成油包水型(W/O)佐剂,弗氏完全佐剂(FCA)是在弗氏不完全佐剂(FIA)的基础上加入灭活的分枝杆菌或卡介苗。
1.2 其它油乳佐剂 除了FCA和FIA,基于矿物油的佐剂还有白油Span佐剂、Specol佐剂、MontanideISA50、ISA 206等。
除了矿物油,其他油脂也可以制成油乳佐剂,比较常用的有植物油(如花生油)、角鲨烯和角鲨烷等。
2 矿物质类佐剂矿物质佐剂属于传统佐剂之一,主要指铝盐和钙盐佐剂,包括氢氧化铝胶、硫酸铝钾胶、磷酸铝、磷酸钙等,矿物质类佐剂能吸附和沉淀抗原,与抗原形成复合物,形成凝胶状态,注入动物体内后形成抗原储存库,缓慢释放抗原,较长时间刺激免疫系统,主要增强机体的体液免疫应答。
铝盐佐剂已有70多年的应用历史,在人用生物制品广泛应用。
3 微生物佐剂某些微生物菌体、组分、代谢产物能够活化免疫细胞,加强免疫效应,对特异性和非特异性免疫都有明显的增强作用。
3.1 微生物菌体 分枝杆菌、乳酸菌类、短小棒状杆菌、葡萄球菌、链球菌、百日咳杆菌。
国外疫苗佐剂的评价秦玉明;赵耘;李宇;王栋【摘要】各种疫苗在疫病的防治中起着非常重要的作用,佐剂包括铝胶、矿物油、灭活细菌和化学合成物质等,其研究已逐渐成为国际生物制品行业的热点.本文综述了国外人医和兽医中一些著名的佐剂及其安全性、毒理试验和作用机理,同时对我国兽用疫苗佐剂的发展前景作了展望.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2005(039)006【总页数】4页(P34-37)【关键词】佐剂;安全性;毒理实验;作用机理【作者】秦玉明;赵耘;李宇;王栋【作者单位】中国兽医药品监察所,北京,100081;中国兽医药品监察所,北京,100081;首都医科大学顺义校区,北京,101300;中国兽医药品监察所,北京,100081【正文语种】中文【中图分类】R392-33一种免疫效果确实的疫苗往往需要一种与之相匹配的佐剂才能更好地发挥疫苗抗感染的特性。
近年来随着现代生物技术的进步,各种新型疫苗(乙肝亚单位疫苗、HIV疫苗及基因工程疫苗)的研究逐渐成为热点问题。
其中佐剂的研究几乎决定了新型疫苗的诞生。
虽然经典的铝胶佐剂成为美国食品与药品管理局(FAD)批准的唯一的人医用佐剂,但是很难满足现代各种新型疫苗的需要和发展。
目前国外已经试验的佐剂有100多种,按照佐剂作用方式可分为:免疫调节作用(诱导抗原提呈细胞(APC)分泌不同的细胞因子,如γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)、α肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素4、5、10、13(IL-4、5、10、13)、抗原提呈作用(佐剂保持抗原构象的完整并提呈给适当的免疫效应细胞)、诱导C细胞毒性T细胞(CTL)应答、靶向作用(佐剂激发APC摄取和传递抗原,进而向免疫效应细胞提呈抗原的能力)和抗原储存作用(将抗原短期或长期储存在注射部位免受肝脏清除)[1]。
根据佐剂的成分可分为矿物盐佐剂、油佐剂、微生物类产品、皂苷类和化学合成物质等五类。
本文简单阐述了国外研究应用的佐剂。
动物疫苗的乳化动物疫苗的乳化是指将抗原液分散在油佐剂中所形成稳定的异源系统,注入动物体内后,能非特异性地增强动物机体对抗原的特异免疫应答,并延长免疫持续期。
由于油佐剂能将抗原物质吸附或黏着,注入动物机体后可较久地存留在体内,持续地释放出抗原物质来不断刺激机体的免疫系统,从而能持久地提高抗体效价,提高疫苗的免疫效果。
因此,人们不断研究动物疫苗的乳化效果和新型油佐剂,以便获得更有效、更安全和更稳定的疫苗。
一、动物疫苗的乳化及佐剂1.1动物疫苗的乳化油佐剂疫苗是指抗原液体或微粒(滴)(分散相或内相)借助乳化剂,在机械力的作用下,分散悬浮于不相溶的油佐剂液体(连续相或外相)中所形成相对稳定的分散体系。
1.2动物疫苗乳化剂两个不相混容的纯液体不能形成稳定的油乳剂,必须要加入第三组分(起稳定作用)—乳化剂,以降低体系的界面能。
乳化剂属于表面活性剂,其主要功能是起乳化作用,才能形成油乳剂。
例如,将注射用白油和抗原液放在试管里,无论怎样用力摇荡,静置后都会很快分离。
但是,如果往试管里加一点乳化剂,再摇荡时就会形成象牛奶一样的乳白色液体。
乳化剂指动物疫苗中分散相与连续相两相间的界面活性物质,可促进和稳定两种互不相溶物形成乳剂,如弗氏佐剂中的羊毛脂,油佐剂中的Span-80、Arlacel-80、Tween-80等。
动物疫苗的乳化见图1。
二、动物疫苗的剂型通常动物疫苗的乳化过程中一相是水相抗原和极性小的有机液体油相油佐剂,习惯上统称为“油”。
根据内外相的性质,油乳剂主要有三种类型,一类是油分散在水中,简称为水包油型油乳剂,用O/W表示;另一种是水分散在油中,简称为油包水型油乳剂,用W/O表示,还有一种复合油乳剂,它的分散相本身就是一种油乳剂,如将一个W/O的油乳剂分散到连续的水相中,而形成一种复合的双相W/O/W型油乳剂。
不同的动物疫苗剂型的特性见表1。
2.1动物疫苗剂型检测动物疫苗不同的剂型有不同的特点,根据不同的免疫要求、免疫动物、免疫途径和抗原类型综合选择理想的剂型。
山羊痘灭活疫苗免疫保护试验赵利平;魏学峰;陈九连;刘棋;郭建刚;巴特;苏丽琼;王家福【摘要】将山羊痘GT4-STV42-56种毒在犊牛睾丸细胞上繁殖,收获毒液,用0.1%甲醛溶液灭活,加适量206佐剂,制成山羊痘油佐剂灭活疫苗.将疫苗以不同剂量皮下免疫接种不同种群的山羊.免疫后21 d,用AV40株强毒进行攻毒保护试验.结果显示,免疫剂量达0.5 mL时,疫苗对内蒙绒山羊的保护率为100%,对广西黑山羊的保护率为80%.实验表明,山羊痘灭活疫苗对山羊的免疫效果确实可靠.【期刊名称】《中国兽药杂志》【年(卷),期】2005(039)008【总页数】3页(P21-23)【关键词】山羊痘;灭活疫苗;免疫保护【作者】赵利平;魏学峰;陈九连;刘棋;郭建刚;巴特;苏丽琼;王家福【作者单位】金宇集团内蒙古生物药品厂,内蒙古呼和浩特,010030;金宇集团内蒙古生物药品厂,内蒙古呼和浩特,010030;金宇集团内蒙古生物药品厂,内蒙古呼和浩特,010030;广西兽医防检站,广西南宁,530001;广西兽医防检站,广西南宁,530001;金宇集团内蒙古生物药品厂,内蒙古呼和浩特,010030;金宇集团内蒙古生物药品厂,内蒙古呼和浩特,010030;金宇集团内蒙古生物药品厂,内蒙古呼和浩特,010030【正文语种】中文【中图分类】S859.797山羊痘是由山羊痘病毒引起的一种高度接触性传染病。
该病以体温升高,全身性丘疹或结节、水泡,内脏(特别是肺)病变乃至死亡为特征[1]。
此病严重影响养羊业、制革业和羊绒制品业的发展,OIE将其列为A类传染病,我国将其列为一类传染病。
预防此病的根本办法是用疫苗免疫接种。
目前,市场上的疫苗主要有弱毒疫苗和灭活疫苗两种,我国主要采用弱毒疫苗,尚无灭活疫苗。
近年来,一些进口纯种羊或改良羊使用弱毒苗后,出现了流产和发病等不良反应。
为此,研究人员进行了灭活疫苗的研制,笔者对实验室制备的灭活疫苗进行了免疫效力试验。
免疫佐剂研究进展及前景展望李学钊;洪炀;王治仓;李祥瑞;宋鸿雁【摘要】本文从免疫佐剂的发现、作用机理、发展进行论述,综述了传统免疫佐剂、细胞因子佐剂、天然来源佐剂及新型免疫佐剂的类别与免疫机理,并就免疫佐剂的发展前景进行了展望。
%This article summarizes discovery, mechanism and development of immunoadjuvants, and reviews categories and mechanisms of traditional immunoadjuvants, cytokines, adjuvants, natural adjuvants and newly developed adjuvants. In addition, the perspective of immunoadjuvant is briefly described.【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2014(000)004【总页数】6页(P81-86)【关键词】疫苗;免疫佐剂;免疫机理【作者】李学钊;洪炀;王治仓;李祥瑞;宋鸿雁【作者单位】甘肃畜牧工程职业技术学院,武威733006;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;甘肃畜牧工程职业技术学院,武威733006;南京农业大学动物医学院,南京210095;南通大学实验动物中心,南通226019【正文语种】中文【中图分类】S852.43李学钊1,洪炀2,王治仓1,李祥瑞3,宋鸿雁4(1.甘肃畜牧工程职业技术学院,武威 733006;2.中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241;3.南京农业大学动物医学院,南京 210095;4.南通大学实验动物中心,南通 226019)疫苗(vaccine)是用于预防传染病的抗原制剂。
通常用钝化、弱化或无害的病原体或其产物制成,用以刺激机体产生保护性免疫力[1]。
新型免疫佐剂的开发及应用免疫佐剂是指在携带抗原的疫苗中增加其他成分,以增强或调节免疫反应的物质。
免疫佐剂不仅可以提高生物制品的免疫原性和安全性,而且能够降低疫苗的剂量和频率。
随着分子生物学、生物技术的不断发展,越来越多的新型免疫佐剂被开发并应用于疫苗的生产中。
一、免疫佐剂的类型和作用1. 油水复合佐剂:油是免疫佐剂的重要成分之一,可以提高疫苗对抗原的稳定性,并激发强烈的抗体反应。
油水复合佐剂是指以油为基础的佐剂,通常包括水和乳化剂。
它们可以改善疫苗悬浮液的分散性和局部免疫刺激,并改变疫苗的吞噬和呈递特性,从而提高疫苗的免疫原性。
2. 佐剂小体:佐剂小体是由蛋白质组成的颗粒,在疫苗中作为佐剂使用。
它们可以增强疫苗的免疫原性和特异性,增加免疫细胞的摄取和抗原表现,并诱导诱导特定的免疫细胞类型,如细胞毒性T淋巴细胞和记忆B细胞。
3. 多糖佐剂:多糖佐剂通常是由多糖结构,如卡波激活多糖(CAPs)和壳多糖(LPS)组成,在疫苗中使用以增强抗原的免疫原性。
多糖佐剂可以诱导多种的细胞类型产生反应,并增加特异性的抗体水平。
此外,在一些疾病,如肺炎球菌和流感等,多糖佐剂的能力很容易被当作候选佐剂。
二、新型免疫佐剂的开发随着分子生物学和生物技术的发展,越来越多的新型免疫佐剂被开发。
以下是几个比较有潜力的新型免疫佐剂:1. 病毒样颗粒:病毒样颗粒是由病毒多聚体组成的一类颗粒,通常是不包括病毒核酸。
这些颗粒具有很强的免疫原性和天然的佐剂性,且在疫苗中使用时可以激发强烈的保护性免疫反应。
目前已经有很多类型的病毒样颗粒作为疫苗的候选佐剂。
2. 蛋白质互作型佐剂:蛋白质互作型佐剂是由蛋白质构建而成,这些蛋白质是在免疫细胞中表达的关键信号分子。
这些佐剂可以模拟天然的免疫反应而不需要携带抗原,从而提高疫苗的免疫原性和安全性。
3. 基因疗法佐剂:基因疗法佐剂通常是由多肽或蛋白质编码的DNA或RNA,可以导入宿主细胞以表达抗原,从而产生特异性保护性免疫应答。
副溶血弧菌TDH蛋白高效表达、免疫原性分析及初步应用李欣彤;陈永军;刘迎春;白雪瑞;王少辉;韩先干;刘永杰;王权;蒋蔚【摘要】副溶血弧菌是引起细菌性食物中毒的主要食源性致病菌,耐热直接溶血毒素(theromostable direct hemolysin,TDH)是其公认的主要致病因子.本研究根据已发表基因序列(GenBank登录号:M10069)设计引物,以副溶血弧茵SHJLA株基因组DNA为模板,扩增编码TDH蛋白的基因,克隆至表达质粒pET28a(+)中,重组质粒经限制性酶切鉴定后测序,结果表明插入片段长度为576 bp.重组原核表达质粒pET28a-tdh转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经诱导可表达分子量约为27 kDa 的融合蛋白,主要以包涵体形式表达.对包涵体进行复性,Western blot分析表明经过复性后的重组蛋白能够被感染副溶血弧菌SHJLA株的小鼠血清识别.重组蛋白免疫家兔,ELISA检测多抗血清效价在1:256 000以上.将该多抗初步应用于斑点-ELISA(Dot-ELISA)方法的建立,TDH阳性的致病性副溶血弧菌检测到阳性斑点,而TDH阴性的副溶血弧菌及其他细菌未检测到特异性斑点.本研究可为深入研究TDH 的蛋白功能,建立致病性副溶血弧菌免疫学快速诊断方法以及保护性疫苗的研制提供研究基础.【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2015(023)006【总页数】7页(P56-62)【关键词】副溶血弧菌;直接溶血素;蛋白表达;斑点-ELISA【作者】李欣彤;陈永军;刘迎春;白雪瑞;王少辉;韩先干;刘永杰;王权;蒋蔚【作者单位】中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;南京农业大学动物医学院农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,南京210095;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241;中国农业科学院上海兽医研究所,上海200241【正文语种】中文【中图分类】S852.616副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)是一种革兰氏阴性嗜盐菌,普遍存在于河口、海洋和沿海环境,夏季和春季是该菌引起食物中毒的高发季节,可引起人严重的急性胃肠炎、败血症和伤口感染[1-3]。
油佐剂口蹄疫疫苗有望替代水佐剂疫苗
李凯年
【期刊名称】《畜牧兽医科技信息》
【年(卷),期】1998(000)005
【摘要】英国动物卫生研究所Pirbright实验室研究了用两种新的油佐剂Montanide ISA25和206制备口蹄疫疫苗,于4℃下保存后,保持了其效力比常规用水配制的疫苗长,并且不论用何种注射途径,对牛和猪都可产生良好的抗体反应。
此外,用油佐剂疫苗注射后,没有毒性或发热的表现。
即使用加强剂
【总页数】1页(P6-6)
【作者】李凯年
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】S859.79
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1.口蹄疫A型油佐剂和leo佐剂弱毒灭活疫苗免疫持续期的研究 [J], 朱刚;黄炯;符子华;马文戈;徐亚萍;赵海源;王红巧;张读朴;郭惠玲
2.口蹄疫疫苗中佐剂专利技术综述 [J], 张聪;吴丹阳
3.不同类型的免疫佐剂在口蹄疫疫苗中的应用研究 [J], 陈苗苗;董金杰;杜平;王超英
4.新型油佐剂A5与进口206油佐剂配制双相疫苗比较试验 [J], 尹锡明;王玉智
5.栽培一枝蒿粗多糖佐剂增强口蹄疫疫苗的皮下免疫效果 [J], 翁翔;张爱莲;李泉晓;吴道澄;曹辉
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