原料药中重金属残留检测 原料药中重金属残留测试

天然提取物中重金属溶剂残留的检测作者：张欢罗忠国来源：《科学与财富》2015年第33期摘要：近年来，生物技术获得了很大的发展，多数产品都打着天然提取物的旗号在销售和使用。

但对于天然提取物而言，并没有想象的那么神奇。

从客观的角度来分析，天然提取物，是一种针对各类物质的提取，多数情况下是针对植物的提取。

提取物虽然是在天然环境形成的，但并非是完全清洁的，提取物中含有的其他物质相对较多，且在检测中不易察觉。

目前，很多地区的土地都受到了严重的污染，环境破坏严重。

针对天然提取物的重金属溶剂残留检测，是非常有必要的，日后应加强该方面的研究。

关键词：天然提取物；重金属；溶剂；残留重金属溶剂是对人体危害较大的一种溶剂，并且在检测中比较困难。

重金属溶剂会随着河流、土地等，不断的融入到植物当中，即便是某些天然提取物，其内部依然有可能含有大量的重金属溶剂，这对植物的加工和产品的销售，都是非常不利的。

为此，应针对天然提取物的检测进行重视，尤其是重金属溶剂的检测工作，必须选择有效的方法，实现高度精准的检测。

在此，本文主要对天然提取物中重金属溶剂残留的检测进行讨论。

一、概述近年来，天然提取物获得了很大的重视，并且在各个领域中均获得了较大的发展，其创造的经济效益和社会效益均是值得肯定的。

但在检测中发现，部分天然提取物中，含有一定数量的重金属溶剂，该物质所造成的恶劣影响非常严重。

从客观的角度来分析，重金属溶剂会对人体构成极大的威胁，如果持续的加大剂量，将导致较多的疾病和身体不适，最终危及生命。

从主观的角度来分析，盲目的相信天然提取物显然是不明智的，应针对天然提取物中的重金属溶剂，进行深入的检测分析，任何残留现象都将是极大的安全隐患。

在大环境中，土地的污染和水源的污染，都为重金属溶剂的残留提供了较多的路径，天然提取物的安全性也是有待深究的。

二、天然提取物中重金属溶剂残留的检测经过长时间的分析和研究，发现大多数的天然提取物中，其含有的重金属溶剂并不多，一般表现为残留现象。

化学原料药中元素杂质的风险评估吴洁;黄青兰【摘要】原料药中可能存在多个来源的元素杂质,由于元素杂质通常没有治疗作用,因而原料药生产中元素杂质含量应被控制在可接受的限度.国际人用药物注册技术协调会议(ICH)Q3D元素杂质指南,提出对于潜在存在于药物中的元素杂质需进行定性和定量分析评估,并基于进行风险评估以限制最低元素杂质含量.为响应ICH颁布的元素杂质指导原则,进一步控制原料药中元素杂质水平,现就原料药生产实际,通过对生产工艺及设备等因素可能导致的元素杂质进行评估,确定其风险以制定相应控制策略,从而有效保障药品质量.【期刊名称】《上海医药》【年(卷),期】2019(040)001【总页数】4页(P74-77)【关键词】元素杂质;风险评估;原料药;ICH_Q3D【作者】吴洁;黄青兰【作者单位】上海紫源制药有限公司上海 201108;上海紫源制药有限公司上海201108【正文语种】中文【中图分类】TQ460.72元素杂质主要是指药品生产或贮藏过程中生成、加入或无意引入的物质。

由于药品中元素杂质不能给病人提供任何治疗益处（个别药品除外），而且还可能引发不良反应，或可能对药品的稳定性、保质期产生不利影响，因而建立旨在减少存在于药物中的元素杂质，或者对允许可接受的元素杂质浓度范围进行分析评估尤为重要[1]。

2014年12月人用药品注册技术要求国际协调会（ⅠCH）更新关于金属杂质的指南，该指导原则对元素杂质进行了重新分类，监控的元素杂质种类增加至24种，包含了毒性较大的非金属元素如砷、汞、硒及各种常用的金属催化剂、重金属等，并于2015年9月更名为ⅠCH_Q3D元素杂质指导原则（Q3D Guideline for elements impurities）[2]。

自ⅠCH更新Q3D元素杂质指南后，欧洲药品管理局（EMA）和美国FDA相继更新了这一指南，与ⅠCH高度保持一致，由此可见控制的杂质种类已经从传统的重金属扩展到非金属元素，对元素杂质的监控越来越严格，范围也变宽。

IC P-M S法测定富马酸福莫特罗原料药中催化剂钯的残留量李春盈，张静，钟依雯，曾敏珊（广州市药品检验所，广东广州510160)摘要：目的建立富马酸福莫特罗中催化剂钯（P d)残留的检测方法。

方法通过直接溶解样品，以电感耦合等离子质谱法(1CP-MS)测定样品中钯的含量。

结果测定了3批富马酸福莫特罗中钯的含量。

ICP-MS条件经优化后，测得钯在2~50 浓度范围内相关系数为0.999 9(^1 = 6)，线性关系良好，方法检测限为0.03 fxg.L_1,回收率在98.0%〜101.4%之间，ftSZ)为l.l%(n = 6)。

结论本方法操作简便、快捷、灵敏度高，适用于富马酸福莫特罗中钯残留量的检测。

关键词：电感耦合等离子质谱法;钯残留量；富马酸福莫特罗中图分类号:R917 文献标志码:A文章编号：1674-229X( 2020) 11-0767-02Doi ： 10.12048/j.issn. 1674-229X.2020.11.009Determination of Catalyst Palladium Residue in Formoterol Fumarate Dihydrate Crude Product by ICP-MS LI Chunying, ZHANG Jing,ZHONG \iwen,ZENG Minshan( Giia/igz/low Institute of Drug Control, Guangzhou ^ Guangdong 5\0\60 y China)ABSTRACT ： OBJECTIVE To establish a method for determinating the residual content of palladium which was used as a catalyst in drug substance of formoterol fumarate dihydrate. METHODS The samples were prepared through dissolving directly and analyzed by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS). RESULTS The content of palladium residue in 3 batches of formoterol fumarate dihydratewere determined.Optimized by ICP-MS, the calibration curves of palladium were at good linear of the concentration range of 2-50 fxg • L 1 , with correlation coefficient (r) was 0.999 9 (n = 6).Detection limits of the method was 0.03 ixg'L-1. The recoveries were in the range of 98.0%-101.4%,and RSD was 1.1% (n = 6).CONCLUSION The method is highly sensitive, rapid and accuracy for determination of catalyst palladium residue in formoterol fumarate dihydrate crude product.KEY WORDS：ICP-MS；palladium residue；formoterol fumarate dihydrate富马酸福莫特罗最初是由日本山之内制药公司 开发的长效、高选择性p2受体激动剂，用于治疗支 气管哮喘，急性支气管炎或喘息性支气管炎等气道 阻塞性肺病[M]。

原料药中元素杂质的法规要求及控制方法张再奇元素杂质又称重金属，重金属原义指比重大于5的金属，元素杂质包括可能存在于原料、辅料或制剂中，来源于合成中催化剂残留、药品生产制备过程中引入或辅料中存在的、生产设备引入、或容器密闭系统引入。

某些元素杂质不仅对药品的稳定性、保质期产生不利影响，还可能因为潜在的毒性引发药物副反应。

因此欧盟、美国对杂质的控制越来越严格，对此项不断修订，中国在加入ICH后对此项检测应该也会向国际靠拢，因此了解法规对元素杂质的要求、建立有效的检测方法变得尤为重要。

一、各国法规变更史（1）EMA、EP关于元素杂质的修订EP最新版为9.0版，其中保留了2.4.8金属测试方法A-H；2.4.20章节金属催化剂和金属试剂残留检测；5.20金属催化剂或金属试剂残留。

但在9.3增补版（2018年1月1日实施）中5.20项下规定，元素杂质限度遵循ICH要求。

EMA对元素杂质的修订如下表1。

（2）ICH对元素杂质的修订历程ICH于2009年10月批准了Q3D，经多方讨论后，修订版本的Q3D step4于2014年12月16日生效，其中列出了24种元素杂质的三种给药途径的PDE 值，确定实施日期为：新上市许可为2016年6月生效，已上市品种为2017年12月生效。

（3）USP对元素杂质的修订历程FDA规定在2018年1月1日之后，针对USP药典品种，提交新的NDA、ANDA 应该符合USP<232>、<233>。

针对非USP药典品种，申请人提交新的NDA、ANDA时，应该遵循Q3D。

美国对元素杂质的规定与ICH规定在不同时期，内容不一致，但从2017年12月之后，USP对元素种类和限量均与ICH保持一致。

修订历程详见下表2。

（4）中国药典对重金属检测的修订中国药典对重金属检测的修订主要体现在表3中，名称仍然为重金属，方法仍采用比色法，2017年中国成为了ICH成员国，未来中国的药政监管将遵循ICH指南规定，元素杂质与国际接轨也是大势所趋。

测定空白值的标准偏差；S：标准曲线的斜率）。

得Pb、Cu、As、Cd、Hg的检测限分别为0.02 mg·kg-1、0.02 mg·kg-1、0.002 mg·kg-1、0.001 mg·kg-1和0.05 mg·kg-1，定量限分别为0.07 mg·kg-1、0.07 mg·kg-1、0.006 mg·kg-1、0.003 mg·kg-1和0.17 mg·kg-1。

表3　各元素的线性关系元素线性方程r线性范围/（ng·mL-1）Pb y=15.998x+30.9870.999 60～20As y=0.400 1x+0.9120.999 60～20Cd y=0.320 1x+0.060 60.999 70～10Hg y=0.121 2x+0.001 40.999 80～5Cu y=5.230 4x+470.999 50～2002.3　精密度测定取3种不同浓度的酸枣仁样品，每种浓度分别制备至少3份供试品溶液进行测定，用至少9份样品的测定结果进行评价，计算每个元素的RSD，考察其重复性。

结果测得Pb、As、Cd、Cu、Hg各元素重复性RSD分别为1.8%、1.9%、2.1%、2.2%、1.3%。

由不同日期、不同分析人员进行日间精密度测定，得Pb、As、Cd、Cu、Hg各元素的RSD值分别为2.1%、1.6%、2.1%、1.8%、1.9%，满足验证要求。

精密度试验结果见表4。

2.4　回收率测定取已测定的样品9份，精密加入高（0.3 mg·kg-1）、中（0.2 mg·kg-1）、低（0.1 mg·kg-1）3个不同元素浓度的混合标准品溶液（每种浓度分别制备3份供试品溶液进行测定），进样测定，用实测值与供试品中含有量之差，除以加入对照品量计算回收率。

由表5可知，Pb、As、Cd、Cu、Hg各元素的平均回收率分别为80.6%、83.1%、82.2%、81.1%和85.9%，RSD≤3.6%，符合分析要求。

原子吸收分光光度法测定重金属残留铅、镉测定法（石墨炉法）供试品溶液制备：取供试品粗粉（过2号筛）0.5~1.0g，精密称定，置消化瓶中加硝酸-高氯酸（4:1）混合溶液10mL，混匀，瓶口加一小漏斗，浸泡过夜。

置消化炉上，加热消解，保持微沸，至棕色烟散尽后，加温继续加热直至白烟散尽，消解液呈无色或略带黄色，放冷，转入50mL量瓶中，用2%硝酸定容至刻度，摇匀，即的。

同法同时制备试剂空白溶液。

铜测定法（火焰法）供试品溶液制备同铅测定下供试品溶液制备。

砷测定法（氢化物法）供试品溶液制备：取供试品粗粉（过2号筛）0.5~1.0g，精密称定，置消化瓶中加硝酸-高氯酸（4:1）混合溶液10mL，混匀，瓶口加一小漏斗，浸泡过夜。

置消化炉上，加热消解，保持微沸，至棕色烟散尽后，加温继续加热直至白烟散尽，消解液呈无色或略带黄色，放冷，转入50mL量瓶中，用2%硝酸定容至刻度，摇匀，即的。

精密量取10mL，置25mL量瓶中，加25%碘化钾（临用前配置）1mL，摇匀，加10%抗坏血酸（临用前配置）1mL，摇匀，用20%盐酸定容，摇匀，密塞，置80度水浴中加热3min，取出放冷。

取适量吸入氢化物发生装置，测定吸收值。

同法同时制备试剂空白溶液。

汞测定法（冷吸收法）供试品溶液制备：取供试品粗粉（过2号筛）0.5~1.0g，精密称定，置消化瓶中加硝酸-高氯酸（4:1）混合溶液10mL，混匀，瓶口加一小漏斗，浸泡过夜。

置消化炉上，加热消解，保持微沸，至棕色烟散尽后，加温继续加热直至白烟散尽，消解液呈无色或略带黄色，放冷，加4%硫酸溶液适量、5%高锰酸钾溶液0.5mL，摇匀，滴加5%盐酸羟胺溶液至紫红色恰消失，转入25mL量瓶中，用4%硫酸定容至刻度，摇匀，即得。

同法同时制备试剂空白溶液。

注意事项:1、视实际消化情况称取供试品，一般是取1.0g，有些量多就称取少些比如菟丝子只能是0.5g，否则消化不完，有残渣。

因瓶壁上会沾有供试品，所以加硝酸-高氯酸（4:1）混合溶液时先冲洗瓶壁。

利伐沙班原料药中重金属镍残留量的检测方法与评价王宣江苏省淮安市食品药品检验所，淮安223001摘要目的：建立利伐沙班原料药中金属催化剂镍残留的两种测定方法，并对不同方法进行比较分析。

方法：方法一采用石墨炉原子吸收分光光度法；方法二采用电感耦合等离子体质谱法"结果:方法一在10〜100范围内线性良好,最低检出浓度为1.9方法检测限为0.2!g・gT,加标回收率平均为112%；方法二在0.5〜20!g・LT范围内线性良好,最低检出浓度为0.056!g・L%i，方法检测限为0.007^g-g%1,加标回收率平均为97.9%。

结论：6批样品的检验结果表明，两种方法对结果的测量无明显差异，但电感耦合等离子体质谱法具有分析速度快、检测限更低、灵敏度高以及可多种元素同时测定等优点，在重金属痕量分析检测方面更具优势。

关键词利伐沙班；金属催化剂；镍；电感耦合等离子体质谱法；石墨炉原子吸收分光光度法中图分类号R927.1文献标志码A文章编号1673-7806（2020）05-338-03利伐沙班（Rivaroxaban）化学名为5-氯（（（5S）-2-氧代-3-（4-（3-氧代-4-吗啉基）苯基）-1,3-恶唑烷-5-基）甲基）-2-噻吩甲酰胺巴分子式为G9H27CIN3O5S，是一种口服的抗凝血药物，它通过高选择性直接抑制Xa因子达到抑制凝血酶产生和血栓形成的作用，与传统抗凝血药物相比,具有服用方便、起效迅速、安全性高等特点叫在利伐沙班合成中，用到雷尼鎳作为催化剂目，鎳及其盐类的毒性较低，但由于它本身具有生物化学活性,故能激活或抑制一系列的酶（精氨酸酶、羧化酶、酸性磷酸酶和脱羧酶）而发挥其毒性。

长期接触（如冶炼鎳、镀鎳等）、吸入或注射鎳化物，均有致癌作用。

欧洲药物评审组织（EMEA）将金属催化剂按风险级别分类管理，鎳作为第1类金属，规定注射用原料药中不得超过1!g-g"1[4]o药物中鎳含量的测定方法主要有火焰原子吸收法、石墨炉原子吸收法、电感耦合等离子体质谱法等％本研究采用微波消解法进行样品前处理，建立了石墨炉原子吸收法、电感耦合等离子体质谱法两种方法测定利伐沙班中残留的鎳，并作比较分析，为药物中痕量鎳的测定提供参考。

微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定化学原料药中痕量钯含量李莉;赵桂莉【摘要】建立了微波消解-电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定酒石酸氢可酮原料药中痕量元素钯含量的方法.样品经过微波消解,在优化ICP-MS仪器工作参数后,对样品中的钯含量进行测定.结果表明,方法检出限为0.002 9 μg/mL,加标回收率在94.90％～103.4％,相对标准偏差小于3％.方法实现了对化学原料药中痕量钯的快速、简便、准确的检测.方法有望用于其它类似化学原料药中多种痕量元素的同时检测.【期刊名称】《中国无机分析化学》【年(卷),期】2016(006)001【总页数】4页(P6-9)【关键词】微波消解;ICP-MS;化学原料药;钯【作者】李莉;赵桂莉【作者单位】青海出入境检验检疫局综合技术中心,西宁810000;青海出入境检验检疫局综合技术中心,西宁810000【正文语种】中文【中图分类】O657.63;TH843药品安全是重大的民生和公共安全问题，事关人民群众身体健康和社会和谐稳定，因此国家在2012年伊始第一次发布了“国家药品安全“十二五”规划”，对包括化学药、原料药、中成药在内的各种药品提出了更高质量标准和检测需求。

但是在化学药合成过程中，过渡金属的复合物或金属盐类，通常作为催化剂和原料试剂使用，在大多数原料药的合成中，都需要使用金属催化剂，而原料药中的金属残留物会被进一步带入到药物制剂中，从而造成药品中金属杂质元素的残留。

杂质元素的限度检测对于药物安全至关重要，已经证明这些杂质元素是引起人体癌症，神经系统等疾病的诱因。

这些金属杂质不但对治疗作用无益，而且具有影响人类健康的潜在危险[1]。

基于药物安全性和质量控制的要求，必须对原料药中的金属催化剂或金属试剂残留量予以严格的控制。

金属钯具有选择性好、活性高等特点，它常作为一种催化剂在药物及其中间体的合成过程中得到广泛应用，但如果残留在药物中的钯含量过高，会对人体的重要脏器造成损害，如引发鼻炎、结膜炎等疾病[2]。

HPLC法测定肝素钠原料中EDTA―2Na的残留肝素钠是从猪小肠黏膜中提取精制的含有硫酸氨基葡聚糖的钠盐，属于不均一的多糖分子，通常分子量在3000～30000道尔顿，临床常作为注射剂使用。

肝素钠本身带负电荷，能干扰血凝过程的许多环节，其作用机制比较复杂，主要通过与抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）结合，而增强后者对活化的Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ和Ⅻ凝血因子的抑制作用。

具体涉及阻止血小板凝集和破坏，妨碍凝血激活酶的形成；阻止凝血酶原变为凝血酶；抑制凝血酶，从而妨碍纤维蛋白原变成纤维蛋白。

肝素钠作为原料药，中国药典中明确规定了其重金属限度的检测，但由于其来源于动物组织提取，实际生产工艺中均要增加去除重金属的工艺。

目前多采用添加EDTA-2Na来螯合重金属，形成水溶物后，经分级沉淀步骤去除螯合物。

EDTA-2Na收载于FDA《非活性组分指南》，可用于非注射和注射给药制剂，会与人体内的钙离子形成螯合物，引起低血钙等症状。

由于肝素钠生产过程中使用EDTA-2Na去除重金属，所以在终产品中可能残留EDTA-2Na，对其进行检测有重要的意义。

1仪器与材料11仪器TG332A型分析天平（湘仪天平仪器设备有限公司）；LC-15C 型高效液相色谱仪（日本岛津）；LC-20AD型紫外检测器（日本岛津）；1.2材料硫酸铜（分析纯，天津市永大化学试剂有限公司）；EDTA-2Na （分析纯，天津市科密欧化学试剂有限公司）；肝素钠（注射级，批号：HM120401、HM120402、HM120403，石家庄市协和药业有限公司）。

水为自制纯化水（二级反渗透法）。

2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶填料WondaSilC18（200mm×46mm×5μm）；流动相：0025mol/l硫酸铜溶液（用稀硫酸调节pH至30）；检测波长：254nm；流速：10ml/min；检测温度：室温；进样量：20μl。

2.2溶液的制备2.2.1空白溶液的制备精密量取004mol/l硫酸铜溶液10ml，置50ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。