血细胞分析仪的检测技术及临床应用 PPT课件

03
血细胞分析的方法
显微镜检查法
人工操作
适用范围
显微镜检查法是一种经典的血细胞分析方 法，通过人工操作显微镜对血液样本进行 观察，识别各种血细胞及其形态特征。
显微镜检查法适用于临床实验室、基 层医疗单位等场所，尤其在缺乏自动 化分析仪器的区仍被广泛应用。
主观性
由于该方法依赖于人工操作和经验判 断，因此具有一定的主观性，不同操 作者之间可能存在一定差异。
血细胞分析的目的和意义
诊断血液系统疾病
血细胞分析可以检测出各种血液 系统疾病，如贫血、白血病、血 小板减少症等，为医生提供诊断
依据。
监测治疗效果
通过定期进行血细胞分析，可以监 测治疗效果，如化疗后肿瘤标记物 水平的变化等。
评估健康状况
血细胞分析可以反映机体的健康状 况，如红细胞计数和血红蛋白浓度 可以反映贫血程度，白细胞计数可 以反映感染情况等。
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血细胞分析的指标
红细胞指标
红细胞计数(RBC)
用于判断贫血、红细胞增多等。正常 值：男性4.0~5.5 × 10^12/L，女性 3.5~4.5 × 10^12/L。
血红蛋白浓度(Hb)
反映贫血程度。正常值：男性 120~160g/L，女性110~150g/L。
红细胞压积(Hct)
反映血液浓缩程度。正常值：男性 0.4~0.5，女性0.35~0.45。
异常指标处理
对异常指标进行复检和确认，排除干扰因素和仪器误差。
血细胞分析的局限性
影响因素
血细胞分析结果可能受到多种因素的影响，如标本采集、处理、 仪器误差等。
疾病特异性
某些疾病可能导致血细胞计数和形态的异常，但特异性不高，需要 结合其他检查结果进行诊断。

免疫学及临床检验教研室
①DIFF通道：中性、嗜酸、淋巴、单核细胞的检测通道。 溶血剂使红细胞和血小板迅速溶解，并在白细胞膜上 打出小孔及与嗜酸性颗粒结合，染料通过小孔进入白 细胞与核酸及细胞器结合，通过激光照射，产生不同 强度的荧光，荧光强度与细胞的核酸含量成正比。
②WBC/BASO通道：用酸性试剂将红细胞处理掉，除嗜碱 性粒细胞外其他白细胞均处理为裸核，利用FSC和SSC 信号将嗜碱细胞分离出来，此通道同时可获得WBC总数。
②溶血后对白细胞进行染色，染色后的标本进入鞘流池 进行双鞘流分析，由于淋巴、单核、中性以及嗜酸细胞对 染色剂的着色程度不同，细胞结构的光散射程度不同，产 生特定吸光率。
③嗜碱性粒细胞具有抗酸性，在WBC/BASO通道保持形态 完整，其他白细胞胞质溢出成为裸核，根据电阻抗得到嗜 碱性粒细胞直方图。
免疫学及临床检验教研室
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图3-10 体积（V）、电导（C）和光散射（S）法
图3-11 VCS细胞检测立体散点图
图3-12 VCS异常细胞检测 平面散点图位置
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（2） 双鞘流技术和细胞化学染色原理
①标本在第一鞘流液中经过电阻抗分析，得到细胞体积， 第二鞘流液对进行光吸收率分析，对细胞内容物进行测定。
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电阻抗法是三分群血液分析仪的核心技术，可准 确测出细胞（或类似颗粒）的大小和数量。
电阻抗法还与其他 检测原理组合应用于 五分类血液分析仪中。
图3-1 电阻抗法细胞计数原理
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白细胞计数时除加入一定量稀释液外还要加入 溶血剂，红细胞迅速溶解同时使白细胞膜通透性改 变，白细胞胞质中部分物质经细胞膜渗出，使细胞 膜紧裹在细胞核或存在的颗粒物质周围，所以经溶 血剂处理后含有颗粒的粒细胞比无颗粒的单核细胞 和淋巴细胞要大些。

• 当有一个细胞通过小孔时，由于电阻增加， 于瞬间引起电压变化——通过脉冲。
• 细胞体积越大，脉冲振幅越高；细胞数量越 多，脉冲数量也越多。
• 电阻抗法可准确测量出细胞（或类似颗粒） 的大小，是三分群血液分析仪的主要应用 原理。
• 血红蛋白（HGB）被高铁氰化钾氧化为高铁 血红蛋白，再与氰结合成稳定的棕红色氰 化高铁血红蛋白，在规定的波长和液层厚 度的条件下，具有一定的吸光系数，根据 吸光度，即可求得细胞蛋白浓度。
希森美康KX-21自动血球计数仪
1.检测部
2.旋转阀与清洗槽
前片
中片(旋转片)
进样针
后片
恒定的、精确的体积
SRV中有高精度的小孔，阀门中片的全血(或稀释血)传输 至检测器，在每次检测后，SRV阀对内部小孔进行清洗
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4.溶血剂
血细胞计数原理即库尔特原理（Coulter principle):根据血细胞非传导的性质，以 电解质溶液中悬浮的血细胞在通过计数 小孔时引起的电阻变化进行检测为基础， 进行血细胞计数和体积测定。
5.必要时的保养
6.提供品的更换
7.调整
只介绍气压：
谢谢大家！
学习永远 不晚。 JinTai College
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2.标本的测量
3.测量结果
希森美康KX-21血球计数仪
另外：
1.日常保养
一定要戴橡胶手套；浮标尖头朝上！！
2.每周保养
旋转阀托盘的清洗
3.每月保养
用量：每处1 滴管
பைடு நூலகம்
4.每三月保养
确认动作次数复位！！
150－350fl的为嗜中性粒细胞。

• 病例2：
• 患者王某，21岁，女性，发热38.0 ℃， 咽部疼痛就诊。实验室检查结果：
白细胞5.6X10^9/L
淋巴细胞百分比70.1% 淋巴细胞绝对值3.9x10^9
中间群细胞百分比5.4% 中间群细胞绝对值0.3x10^9
中性粒细胞24.5%
中性粒细胞绝对值1.4x10^9
• 此类直方图常见于婴幼儿血象、再障、中 性粒细胞缺乏症、淋巴细胞增多症、传单 、慢性淋巴细胞白血病等。
血细胞分析仪临床意义
• NEUT% 中性粒细胞百分率 • NEUT# 中性粒细胞绝对值 • LYMPH% 淋巴细胞百分率 • LYMPH# 淋巴细胞绝对值 • MONO% 单核细胞百分率 • MONO# 单核细胞绝对值 • EO% 嗜酸性粒细胞百分率 • EO# 嗜酸性粒细胞绝对值 • BASO% 嗜碱性粒细胞百分率 • BASO# 嗜碱性粒细胞绝对值
• （2）鉴别IDA和轻型β-地中海贫血：两者 都是由于Hb合成异常所致贫血，均表现为 小细胞低色素，前者RDW增高，后者RDW 正常
MCV/RDW贫血分类法有助于贫血的形态分类★
3.1.3征求其他面试者的意见 首先应明确单位的目标是否有过变化？为了适应这种变化该工作是否作过调整？询问其他部门对该工作的期望，这些期望是否都得到 了满足。 小提示68：注意应聘者的声音：声音尖表明紧张。 目标：1.让学生明白劳动可以锻炼身体，增长本领，使自己从小养成爱劳动的好习惯。 忌“零”食，忌“偏”食， 大部分人在写作简历时是诚实的，但有些人总禁不住要隐瞒不好的方面，夸大自己的成绩。仔细研读每份简历，选出面试对象，为每 位面试者准备一些问题。 小提示87：即使没有合适的应聘者，也绝不可降低要求。 人力资源经理 1、讲解乘船的意外伤害事故，引起学生的重视。 要争取在2小时内将伤口处理。处理的方法：一是在咬伤处的上边扎一条止血带，减小狂犬病毒随血液流入全身。 （3） 活动时，应注意鼻，口混合呼吸，特别是长跑时，一定不要张着嘴大口大口地喘气。

嗜碱性粒细胞散点图
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1、流式细胞术、电阻抗、射频和特殊细胞染色法
检测通道：
（3）未成熟粒细胞信息（IMI）
通道：用射频、电阻抗和细胞化学
染色法。在细胞悬液中加硫化氨基
酸，幼稚细胞与硫化氨基酸结合的
（1）4DIFF通道：利用激光流式
细胞术、核酸荧光染色技术，采用专 一溶血剂解红细胞和血小板，而白细 胞膜仅部分溶解出现小开口，核酸荧 光染料聚次甲基进入受损的白细胞内， 与DNA、RNA和细胞器结合，使之着 色。染色后白细胞色深（未成熟粒细 胞、异常细胞染色更深，成熟白细胞 荧光染色浅），红细胞不染色，血小 板稍染色。因荧光强度与细胞所含核 酸量成比例，从而得到4DIFF白细胞 散点图，包括中性粒细胞和嗜碱性粒 细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性 粒细胞（百分率和细胞计数绝对值） 和未成熟粒细胞（百分率和细胞计数 绝对值）。
电阻抗法可精确测量出细胞
（或类似颗粒）的大小，是三分类 血细胞分析仪的主要应用原理。电 阻抗法还与光学检测原理组合应用 于五分类血细胞分析仪中。
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二、射频电导法

射频指射频电流，是每秒变化
大于10000次的高频交流电磁波。电
导性即电的传送性能。高频电流能
通过细胞壁。用高频电磁探针渗入
细胞膜脂质层可测定细胞的导电性，
发了第1台电子血细胞技术仪，并应用于临
床，开创了血细胞计数的新纪元。从此，随
着基础医学和高科技，特别是计算机软件技
术的发展，其检测原理逐渐完善，检测技术
不断创新，检测的参数显著增多。
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传统手工法显微镜血细胞计数或分类
方法，不仅速度慢，而且因操作过程的随 机误差、实验器材的系统误差和检测方法 的固有误差，检测的精密度不高。

群落分界不清，有/无分类数据
单一群落浓集/区域扩展
警示B、E以及 白细胞信息 幼稚细胞增多 警示杂乱
警示原始/ 幼稚细胞
警示成熟血 细胞/异淋↑
血小板大多增高
贫血伴有血小板减少
RBC/PLT正常或略低
（伴有幼红细胞）
显微镜确认细胞类别/数量多寡
显微镜观察
骨髓增殖肿瘤 重度核左移？
恶性血液病 溶血危象
血细胞及血液分析仪基础
——图形和警示的分析与处理
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引言
• 血细胞分析最基本的实验室检查方法就是血 常规检测，而做血常规用到的最基本的仪器是 血细胞分析仪。今天要和大家一起探讨的是用 血细胞分析仪做出来的血常规结果如何进行血 细胞分析。临床医生习惯看的是数据，而我们 检验人员主要分析的不是那些数据，而是附在 报告上的图形和警示。
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血涂片观察和分类
白细胞分类
(n=200)
中性杆状核
1%
中性分叶核
68.5%
淋巴细胞
23.5%
单核细胞
4%
嗜酸粒细胞
2%
嗜碱粒细胞
1%
血涂片镜检 分析
镜下可见红细胞 内出现明显的疟 原虫环状体、配 子体、裂殖体等
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三、白细胞图形和警示
临床信息
患者，女，23岁，于半 月前发现双下肢散在瘀 斑，伴牙龈出血。无鼻 出血，无发热；有头晕、 乏力；近两次月经量偏 多。以”出血原因待查” 而到本院就诊。
2%
嗜碱粒细胞
0%
血涂片镜检 分析
镜下可见白细胞及 血小板形态无明显 异常的变化，红细 胞出现明显的聚集 现象
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工作流程
红细胞图形
图形 典型

桑葚状。 • PH对红细胞的影响： • 酸性尿中，红细胞膜脂质内层面积增加，体积变小。碱性
红细胞 吞噬细胞
白细胞
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上皮细胞
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1.红细胞
• 未染色的正常红细胞为双凹圆盘状，淡黄色，直径大约 7～8μm
• 渗透压对红细胞的影响： • 低渗透压尿中红细胞胀大，使血红蛋白溢出，仅留下细胞
膜，成为大小不等的空环形或面包圈样，称为影红细胞。 • 高渗透压尿中红细胞皱缩，体积变小，似锯齿形、棘形或
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尿液分析的内容
➢ 尿液理学检查 ➢ 化学检查 ➢ 显微镜形态学检查
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一、尿液的理学检查
☺包括对尿量、颜色、透明度、比密、气味、 （酸碱度）、渗透量、电导率等物理指标 进行分析检验。
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二 尿液的常规化学检查
☺尿液干化学检验项目主要有：pH、比密、 蛋白质、葡萄糖、酮体、胆红素、尿胆原、 亚硝酸盐、红细胞（潜血）、白细胞（粒 细胞酯酶）；维生素C。
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干化学检查和镜检
• 已经有很多研究和文献证明，尿干化学检查中的红 细胞和白细胞项目，不能取代尿液有形成分的检查， 尿液干化学检查的所有内容也都是过筛性检查内容， 并不能取代显微镜检查内容；而显微镜检查也不能 取代化学检查。
• 在某些情况下干化学检查与湿化学检查的敏感性、 特异性和应用价值也有不同。
– 尽可能同一体位（血红蛋白、血细胞比容、红 细胞计数于站位时增加）、一定时间和近似生 理条件下采血
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血细胞分析仪
血细胞分析仪实质上是指
对一定体积内血细胞数量及异
质性进行分析的仪器，包括血
细胞计数与分类、血红蛋白测