基因检测案例8-角膜营养不良

角膜营养不良相关基因研究进展
曹文萍;刘平
【期刊名称】《国际眼科杂志》
【年(卷),期】2008(8)7
【摘要】角膜营养不良是一组临床表现多样的遗传性疾病.随着分子遗传学研究技术的发展,越来越多类型的角膜营养不良的致病基因及相关突变已经被确定.本文将从基因功能、突变位点、可能的致病原因等方面对各类型角膜营养不良及其相关基因的研究进展作一综述.
【总页数】3页(P1429-1431)
【作者】曹文萍;刘平
【作者单位】150001,中国黑龙江省哈尔滨市,哈尔滨医科大学附属第一医院眼科三病房;150001,中国黑龙江省哈尔滨市,哈尔滨医科大学附属第一医院眼科三病房【正文语种】中文
【中图分类】R77
【相关文献】
1.衰老相关基因Klotho的研究进展衰老相关基因Klotho的研究进展 [J], 郭煜晖;胡大军;陈静;彭丹丽;李玉婷
2.施奈德结晶状角膜营养不良的分子基础与临床研究进展 [J], 陶俊峰; 黄玉迪; 张军林; 苏振宏; 解举民
3.TGFBI相关颗粒状角膜营养不良的研究进展 [J], 李豪亮;梁舒
4.未折叠蛋白反应在角膜营养不良中的研究进展 [J], 刘学睿;王丽媛;张毅;郑涛;赵
楚楚;刘平
5.施奈德结晶状角膜营养不良致病基因功能的研究进展 [J], 苏振宏;黄玉迪;解举民因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

有效的治疗方法是采用单眼雾视法ꎬ生成中心凹盲点而成功消除中心凹冲突ꎮ大部分患者剥除视网膜前膜可有效解决双眼视网膜复视ꎬ如果棱镜不能满意地消除或减少主观复视ꎬ则斜视手术成功可能性不大ꎮ解读:该版ＰＰＰ提出了双眼视网膜复视的新概念ꎬ用开/关灯测试㊁视标－框架测试方法可以确定诊断ꎬ最有效的治疗方法是雾视一侧眼ꎮ４㊀成人斜视ＰＰＰ的主要发现和建议成人斜视ＰＰＰ的优点在于ꎬ多数成人斜视诊疗建议的证据来源于美国斜视学会小儿眼科/成人斜视ＰＰＰ专家组的临床研究结果ꎬ其可信度高ꎬ提出的各项诊疗建议全面且实用ꎮ我们应认真学习和理解２０１９版成人斜视ＰＰＰ的内容ꎬ更新成人斜视相关的知识和理念ꎬ结合中国的国情和特点ꎬ进一步促进中国成人斜视诊断和治疗的规范化ꎮ利益冲突㊀所有作者均声明不存在任何利益冲突参考文献[１]ＤａｇｉＬＲꎬＶｅｌｅｚＦＧꎬＡｒｃｈｅｒＳＭꎬｅｔａｌ.ＡｄｕｌｔＳｔｒａｂｉｓｍｕｓＰｒｅｆｅｒｒｅｄＰｒａｃｔｉｃｅＰａｔｔｅｒｎ[Ｊ].Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙꎬ２０２０ꎬ１２７(１)ʒ１８２－２９８.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｏｐｈｔｈａ.２０１９.０９.０２３.(收稿日期:２０２０－０３－２０)(本文编辑:尹卫靖)病例报告Ａｖｅｌｌｉｎｏ角膜营养不良一例陶天畅㊀王蕾㊀崇伟华㊀李根林首都医科大学附属北京同仁医院㊀北京同仁眼科中心㊀北京市眼科学与视觉科学重点实验室ꎬ１００７３０通信作者:李根林ꎬＥｍａｉｌ:ｌｉｇｅｎｌｉｎ２０１８＠１６３.ｎｅｔ基金项目:国家自然科学基金项目(８１２７１０４６)ꎻ北京市自然科学基金项目暨北京市教育委员会科技发展计划重点项目(ＫＺ２０１５１００２５０２５)ＤＯＩ:１０.３７６０/ｃｍａ.ｊ.ｃｎ１１５９８９￣２０２００５２０￣００３６２ＡｃａｓｅｏｆＡｖｅｌｌｉｎｏｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙＴａｏＴｉａｎｃｈａｎｇꎬＷａｎｇＬｅｉꎬＣｈｏｎｇＷｅｉｈｕａꎬＬｉＧｅｎｌｉｎＢｅｉｊｉｎｇＴｏｎｇｒｅｎＥｙｅＣｅｎｔｅｒꎬＢｅｉｊｉｎｇＴｏｎｇｒｅｎＨｏｓｐｉｔａｌꎬＣａｐｉｔａｌＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＢｅｉｊｉｎｇＯｐｈｔｈａｌｍｏｌｏｇｙａｎｄＶｉｓｕａｌＳｃｉｅｎｃｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙꎬＢｅｉｊｉｎｇ１００７３０ꎬＣｈｉｎａＣｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇａｕｔｈｏｒ:ＬｉＧｅｎｌｉｎꎬＥｍａｉｌ:ｌｉｇｅｎｌｉｎ２０１８＠１６３.ｎｅｔＦｕｎｄｐｒｏｇｒａｍ:ＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉｏｎｏｆＣｈｉｎａ(８１２７１０４６)ꎻＫｅｙＰｒｏｊｅｃｔｏｆＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＰｌａｎｏｆＢｅｉｊｉｎｇＭｕｎｉｃｉｐａｌＣｏｍｍｉｓｓｉｏｎｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ(ＫＺ２０１５００２５０２５)ＤＯＩ:１０.３７６０/ｃｍａ.ｊ.ｃｎ１１５９８９￣２０２００５２０￣００３６２010020030040050060070001002003004005006007000.0%5.7%26.4%41.5%22.6%2.8%0.9%0.0%0.9%9.1%33.6%34.5%15.5%5.5%0.9%0.0%0%10%20%30%40%50%0%10%20%30%40%50%5A 5B图１㊀患者双眼前节照相㊀可见大小㊁形态㊁位置不规则的灰白色混浊ꎬ呈颗粒样改变㊀Ａ:右眼㊀Ｂ:左眼㊀图２㊀双眼裂隙灯显微镜照相㊀双眼角膜基质层可见分布不均的星形沉积㊀Ａ:右眼㊀Ｂ:左眼㊀图３㊀患者双眼眼底彩色照相㊀双眼视网膜未见明显异常㊀Ａ:右眼㊀Ｂ:左眼㊀图４㊀患者基因测序结果㊀Ａ:阴性对照㊀Ｂ:杂合突变ＴＧＦＢＩｃ.３７１Ｇ>Ａꎻｐ.Ｒ１２４Ｈ㊀图５㊀角膜内皮分析报告㊀不同面积内皮细胞所占比例正常㊀Ａ:右眼㊀Ｂ:左眼㊀㊀患者ꎬ男ꎬ汉族ꎬ４５岁ꎬ双眼反复不适１０年余ꎬ２０１６年９月２３日自觉双眼有异物感ꎬ伴流泪不止ꎬ至北京同仁医院就诊ꎮ患者全身检查未见明显异常ꎬ父母非近亲结婚ꎬ否认家族史ꎮ右眼裸眼视力０ ８ꎬ左眼０ ８ꎻ非接触性眼压(吹气式)测量:右眼１３ｍｍＨｇꎬ左眼１２ｍｍＨｇ(１ｍｍＨｇ＝０ １３３ｋＰａ)ꎻ眼前节照相示双眼结膜未见异常ꎬ双眼角膜见大小㊁形态㊁位置不同的灰白色混浊(图１)ꎻ前房较深ꎬＫＰ(－)ꎬ房水闪辉(－)ꎬ双眼瞳孔等大等圆ꎬ直接㊁间接光反射存在ꎻ晶状体及玻璃体透明ꎮ裂隙灯显微镜检查显示双眼角膜基质层散在星状灰白色沉积物(图２)ꎮ眼底检查示双眼视盘色淡红ꎬ边界清ꎬＣ/Ｄʈ０ ３ꎬ视网膜血管走向正常ꎬ动静脉管径比为２ʒ３ꎬ双眼黄斑中心凹反光明显(图３)ꎮ基因检测示先证者携带下列杂合突变:ＴＧＦＢＩｃ.３７１Ｇ>Ａꎻｐ.Ｒ１２４Ｈ(图４)ꎮ角膜内皮细胞检查各项指标均无明显异常(图５ꎬ表１)ꎮ眼别厚度(μｍ)取样个数面积(μｍ２)面积(μｍ２)面积(μｍ２)差(μｍ２)系数(％)密度(个/ｍｍ３)六边形比例(％)右眼５８３１０６１１５ ８６４２ ９３４４ ２８８ １２５ ６２９０５ ２６０左眼５２７１１０９９ ８６０５ ６３２７ ８１０２ ７３１ ３３０５０ ５５３㊀讨论:Ａｖｅｌｌｉｎｏ角膜营养不良(ＡｖｅｌｌｉｎｏｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙꎬＡＣＤ)又称颗粒状角膜营养不良(ｇｒａｎｕｌａｒｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙꎬＧＣＤ)Ⅱ型ꎬ是一种罕见的常染色体显性角膜疾病[１]ꎬ其发病机制主要与ＴＧＦＢＩ基因变异有关[２]ꎬ最早报道于意大利的Ａｖｅｌｌｉｎｏ地区[３]ꎬ在日韩地区发病率较高ꎬ我国少见报道ꎮＡＣＤ的临床特征为角膜中央部基质出现非对称性灰白色的形状㊁大小㊁深浅不定的混浊ꎬ多呈格子状分布ꎮ角膜营养不良具有一定的遗传异质性ꎬ其发病与ＴＧＦＢＩ㊁ＧＳＮ㊁Ｋ１２㊁Ｋ１３㊁Ｍ１Ｓ１㊁ＣＨＳＴ６㊁ＣＯＬ８Ａ２㊁ＳＬＣ４Ａ１１等基因表达异常有关[４]ꎬ其中ＴＧＦＢＩ基因变异引起者较为常见[５]ꎬ根据临床表现可分为: (１)格子状角膜营养不良(ｌａｔｔｉｃｅｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙꎬＬＣＤ)㊀包括ＬＣＤⅠ㊁Ⅲ㊁Ⅳ型和非典型ＬＣＤꎻ(２)ＧＣＤ㊀包括ＧＣＤⅠ㊁Ⅱ㊁Ⅲ型和非典型ＧＣＤꎻ(３)蜂窝状角膜营养不良(Ｔｈｉｅｌ￣ＢｅｈｎｋｅｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙꎬＴＢＣＤ)ꎮ按照发病的解剖结构则可分为前部㊁基质部和后部型ꎮ目前已知ＴＧＦＢＩ基因涉及Ｒ１２４Ｈ㊁Ｒ５５５Ｗ㊁Ｒ１２４Ｌ等多种突变[６]ꎬ具体机制尚不明确ꎬ可能与蛋白结构功能异常或蛋白水解异常有关[７－８]ꎬ由于突变种类不同ꎬ患者的临床表现并不相同ꎬ遗传学研究证实ＴＧＦＢＩ基因的Ｒ１２４Ｈ变异为ＡＣＤ的致病原因[９]ꎮＡＣＤ患者多在２０岁左右发病ꎬ早期可见角膜上出现颗粒状混浊物沉积ꎬ随着时间的推移逐渐呈格子状ꎬ可向角膜基质深层进展[１０]ꎮＡＣＤ患者中女性的视力损伤重于男性ꎬ表明性激素可能影响病情[１１]ꎮ尽管目前已知ＡＣＤ发病由ＴＧＦＢＩ基因发生Ｒ１２４Ｈ变异引起ꎬ但不同ＡＣＤ患者的表型存在差异ꎬ有待进一步研究ꎮＧＣＤⅡ的诊断标准:角膜基质层出现点状㊁星形㊁雪花状混浊ꎬ也可为格子线样混浊ꎬ主要为颗粒状和组织淀粉样沉积ꎬ发病时除了视力出现不同程度下降外ꎬ可不伴其他症状ꎮ本例患者根据角膜表现ꎬ结合临床检查及基因检测结果ꎬ诊断为ＧＣＤⅡꎮ本例患者需与下列疾病进行鉴别:(１)ＴＢＣＤ㊀ＴＢＣＤ为ＴＧＦＢＩ基因发生Ｒ５５５Ｑ变异引起常染色体显性遗传疾病ꎬ多于１０~２０岁发病ꎬ表现为角膜中央浅表蜂窝样变及角膜反复溃疡伴眼部不适ꎬ周围角膜一般无混浊ꎬ随着病情进展混浊可蔓延至角膜深基质层和外周角膜ꎮ本例患者无角膜蜂窝状改变ꎬ可资鉴别ꎮ(２)ＲＢＣＤ㊀又称ＧＣＤⅢ型ꎬ其发病主要与ＴＧＦＢＩ基因出现Ｒ１２４Ｌ突变有关ꎬ多在１岁内出现体征ꎬ表现为角膜中央区分支状或地图状混浊ꎬ病灶可发展至角膜缘及深基质层ꎬ多数患者于１０岁前出现角膜上皮反复溃疡和疼痛ꎬ其角膜溃疡较ＴＢＣＤ更加严重和频繁ꎮ本例患者无角膜溃疡表现ꎬ可资鉴别ꎮ(３)ＬＣＤ㊀其主要症状为角膜网格线样混浊ꎬ呈刚果红色ꎬ根据其临床表型和异常蛋白在角膜的沉积位置可分为多种类型[１２]ꎮ本例患者角膜呈灰白色颗粒样改变ꎬ可资鉴别ꎮ(４)斑点状角膜营养不良(ｍａｃｕｌａｒｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙꎬＭＣＤ)㊀为常染色隐性遗传病ꎬ在角膜基质层营养不良中最为少见ꎬ但病情最为严重ꎬ目前认为其发病机制为硫酸角质素的生成异常ꎬ从而引起氨基多糖沉积于基质层所致ꎬ临床表现为浅表灰白色角膜混浊ꎬ易与ＧＣＤ混淆ꎮＭＣＤ随着时间的推移可出现弥漫性全角膜受累伴视功能损伤ꎬ角膜基质层病灶之间出现云翳ꎮ本例患者未见全角膜受累表现ꎬ无明显视力下降ꎬ可资鉴别ꎮ利益声明㊀所有作者均声明不存在利益冲突参考文献[１]ＡｂａｚｉＺꎬＭａｇａｒａｓｅｖｉｃＬꎬＧｒｕｂｉｓａＩꎬｅｔａｌ.ＩｎｄｉｖｉｄｕａｌｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃｖａｒｉａｎｃｅｓｉｎａｆａｍｉｌｙｗｉｔｈＡｖｅｌｌｉｎｏｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙ[Ｊ/ＯＬ].ＢＭＣＯｐｈｔｈａｌｍｏｌꎬ２０１３ꎬ１３ʒ３０[２０２０－０１－０５].ｈｔｔｐ://ｗｗｗ.ｎｃｂｉ.ｎｌｍ.ｎｉｈ.ｇｏｖ/ｐｕｂｍｅｄ/２３８３７６５８.ＤＯＩ:１０.１１８６/１４７１￣２４１５￣１３￣３０. 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[６]ＰｏｕｌｓｅｎＥＴꎬＮｉｅｌｓｅｎＮＳꎬＪｅｎｓｅｎＭＭꎬｅｔａｌ.ＬＡＳＩＫｓｕｒｇｅｒｙｏｆｇｒａｎｕｌａｒｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙｔｙｐｅ２ｐａｔｉｅｎｔｓｌｅａｄｓｔｏａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｆｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｂｅｔａ￣ｉｎｄｕｃｅｄｐｒｏｔｅｉｎ(ＴＧＦＢＩｐ)[Ｊ].Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓꎬ２０１６ꎬ１６(３)ʒ５３９－５４３.ＤＯＩ:１０.１００２/ｐｍｉｃ.２０１５００２８７.[７]蔡素萍.从分子水平认识角膜营养不良的分类方法[Ｊ].中华实验眼科杂志ꎬ２０１３ꎬ３１(２)ʒ２０４－２０８.ＤＯＩ:１０.３７６０/ｃｍａ.ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣０１６０.２０１３.０２.０２３.ＣａｉＳＰ.Ｍｏｄｉｆｉｅｄｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｏｆｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙａｔｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｅｖｅｌ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＥｘｐＯｐｈｔｈａｌｍｏｌꎬ２０１３ꎬ３１(２)ʒ２０４－２０８.ＤＯＩ:１０.３７６０/ｃｍａ.ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣０１６０.２０１３.０２.０２３. [８]ＬａｋｓｈｍｉｎａｒａｙａｎａｎＲꎬＣｈａｕｒａｓｉａＳＳꎬＭｕｒｕｇａｎＥꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎｐｒｏｐｅｎｓｉｔｙｏｆｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ￣ｉｎｄｕｃｅｄｐｒｏｔｅｉｎ(ＴＧＦＢＩｐ)ａｎｄｔｈｅａｍｙｌｏｉｄｆｏｒｍｉｎｇｍｕｔａｎｔｓ[Ｊ].ＯｃｕｌＳｕｒｆꎬ２０１５ꎬ１３(１)ʒ９－２５.ＤＯＩ:１０.１０１６/ｊ.ｊｔｏｓ.２０１４.０４.００３. [９]ＷｅｉｓｓＪＳꎬＭøｌｌｅｒＨＵꎬＡｌｄａｖｅＡＪꎬｅｔａｌ.ＩＣ３Ｄｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｉｅｓ ｅｄｉｔｉｏｎ２[Ｊ].Ｃｏｒｎｅａꎬ２０１５ꎬ３４(２)ʒ１１７－１５９.ＤＯＩ:１０.１０９７/ＩＣＯ.０００００００００００００３０７.[１０]ＯｙａＦꎬＳｏｍａＴꎬＯｉｅＹꎬｅｔａｌ.Ｏｕｔｃｏｍｅｓｏｆｐｈｏｔｏｒｅｆｒａｃｔｉｖｅｋｅｒａｔｅｃｔｏｍｙｉｎｓｔｅａｄｏｆｐｈｏｔｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｋｅｒａｔｅｃｔｏｍｙｆｏｒｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｇｒａｎｕｌａｒｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙｔｙｐｅ２[Ｊ].Ｇｒａｅｆｅ'ｓＡｒｃｈＣｌｉｎＥｘｐＯｐｈｔｈａｌｍｏｌꎬ２０１６ꎬ２５４(１０)ʒ１９９９－２００４.ＤＯＩ:１０.１００７/ｓ００４１７￣０１６￣３４６４￣１. [１１]ＧｕＺꎬＺｈａｏＰꎬＨｅＧꎬｅｔａｌ.ＡｎＡｒｇ１２４ＨｉｓｍｕｔａｔｉｏｎｉｎＴＧＦＢＩａｓｓｏｃｉａｔｅｄｔｏＡｖｅｌｌｉｎｏｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙｉｎａＣｈｉｎｅｓｅｐｅｄｉｇｒｅｅ[Ｊ].ＭｏｌＶｉｓꎬ２０１１ꎬ１７ʒ３２００－３２０７.[１２]彭诗茗ꎬ赵军ꎬ祝天辉ꎬ等.格子状角膜营养不良一家系系谱特点及临床特征分析[Ｊ].中华实验眼科杂志ꎬ２０１７ꎬ３５(８)ʒ７０４－７０８.ＤＯＩ:１０.３７６０/ｃｍａ.ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣０１６０.２０１７.０８.００７.ＰｅｎｇＳＭꎬＺｈａｏＪꎬＺｈｕＴＨꎬｅｔａｌ.ＰｅｄｉｇｒｅｅａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓｉｎａＣｈｉｎｅｓｅｆａｍｉｌｙｗｉｔｈｌａｔｔｉｃｅｃｏｒｎｅａｌｄｙｓｔｒｏｐｈｙ[Ｊ].ＣｈｉｎＪＥｘｐＯｐｈｔｈａｌｍｏｌꎬ２０１７ꎬ３５(８)ʒ７０４－７０８.ＤＯＩ:１０.３７６０/ｃｍａ.ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣０１６０.２０１７.０８.００７.(收稿日期:２０２０－０２－０１㊀修回日期:２０２０－０５－２０)(本文编辑:尹卫靖)。

·论著·作者单位:100730首都医科大学北京同仁眼科中心(于洁、邹留河、刘宁朴、吕岚、董东生);北京市眼科研究所(贺玖成、张伟、孙旭光、武宇影、殷晓棠)通讯作者:于洁,Email :shixiaojun01@s ina .com角膜营养不良与BIGH3基因突变研究于洁　邹留河　贺玖成　刘宁朴　张伟吕岚　孙旭光　董东生　武宇影　殷晓棠 【摘要】　目的　对角膜营养不良患者进行分子遗传学分析,探讨我国人角膜营养不良中BIGH3基因突变的类型。

方法　2000年7～12月收集15例颗粒状、Av ellino 、Reis -B ǜcklers 角膜营养不良患者和5例无任何角膜病变的正常对照者外周血10ml ,提取白细胞DNA ,利用合成的BIGH3基因第4和第12外显子特异性引物,进行PCR 扩增,并对扩增产物进行直接测序,分析相应基因序列。

结果15例患者均检出BIG H3基因突变,其中R124H 突变10例,包括纯合子2例,杂合子8例;R124L 突变2例,均为杂合子;R555W 突变3例,均为杂合子;正常对照者均未检出BIGH3基因突变。

结论15例角膜营养不良患者的角膜病变均由BIGH3基因突变引起,与国外文献报道相同。

突变基因对角膜病变严重程度的影响具有剂量效应,纯合子病情严重。

R124L 突变患者的临床表现重于R124H 突变患者。

【关键词】　角膜营养不良,遗传性;　突变;　肿瘤蛋白质类;　杂合子;　纯合子;　系谱Analysis of mutation of BIGH3gene in C hinese patients with co rneal dystrophies Y U J ie ＊,ZOULiu -he ,HE Jiu -cheng ,LIU Ning -pu ,Z HANG Wei ,L Lan ,SUN X u -guang ,DONG Dong -sheng ,WU Y u -y ing ,Y IN X iao -tang .＊Tongren Ophthalmic Center ,Capital University of Medical Science ,Beijing 100730,China Corresponding autho r :Y U Jie ,Email :shixiaojun01@sina .com 【Abstract 】　Objective To study w hether Chinese patients with various corneal dystro phy carry mutations in BIGH3gene .Methods Genomic DNA w as extracted from Chinese patients with Avellino corneal dystrophy (ACD ,10cases ),Reis -B ǜcklers corneal dystrophy (CDRB ,2cases ),granular corneal dystro phy (GCD ,3cases )and 5contro l subjects .T he exo ns 4and 12o f BIGH3gene w ere amplified by PCR and the product w as sequenced directly .Results All 15patients carried mutations in BIGH3gene ,R124H in 10cases with A CD ,R124L in 2cases with CDRB and R555W in 3cases with GCD .C onclusions Co rneal lesions in all 15Chinese patients clinically diagnosed with co rneal dystrophies are caused by mutations in BIG H3gene .Dose -effect analy sis show s that corneal lesions are more severe in homozy gous patients than those in heterozygous cases and that clinical manifestation of patients w ith R124L mutation is more sev ere than that of patients w ith R124H mutation .【Key words 】　Co rneal dy strophies ,hereditary ;　M uta tio n ;　Neoplasm proteins ;　He terozy gote ;　Homozy gote ;　Pedigree 角膜营养不良是一种与遗传有关的原发性、具有病理组织学特征的疾病[1],其特征为双眼角膜有异常物质沉积[2],以往对其研究主要停留在临床观察和病理检查水平。

角膜营养不良按解剖部位可分为以下4类：(1)上皮及基底膜营养不良(前部)：Meesmann角膜营养不良(Meesmann corneal dystrophy，MECD)又名遗传性青年性上皮营养不良，是角膜上皮的家族性营养不良，为常显，角蛋白K3或K12基因突变所致。

该病常在出生后头几个月发病，病情进展缓慢，早期无症状，常在长大后，眼部出现视力减退和刺激症状时才来院就诊。

临床表现：双眼角膜上皮内可见无数小的灰白色混浊，偶见于Bowman膜上。

病变常反复发作，发作时有畏光、流泪、异物感等症状，但视力损害较轻。

组织学检查可见角膜上皮不规则增厚，基底膜上有大量空泡细胞。

上皮内有囊泡形成，其内聚集PAS阳性物质。

电镜下发现上皮细胞内有纤维颗粒状特殊物质。

上皮基底膜营养不良(epithelial basement membrane dystrophy，EBMD)常见，又称为地图-点状-指纹状营养不良。

病理组织学检查可见基底膜增厚，并向上皮内延伸；上皮细胞不正常，伴有微小囊肿，通常位于基底膜下，内含细胞和细胞核碎屑。

显性遗传，成人女性多见，人群发病率为2%，本病多为双眼自发性反复发作的患眼疼痛、刺激症状及暂时的视力模糊。

临床表现：自发性反复发作的眼部疼痛，刺激及暂时性视力模糊，裂隙灯下可见角膜上皮层及基底膜出现指纹状细小线条、地图样线和灰白色小点或微小囊肿，可发生上皮反复性剥脱。

(2)Bowman层营养不良(Bowman corneal dystrophy，BCD)(前部)：Reis—Bücklers角膜营养不良(Reis-Bticklerscorneal dystrophy，RBCD)又称I型Bowman层角膜营养不良，常显，为TGFB I基因产物突变所致。

双眼对称性疾病，5岁前即可发病，早期症状为反复发作的角膜上皮糜烂,位于前弹力膜的角膜混浊逐渐扩大、融合, 随年龄的增长引起视力障碍。

Thiel.Behnke角膜营养不良(Thiel.Behnke corneal dystrophy，TBCD)Thiel—Behnke角膜营养不良，又称蜂窝状角膜营养不良、Bowman层角膜营养不良Ⅱ型(cDBⅡ)，眼部表现为位于Bowman层的蜂窝状混浊。

Fuchs角膜内皮营养不良（滴状角膜，角膜滴状变性）【病因】(一)发病原因本病有一定的遗传性，遗传方式尚不十分清楚，有些病例已证实为常染色体显性遗传。

病因不明，可能是多方面的，一些尚未被认识到的因素干扰了角膜内皮细胞的结构与功能，最终导致了内皮泵功能的失代偿。

本病除散发病例外，为常染色体显性遗传病。

2001年，Biswas等对一家系进行基因组分析，发现位于第1号染色体短臂1p34.3-p32内的、Ⅷ型胶原Alpha2(COL8A2)基因发生了Q455K错义突变。

这可能使Ⅷ型胶原对角膜内皮细胞的终末分化作用受到了干扰，扰乱了角膜内皮细胞的结构与功能，使其产生异常的基底膜与纤维胶原产物――滴状赘疣。

滴状赘疣进一步使角膜内皮细胞受到损伤，终于引起角膜泵功能和抗细胞凋亡功能的失代偿，以致丧失有用的视力。

原发性营养不良的角膜内皮细胞可能引起位于后弹力膜后面的胶原沉积。

单纯的滴状角膜组织学表现为疣或赘生物样外貌，其他情况则可表现为局部胶原沉积、额外覆盖的基底膜或均匀增厚的后胶原层。

然而，曾在一例Fuchs内皮营养不良的角膜标本上发现病毒颗粒，提示获得性病因的可能。

(二)发病机制虽然Fuchs内皮营养不良中内皮的根本异常尚不清楚，但临床所见的发病机制有以下几方面。

1. 胶原组织产生增加多在后弹力层后方及上皮下。

正如许多其他角膜疾病，Fuchs营养不良的不正常内皮细胞产生多余的胶原，包括有稀疏胶原的异常，基底膜及多层较疏松的原纤维胶原。

上皮下结缔组织来自从角膜缘或基质迁徙来的成纤维细胞，但其中一部分亦可能来自上皮。

2.内皮屏障作用及泵功能降低在内皮退行性变而遭破坏的同时可以出现。

细胞顶端间隙的连接破坏，使房水穿过内皮屏障进入基质及上皮。

由于病变内皮不能将这些液体泵出，而上皮屏障又阻止其从角膜前面排出，致使角膜发生水肿。

病变晚期，由于上皮下瘢痕形成阻止液体进入上皮，基质瘢痕形成使角膜不再增厚，后部胶原组织使角膜后部韧性增加而较难肿胀，故角膜结构较前紧密，患者也感觉较为舒适。

·19JOURNAL OF RARE AND UNCOMMON DISEASES, MAR. 2022,Vol.29, No.3, Total No.152【第一作者】李瑾，女，硕士研究生，主要研究方向：眼底病及遗传性眼部疾病。

E-mail：****************【通讯作者】闫晓河，男，副主任医师、副教授，主要研究方向：眼底病、遗传性眼病、眼科罕见病。

E-mail：*************.cn·论著· 颗粒状角膜营养不良(granular corneal dystriphy，GCD)是常染色显性角膜营养不良疾病，其临床表型及遗传学特征具有高度特异性。

近年来，随着分子生物学的发展，基因鉴定技术得到更广泛的推广，对遗传性疾病的诊断提供了确切可靠的依据。

本研究旨在对两例GCD患者的突变基因进行筛查鉴定，这对于患者诊断和分型具有重要意义。

1 资料与方法1.1 一般资料 在暨南大学附属深圳眼科医院收集两例颗粒状角膜营养不良患者，两名患者均为中青年女性，临床表现为反复出现的角膜刺激症状伴视力下降。

本研究经过暨南大学深圳附属眼科医院伦理委员会批准，患者签署基因检测知情同意书。

1.2 方法 抽取两名患者的外周血各2mL，试管内用乙二胺四已酸抗凝。

从受检者外周血样本中提取基因组DNA，采用韦翰斯生物定制的探针，基于探针杂交捕获的方法，捕获并富集目标基因的外显子及毗邻剪接区域(约20bp)。

构建好的文库经质检后，通过高通量测序仪(Illumina HiSeq X)进行双端测序测序。

下机的原始数据经质控后获得Clean data，使用BWA软件通过与参考基因组比对分析，经过GATK软件call出其中的SNV和InDel变异，再用Clinvar、HGMD等专业数据库和预测软件进行注释分析，筛选与受检者表型一致的变异位点。

1.3 眼科学检查 对受检者进行眼科检查，包括视力、眼压，眼前节裂隙灯及前置镜检查眼底；辅助检查包括眼前段照相。