高中生物课件《将目的基因导入受体细胞 和目的基因的检测与鉴定 》
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第2节第2课时将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定【课标要求】阐明基因工程的基本操作程序主要包括目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测与鉴定。
【核心素养】1.科学思维:结合生产实例,举例说出基因工程的基本操作程序。
2.科学探究:针对人类生产和生活的某一需求,尝试提出初步的基因工程构想,完成初步设计。
【新知探究】三、将目的基因导入受体细胞1.转化:目的基因进入受体细胞内,并在受体细胞内________和________的过程。
2.目的基因导入受体细胞的方法(1)目的基因导入植物细胞①花粉管通道法Ⅰ.用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入________中。
Ⅱ.在植物受粉后的一定时间内,剪去柱头,将DNA溶液滴加在花柱切面上,使目的基因借________________进入________。
②农杆菌转化法Ⅰ.农杆菌的特点:农杆菌自然条件下侵染________植物和________植物;农杆菌的Ti质粒上的________能够整合到所侵染细胞的________________上。
Ⅱ.转化方法:将目的基因插入农杆菌________________中,让农杆菌侵染植物细胞。
(2)目的基因导入动物细胞①常用方法:________法。
②常用受体细胞:________。
(3)目的基因导入微生物细胞①方法:用________处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,然后将重组表达载体导入其中。
②常用受体细胞:原核细胞(使用最广泛的是大肠杆菌)。
四、目的基因的检测与鉴定1.分子水平检测(1)通过________等技术检测受体细胞染色体DNA上是否插入了目的基因或检测目的基因是否转录出mRNA。
(2)从转基因生物中提取蛋白质用相应的抗体进行________________杂交,检测目的基因是否翻译成了蛋白质。
2.个体水平鉴定包括抗虫、抗病的接种实验,以确定是否有抗性及抗性程度。
第8课时目的基因的导入、检测与鉴定[学习目标] 1.理解目的基因导入受体细胞的方法。
2.掌握检测与鉴定目的基因的方法。
[核心素养] 1.科学思维:结合生产实际,举例说出基因工程的基本程序。
2.社会责任:针对生产生活中的某一需求,尝试提出基因工程构想,完成初步设计。
一、将目的基因导入受体细胞1.转化的含义目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。
2.转化的方法(1)导入植物细胞①农杆菌转化法:将目的基因导入双子叶植物和裸子植物时最常用的方法。
a.土壤农杆菌的特点:植物体受到损伤时,伤口处的细胞会分泌大量的酚类化合物,吸引农杆菌侵染,其Ti质粒上的T-DNA(可转移的DNA)可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞的染色体的DNA上。
b.方法步骤:目的基因插入Ti质粒的T-DNA上→转入农杆菌→导入植物细胞→目的基因插入植物细胞中的染色体DNA上→目的基因表达。
②基因枪法:将目的基因导入单子叶植物常用的方法。
表达载体DNA包裹在微小的金粉粒子或钨粉粒子表面→用基因枪高速射入受体细胞或组织中→目的基因表达。
③花粉管通道法:在植物受粉后,花粉形成的花粉管还未愈合前,剪去柱头,滴加DNA(含目的基因),使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞。
(2)导入动物细胞①方法:显微注射技术。
②常用受体细胞:受精卵。
③步骤:目的基因表达载体提纯→取卵(受精卵)→显微注射→胚胎早期培养→移植到雌性动物的输卵管或子宫内→获得具有新性状的转基因动物。
(3)导入微生物细胞①原核生物的特点:繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。
②常用的方法a.用Ca2+处理细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(这种细胞称为感受态细胞)。
b.感受态细胞和重组表达载体DNA分子在缓冲液中混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子。
1.将胰岛素基因的表达载体导入大肠杆菌,从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到期待的生物活性,导致这种差异的原因可能是什么?提示大肠杆菌是原核生物,无内质网、高尔基体等细胞器,大肠杆菌中基因表达获得的蛋白质未经加工。