滇龙胆种子质量分级标准研究

栽培滇龙胆的化学成分研究朱卫萍;赵磊;张国华;饶高雄【期刊名称】《云南中医学院学报》【年(卷),期】2010(033)005【摘要】目的:研究栽培滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)的化学成分,比较栽培品和野生品化学成分的异同,评价栽培滇龙胆药材品质.方法:用色谱法分离化学成分,根据波谱分析鉴定化学结构;用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)进行化学成分的比较分析.结果:从栽培滇龙胆药材中分离鉴定了19个成分;栽培品的TLC及HPLC谱图和野生品一致,龙胆苦苷的含量分别为4.31%(栽培品)和4.71%(野生品).结论:首次研究了栽培滇龙胆的化学成分,并明确其所含化学成分类型、主要有效成分和野生滇龙胆一致;滇龙胆栽培品和野生品中龙胆苦苷含量相当且均高于法定标准;滇龙胆人工栽培是成功的,应大力发展规模种植.【总页数】6页(P8-12,16)【作者】朱卫萍;赵磊;张国华;饶高雄【作者单位】云南中医学院中药学院,云南昆明,650500;云南中医学院中药学院,云南昆明,650500;云南中医学院中药学院,云南昆明,650500;云南中医学院中药学院,云南昆明,650500;云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明,650231【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.不同栽培模式对滇龙胆中龙胆苦苷含量的影响 [J], 杨美权;张金渝;沈涛;袁天军;杨维泽;杨天梅;张智慧;金航2.傅里叶红外光谱对野生及栽培滇龙胆不同部位的研究 [J], 申云霞;赵艳丽;张霁;左智天;王元忠;张庆芝3.滇龙胆地上部分的化学成分研究 [J], 赵磊;李智敏;白艳婷;金航;饶高雄4.滇龙胆栽培技术研究进展 [J], 卢杰;胡勇5.滇龙胆化学成分和药理作用的研究进展 [J], 张延智; 刘佳乐; 杜一民; 陈旭冰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

龙胆药材和饮片的质量标准研究目的确定龙胆药材和饮片的质量标准。

方法先进行常规检查再对药材浸出物进行测定，然后采用薄层色谱法和高效液相色谱法进行分析研究。

结果对30多批龙胆药材和饮片中所含的水分和总灰分以及酸不溶性灰分做分析检查并且对他们的浸出物做测定，然后再对龙胆苦苷中的TLC做定性鉴别，对HPL做定量分析研究，把龙胆药材和饮片中的龙胆苦苷限制含量分别列出。

结论所确定的药物质量标准方法可靠性高、重现性好而且方法操作比较简便，对标准制定的限量较为合理，可以用于控制龙胆药材和饮片质量标准。

标签：质量标准；龙胆药材；饮片在我国历代药物书籍之中对龙胆的药材都有所记载，它对肝火旺盛有较好的功效[1]。

龙胆药材主要产地集中在我国东北地区，在黑龙江和吉林当地人也称它为关龙胆和北龙胆。

我国的云南和四川也产龙胆药材俗称南龙胆[2]。

2005年我国出版中国药典，因为对龙胆中苦苷含量的测定需要设计精神类药品所以在一些基层单位检测起来很不方便[3]。

本次论文是为了确定对龙胆药材和饮片中苦苷含量测定的新方法，对薄层鉴别作了一些修改，为龙胆药材和饮片的质量提供了一定的科学依据。

1 检测仪器和实验药物本次实验用到很多先进的医学药物检测仪器，如下：薄层色谱自动点样仪和薄层色谱摄像仪，高效液相色谱仪，电子天平和硅胶预制板，超声波清洗器，马弗炉和烘箱。

本次实验所用药物均由上海中药标准化研究中心提供，试验中用到的水选用康师傅纯净水，测定甲醇为色谱纯，其余试剂全部为分析纯。

实验中一共用到龙胆药物和饮片为10批，这些药物的采集和鉴定均由副研究员负责，药物的来源和测定结果见文中的表1.2 测定方法与测定结果2.1 薄层的鉴别选取文中2.4.3小节中适量的没有进行稀释的样本溶液过滤，把它作为试品溶液，再选取龙胆苦苷加入适量甲醇制成每1ml含1mg的溶液作为对照品溶液。

吸取5ul已经制好的试品溶液和1ul已经制好的对照品溶液，将两种药物溶液分别滴在同一个硅胶薄层板上再滴入展开试剂，然后取出晾干，放在紫外光灯下观察，得出以下结论：药物试品溶液和对照品溶液在色谱相应的位置出现的斑点颜色相同，我们将药材的TLC图列出来如下图1，而我们对饮片做的测试鉴别图与图1相似。

不同初加工方法对滇龙胆药材品质的影响杨雁,金鹏程,李林玉,杨斌,王馨,金航∗㊀(云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650200)摘要㊀采集临沧云县产新鲜滇龙胆,采用9种不同初加工方法,以滇龙胆的根及根茎为研究对象,测定干燥后滇龙胆样品中龙胆苦苷㊁马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷和当药苷含量,以及总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物等指标,依据‘中华人民共和国药典“标准,对药材品质进行综合评价㊂结果表明,不同加工方法滇龙胆有效成分含量有一定差异,其中水洗烘干(SXHG )处理样品龙胆苦苷和马钱苷酸的含量显著高于其他处理,同时,所需干燥时间最短,仅为12h ,远低于其他处理;水洗烘干(SXHG )处理样品的总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物均达到‘中华人民共和国药典“标准;主成分分析可知,水洗烘干(SXHG )滇龙胆样品综合质量最好,免洗阴干(MXYG )综合质量次之,但该方法加工的样品总灰分和浸出物未达到‘中华人民共和国药典“标准,水洗阴干(SXYG )在传统生产中农户广泛使用,可根据天气㊁场地等实际情况在产地加工中作为辅助干燥方法㊂综合考虑,滇龙胆药材产地加工方法以水洗烘干为宜;若药材加工量较大,可根据天气㊁场地等实际情况采用水洗阴干方法进行加工㊂关键词㊀滇龙胆;初加工方法;有效成分;聚类分析;主成分分析中图分类号㊀R 281.4㊀㊀文献标识码㊀A㊀㊀文章编号㊀0517-6611(2023)17-0139-05doi :10.3969/j.issn.0517-6611.2023.17.031㊀㊀㊀㊀㊀开放科学(资源服务)标识码(OSID):Effect of Different Primary Processing Methods on the Quality of Gentiana rigescensYANG Yan ,JIN Peng-cheng ,LI Lin-yu et al㊀(Medicine Plants Research Institute,Yunnan Academy of Agricultural Sciences,Kunming,Yunnan 650200)Abstract ㊀Fresh Gentiana rigescens was collected from Yunxian Lincang.Taking the roots and stems of Gentiana rigescens as the research ob-jects,the contents of gentiopicroside,loganic acid,swertimarin and sweroside,as well as total ash,acid-insoluble ash and extract in dried Gentiana rigescens samples were determined by using 9different primary processing methods.According to the standard of Pharmacopoeia of the People s Republic of China ,the quality of medicinal materials was comprehensively evaluated.The result showed that the contents of active ingredient in Gentiana rigescens with different processing methods were different,among which the content of gentiopicroside and loganic acid in the sample treated with water washing and drying (SXHG)was significantly higher than any other treatments.At the same time,the drying time required was the shortest,only 12hours,far lower than any other treatments.The total ash,acid insoluble ash and extracts of the sample treated by water washing and drying (SXHG)met the standards of the Pharmacopoeia of the People s Republic of China .According to the principal component analysis,the comprehensive quality of water washing and drying (SXHG)of Gentiana rigescens sample was the best,fol-lowed by washing free dried in the shade (MXYG).However,the total ash and extracts of the samples processed by this method did not meet the standards of the Pharmacopoeia of the People s Republic of China .Water washed and dried in the shade (SXYG)was widely used by farm-ers in traditional production,and could be used as an auxiliary drying method in the production area processing according to the weather,site and other actual conditions.Overall consideration,the processing method of Gentiana rigescens in the producing area should be water washing and drying (SXHG).If the processing amount of medicinal materials was large,the method of water washed and dried in the shade (SXYG)could be used according to the weather,site and other actual conditions.Key words ㊀Gentiana rigescens Franch.;Primary processing method;Active ingredients;Cluster analysis;Principal component analysis基金项目㊀云南省生物医药重大专项(202102AA310045);云南省发展和改革委员会云岭产业技术领军人才(金航)培养专项;国家重点研发计划中医药现代化研究专项(2017YF1701406)㊂作者简介㊀杨雁(1985 ),女,云南曲靖人,副研究员,硕士,从事中药材生态种植研究㊂∗通信作者,研究员,从事中药资源评价研究㊂收稿日期㊀2023-03-28;修回日期㊀2023-04-28㊀㊀滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)为龙胆科(Genti-anaceae)龙胆属(Gentiana )多年生草本植物,以根和根茎入药,性苦寒,归肝胆经,具有清热燥湿㊁泻肝胆火的功效[1],是我国常用大宗药材,具有悠久的药用历史,为历版‘中华人民共和国药典“(以下简称‘药典“)收载的龙胆基原植物之一,是我国传统中药复方龙胆泻肝丸㊁龙胆泻肝片等180多种中成药的主要原料[2]㊂赵志莲等[3-4]研究表明,龙胆属药用植物的主要活性成分是环烯醚萜类,其中龙胆苦苷㊁马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷和当药苷是其主要药效成分,是滇龙胆质量评价的重要指标[5-8]㊂产地初加工方法是影响中药材品质形成的关键因素,决定了中药材㊁中药饮片及制剂的质量[9],是影响中药临床应用安全性和有效性的一项源头性工序[10]㊂药用植物在采收后会发生细胞缩水㊁破裂㊁变性㊁酶解㊁后熟㊁干燥等变化,根据药材性质和商品销售㊁运输和保管的要求,对中药材进行去除非药用部位㊁清洗㊁干燥等产地初加工,防止其霉变虫蛀,便于运输储存,保障中药材质量[9]㊂因此科学合理的产地初加工方法至关重要㊂不同的产地初加工方法直接影响药材的质量,罗寅珠等[11]研究发现半夏药材晒干处理后外观性状较好㊁密度高,质坚实,药效成分含量整体较高;刘勇等[12]研究发现阴干法处理后的三七药材质地坚实,内部结构紧密,外观性状较好,并且药效成分含量较高㊂传统本草记载滇龙胆药材产地加工方法多为采后阴干[13-15],但当前滇龙胆人工种植面积较大,阴干场地和天气原因极大地限制了滇龙胆产地加工规模化发展㊂近年来,已有学者开展了滇龙胆产地加工研究,吴昕怡等[16]采用热烫的方法对滇龙胆进行加工处理,发现热烫处理后滇龙胆中3种有效成分的OD 值呈先升高后降低的趋势;刘秀嶶等[17]研究了不同光质对滇龙胆药材干燥品质的影响,结果显示绿光能降低滇龙胆水分含量,并且显著提高其龙胆苦苷㊁獐牙菜苦苷和马钱苷酸的含量;沈涛等[18-21]对滇龙胆适生区范围和生物气候特征进行研究,以期为野生滇龙胆资源保护㊁持续利用与产地鉴别提供依据㊂但此类研安徽农业科学,J.Anhui Agric.Sci.2023,51(17):139-143㊀㊀㊀究多是围绕滇龙胆资源分布㊁化学成分㊁药理作用㊁产地鉴别等方面开展,有关滇龙胆产地初加工方法的研究不多,很多加工方法并未结合生产实际,推广应用性不强,且在加工后药材整体质量评价方面研究较少㊂为探索不同加工方法对滇龙胆药材质量的影响,该研究采用9种不同的产地初加工方法,以滇龙胆的根及根茎为研究对象,测定干燥后滇龙胆样品中龙胆苦苷㊁马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷和当药苷含量,以及总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物等指标,依据‘药典“,对样品进行综合评价,以期为滇龙胆产地初加工规范化研究提供理论依据㊂1㊀材料与方法1.1㊀试验材料1.1.1㊀试材㊂试验用新鲜滇龙胆药材样品,于2021年12月采自临沧市云县茂兰镇,经云南省农业科学院药用植物研究所金航研究员鉴定为龙胆科(Gentianaceae)龙胆属(Genti-ana)植物滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)㊂1.1.2㊀仪器㊂ThermoFisher高效液相色谱仪UltiMate3000系列(LPG-3400SD泵,WPS-3000SL全自动进样器,DAD-3000紫外可见检测器,190~900nm);万分之一电子分析天平(赛多利斯电子天平);TB-5200DT型超声波清洗仪(天津市泰斯特联创生物技术公司);101-3AB型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特联创生物技术公司)㊂1.1.3㊀试剂㊂龙胆苦苷㊁马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷和当药苷对照品均购自上海诗丹德标准技术服务公司,批号分别为9306㊁9415㊁3456㊁7001㊂甲醇㊁乙腈(美国Fisher试剂公司);醋酸㊁磷酸(罗恩试剂公司,色谱纯);水(自制超纯水)㊂1.2㊀试验方法1.2.1㊀不同初加工方法㊂采用9种不同初加工方法对样品进行处理,具体方法见表1㊂1.2.2㊀总灰分的测定㊂参照‘药典“(2020版)[1]龙胆灰分测定法,测定用样品混合均匀后粉碎过100目筛,取3~5g 置炽灼至恒重的坩埚中,称定重量(准确至0.01g),逐渐升高温度至500~600ħ,待样品完全灰化并至恒重,称重,根据残渣重量,计算样品中总灰分的含量(%)㊂1.2.3㊀酸不溶性灰分的测定㊂取 1.2.2 项所得的灰分,加入稀盐酸10mL至坩埚中,坩埚用表面皿覆盖,放置在水浴上加热10min,用5mL热水冲洗表面皿,洗液并入坩埚中,然后用无灰滤纸过滤,坩埚内的残渣用水洗于滤纸上,并洗涤至洗液不显氯化物反应为止㊂滤渣和滤纸移置同一坩埚中,干燥,炽灼至恒重㊂根据残渣重量,计算样品中酸不溶性灰分的含量(%)㊂1.2.4㊀浸出物的测定㊂参照‘药典“(2020版)[1]龙胆浸出物测定法(通则2201),取样品2~4g,精密称定,置于250mL 的锥形瓶中,精密加水100mL,密塞,称定重量,静置1h后,连接回流冷凝管,加热至沸腾,并保持微沸1h㊂放冷后,取下锥形瓶,密塞,再称定重量,用水补足减少的重量,摇匀后用干燥过滤器过滤,精密量取滤液25mL,置于已干燥至恒重的蒸发皿中,在水浴上蒸干后,于105ħ干燥3h,再置于干燥器中冷却30min,迅速精密称定重量㊂以干燥品计算样品中水溶性浸出物的含量(%)㊂1.2.5㊀有效成分含量的测定㊂1.2.5.1㊀色谱条件㊂4个有效成分的色谱柱均为Thermo液相色谱柱(Acclaim TM120A C18;250mmˑ4.6mm,5μm);流速1.000mL/min;进样量10μL;柱温30.0ħ㊂马钱苷酸流动相为乙腈-0.1%醋酸(9ʒ91),检测波长254nm,理论塔板数不低于3000;龙胆苦苷流动相为甲醇-水(25ʒ75),检测波长270nm,理论塔板数不低于3000;獐牙菜苦苷流动相为甲醇-0.05%磷酸(18ʒ82),检测波长237nm,理论塔板数不低于5000;当药苷流动相为甲醇-水(18ʒ82),检测波长247nm,理论塔板数不低于6000㊂1.2.5.2㊀供试品溶液制备㊂龙胆苦苷㊁马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷㊁当药苷的制备分别参照‘药典“(2020版)秦艽㊁龙胆㊁青叶胆㊁当药的含量检测方法制备㊂1.2.5.3㊀对照品溶液制备㊂精密称取对照品龙胆苦苷7mg㊁马钱苷酸8mg㊁獐牙菜苦苷7mg和当药苷10mg,分别用适量甲醇定容至25mL,摇匀,4ħ避光保存,备用㊂1.2.5.4㊀标准曲线绘制㊂精密量取 1.2.5.3 项下的对照品溶液各5mL,定容至10mL容量瓶中,连续等梯度稀释0.5倍6次,得到不同浓度梯度对照品溶液㊂以浓度为横坐标㊁峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算得出回归方程,结果见表2㊂表1㊀9种不同初加工方法(n=4)Table1㊀Nine different primary processing methods序号No.加工方法Process methods处理方法Treatment method1免洗阴干MXYG将100g新鲜供试材料抖去泥土和杂质后,置于室内通风处阴干2水洗阴干SXYG将100g新鲜供试材料用水管冲洗干净泥土杂质(流水冲洗2min),置于室内通风处阴干3微波免洗阴干WMYG将100g新鲜供试材料抖去泥土,置于微波炉(165ħ)烘烤中1min后,置于室内通风处阴干4微波免洗晒干WMSG将100g新鲜供试材料抖去泥土,置于微波炉(165ħ)中烘烤1min后,置于室外晒干5免洗晒干MXSG将100g新鲜供试材料抖去泥土和杂质后,置于室外晒干6水洗晒干SXSG将100g新鲜供试材料用水管冲洗干净泥土杂质(流水冲洗2min),置于室外晒干7水洗烘干SXHG将100g新鲜供试材料用水管冲洗干净泥土杂质(流水冲洗2min),置于烘箱(40ħ)中烘干8微波水洗晒干WSSG将100g新鲜供试材料用水管冲洗干净泥土杂质(流水冲洗2min),置于微波炉(165ħ)中烘烤1min后,置于室外晒干9微波水洗阴干WSYG将100g新鲜供试材料用水管冲洗干净泥土杂质(流水冲洗2min),置于微波炉(165ħ)中烘烤1min后,置于室内阴干041㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀2023年表2㊀龙胆苦苷㊁马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷和当药苷标准曲线Table 2㊀Standard curve of gentiopicroside ,loganic acid ,swertimarin and sweroside化合物Compounds回归方程Regression equation决定系数Determination coefficient(R 2)检测限LODʊμg /mL 龙胆苦苷Gentiopicroside y =146.71x +0.12620.99990.1~0.6马钱苷酸Loganic acidy =146.71x +0.12621.00000.01~0.09獐牙菜苦苷Swertimarin y =136.23x -0.00450.99990.002~0.016当药苷Swerosidey =206.45x -0.01951.00000.005~0.0451.3㊀数据分析㊀采用IBM SPSS Statistics 26软件对4种有效成分含量以及总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物测定结果进行方差分析㊁聚类分析和主成分分析㊂2㊀结果与分析2.1㊀不同干燥温度对滇龙胆有效成分含量的影响㊀该研究设计了7组干燥温度㊁自然阴干㊁自然晒干共9个处理㊂将采收的新鲜滇龙胆按标准进行去杂质㊁去除非药用部位㊁清洗等加工步骤,样品混匀后随机分组,每组试验设置4个重复,9个处理的具体方法见表1,分析结果见表3㊂表3㊀不同干燥温度对滇龙胆有效成分含量的影响(n =4)Table 3㊀Effect of different drying temperatures on the content of effective components in Gentiana rigescens温度Temperatureʊħ干燥时间Drying timeʊh龙胆苦苷Gentiopicrosideʊ%马钱苷酸Loganic acidʊ%獐牙菜苦苷Swertimarinʊ%当药苷Swerosideʊ%4012.09.25a0.29c0.21b0.021c5011.08.02d 0.29c0.17de 0.021c607.09.06b 0.20d 0.17de 0.024b 70 6.57.94d0.51a0.20c0.024b 80 6.08.67c0.33b 0.18d 0.026a905.07.66e0.20d 0.14f0.018f1002.07.57e0.18e0.17de 0.020d 阴干Dry in the shade39.06.00f0.17f0.17de 0.017g 晒干Washed dry 25.0 5.65g 0.09g 0.23a0.019e㊀注:同列不同小写字母表示差异显著(P <0.05)㊂㊀Note:Different lowercase letters in the same column indicate significant difference(P <0.05).㊀㊀从表3可以看出,不同干燥温度条件下,40ħ干燥温度条件下龙胆苦苷含量最高,平均值达9.25%,是‘药典“(2020版)规定(龙胆苦苷含量不得少于1.5%)的6.17倍,同时,测定的马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷和当药苷含量也较高;晒干的样品龙胆苦苷含量最低,仅为5.65%,比40ħ烘干样品龙胆苦苷含量低3.60百分点,但晒干样品的龙胆苦苷含量也达到了‘药典“(2020版)规定的最低标准㊂因此,40ħ为滇龙胆烘干的最佳温度,在设计不同加工方法中滇龙胆的干燥温度选择40ħ㊂2.2㊀不同加工方法对滇龙胆总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物的影响㊀滇龙胆加工过程中,总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物是‘药典“(2020版)中评价药材质量的一个重要指标㊂从表4可以看出,所有免洗处理(MXYG㊁WMYG㊁WMSG㊁MX-SG)样品的总灰分均显著高于水洗样品,其中,免洗阴干(MXYG)处理样品的总灰分最高,为9.08%,是‘药典“(2020版)规定(总灰分不得过7.0%)的1.30倍;酸不溶性灰分也是免洗处理样品高于水洗样品,按照‘药典“规定酸不溶性灰分不得过3.0%,免洗阴干(MXYG)处理样品的酸不溶性灰分最高,为5.52%,是‘药典“(2020版)规定的1.84倍;免洗阴干(MXYG)和微波免洗阴干(WMYG)处理样品的浸出物显著低于其他处理,按照‘药典“(2020版)规定的水溶性浸出物不得少于36.0%,免洗阴干(32.40%)和微波免洗阴干(28.17%)处理后的样品达不到‘药典“(2020版)标准㊂水洗烘干(SXHG)处理样品的总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物均达到了‘药典“(2020版)标准㊂表4㊀不同初加工方法对总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物的影响(n =4)Table 4㊀Effect of different processing methods on total ash ,acid insol-uble ash and extracts单位:%加工方法Processing method 总灰分Total ash酸不溶性灰分Acid insolubleash浸出物ExtractMXYG 9.08a5.52a32.40dSXYG 2.56d 0.68f38.19c WMYG 5.29c2.32c28.17eWMSG 4.80c1.57d 37.33cMXSG 6.26b 2.91b 39.42bc SXSG 2.98d 0.66f43.79aSXHG 2.46d0.49f38.93bc WSSG3.65d1.32de41.31abWSYG 2.87d 0.87ef 38.51bc ㊀注:同列不同小写字母表示差异显著(P <0.05)㊂㊀Note:Different lowercase letters in the same column indicate significantdifference(P <0.05).2.3㊀不同加工方法对滇龙胆中4种有效成分含量的影响㊀从表5可以看出,不同加工处理方法滇龙胆中4种有效成分含量有一定差异㊂其中,水洗烘干(SXHG)处理滇龙胆的龙胆苦苷含量最高,为9.25%,是‘药典“(2020版)规定(龙胆苦苷含量不得少于1.5%)的6.17倍,免洗微波处理1min 后晒干(WMSG)样品的龙胆苦苷含量最低(4.62%),14151卷17期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀杨雁等㊀不同初加工方法对滇龙胆药材品质的影响是‘药典“(2020版)标准的3.08倍;水洗烘干(SXHG)处理滇龙胆的马钱苷酸含量也显著高于其他处理;同时,水洗烘干处理的干燥时间最短,仅为12h,远低于其他处理㊂表5㊀不同初加工方法对滇龙胆有效成分含量的影响(n =4)Table 5㊀Effect of different processing methods on the content of effective components in Gentiana rigescens加工方法Processing method干燥时间Drying timeʊh龙胆苦苷Gentiopicrosideʊ%马钱苷酸Loganic acidʊ%獐牙菜苦苷Swertimarinʊ%当药苷Swerosideʊ%MXYG 397.96b0.11c0.20b0.01bSXYG437.75c0.17b 0.17cd 0.02aWMYG 32 6.39d 0.04g0.17cd 0.01b WMSG 20 4.62h 0.04g0.14e0.02aMXSG 24 5.65f0.05f0.17cd 0.01b SXSG 26 6.00e 0.09d 0.23a0.02aSXHG 129.25a 0.29a 0.21b 0.02aWSSG225.27g0.04g0.17cd0.01b WSYG 367.96b 0.08e 0.18c0.02a㊀注:同列不同小写字母表示差异显著(P <0.05)㊂㊀Note:Different lowercase letters in the same column indicate significant difference(P <0.05).2.4㊀聚类分析㊀对9种不同加工方法处理的36批(n =4)滇龙胆样品进行聚类分析,结果见图1㊂由图1可知,当临界值在5时,可将加工方法分为4大类,其中,WSYG㊁SXYG㊁MXYG 处理样品划分为第1类,此类样品龙胆苦苷含量相近;SXHG 处理样品单独划分为第2类,此类样品龙胆苦苷含量最高;WMSG 处理样品划分为第3类,此类样品龙胆苦苷含量最低;WMYG㊁WSSG㊁MXSG 和SXSG 处理样品划分为第4类,此类样品龙胆苦苷㊁獐牙菜苦苷㊁马钱苷酸和当药苷含图1㊀不同加工方法滇龙胆样品聚类分析树状图Fig.1㊀Cluster analysis tree of Gentiana rigescens samples withdifferent processing methods量相近㊂当临界值在10时,可将加工方法分为2大类,其中,WSYG㊁SXYG㊁MXYG 和SXHG 处理样品划分为第1类,此类样品龙胆苦苷含量均在7.0%以上,显著高于其他样品,除前处理方法不同外,加工方法以阴干为主;WMSG㊁WSSG㊁SXSG㊁MXSG 和WMYG 处理样品划分为第2类,此类样品龙胆苦苷含量低于6.5%,加工方法以晒干为主㊂2.5㊀主成分分析㊀用SPSS 26.0对9种不同加工方法处理的36批(n =4)滇龙胆样品中龙胆苦苷㊁马钱苷酸㊁獐牙菜苦苷和当药苷含量进行主成分分析㊂由表6可知,以特征值大于1为提取标准,得到2个主成分(PCA 1和PCA 2)㊂PCA 1的特征值为1.779,其贡献率最大,方差贡献率为44.464%,由成分的载荷矩阵(表7)可知,龙胆苦苷在主成分1上的载荷值最高,对主成分1贡献较大㊂PCA 2的特征值为1.070,其总方差贡献率为26.746%㊂前2个主成分的累计方差贡献率达到71.210%,表达全部信息的71.210%㊂表6㊀主成分的特征根及贡献率Table 6㊀Eigenvalues and contribution rates of principal components主成分Principle component特征值Eigenvalue 方差贡献率Contribution rates of varianceʊ%累计方差贡献率Cumulative contribution rates of varianceʊ%PCA 1 1.77944.46444.464PCA 21.07026.74671.210表7㊀成分载荷矩阵Table 7㊀Component load matrix主成分Principle component龙胆苦苷Gentiopicroside 马钱苷酸Loganic acid獐牙菜苦苷Swertimarin 当药苷Sweroside PCA 10.8190.8940.3010.467PCA 2-0.434-0.1160.8110.460㊀㊀通过SPSS 软件处理后得出主成分得分系数(表8),第一主成分贡献最大,其中第一主成分中系数最大的为龙胆苦苷,说明龙胆苦苷在滇龙胆的质量控制中起着重要作用㊂根据主成分计算公式和主成分得分系数可以算出前2个主成分与4种有效成分的线性组合为:241㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀安徽农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀2023年F1=0.588X1+0.502X2-0.164X3+0.058X4F2=-0.175X1+0.113X2+0.759X3+0.500X4计算主成分综合得分及排序(表9)㊂由综合得分可知,不同加工方法滇龙胆样品中以水洗烘干(SXHG)综合质量最好;免洗阴干(MXYG)综合质量次之,但该方法加工的样品总灰分和浸出物未达到‘药典“标准;水洗阴干(SXYG)在传统生产中农户广泛使用,可根据天气㊁场地等实际情况在产地加工中作为辅助干燥方法㊂表8㊀主成分得分系数Table8㊀Principal component score coefficient主成分Principle component龙胆苦苷Gentiopicroside马钱苷酸Loganic acid獐牙菜苦苷Swertimarin当药苷SwerosidePCA10.5880.502-0.1640.058 PCA2-0.1750.1130.7590.500表9㊀不同加工方法滇龙胆药材的主成分因子及品质综合评价Table9㊀Principal component factors and comprehensive quality evalu-ation of Gentiana rigescens with different processing methods加工方法Processingmethod F1F2F排序SortingMXYG 4.70348-1.22377 3.479712 SXYG 4.61562-1.19801 3.417614 WMYG 3.75010-0.97970 2.770405 WMSG 2.71484-0.68772 2.027129 MXSG 3.32000-0.84907 2.470937 SXSG 3.53662-0.85526 2.681366 SXHG 5.55130-1.41659 4.134711 WSSG 3.09154-0.78370 2.307848 WSYG 4.69228-1.23734 3.4549433㊀讨论中药材经产地加工后不仅便于药材的运输和储藏,而且不同的产地加工方法对药材品质也有极大影响㊂中药材产地初加工方法的选择和形成通常是基于原产地习用方法㊁操作简单㊁技术要求低㊁投入较少等原则[12],因此,该研究比较了9种不同产地初加工方法,通过综合评价,结果表明不同产地初加工方法对滇龙胆药材品质有较大影响㊂传统的免洗阴干和晒干虽然也能较好地保证药材原有性状,干燥成本低,但其耗时较久,所需干燥场地大,受天气等因素影响较大,药材容易发生霉变[22-23],而且未经水洗的药材总灰分㊁酸不溶性灰分较高,水溶性浸出物较低,未能达到‘药典“(2020版)规定标准,因此探索替代传统干燥方法的新技术㊁新方法成为滇龙胆产地加工的重要任务㊂该研究通过选取不同的滇龙胆初加工方法,研究结果发现滇龙胆经水洗后新鲜药材表面的灰尘和杂质都大大减少,药材的外观形态和色泽较未洗过的更佳,并且总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物均能达到‘药典“标准;从有效成分含量测定的结果可以看出,40ħ烘干能较好地保留滇龙胆中的苷类成分,结合主成分综合评价得分结果㊁总灰分㊁酸不溶性灰分和浸出物等指标比较,可知水洗后40ħ烘干相对来说接近于传统干燥方法,干燥后的样品外观性状好,操作简单,干燥时间短,并且所得样品有效成分含量也较其他加工方法最高㊂4㊀结论综上所述,滇龙胆新鲜药材经流水冲洗2min,然后放入40ħ烘箱烘干(即水洗烘干)是滇龙胆产地加工的适宜方法,若药材加工量较大,可根据天气㊁场地等实际情况采用水洗阴干方法进行加工㊂参考文献[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典:2020年版一部[S].北京:中国医药科技出版社,2020:96.[2]王彩云,张晓东,沈涛,等.龙胆苦苷生物合成途径研究进展[J].江苏农业科学,2014,42(3):4-10.[3]赵志莲,张琳,刘卫红,等.滇龙胆裂环烯醚萜类活性成分积累规律的研究[J].时珍国医国药,2016,27(9):2073-2075.[4]JIANG R W,WONG K L,CHAN Y M,et al.Isolation of iridoid and sec-oiridoid glycosides and comparative study on Radix gentianae and related adulterants by HPLC analysis[J].Phytochemistry,2005,66(22): 2674-2680.[5]WANI B A,RAMAMOORTHY D,RATHER M A,et al.Induction of apop-tosis in human pancreatic MiaPaCa-2cells through the loss of mitochondri-al membrane potential(ΔΨm)by Gentiana kurroo root extract and LC-ESI-MS analysis of its principal constituents[J].Phytomedicine,2013,20(8): 723-733.[6]OLENNIKOV D N,KASHCHENKO N I,CHIRIKOVA N K,et al.Iridoids and flavonoids of four Siberian gentians:Chemical profile and gastric stim-ulatory effect[J].Molecules,2015,20(10):19172-19188.[7]WEI S H,CHI H D,KODAMA H,et al.Anti-inflammatory effect of three iridoids in human neutrophils[J].Nat Prod Res,2013,27(10):911-915.[8]HUANG X J,LI J,MEI Z Y,et al.Gentiopicroside and sweroside from Ve-ratrilla baillonii Franch.induce phosphorylation of Akt and suppress Pck1 expression in hepatoma cells[J].Biochem Cell Biol,2016,94(3): 270-278.[9]吴潍.产地初加工方法对中药材质量的影响[J].中医药管理杂志, 2020,28(1):90-94.[10]李宁宁,李丝雨,刘国秀,等.基于道地属性的中药材产地初加工规范标准构建探讨[J].中国现代中药,2022,24(4):559-563.[11]罗寅珠,刘勇,黄必胜,等.不同干燥方法对半夏药材干燥特性㊁外观性状与内在成分的影响[J].中草药,2021,52(19):5845-5853. [12]刘勇,徐娜,陈骏飞,等.不同干燥方法对三七药材外观性状与内在结构及其品质的影响[J].中草药,2019,50(23):5714-5723.[13]陈嘉谟撰,周超凡,陈湘萍,王淑民点校.本草蒙筌[M].北京:人民卫生出版社,1988:115-116.[14]唐慎微.重修政和经史证类备急本草:卷六[M].影印本.北京:人民卫生出版社,1957.[15]李时珍.草本纲目:卷十三[M].校点本.北京:人民卫生出版社,1977: 785.[16]吴昕怡,刘秀嶶,屈云慧,等.Box-Behnken设计-响应面法优化滇龙胆药材产地初加工工艺[J].中国药房,2020,31(15):1830-1835. [17]刘秀嶶,吴昕怡,屈云慧,等.不同光质对滇龙胆药材干燥品质的影响[J].云南民族大学学报(自然科学版),2021,30(5):505-508. [18]沈涛,虞泓,王元忠.滇龙胆草野生资源的地理分布与生物气候特征[J].应用生态学报,2019,30(7):2291-2300.[19]沈涛,张霁,赵艳丽,等.野生和栽培滇龙胆主要活性组分含量特征及质量评价[J].药物分析杂志,2015,35(6):979-985.[20]杨雁,金航,王家金,等.大理苍山不同海拔梯度和土壤对野生滇龙胆生长及其成分的影响[J].西南农业学报,2014,27(4):1601-1606. [21]杨雁,石瑶,田浩,等.不同林药复合种植模式滇龙胆有效成分含量研究[J].西南农业学报,2019,32(6):1273-1277.[22]赵飞.新形势下的中药材行业发展探析[J].南京中医药大学学报(社会科学版),2016,17(2):122-126.[23]刘书斌.甘肃地产党参商品等级划分合理性分析及相关性的研究[D].兰州:甘肃中医药大学,2016.34151卷17期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀杨雁等㊀不同初加工方法对滇龙胆药材品质的影响。

云南不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的含量测定作者：来国防，程宾，罗士德，王易芬【摘要】目的建立HPLC法测定云南不同产地滇龙胆中龙胆苦苷的方法。

方法色谱柱为Waters Sunfire RP18(250 mm×4.6 mm，5 μm)柱，流动相为甲醇-水溶液(20∶80)，柱温35℃，体积流量1.0 ml/min，检测波长270 nm。

结果龙胆苦苷在0.077 4 ～ 1.160 4 mg(r = 0.999 8)线性关系良好，平均回收率为98.8%(RSD = 1.86%，n = 9)，检测10批样品其龙胆苦苷的含量在2.75% ～4.87%之间。

结论该方法简便快速、准确，可为评价滇龙胆药材质量提供依据。

【关键词】高效液相色谱法; 滇龙胆; 龙胆苦苷Abstract：ObjectiveTo establish the method of the gentiopicroside in the plantof Gentiana rigescens from different regions in Yunnan province by HPLC. Me thodsThe Watres Sunfire C18(4.6mm×250mm, 5μm)was used, with mixture liquid of methanol and water(20:80)as mobile phase. The detection wavelength was 270 nm, the column temperature was 35℃, and the flow rate was 1.0ml/min. ResultsGentiopicroside showed a good linear relationship within the range of 0.0774 ～ 1.1604 mg(r =0.9998), the recovery rate was 98.8%, and RSD was 1.86% (n = 9). The gentiopicroside content of Gentiana rigescens in 10 different regions was within the range of 2.75%～4.87%. ConclusionThe method is simple and accurate，and can be used to identify and evaluate the quality of Gentiana rigescens. Key words：HPLC; Gentiana rigescen; Gentiopicroside 龙胆为常用中药，《中国药典》收载龙胆Gentiana scabra Bge.，条叶龙胆G. manshurica Kitag.，三花龙胆G. triflora Pal1.或坚龙胆G. rigescens Franch.的干燥根及根茎，前3种习称“龙胆”，后一种习称“坚龙胆”。

98 I FOOD INDUSTRY I理论THEORY影响龙胆质量的主要问题及其质量标准的思考和建议文 董其祥陇南市食品药品检验检测中心部位超标，这主要靠在药材加工和饮片生产过程中严格执行加工炮制规范来提高饮片质量。

2. 显微鉴别2.1 检验结果合格的龙胆根横切面表皮细胞有时残存，皮层窄；外皮层细胞类方形，木栓化；皮层狭窄；内皮层细胞切向延长，每一细胞由纵向壁分隔成2-10余个小细胞。

韧皮部宽广，有裂隙。

形成层不甚明显。

木质部导管3-10个群束。

髓部明显, 约占根部的1/3。

薄壁细胞含细小草酸钙结晶。

合格的坚龙胆根横切面最外为内皮层，内皮层细胞切向延长，每一细胞由纵向壁分隔成数个类方形小细胞。

韧皮部宽广，筛管群稀疏散在。

形成层环不甚明显。

木质部导管发达，均匀密布于根的中央。

无髓部。

薄壁细胞中无草酸钙结晶。

龙胆根横切面简图龙胆，为中医临床常用中药，功能清热燥湿，泻肝胆火。

药典规定，条叶龙胆、龙胆、三花龙胆的干燥根和根茎习称“龙胆”，坚龙胆的干燥根和根茎习称“坚龙胆”。

二者在性状鉴别和显微特征方面区别明显；尤其在含量测定方面，标准规定，龙胆饮片含龙胆苦苷不得少于2.0%；坚龙胆饮片不得少于1.0%。

也就是说，规定的龙胆含量比坚龙胆含量要高出一倍。

在实际检验中，如果饮片含量在1.0-2.0%之间就对龙胆的质量优劣判断及结论裁决带来困难，更为以龙胆作为原料的中成药带来质量隐患。

笔者系统总结了龙胆质量标准的问题，并对标准中的不足之处进行思考和探索性研究，以期客观地对龙胆检验结果的判断提供依据，主要涉及性状鉴别、显微鉴别、水分、总灰分检查及含量测定。

1. 性状1.1 检验结果合格的龙胆饮片为不规则形的段。

根茎呈不规则块片，表面暗灰棕色或深棕色。

根圆柱形，表面淡黄色至黄棕色，有的有横皱纹，具纵皱纹。

切面皮部黄白色至棕黄色，木部色较浅。

气微，味甚苦。

合格的坚龙胆为不规则形的段。

根表面无横皱纹，膜质外皮已脱落，表面黄棕色至深棕色。

植物科学学报　2023，41（4）：479～489Plant Science Journal DOI：10.11913/PSJ. 2095-0837. 22227沈涛，王元忠. 滇龙胆优质种源的性状特征与综合评价[J]. 植物科学学报，2023，41（4）：479−489Shen T，Wang YZ. Phenotypic characteristics and comprehensive evaluation of high-quality germplasm resources of Gentiana rigescens Franch. ex Hemsl.[J]. Plant Science Journal，2023，41（4）：479−489滇龙胆优质种源的性状特征与综合评价沈涛1，王元忠2 *（1. 玉溪师范学院化学生物与环境学院，云南玉溪 653100； 2. 云南省农业科学院药用植物研究所，昆明 650200）摘　要：为探讨野生滇龙胆（Gentiana rigescens Franch. ex Hemsl.）优质高产植株性状特征，以采自不同地区的877株滇龙胆为研究材料，利用主成分分析（PCA）、层次聚类（HCA）、隶属函数等方法对有效成分产量性状进行评价。

结果显示，17个性状中，根部龙胆苦苷产量多样性指数最高，叶部马钱苷酸和当药苷产量的多样性指数较低；结合隶属函数对所有样品进行评分，发现优质高产种源共214株，占总样品数的24.40%，分布于云南、四川和贵州；变量投影重要性准则（VIP）分析表明，云南与四川的优质种源主要性状特征较为接近，均为当药苷、马钱苷酸及6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷高产；贵州优质种源则为獐牙菜苦苷高产。

基于3种机器学习算法建立不同等级种源的鉴别模型，结果发现随机森林（RF）算法建立的判别模型的预测精度和稳定性较高，能对不同等级种源进行有效划分。

关键词：滇龙胆；高产优质；隶属函数；机器学习；资源评价中图分类号：Q949.95 文献标识码：A 文章编号：2095-0837（2023）04-0479-11Phenotypic characteristics and comprehensive evaluation of high-quality germplasm resources of Gentiana rigescens Franch. ex Hemsl.Shen Tao1 ，Wang Yuan-Zhong2 *（1. College of Chemistry, Biology, and Environment, Yuxi Normal University, Yuxi, Yunnan 653100, China； 2. Institute of Medicinal Plants,Yunnan Academy of Agricultural Sciences, Kunming 650200, China）Abstract：We explored the phenotypic characteristics and established a classification strategy of high-quality germplasm resources of wild Gentiana rigescens Franch. ex Hemsl. In total, 887 samples of G. rigescens col-lected from different regions were used as research materials. Principal component analysis (PCA), hierarchi-cal clustering analysis (HCA), and membership function analysis were used to analyze and evaluate 17 active ingredient yield traits of the roots, stems, and leaves. Results showed that gentiopicroside yield in the roots had the highest Shannon-Wiener index value (I = 1.64), while loganic acid and sweroside acid yields in the leaves had the lowest I values (I = 0.73). Based on D value scoring and membership function analysis, we identified 214 high-quality and high-yield seed sources, accounting for 24.40% of the total sample size, dis-tributed in Yunnan, Sichuan, and Guizhou. Variable importance in projection (VIP) analysis showed similar phenotypic characteristics among the high-quality germplasms in Yunnan and Sichuan, which were characte-rized by high sweroside, loganic acid, and 6'-O-β-D-glucopyranosylgentiopicroside yield. The high-quality germplasms in Guizhou were characterized by high swertiamarin yield. Among the three different machine收稿日期：2022-08-29，修回日期：2023-06-18。

昆明龙胆的质量标准初步探究目的：为昆明龙胆质量标准的研究提供参考依据。

方法：按照药材质量标准的要求，对昆明龙胆进行较为系统的质量标准研究。

结果：对昆明龙胆的植物来源、药材性状、显微鉴别、理化鉴别及检查进行描述。

结论：初步制定昆明龙胆的质量标准。

标签：昆明龙胆；鉴别；检查Abstract：Objective to provide reference for the establishment of quality criterion of Gentiana Duclouxii.Franch. MethodBy According to the requirement of the quality standard of the medicinal ，has been systematically investigated the quality of Gentiana Duclouxii.Franch. Result To describe Plant origin、Medicinal properties、Microscopic identification、Physical and chemical identification、Physicalchemical identification and inspect of Gentiana Duclouxii.Franch. Conclusion preliminary formulate the quality criterion of Gentiana Duclouxii.Franch.Keywords：Gentiana Duclouxii.Franch；Identify；Inspect龍胆，苦，寒，归肝、胆经。

具有清热燥湿，泻肝胆火的功效。

用于湿热黄疸、阴痒阴肿、带下、湿热瘙痒、肝火目赤、耳鸣耳聋、胁痛口苦、惊风抽搐[1]。

《中华人民共和国药典》（2015年版）收载龙胆品种为：龙胆科植物条叶龙胆Gentiana manshurica. Kitag、龙胆Gentiana scabra. Bge、三花龙胆Gentiana triflora.或坚龙胆gentiana rigescens. Franch.的干燥根及根茎[1]。

中药材滇龙胆资源调查和分析研究王丽;杨雁;方艳;马聪吉;张智慧;朱新焰;王家金;刘大会【期刊名称】《西南农业学报》【年(卷),期】2017(030)002【摘要】采取文献调查、走访调查、样方调查、市场调查等方法,对四川、云南、贵州省区野生滇龙胆资源地理分布、生态环境及云南家种滇龙胆人工栽培现状、市场及开发利用情况等方面进行调查,在此基础上对滇龙胆野生资源蕴藏量进行了估算,并对滇龙胆在药材资源、药材品质、人工种植等方面存在问题进行分析,提出了相应的对策与建议,为促进滇龙胆资源可持续利用提供依据.【总页数】6页(P267-272)【作者】王丽;杨雁;方艳;马聪吉;张智慧;朱新焰;王家金;刘大会【作者单位】云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650205;云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650205;云南省农业科学院园艺作物研究所,云南昆明650205;云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650205;云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650205;云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650205;云南省农业科学院药用植物研究所,云南昆明650205;湖北中医药大学药学院,湖北武汉430065【正文语种】中文【中图分类】S567【相关文献】1.滇龙胆资源家种后灰霉病发生与病原鉴定 [J], 赵振玲;张智慧;张金渝;金航;杨美权;杨维泽2.滇龙胆地上部分资源综合利用的化学研究 [J], 黄福荣3.滇龙胆草资源调查及繁殖特性研究 [J], 唐荣平;苏汉林;王建光;王先宏4.滇龙胆种质资源筛选及离体培养的初步研究 [J], 赵志莲;李海峰;张德全;段宝忠5.滇龙胆开花物候与交配系统研究 [J], 余成华;朱春艳;段绍凤;杨秋雄;韩俊;梁艳丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

滇龙胆的本草考证
杨雁;金航;杨斌;王馨;马维思;金鹏程;李林玉
【期刊名称】《中国民族民间医药》
【年(卷),期】2024(33)1
【摘要】目的:研究历代典籍对滇龙胆的文献记载,对滇龙胆进行本草考证,以期为滇龙胆的开发利用提供参考。

方法:通过查阅历代本草典籍,结合现代研究文献,对滇龙胆的名称、基原、产地变迁、采收加工以及品质评价进行系统的梳理、考证。

结果:经考证,滇龙胆始载于《滇南本草》,别名坚龙胆、龙胆草、苦草等,为龙胆科龙胆属植物,基原植物为滇龙胆,是《中华人民共和国药典》龙胆药材的基原植物之一;主产于云南,临沧是其道地产区;滇龙胆一般于秋冬两季采收;加工多以产地初加工为主,即将滇龙胆清洗后阴干或晒干;历代本草典籍中对其质量评价的记载非常少,以“形如枯骨”“根肥长”“脂润”“味苦”“粘牙”作为质量好坏的评价标准,现代主要以龙胆苦苷含量作为龙胆药材质量评价的主要手段之一,辅助以外观性状等的观测。

结论:考证结果将为今后滇龙胆的开发利用提供参考。

【总页数】8页(P55-61)
【作者】杨雁;金航;杨斌;王馨;马维思;金鹏程;李林玉
【作者单位】云南省农业科学院药用植物研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R281.3
【相关文献】
1.《滇南本草》所载地丁的本草考证
2.对《滇南本草》中“金丝莲”原植物的本草考证
3.龙胆药性及功效的本草考证
4.龙胆的本草考证
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。