固相萃取

093858 张亚辉
实验四固相萃取富集邻苯二甲酸二乙酯
一. 实验目的
1. 了解固相萃取基本原理。

2. 掌握固相萃取基本操作步骤。

二. 实验原理
固相萃取（Solid Phase Extraction 简称ＳＰＥ）是近年发展起来一种样品预处理技术，由液固萃取和液相色谱技术结合发展而来。

固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程。

在固相萃取过程中，固相对分析物的吸附力大于样品母液，当样品通过固相萃取柱时，分析物被吸附在固体表面，其他组分则随样品母液通过柱子，最后用适当的溶剂将分析物脱下来。

目前，这项技术主要用于样品的分离、纯化和浓缩。

与传统的液液萃取法相比较，该技术可以提高分析物的回收率、更有效地将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单，省时，省力。

固相萃取基本操作步骤：
1、柱的预处理：为了获得高的回收率和良好的重现性，固相萃取柱在使用之前必须用适当的溶剂进行预处理，预处理除去填料中可能存在的杂质，另一个目的是使填料溶剂化，提高固相萃取的重现性。

2、样品的添加：预处理后，试样溶液被加至并以一定的流速通过柱子。

在该步骤分析物被保留在吸附剂上。

3、柱的洗涤：在样品通过萃取柱时，不仅分析物被吸附在柱子上，一些杂质也同时被吸附，选择适当的溶剂，将干扰组分洗脱下来，同时保持分析物仍留在柱上。

4、分析物的洗脱：用洗脱剂将分析物洗脱在收集管中，为了提高分析物的浓度或为以后分析调整溶剂杂质，可以把收集到的分析物用氮气吹干，再溶于小体积适当的溶剂中。

三. 仪器与试剂
1.仪器：
Agilent8453UV-VIS分光光度仪
Glass Speed Mate – 12 固相萃取仪
Speed SPE C18/18% 500mg/6mL 2根
量筒：10mL 1个100mL 2个
容量瓶：250ml 6个10mL 2个1L 1个
2.试剂：
（1）邻苯二甲酸二乙酯（DEP）分析纯。

（2）甲醇分析纯。

（3）邻苯二甲酸二乙酯溶液（1g / L）：取0.89mL DEP于1L容量瓶中，加约150mL 甲醇溶液，以蒸馏水定容。

（4）邻苯二甲酸二乙酯溶液（0.002、0.004、0.008、0.016、0.024、0.036g / L）：分别取0.5、1、2、4、6、8mL溶液（3）于250mL容量瓶中，以蒸馏水定容。

四、实验步骤
1、固相萃取：
（1）活化：
取C18小柱2根，分别标记为样品柱、空白柱。

分别量取7mL甲醇过柱。

待液面接近固相时，分别量取10mL蒸馏水过柱。

（2）过柱：
待蒸馏水过完柱，在样品柱中，量取100mL 0.002g / L DEP溶液，分多次过柱。

在空白柱中，量取100mL蒸馏水，分多次过柱。

（3）洗脱：
待溶液全部过完柱后，取下两根C18小柱，分别置于两个10mL容量瓶上，分别量取7mL甲醇过柱。

待甲醇过完柱，取下C18小柱，以甲醇定容，分别得到样品过柱液及空白过柱液。

2、Agilent8453UV-VIS分光光度仪的测定：
（1）标准曲线的测定：
以蒸馏水为参比，测定0.002、0.004、0.008、0.016、0.024、0.032g / L DEP 溶液。

（2）样品的测定：
以空白过柱液为参比，测定样品过柱液。

五、数据的记录与处理
1．绘制标准曲线
浓度吸光度
0.002 0.087077
0.004 0.17081
0.008 0.34093
0.016 0.65745
0.024 0.94639
0.032 1.2476
测得样品的吸光度为0.65929，即y=0.65929代入y=38.577x+0.0221，得x=0.016517，即样品过柱液浓度为0.016517。

2．计算富集倍数
富集倍数n=0.016517/.002=8.2587
六、思考与讨论
（1）你认为如何能进一步提高富集倍数？富集倍数的提高会受到哪些因素的限制？
（2）在原溶液的配制中，用到了一定量的甲醇。

而在标准曲线的测定中，为何仍然采用蒸馏水作为参比？试从全波长谱图中找到线索。

（3）除了使用紫外-可见分光光度法进行检测外，列举你认为可能的检测手段及其特点。

（4）通过文献查阅，简单综述目前固相萃取技术的发展现状及应用领域。