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1. 目的（Objectives）本规程规范了岛津UV-2550型紫外分光光度计校验的方法，确保在法定计量部门校验后的有效期内岛津UV-2450型紫外分光光度计使用的有效性，保证检验结果的准确可靠。
2. 范围（Scope）本规程适用于检验部及各车间中间体化验室的岛津UV-2550型紫外分光光度计的定期校验。
3. 定义（Definition）无4. 职责（Responsibilities）4.1. 质量控制部负责本规程的起草、修订、审核、培训和执行。
4.2. 质量保证部、工程部负责本规程的审核。
4.3. 质量负责人负责对本规程的批准。
5. 引用标准（Reference Standards）5.1. 《中国药典》（2010年版）5.2. 中国药品检验标准操作规范2010年版5.3. JJG 178-2007紫外、可见、近红外分光光度计检定规程6. 材料（Resource）6.1. 质量分数为0.060/1000重铬酸钾的0.001mol/L的高氯酸标准溶液。
6.2. 10%高氯酸溶液。
6.3. 4%高氯酸钬溶液。
6.4. 碘化钠标准溶液：浓度为10.0g/L。
6.5. 亚硝酸钠标准溶液：浓度为50.0g/L。
7. 流程图（Flow Chart）无8. 内容（Contents）8.1. 校验项目及可接受标准8.2. 校验前准备8.2.1. 操作室应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性物质，无强烈的机械振动和电磁干扰，无强光直射，排风良好。
8.2.2. 温度在15℃~35℃；相对湿度为45%~80%（假如室温大于30℃，相对湿度不得大于70%）。
8.2.3. 仪器应有名称、型号、编号、制造厂名、出厂日期、工作电源电压、频率及检定签标识等8.2.4. 检查吸收池，不得有裂纹，透光面应清洁，无划痕和斑点。
8.3. 校验方法8.3.1. 基线平直度8.3.1.1.8.3.1.2. 操作：按8.3.1.1设定方法，基线扫描3次，记录图谱和数据。
UV-2550基本操作步骤
1.先开主机再开电脑.
2.点击UVprobe快捷键打开软件.
3.点击光度或光谱,然后点击连接仪器将进行自检,等所有的
白色方框变成绿色圆点,自检完成. 等仪器预热半小时以后就可以进行操作.
4.首先进行基线校准,点击左下脚基线设置波长范围(一般为
你使用波长左右如380和500设置时为300-600),点击确定仪器将进行自动矫正(大概需要6分钟),矫正完成后点击到波长设置波长(一般为中间波长如上500),然后点击调零.
如果要看矫正结果就单击开始.
5.光度测定时点击光度模式,光度测量是针对浓度和单点的
测量:
1)点击M设置方法,在波长下设置点或范围,输入波长或
范围,点击加入
2)点击校准设置校准点数,在WL1加入设定波长,然后关
闭.(如果是单点就的输入标样浓度)
3)在标准表中输入标样名称(多点时输入标样浓度)点击
其他地方然后读取.校准曲线做好.
4)输入样品名称点击其他地方然后读取.出现你所需要浓
度完成.
6.光谱测定时点击光谱模式,光谱测量是进行光谱扫描做扫
描图象.
1)点击M设置方法,设置扫描范围、扫描速度.选择扫描
方式单个(完成后保存图谱)或自动(设置保存路径).
2)点击仪器参数设置测定方式、狭缝宽度点击确定.
3)点开始进行扫描.
7. 动力学测定时点击动力学模式, 动力学是测点随时间变化的曲线.
1) 点击M设置方法,设置记时方式自动或手动,输入时间.
2) 输入波长并设置X、Y轴坐标范围.
3) 设置活度范围.
4) 点击文件选项设置文件保存路径.点确定开始测量. 8. 关机:先关电脑再关主机.。
紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的方法学考察要点一、本文概述紫外可见分光光度法是一种基于物质对紫外和可见光的吸收特性进行定量分析的方法。
在生物化学和药物分析中，这种方法被广泛应用于测定各类化合物的含量，其中包括黄酮类化合物。
黄酮类化合物，也称为黄酮或黄碱素，是一类具有广泛生物活性的天然产物，它们广泛存在于植物中，并具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，对黄酮类化合物进行准确、快速的定量分析具有重要意义。
本文旨在探讨紫外可见分光光度法在测定总黄酮含量中的应用，并对其方法学进行考察。
我们将详细介绍紫外可见分光光度法的基本原理、实验操作步骤，以及影响测定结果的各种因素。
我们还将讨论该方法的优点和局限性，以及在实际应用中可能遇到的问题和解决方案。
通过对这些内容的全面探讨，我们希望能够为相关领域的研究人员和技术人员提供有益的参考和指导，推动紫外可见分光光度法在黄酮类化合物分析中的应用和发展。
二、紫外可见分光光度法的基本原理紫外可见分光光度法（UV-Vis spectrophotometry）是一种基于物质对紫外和可见光区域内特定波长光的吸收特性进行定量分析的方法。
该方法基于朗伯-比尔定律（Lambert-Beer Law），即溶液对光的吸收与溶液的浓度成正比，与光通过溶液的路径长度也成正比。
在紫外可见分光光度法中，当一束单色光通过被测溶液时，部分光能会被溶液中的吸光物质吸收，导致光强减弱。
吸光度（A）与吸光物质的浓度（c）和光程长度（l）之间的关系可以表示为 A = εlc，其中ε为摩尔吸光系数，它表示单位浓度、单位光程长度下的吸光度。
对于总黄酮含量的测定，黄酮类化合物在紫外可见光区域内有特定的吸收峰，通过测量这些吸收峰处的吸光度，并结合标准品的工作曲线，可以实现对总黄酮含量的定量分析。
紫外可见分光光度法还具有操作简便、灵敏度高、重现性好等优点，因此在黄酮类化合物含量测定中得到了广泛应用。
需要注意的是，紫外可见分光光度法只能测定那些具有吸光特性的物质，且受到溶液的颜色、浊度以及其它共存物质的影响。
紫外-可见分光光度计操作规程岛津-概述说明以及解释1.引言1.1 概述紫外-可见分光光度计是一种常用的实验室仪器，用于测量样品溶液或气体中的光吸收程度。
其原理是根据不同物质在紫外-可见光范围内对特定波长的光的吸收特性进行分析。
该仪器被广泛应用于化学、生物、环境、食品等多个领域的研究和实验中。
本文旨在介绍紫外-可见分光光度计的操作规程，通过阐述其基本原理、操作步骤、常见故障排除方法以及维护保养等方面的内容，帮助用户更好地使用紫外-可见分光光度计，并确保其准确性和稳定性。
首先，我们将会介绍紫外-可见分光光度计的基本原理和工作原理，以帮助读者了解其工作原理和相关概念。
然后，我们将详细描述紫外-可见分光光度计的操作步骤，包括仪器的开启与关闭、样品的准备与操作、光谱扫描的设置与保存等内容。
此外，我们还将介绍一些常见的故障及其排除方法，以帮助用户在使用过程中遇到问题时能够及时解决。
最后，我们将探讨紫外-可见分光光度计的维护与保养，包括仪器的清洁、日常维护以及故障预防等方面，以延长仪器的使用寿命和保持其准确性。
通过本文的阅读，读者能够全面了解紫外-可见分光光度计的操作规程，并能够正确合理地操作该仪器。
同时，本文还对紫外-可见分光光度计的未来发展进行了展望，强调了操作规程的重要性，并提出了进一步完善操作规程的建议。
希望本文能够对使用紫外-可见分光光度计的人员提供有益的指导，并促进该仪器在科学研究和实验中的应用。
文章结构部分的内容如下：1.2 文章结构本文分为引言、正文和结论三个部分。
每个部分包含若干小节，具体内容如下：1) 引言部分：- 1.1 概述：介绍紫外-可见分光光度计的基本概念和应用背景。
- 1.2 文章结构：本小节解释了本文的整体结构和各个部分的内容安排。
- 1.3 目的：明确本文撰写的目的和意义。
- 1.4 总结：本小节在引言部分结束时对整体内容进行简要总结，并为接下来的正文部分铺垫。
2) 正文部分：- 2.1 紫外-可见分光光度计的基本原理和工作原理：介绍紫外-可见分光光度计的基本原理和工作原理，包括光束路径、光源、检测器等相关知识。
紫外可见分光光度计测定⾷品中苯甲酸钠的含量紫外可见分光光度计法测定⾷品中苯甲酸钠的含量⼀、实验⽬的1.进⼀步了解和熟悉紫外-分光光度计的原理和结构，学习UV2550的操作。
2.掌握紫外分光光度法测定苯甲酸钠的吸收光谱图。
3.掌握标准曲线法测定样品中苯甲酸钠的含量。
⼆、实验原理为了防⽌⾷品在储存、运输过程中发⽣腐蚀、变质，常在⾷品中添加少量防腐剂。
防腐剂使⽤的品种和⽤量在⾷品卫⽣标准中都有严格的规定，苯甲酸及其钠盐、钾盐是⾷品卫⽣标准允许使⽤的主要防腐剂之⼀，其使⽤量⼀般在0.1%左右。
苯甲酸具有芳⾹结构，在波长225nm和272nm处有K吸收带和B吸收带。
根据苯甲酸（钠）在225nm处有最⼤吸收，测得其吸光度即可⽤标准曲线法求出样品中苯甲酸的含量。
三、仪器和试剂1.紫外可见分光光度计UV2550（⽇本岛津），1.0cm⽯英⽐⾊⽫，50ml容量瓶。
2.NaOH溶液（0.1mol/L）3.苯甲酸钠标准溶液的配制(1)苯甲酸钠标准贮备液（1.000g/L）：准确称量经过⼲燥的苯甲酸钠1.000g（105℃⼲燥处理2h）于1000mL容量瓶中，⽤适量的蒸馏⽔溶解后定容。
该贮备液可置于冰箱保存⼀段时间。
(2)苯甲酸钠标准溶液（100.0mg/L）：准确移取苯甲酸钠储备液10.00mL于100mL容量瓶中，加⼊蒸馏⽔稀释定容。
(3)系列标准溶液的配制：分别准确移取苯甲酸钠标准溶液1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL和5.00mL于6个50mL容量瓶中，各加⼊0.1mol/LNaOH溶液1.00mL后，⽤蒸馏⽔稀释定容。
得到浓度分别为2.0 mg/L、4.0mg/L、6.0mg/L、8.0mg/L和10.0mg/L的苯甲酸钠系列标准溶液。
4.市售饮料的配制准确移取市售饮料0.5ml于50mL容量瓶中，⽤超声脱⽓5min驱赶⼆氧化碳后，加⼊0.1mol/LNaOH溶液1.00mL，⽤蒸馏⽔稀释定容。
编号：部门：质量控制室版本：1.2起草：审核：替代：1.0Q A审核：批准：执行日期：1 目的建立SHIMADZU UV-2550技术手册，规范SHIMADZU UV-2550的使用、维护行为。
2 范围海正药业成品药质量控制室和研发稳定性对SHIMADZU UV-2550的使用、维护。
3 职责质量控制室、研发稳定性、计量中心4 规程4.1操作规程4.1.1 打开光学台和计算机电源，使氘灯稳定1小时。
4.1.2 进入UV Probe菜单，点击“窗口＞光谱”，打开光度测试模块，再点击光度计键条中的连接按钮，来连接仪器，待仪器自检完成后（标记显绿色），点击确定。
4.1.3 测定样品4.1.3.1 光谱测定模块4.1.3.1.1 建立数据采集方法：点击“编辑＞方法”或点击方法图表M，在弹出的窗口中：“开始框”和“结束框”输入所需的波长范围（波长从大扫描到小），再在“扫描速度”、“采样间隔”及“扫描方式”标签中选定所需的参数，然后点击仪器参数标签，在“测定方式”和“狭缝宽”目录中选择所需的参数。
最后点击确定。
4.1.3.1.2 存储数据采集方法数据采集方法可以储存起来，以后可调出使用。
选择“文件＞另存为”，在文件名输入框中，输入SpecMeth，在另存为类型列表框中，点击方法文件（*.smd），然后点击存储。
4.1.3.1.3 数据采集Ⅰ基线校正在两个样品池中分别加试样的空白溶剂，放入样品室，点击光度计键条中的基线按钮，启动基线校正操作，当基线参数对话框弹出时在“开始波长”和“结束波长”中分别输入测试所需的波长范围。
Ⅱ样品测定将外面的那个样品池拿出，倒掉溶剂，吹干（每次测定样品前，都要先将样品池洗干净，并吹干），加入待测试样，放入样品室，点击光度计键条中的开始按钮，当扫描完毕后，在弹出的新数据集对话框中输入文件名及数据存储元名，点击确定。
4.1.3.1.4 保存数据选择“文件＞另存为”，在对话框顶部的保存位置选择适当的路径，在文编号：部门：质量控制室版本：1.2起草：审核：替代：1.0Q A审核：批准：执行日期：件名输入框中输入文件名，在保存类型中选择“.spc”，在点击保存。
几种光谱仪器光源的更换方法购买了光谱仪器的用户可能会对光源的更换有所感触，光源可以说是光谱类仪器的主要损耗部件了，您是否遇到过如下烦恼——仪器出保修期了，而此时需要更换光源，请厂家的工程师更换费用多多。
其实您大可不必对此烦恼，电脑可以DIY，更换光源同样可以。
这就象给车胎打点气一样容易，关键要弄清哪部分是不能动的，我们坚决不动就是。
我本人更换过几种仪器的光源，简述一下，希望对大家有所帮助。
1．日立的紫外可见分光光度计（代表机型：U-3010/U-3900）更换钨灯或氘灯后必须进行光源镜的调整，否则光斑会偏离光轴，造成光能量不足，基线噪声变大。
光源镜位置调整时，样品室支架内须保证无任何样品，如采用其他附件时（如：积分球、反射附件等）暂时不要安装在样品室内。
更换氘灯后的调整方法：－测量模式设定为：E(S)或E(R)－光源设定为：仅用D2灯－光电管高压：选固定模式，电压设定为300V左右－波长设定为：656.1nm仔细调整光源镜左和背部两个定位螺钉，使屏幕能量显示值达到最大。
更换钨灯后的调整方法：－测量模式设定为：E(S)或E(R)－光源设定为：仅用WI灯－光电管高压：选固定模式，电压设定为300V左右－波长设定为：600nm仔细调整光源镜右和背部两个定位螺钉，使屏幕能量显示值达到最大。
注意事项：a)光源镜背部的螺钉为灯光束上下调整螺钉，该螺钉调整时要兼顾两个灯的能量，但主要照顾氘灯的能量，因为氘灯的能量比钨灯低得多。
b)一般情况只换一只灯，但调整时两只灯的情况均要检查。
c)调整后要做基线平坦度及噪声水平测试。
2.日立的荧光分光度计（代表机型：F-4500）a）打开仪器右侧光室盖取出氙灯灯架更换氙灯，注意氙灯内充有高压氙气，小心不要碰碎，否则有一定危险性。
氙灯“+”极为粗的一端朝上安装，“-”极为细的一端朝下安装。
b）更换氙灯后必须要调整灯位置，方法如下：在分析方法窗口中将两个单色器狭缝均设定为5 nm。
UV-2550紫外分光光度计标准操作及维护保养规程1.目的建立UV-2550型紫外可见分光光度计标准操作及维护保养规程，确保分光光度计正常使用。
2.范围适用于UV-2550型紫外可见分光光度计的操作使用。
3.术语或定义N/A4.职责：仪器管理员及仪器操作人员对本规程的实施负责。
5.程序5.1 工作环境仪器应在温度为5℃～35℃，相对湿度不大于85%的环境中工作，放置仪器的桌子不应受到影响使用的振动，室内无强烈电磁场干扰，避免直接暴露在阳光下，避开有硫化氢、二氧化硫、氟气、氮气、氨气等腐蚀气体的地方。
5.2 供电要求仪器供电电压变化不超过220V±22V，频率变化不超过50±2HZ，仪器地线端应良好接地。
5.3 联机5.3.1开启计算机，进入Windows9X操作系统。
5.3.2用鼠标点击“开始”→“程序”→“紫外可见分光光度计”→紫外可见分光光度计”。
5.3.3计算机屏幕显示“是否联机？”提示，选择“是”。
如未初始化，系统直接进入初始化窗口。
如已初始化过，系统提示“是否初始化？”，可选择“是”或“否”。
选择“是”，则系统进入初始化窗口如选择“否”，则系统进行系统设置后进入工作窗口。
5.4.定量分析5.4.1在工作窗口下选择定量分析进入，设定波长（输入指定波长，并使仪器波长马达驱动至该指定波长。
如果波长输入值大于850nm或小于190nm，将会有提示表明该输入出错，并且等待下一次输入。
如取消设定，则所输入波长值无效。
否则产针会等待输入，直至输入的波长值正确为止）。
5.4.2取比色皿一只倒入空白溶液，放入样品室第一格；另取配对比色皿一只倒入待测液，放入样品室第二格，盖好样品室。
5.4.3调满度。
使显示的数值在透过率时为99.0%～101.0%；在吸光度时为-0.001～0.001第二格，读数窗上显示的数值即为该样品的吸光度（A）。
5.5 定性分析5.5.1在工作窗品下选择波长扫描。
岛津UV-2550 仪器说明书
一、仪器简介
岛津UV-2550是一款博得了用户高度评价的紫外可见分光光度计，性能卓越且操作简单方便，与功能强大的操作软件UVProbe结合，可以具备强大的功能。
小光斑的光学系统使得微量的测定更为方便。
1）高水平的超低杂散光
UV-2550采用优异的DDM（双闪耀衍射光栅、双单色器）技术实现了超低杂散光（％以下）和高光通量。
低的杂散光可以对高浓度的样品不进行稀释而直接测定。
2）通用型的软件UVProbe
UV-2550通过新一代的中英文双语操作软件UVProbe控制，包含光谱测定、光度测定、动力学测定和报告处理四大模块，从基本的测定到研究解析都可以通过它实现。
UVProbe实现了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。
另外还可以加载膜厚测定、色彩分析等软件。
3）丰富的附件选择和广泛的应用领域
生命科学领域：可对从生命体内得到的微量样品进行测试。
积分球测试：可以对浑浊样品和粉末状的样品进行测试。
反射附件：可以对光学材料进行相对反射和绝对反射的测定。
二、主要技术指标
三、操作流程
1、开机预热
1.1先打开电脑显示器和主机，再打开仪器的电源（仪器左侧），双击桌面上的图标UVProbe ,
出现“运行身份”对话框，选中“当前用户”，把“保护我的计算机”前的“√”去掉，否则进不去程序，点“确定”，进入软件；
1.2点击屏幕下方的“连接”，出现“UV-2550PC 系列– (FD 00)”对话框，仪器开始初
始化，所有项目前显示绿灯，则初始化通过，点击“确定”，仪器连接成功；
1.3初始化结束后，仪器需预热15min。
预热结束，即可往下操作。
2、基线校正
2.1点击菜单栏中的“窗口”，在下拉菜单中，点击“光度测定”，打开光度模块；
2.2点击屏幕下方光度计按键栏的“基线”，弹出“基线参数”对话框，输入波长范围（实
验所需的波长范围），点击“确定”，启动基线校准操作，在基线扫描过程中，注意波长的变化范围，读数变化≤3nm可接受。
扫描结束后，点击输出窗口的“仪器履历”，查看基线扫描结果。
3、光度测定
首先选择测定方式，即编方法。
在菜单栏的“编辑”下拉菜单中，选择“方法”，弹出“光度测定方法向导-[波长]”对话框，在波长类型中，可设定测定的波长范围（点或范围）。
如果选择波长类型为“点”，则输入目标波长，点击“加入”，即出现在“条目”中；若选择波长类型为“范围”，则输入波长范围，点击“加入”。
完成后，点击“下一步”；
设置类型及定量法等；点击“下一步”，设置标准样品重复次数，点击“下一步”，设置未知样品重复次数；点击“下一步”，设置方法的保存位置，点击“完成”，方法即保存。
标准曲线的绘制。
在标准表中，输入标准品信息。
点击光度计按键栏的“读取Std.”,开始测定。
测定时，可以自动测定（把样品全部放入样品盒，一次可放6个，点击方法中的附件，选择“六联池” ,软件自动测定各标准溶液的吸光度，并自动绘制标准曲线。
所配标准溶液的吸光度在～范围内，吸收测定的精密度约为%（注：当摩尔吸收系数为105L/、石英皿的光程为1cm、浓度在1×10-5～×10-6mol/L范围时，即可得到～范围的吸光度）。
标准测定完毕，工作曲线自动显示。
接下去测定未知样品的浓度。
），也可手动测定（把单个样品放入光路，点击方法中的附件，选择“无”），但是自动测定可能会在光路转换过程中产生误差。
测定结束，点击菜单栏的“图像”，在下拉菜单中“标准曲线统计”，可查看标准曲线的相关信息。
样品的测定
在样品表中，输入样品信息。
测定方法同标准品的测定。
储存
测量完毕后，单击“文件”下拉菜单的“保存”，储存到指定的位置。
关机
将比色皿从样品池中取出，先关闭软件，再关闭仪器电源开关。
清洁
测定结束后，小心将仪器内部及台面被污染的地方清洁干净。
比色皿放回原位。
四、注意事项
不要用手触摸样品室中透光窗面，若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。
假如在石英窗上发现有染色剂，应清洗干净以防影响测定。
要小心保护比色皿的透光面，只能用镜头纸或脱脂棉轻轻擦拭，避免硬的物品把透光面划伤。
至少每季度清洁样品室一次，擦洗样品室底部以清洗溅出的液体样品，防止其蒸发和腐蚀样品室，或由于腐蚀而得到错误结果。
五、期间核查
期间核查的频率
正常情况下为两次检定之间，即每年进行一次，遇到有仪器设备维修、对仪器设备有怀疑或有特殊需要的情况下，应临时进行期间核查。
外观检查
5.2.1样品室应密封良好，无漏光现象。
干燥剂的位置摆放合理，无阻挡光路情况。
5.2.2吸收池的透光面应光洁，无划痕和斑点，任一面不得有裂纹。
5.2.3 仪器与计算机的接口处接触良好，光源工作正常，无灯丝熔断问题。
波长准确度的校正
利用氘灯的两个特征波长峰和来检查波长的精确度。
波长的漂移范围：±。
基线平直度
扫描200～1000nm的基线，吸光度的漂移范围：±以内。
时间扫描
用动力学分光光度法在500nm扫描，漂移范围：±h(电源启动2h后)。
