培养基的配制及使用记录
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培养基配制原始记录日期:_________实验室:_________培养基名称:_________配制人:_________复核人:_________实验室设备和试剂:1.电子天平2.pH计3.明胶粉4.葡萄糖5.维生素B16.纯水步骤:1.准备工作:a.清洗实验室设备,确保干净无菌。
b.准备所需试剂,确保其纯度和质量。
c.检查实验室设备的工作状态。
2.配制明胶溶液:a.称取10克明胶粉。
b.加入1000毫升蒸馏水,搅拌溶解。
c.用0.2微米的过滤器过滤溶液,以除去杂质。
d.得到pH为7.4的明胶溶液。
3.配制葡萄糖溶液:a.称取10克葡萄糖。
b.加入1000毫升蒸馏水,搅拌溶解。
c.用0.2微米的过滤器过滤溶液,以除去杂质。
d.得到pH为7.2的葡萄糖溶液。
4.维生素B1配制:a.取1克维生素B1b.加入100毫升蒸馏水,搅拌溶解。
c.用0.2微米的过滤器过滤溶液,以除去杂质。
d.得到维生素B1水溶液。
5.配制培养基:a.取明胶溶液10毫升,葡萄糖溶液10毫升,维生素B1水溶液1毫升,加入1000毫升蒸馏水,搅拌混合。
b.用0.2微米的过滤器过滤溶液,以除去杂质。
c.得到最终pH为7.0的培养基。
6.复核记录:a.复核人核对实验室设备和试剂的使用情况和质量。
b.复核人核对培养基配制的步骤和结果,确保无误。
备注:-配制过程中所有操作需在无菌条件下进行。
-配制得到的培养基应保存在无菌密封容器中,避免阳光直射。
-配制的培养基需在规定时间内使用,避免菌落污染。
-配制记录需保存至少3个月作为备案。
牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化10g钠琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL 121℃灭菌20min。
2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀20g粉硝酸钾1g氯化0.5g钠磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼20g脂水1000mLpH7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。
121℃灭菌20min。
3、查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。
4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。
临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。
5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。
121℃灭菌30min。
6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。
(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。
加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。
培养基的配制及使用记录一、引言在微生物学实验过程中,培养基的配制及使用记录是非常重要的实验步骤之一、正确的培养基配制可以提供适宜的营养物质和环境条件,促进微生物的生长和繁殖。
本文将详细介绍培养基的配制和使用记录,以及注意事项和实验结果的记录。
二、培养基的配制1.根据实验需要选择合适的培养基配方。
常见的培养基有肉汤培养基、浓缩肉汤培养基、天然培养基、合成培养基等。
2.按照培养基配方准确称取所需的物质,如蛋白胨、葡萄糖、酵母粉等。
3.将物质加入蒸馏水中,并用玻璃棒搅拌均匀,直至溶解完全。
4.调整pH值。
使用pH计将溶液的pH值调整到所需范围内,通常为6.8-7.25.配制完毕的培养基通过高温高压灭菌器进行灭菌,保持高温高压一段时间。
6.灭菌后的培养基应待其冷却到室温后使用或储存,避免细菌的再度污染。
三、培养基的使用记录1.填写培养基使用记录表。
记录培养基的配制日期、配制者、培养基批号等信息。
2.记录每次使用的培养基的用量。
可通过称重器或容量杯进行测量,确保使用的培养基量能满足实验需要。
3.记录每次使用的细菌菌种名称和数量。
用标准测量容器或移液器进行测量和记录。
4.注意培养基的贮存条件。
培养基应存放在阴凉、干燥、无菌的环境中,避免阳光直射或高温暴晒。
四、注意事项1.在培养基的配制和使用过程中,要严格遵守无菌操作规范,防止微生物的污染。
2.注意培养基的保存时间,过期的培养基会导致细菌的生长受阻。
3.培养基使用完后应及时清洗容器并进行消毒处理,以防止细菌的残留和传播。
4.注意培养基的pH值和温度控制,过高或过低的pH值和温度会影响微生物的生长和繁殖。
五、实验结果的记录1.记录每次实验的细菌生长情况,包括菌落形态、菌液浑浊程度以及生长速度等。
2.对于培养基配制不当或实验操作失误导致的异常结果,要仔细记录并分析原因,以便调整实验方法和改进配制过程。
六、结论培养基的配制和使用记录是微生物学实验的重要步骤之一,正确的配制和使用可以提供适宜的环境条件促进微生物的生长和繁殖。
微生物培养基配制实验报告(共5篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。
(2)N源:包括无机氮和有机氮。
(3)C源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
(4)无机盐:如NaCl、KH2PO4等。
微量元素:Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基,110℃、30min。
(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。
(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。
除病菌需更小。
五、实验步骤:1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯,加入100mL水,用玻璃棒搅匀溶解,移入三角瓶,并加入1.5g琼脂。
配制培养基的方法
配制培养基的方法可以分为以下几个步骤:
1. 准备所需材料:培养基成分包括水、碳源、氮源、矿质元素、生长因子等。
根据不同的微生物需要,选择合适的成分。
2. 称量和溶解:根据配方将各成分称量出来,然后用适量的去离子水溶解。
3. 调整pH值:使用pH计将培养基的pH值调整到合适的范围内,通常为7.0左右。
4. 加热和消毒:将溶解后的培养基加热至沸腾,保持沸腾1-2分钟以杀灭可能存在的微生物。
然后,使用高压灭菌器或高温灭菌法将培养基灭菌。
5. 倾倒和分装:将已灭菌的培养基倒入无菌培养瓶或培养皿中,然后密封好。
6. 检查和保存:检查培养基是否有异常,如变色或发霉等。
将已制备好的培养基保存在合适的温度和条件下,以防止污染。
以上是一般的培养基制备方法,具体的步骤和条件可以根据不同的微生物和实验需要进行调整。
培养基配制与使用记录一、培养基配制记录日期:XXXX年XX月XX日实验室:XXXX实验室实验人员:XXX实验目的:配制适用于细菌培养的LB培养基实验步骤:1.准备所需原料,包括:細菌葡萄糖培养基粉、酵母提取物粉、琼脂、NaCl及蒸馏水等。
2.按照配方比例将所需原料称量并加入500mL容量瓶中。
3.将容量瓶加入适量蒸馏水,使总体积达到500mL。
4.盖上瓶盖后反复摇动容量瓶,使各种原料充分溶解均匀。
5.将配制好的LB培养基液倒入100mL容量的培养皿中。
6.按需使用后,将剩余的LB培养基液存放在4℃冰箱中,避免细菌生长受到污染。
备注:1.本次配制的LB培养基比例为:細菌葡萄糖培养基粉10g,酵母提取物粉5g,琼脂15g,NaCl10g,蒸馏水500mL。
2.配制好的LB培养基液应无明显异味、颜色均匀。
3.配制好的LB培养基液需在使用前进行灭菌处理。
二、培养基使用记录日期:XXXX年XX月XX日实验室:XXXX实验室实验人员:XXX培养基类型:LB培养基培养菌株:XXX菌株实验步骤:1.根据需要,取适量的LB培养基液倒入装有菌落的平皿中。
2.将LB培养皿再次进行灭菌处理,确保培养皿表面无细菌。
3.将菌株转移到LB培养基上,使用无菌的铁鉗将菌株抹平均匀。
4.关上培养皿,并在培养皿底部标明日期、菌株信息等。
5.将装有菌落的培养皿倒置放入恒温培养箱中,设置适宜的温度和湿度进行培养。
6.每隔一定时间,观察菌落的生长情况和特征,并记录在培养基使用记录表格中。
7.使用后将未使用完的LB培养基液再次进行灭菌处理,并存放在4℃冰箱中。
备注:1.在培养过程中,要注意严格无菌操作,避免其他微生物的污染。
2.观察培养结果时,应注意菌落的形态、颜色、大小等特征,进一步判断菌株的生长状态和特性。
3.使用后的LB培养基液不可重复使用,避免污染和细菌产生抗药性。
以上为培养基配制与使用的记录,用于保证培养基的质量和培养结果的可靠性,同时也是实验室管理与记录的重要内容。
培养基的配制及使用记录
序号操作指导操作参数记录数据签名
1 检查天平是否在校验有效期
内;检查天平是否正常、完好;
使用前对天平进行调零。
天平编号
是否在校验有效期内
是否正常、完好
是否调零
口是/ 口否
口是/ 口否
口是/ 口否
操作者
______
2 按右表配方比例,在天平上分
别称取培养基于洁净的烧杯
中,并记录称重与批号,将纯
化水加入上述烧杯中并搅
拌均匀,再定容至规定体积。
名称比例称重批号操作者
______
复核者
______
3 平板培养基的配制:
将上述定容好的培养基,分装
于500ml规格的三角瓶中或者
小试管中,塞上硅胶塞,用牛
皮纸包扎紧。
配制量ml
操作者
______
复核者
______
4 将包扎好的培养基,温度
121~125℃湿热灭菌15--20
分钟。
待压力和温度下降后取
出,适当冷却。
灭菌锅编号
设定温度
灭菌时间
℃
操作者
_______
5 进无菌室时,按要求更换上无
菌服,更衣穿戴完毕。
着装是否符合规范口是/ 口否操作者
______
6 将上述已灭菌的培养基经传递
窗转移至无菌室。
在净化操作
台上,无菌操作下倒平板
(15--20ml/90mm皿)。
倒平皿数
试管斜面
副
个
操作者
______
7 空白培养实验
将已经冷却的培养基放入培养
箱中空白培养48小时。
检测是
否无菌。
培养箱编号
培养箱温度
培养时间
是否无菌
℃
口是/ 口否
操作者
______
8
废弃培养基及培养物在锅内加
热煮沸灭活,收集于废液桶中
定期处理。
煮沸、灭活口是/ 口否
操作者
_______
复核者
_______ 附:培养基使用记录
使用日期使用去处使用数量(副) 使用者。