HBx及Beclin1在肝癌中的表达及临床意义

２６　岭南现代临床外科２０１４年２月第１４卷第１期ＬｉｎｇｎａｎＭｏｄｅｍ　Ｃｌｉｎｉｃｓｉｎ　Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｆｅｂ．２０１４，ＶｏＬ１４　Ｎｏ．１　

肝细胞癌中ＨＢｘ的表达及其与患者预后　

的关系　

洪清琦何传超徐錾耀胡斌王捷　

【摘要】　目的检测乙型肝炎病毒Ｘ蛋白（ＨＢｘ）在肝细胞癌中的表达及其与患者预后的关　系，并探讨人血清ＨＢｘ抗原的检测。方法用免疫组化法检测３５例肝癌患者肿瘤组织中ＨＢｘ蛋　白的表达，与临床资料进行相关分析；应用酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测７７例人血清中ＨＢｘ抗　原的表达情况。结果肝癌组织中ＨＢｘ的总体阳性检出率为２０／３５（５７．１４％），其中乙型肝炎病毒　表面抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性者ＨＢｘ的阳性率为１５／２４（６２．５０％），而ＨＢｓＡｇ阴性者ＨＢｘ的阳性率为５／　１１（４５．４５％）；ＨＢｘ阳性与ＨＢｘ阴性的肿瘤组织低分化比率分别为９／２０（４５．００％）及２／１５　（１３．３３％），差异有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）；ＨＢｘ阳性肝癌患者的无病生存期（ＤＦＳ）明显短于ＨＢｘ阴　性患者（Ｋａｐｌａｎ—Ｍｅｉｅｒ法及ｌｏｇ—ｒａｎｋ检验，Ｐ＝０．０３）。ＥＬＩＳＡ检测人血清中ＨＢｘ抗原的总阳性率为　４８／７７（６２．３４％）。结论肝癌肿瘤组织中ＨＢｘ的表达与患者无病生存期呈负相关，ＥＬＩＳＡ法能　有效检测人血清中ＨＢｘ抗原的表达。　【关键词】　肝细胞癌；乙型肝炎病毒；乙型肝炎病毒ｘ蛋白；肿瘤病理分级；无病生存期　中图分类号：Ｒ６５７．３　文献标识码：Ａ　文章编号：１００９—９７６Ｘ（２０１４）０１—００２６—０４　ｄｏｉ：１０．３９６９／ｉ．ｉｓｓｎ．１００９—９７６Ｘ．２０１４．０１．００８　

Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢｘ　ｉｎ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｄｉｓｅａｓｅ—ｆｒｅｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ　ｏｆ　ＨＣＣ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　Ｈｏｎｇ　Ｑｉｎｇｑｉ　，Ｈｅ　Ｃｈｕａｎｃｈａｏ　，Ｘｕ　Ｊｕｎｙａｏ　，Ｈｕ　Ｂｉｎ　，Ｗａｎｇ　Ｊｉｅｂ．ａＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｏｎｃｏｌｏｇｙ　Ｓｕｒｇｅｒｙ，　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，ｔｈｅ　Ｆｉｒｓｔ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｘｉａｍｅｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉａｍｅｎ，　Ｆｉ，ｊｉａｎ　３６１００３；　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　Ｈｅｐａｔｏｂｄｉａｒｙ　Ｓｕｒｇｅｒｙ，　Ｓｕｎ　Ｙａｔ—ｓｅｎ　Ｍｅｍｏｒｉａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｕｎ　Ｙａｔ—ｓｅｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０１２０，Ｃｈｉｎａ．Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　Ａ　ｕｔｈｏｒ：Ｗａｎｇ觑，　ｓｕｍｓｊｗ＠１６３．ｃｏｎ　【Ａｂｓｔｒａｃｔ】　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢｘ　ｉｎ　ＨＣＣ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｚｅ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｗｉｔｈ　ｄｉｓｅａｓｅ－ｆｒｅｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ（ＤＦＳ）ｉｎ　ＨＢＶ—ｒｅｌａｔｅｄ　ＨＣＣ．Ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｏｆ　ＨＢｘ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｓｅｒｕｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ｗａｓ　ｕｔｉｌｉｚｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢｘ　ｉｎ　３５　ＨＢＶ—ｒｅｌａｔｅｄ　ＨＣＣ　ｔｉｓｓｕｅｓ，ａｎｄ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｗｉｔｈ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｄａｔａ．Ｅｎｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄ　ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ　ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）ｗａｓ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｔＯ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ　ＨＢｘ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ＳＣＲｉｍ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＨＢｘ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｒａｔｉｏｓ　ｗｅｒｅ　２０／３５（５７．１４％）ｉｎ　ＨＣＣｓ，ｗｉｔｈ　１５／２４（６２．５０％）ｏｆ　ＨＢｓＡｇ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　５／１１　（４５．４５％）ｏｆ　ＨＢｓＡｇ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｃａｓｅｓ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ　ｐｏｏｄｙ　ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ＨＢｘ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ（９／　２０，４５．００％）ｗａｓ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ＨＢｘ　ｎｅｇａｔｉｖｅ（２／１５，１３．３３％）ｃａｓｅｓ（Ｐ＜０．０１）．　Ｄｉｓｅａｓｅ　ｆｒｅｅ　ｓｕｒｖｉｖａｌ（ＤＦＳ）ｏｆ　ＨＢｘ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｎｅｇａｔｉｖｅ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｅｓｔｉｍａｔｅｄ　ｂｙ　Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ　ｍｅｔｈｏｄ　ａｎｄ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｌｏｇ－ｒａｎｋ　ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｐｏｏｒ　ＤＦＳ　ｉｎ　ＨＢｘ　ｐｏｓｉｔｉｖｅ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＝Ｏ．０３）．ＥＬＩＳＡ　ｃｏｕｌｄ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ　ｄｅｔｅｃｔ　ＨＢｘ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　Ｓｅｌａｌｍ　ｗｉｔｈ　４８／７７（６２．３４％）ｐｏｓｉｔｉｖｅ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｏｆ　ＨＢｘ　ｉｓ　ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｕｍｏｒ　ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　ｇｒａｄｉｎｇ　ａｎｄ　ｐｏｏｒ　ＤＦＳ　ｏｆ　ＨＣＣ　ｐａｔｉｅｎｔｓ．ＥＬＩＳＡ　ｃａｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ　ｄｅｔｅｃｔ　ＨＢｘ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｉｎ　ｈｕｍａｎ　ｓｅｒｕｍ．　【Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ】Ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｃａｒｃｉｎｏｍａ；Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　Ｖｉｒｕｓ；Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ　Ｂ　Ｖｉｒｕｓ　Ｘ　Ｐｒｏｔｅｉｎ；　Ｔｕｍｏｒ　Ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｇｒａｄｉｎｇ；Ｄｉｓｅａｓｅ—Ｆｒｅｅ　Ｓｕｒｖｉｖａｌ　

HBx和癌胚抗原相关细胞黏附分子1在乙型肝炎相关性肝癌中的作用及病理特征

刘凯歌;许刚柱;姚杨;兀威;李亚军;任婷婷;徐光华;叶琳

【期刊名称】《肝脏》

【年(卷),期】2012(017)002

【摘 要】目的 探讨HBx和癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乙型肝炎相关性肝癌中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学方法(SP法)检测81份乙肝相关性肝癌组织中HBx及CEACAM1的表达情况,分析HBx和CEACAM1与乙肝相关性肝癌的临床病理特征.Western印迹检测人正常肝细胞系QZG、肝癌细胞HepG2及稳定转染HBx的肝癌细胞HepG2(HepG2-X)中CEACAM1的表达.结果 81份乙肝相关性肝癌组织中HBx表达阳性率为74.07％ (60/81),CEACAM1表达阳性率为71.60％ (58/81),二者与门静脉侵袭、淋巴结转移和TNM分期存在显著相关,HBx与CEACAM1的表达呈负相关(rs=-0.310,P＜0.01)；在HepG2-X中,CEACAM1蛋白表达水平与肝癌细胞HepG2及人正常肝细胞系QZG相比显著降低.结论 HBx的高表达和CEACAM1的低表达与乙肝相关性肝癌的侵袭、转移密切相关,HBx有可能通过抑制CEACAM1的表达而诱导乙肝相关性肝癌的侵袭与转移.

【总页数】4页(P95-98)

【作 者】刘凯歌;许刚柱;姚杨;兀威;李亚军;任婷婷;徐光华;叶琳

【作者单位】710077 西安医学院第一附属医院消化科;710077 西安医学院第一附属医院消化科;710077 西安医学院第一附属医院消化科;710077 西安医学院第一附属医院消化科;710077 西安医学院第一附属医院消化科;延安大学附属医院感染科;延安大学附属医院感染科;第四军医大学唐都医院营养科

【正文语种】中 文

【相关文献】

1.癌胚抗原相关细胞黏附分子1和血管内皮生长因子在HBV相关性肝癌血管生成中的作用 [J], 许刚柱;刘凯歌;赵慧;徐锐;徐莉;姚杨;任婷婷

第30卷 第4期 中国现代医学杂志 Vol. 30 No.4 2020年2月 China Journal of Modern Medicine Feb. 2020

收稿日期：2019-08-16[通信作者] 包嘉凌，E-mail：bzk2004bb@DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2020.04.011文章编号： 1005-8982（2020）04-0061-04MicroRNA-1301在肝癌中的表达及临床意义陈虒，季沅，金慧涵，王雷，包嘉凌（南京医科大学附属无锡第二医院 肝胆外科，江苏 无锡 214001）摘要：目的 检测microRNA-1301（miR-1301）在原发性肝细胞癌（HCC）中的表达及临床意义。 方法 选取2011年1月—2014年1月在南京医科大学附属无锡第二医院行HCC根治手术的60例患者临床资料、组织样本及随访资料。qRT-PCR检测肝癌及癌旁组织中miR-1301的表达，分析miR-1301的表达与肝癌患者临床特征及预后关系。结果 HCC癌组织中miR-1301相对表达量低于癌旁组织（P <0.05），且肿瘤直径、临床分期、有无脉管癌栓和miR-1301相对表达量与患者不良预后有关（P <0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，miR-1301低表达组肝癌患者总生存率低于高表达组（P <0.05）。多因素Cox分险比例模型提示，肿瘤直径[H^R=1.417（95% CI：1.432，4.166）]、脉管癌栓[H^R=0.493（95% CI：0.205，0.936）]、临床分期[H^R=2.013 （95% CI：0.933，3.114）]、miR-1301低表达[H^R=2.893（95% CI：1.139，3.452），P =0.011]是影响肝癌患者总体生存率的独立危险因素。结论 miR-1301在肝癌组织中低表达，与患者不良预后密切相关，可为肝癌患者预后评估提供新的分子标志物。关键词： 肝肿瘤；microRNA/微RNAs；预后中图分类号： R735.7；R363 文献标识码： AExpression of MicroRNA-1301 in hepatocellular carcinoma and its clinical significanceSi Chen, Yuan Ji, Hui-han Jin, Lei Wang, Jia-ling Bao(Department of Hepatobiliary Surgery, Nanjing Meical University Affiliated Wuxi No.2 Hospital, Wuxi, Jiangsu 214001, China)Abstract: Objective To investigate the expression of miR-1301 in hepatocellular carcinoma (HCC) and analyze its clinical significance. Methods The clinical data, tissue samples and follow-up information of 60 patients who underwent the radical operation of liver cancer in our hospital form January 2011 to January 2014 were collected. Quantitative Real-time PCR (qRT-PCR) was used to determine the expression of miR-1301 in HCC tissues and adjacent normal tissue. The relationship between the expression of miR-1301 and clinical data and prognosis were analyzed. Results The expression of miR-1301 was decreased in HCC samples compared with the adjacent non-cancer tissues, and significantly correlated with tumor diameter, tumor stage and vascular carcinoma (P < 0.05). Kaplan-Meier survival analysis showed that low miR-1301 expression associated with a declined overall survival (P < 0.05). Multivariate analysis showed that the expression of tumor diameter, vascular carcinoma tumor stage and miR-1301 was an independent predictor for overall survival of patients with HCC. Conclusion This study indicates that miR-1301 is downregulated in hepatocellular carcinoma tissue and closely related to poorer survival in patients with HCC, which may provide a new prognostic biomarker for HCC patients.Keyworks: liver neoplasms; microrna; prognosis 中国现代医学杂志 第30卷原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）是世界第5大常见的恶性肿瘤，中国患者约占55%[1]。手术是治疗HCC的主要方式，但术后复发率高，其5年生存率仍较低[2]。microRNA（miRNA）是一群内源性非编码小分子RNA，通过与靶基因mRNA的3'非编码区（3'UTR）结合，导致靶基因mRNA降解或翻译受阻，以参与靶基因的转录后调节[3]。有研究表明，miR-1301在包括HCC内的多种肿瘤中表达下调，对肿瘤的发生、发展起到抑制作 用[4-7]，但其与肝癌患者临床预后关系尚不明确。本研究通过检测HCC组织中miR-1301的表达水平，分析其与患者临床数据及预后的关系，可能为HCC患者预后评估提供新的分子标志物。1 资料与方法1.1 一般资料选取2011年1月—2014年1月在南京医科大学附属无锡第二医院行HCC根治手术的60例患者临床资料、组织样本及随访资料。根据miR-1301相对表达量数值的中位数截点，将患者分为高表达组和低表达组，每组30例。所有癌组织及相应癌旁组织（距肿瘤边缘>2 cm的正常肝脏组织）均与液氮速冻并保存于-80℃冰箱。患者术后第1、3及6个月复查CT、血清甲胎蛋白（alpha-fetal protein, AFP），之后每半年复查CT及AFP，所有考虑复发转移的患者有CT、超声造影、AFP或穿刺活检病理等其中2或3项诊断，患者随访时间截至2019年1月。本研究通过医院伦理委员会批准，患者及其家属知情同意。1.2 方法所有肝癌组织及癌旁组织的RNA通过Trizol（美国Invitrogen公司）提取，具体步骤参照试剂盒说明书。通过逆转录试剂盒（美国Applied Biosystems公司）将RNA逆转录成互补DNA，然后应用miR特异性TaqMan探针和TaqMan Universal PCR Master Mix（美国ABI公司）进行miR-1301的实时荧光定量聚合酶链反应（quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR）检测，反应在StepOne Plus 探测系统（美国ABI公司）上进行，反应条件：95℃预变性10 min，95℃变性15 s，60℃退火1 min，60℃延伸1 min，共40个循环。内参为RNU6B，每个反应设置3个复孔，miR-1301的相对表达量用2-∆∆Ct法

・４０・　解放军医药杂志２０１７年６月第２９卷第６期Ｍｅｄ＆Ｐｈａｒｍ　Ｊ　Ｃｈｉｎ　ＰＬＡ，Ｖｏ１．２９，Ｎｏ．６，Ｊｕｎ．２０１７　

ＮＵＰＲ１蛋白在肝癌中的表达水平及临床意义　

贾　丽，许晓梅，韩建雄　・论著・　

［摘要］　目的探讨核蛋白１（ＮＵＰＲ１）在肝癌组织中的表达水平及临床意义。方法　选取２０１４年１月一２Ｏｌ５　

年６月进行肝癌切除术患者的肝癌组织１１３例作为观察组，另选２８例肝良性肿瘤周围的正常肝组织作为对照组。分　别采用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学检测两组组织中ＮＵＰＲ１　ｍＲＮＡ和蛋白质的表达水平。同时，分析ＮＵＰＲ１　表达水平与临床病理因素的关系。结果　观察组ＮＵＰＲ１　ｍＲＮＡ表达水平和蛋白阳性表达率显著高于对照组（Ｐ＜　０．０５）。ＮＵＰＲ１表达与肝癌的分化程度，门静脉侵袭以及临床分期密切相关（Ｐ＜０．０５）。结论ＮＵＰＲ１在肝癌组织　中呈过表达状态，可能参与了肝癌的发生及发展过程，检测ＮＵＰＲ１表达水平可能为肝癌的早期诊断和治疗提供重要　

帮助。　［关键词］　核蛋白１；肝肿瘤；逆转录聚合酶链反应；免疫组织化学；基因表达　［中国图书资料分类号］　Ｒ７３５．７　［文献标志码］　Ａ　［文章编号］　２０９５－１４０Ｘ（２０１７）０６－００４０—０４　［ＤＯＩ］　１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．２０９５—１４０Ｘ．２０１７．０６．０ｌ　１　

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ｌｅｖｅｌ　ａｎｄ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｆ　ＮＵＰＲ１　Ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　Ｈｅｐａｔ０ｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｃａｒｃｉｎｏｍａ　

ＪＩＡ　Ｌｉ，ＸＵ　Ｘｉａｏ—ｍｅｉ，ＨＡＮ　Ｊｉａｎ—ｘｉｏｎｇ（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ，ｔｈｅ　Ｆｉｆｔｈ　Ｐｅｏｐｌｅｇ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｎｇｄｕ，Ｃｈｅｎｇ—　

ｄｕ　６１　１１３０．Ｃｈｉｎａ）　

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｌｅｖｅｌ　ａｎｄ　ｃｌｉｎｉｃａｌ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｆ　ｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎ１（ＮＵＰＲ１）ｐｒｏ—　ｔｅｉｎ　ｉｎ　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｔｉｓｓｕｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ａ　ｔｏｔａｌ　ｏｆ　１　１３　ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ　ｃａｒｃｉｎｏｍａ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｆｒｏｍ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｕｎｄｅｒ—