谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒说明书

γ-谷氨酰基转移酶（GGT）测定试剂盒（GCANA底物法）适用范围：用于体外定量测定人体血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。

1.1 试剂盒包装规格试剂1：1×25ml，试剂2：1×5ml；试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml；试剂1：3×40ml，试剂2：3×8ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml；试剂1：2×400ml，试剂2：1×160ml；试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。

1.2 试剂盒主要组成成分2.1 外观试剂1：无色澄清液体；试剂2：浅黄色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 试剂空白2.3.1 试剂空白吸光度在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于1.2。

2.3.2试剂空白吸光度变化率在37℃、405nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度变化率（ΔA/min）应不大于0.005。

2.4 分析灵敏度测定活性为50U/L样本时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.011。

2.5 线性范围在（10，500）U/L线性范围内，线性相关系数r不小于0.996。

在（50，500）U/L范围内的线性相对偏差不大于±10%；测定结果(10，50]U/L时线性绝对偏差不大于±5 U/L。

2.6 重复性重复测试两份高低浓度的样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。

2.7 批间差不同批号试剂测试同一份样本，测定结果的批间相对极差应不大于10%。

2.8 准确度相对偏差：相对偏差应不超过±10%。

2.9 稳定性效期稳定性：试剂盒在2℃～8℃下有效期为12个月，取失效期的试剂盒进行检测，试验结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8要求。

货号: MS1204 规格：100管/96样谷胱甘肽S-转移酶（glutathione S-transferase，GST）试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：GST 是一种具有多种生理功能的蛋白质家族，主要存在于细胞质内。

GST 是体内解毒酶系统的重要组成部分，主要催化各种化学物质及其代谢产物与 GSH 的巯基共价结合，使亲电化合物变为亲水物质，易于从胆汁或尿液中排泄，达到将体内各种潜在或具备毒性的物质降解并排出体外的目的。

因此，GST 在保护细胞免受亲电子化合物的损伤中发挥着重要的生物学功能。

此外，因为 GST 具有 GSH-Px 活性，亦称为 non-Se GSH-Px，具有修复氧化破坏的大分子如DNA、蛋白质等的功能。

注意，GST 催化的反应减少 GSH 含量，但是不增加GSSG 含量。

测定原理：GST催化GSH与CDNB结合，其结合产物的光吸收峰波长为340nm；通过测定340nm 波长处吸光度上升速率，即可计算出GST活性。

自备仪器和用品：低温离心机、水浴锅、可调节移液器、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、和蒸馏水。

试剂组成和配置：试剂一：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。

试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存。

临用前加2 mL蒸馏水溶解。

粗酶液提取：1. 组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。

8000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

2. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

人谷胱甘肽（GSH）酶联免疫分析试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中谷胱甘肽（GSH）的含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人谷胱甘肽（GSH）水平。

用纯化的人谷胱甘肽（GSH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入谷胱甘肽（GSH），再与HRP标记的谷胱甘肽（GSH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。

TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的谷胱甘肽（GSH）呈正相关。

用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人谷胱甘肽（GSH）的含量。

样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20分钟左右（2000-3000转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

用液氮迅速冷冻保存备用。

标本融化后仍然保持2-8℃的温度。

加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。

谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法)产品简介：谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法) (Glutathione Reductase Assay Kit with DTNB)是一种简单易行的通过比色法来检测细胞、组织或其它样品中谷胱甘肽还原酶(Glutathione reductase, GR)活性的试剂盒。

谷胱甘肽还原酶在许多组织中都有分布，可以维持细胞内充足的还原型谷胱甘肽(GSH)水平。

GSH 可以清除自由基和一些有机过氧化物，或作为谷胱甘肽氧化酶(Glutathione peroxidase)的底物来清除一些过氧化物。

谷胱甘肽还原酶可以还原氧化型谷胱甘肽(GSSG)生成还原型谷胱甘肽(GSH)，而GSH 可以和生色底物DTNB 反应产生黄色的TNB 和GSSG ，并可以通过测定A 412来检测TNB 的生成量。

适当设置应体系，前后两个反应合并起来后，GSSG/GSH 过量而GR 相对不足时，该反应体系中谷胱甘肽还原酶就成为整个反应体系的限速因素，此时黄色的TNB 生成量和谷胱甘肽还原酶的活性呈线性正相关。

从而通过测定A 412就可以计算出谷胱甘肽还原酶的活性水平。

本试剂盒的具体反应原理如下：两个反应相合并：本试剂盒检测肝脏样品的检测效果如图1所示。

图中可见，对于肝脏样品可以检测到比较强的谷胱甘肽还原酶的活性并且有很好的剂量效应。

图1. 谷胱甘肽还原酶检测试剂盒(DTNB 法)用于肝脏裂解样品的实测效果图。

本试剂盒可以检测组织匀浆液上清、细胞裂解液上清等生物样品中的谷胱甘肽还原酶的活性。

一个试剂盒共可以进行100次检测。

碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线: 400-1683301或800-8283301 订货e-mail :****************** 技术咨询: ***************** 网址: 碧云天网站 微信公众号保存条件：-20ºC保存，一年有效。

谷氨酰胺酶(glutaminase,GLS)活性测定试剂盒使用说明产品简介：GLS存在于高等动物和某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

试验中所需的仪器和试剂：台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。

产品内容：试剂一×1瓶，60mL，4℃保存；试剂二×1瓶，50mL，4℃保存；试剂三×1瓶，60mL，常温保存；试剂四×1瓶，12mL，常温保存；试剂五×1瓶，6mL，常温保存；试剂六×1瓶，6mL，常温避光保存。

操作步骤：一、粗酶液提取：称取约0.1g组织，加入0.9ml试剂一研钵中研磨均匀，于48000rpm℃离心10min，取上清，作为待测液（粗酶液）。

二、测定步骤：1、空白管：（1）蒸馏水0.05mL，加试剂一0.2mL，加试剂二0.8mL，混匀后37℃水浴1h；（2）加入试剂三1.05mL，混匀后8000rpm离心10min；取上清液1.0mL到新离心管中，加入试剂四0.23mL，混匀；（3）取0.8mL到新离心管中，依次加入试剂五0.1mL和试剂六0.1mL，混匀后等待10min，即可用于调零。

2、样品管：仅需要把蒸馏水0.05mL换成粗酶液0.05mL即可，其余同空白管。

3、实际测定只要做一个空白管，用于调零，于420nm处比色，记录吸光值，记为A。

GLS活性计算：1、酶活性单位定义：37℃下每mg蛋白质每小时催化谷氨酰胺生成1μmol氨。

2、计算公式：GAA（U/mg prot）＝363.1×(A－0.1301)÷蛋白质浓度（mg/mL）。

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®还原型谷胱甘肽(GSH)比色法测试盒Reduced Glutathione (GSH) Colorimetric Assay Kit产品货号：E-BC-K030-S产品规格：50 assays(48 samples)/100 assays(96 samples)检测仪器：紫外-可见光分光光度计（420 nm）使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

用途本试剂盒适用于检测血清、血浆、动植物组织样本及培养细胞中GSH的含量。

检测原理还原型谷胱甘肽（GSH）可与二硫代二硝基苯甲酸（DTNB）反应产生硫代硝基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物（反应式见下图），硝基巯基苯甲酸是一种黄色化合物，在420 nm处，可进行比色定量测定还原型谷胱甘肽（GSH）的含量。

本试剂盒检测组织和细胞样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用考马斯亮蓝法（货号：E-BC-K168-S）提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。

所需自备物品仪器：紫外-可见光分光光度计（420 nm）、涡旋混匀仪、磁力搅拌器、微量移液器（1000 μL，200 μL，100 μL，10 μL）、烧杯（250 mL）耗材：枪头（1000 μL，200 μL，10 μL ）、EP管（5 mL、2mL）、吸水纸、擦镜纸、磁力搅拌子试剂：双蒸水或去离子水、生理盐水（0.9% NaCl）或PBS（0.01 M，pH 7.4）。

试剂准备①检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。

谷氨酰胺合成酶（GS）1、培养条件：将菌株转接到斜面培养基上，在30℃下培养3 d，再从种子培养基接种到产酶培养基上，摇床培养条件为28℃下培养36 h，液体培养摇床的转速为160 r/min。

2、无细胞抽提液的制备（1）菌体收集。

菌株在摇床培养36 h，在转速8 000 r/min 下离心20 min，以质量分数为1%的KCl溶液洗涤2次，得到湿菌体，放入-20℃冰箱中保存，备用。

（2）超声波破碎。

融化冻存的菌体，加入3倍体积的浓度为0.05 mol/L 咪唑-HC1缓冲液(pH 值7.0，含浓度2 mmol/L的DTT，用于保护酶蛋白的二硫键，免受超声波的破坏；含浓度2 mmol/L 的Mg 2+，用于稳定酶活力），制成菌悬液，用超声波破碎器于冰浴中在功率400 W，工作1 s，间歇3 s 条件下处理20 min。

然后在温度4℃，转速8 000 r/min 下离心30 min，上清部分即为无细胞抽提液。

3、酶活测定[1]：反应总体积为3 mL，1.6 mL的反应混合液（pH 值7.0）0.1 mol/L的Tris- HCl 80mmol/L的Mg 2+20 mmol/L的谷氨酸钠盐20 mmol/L的半胱氨酸2 mmol/L的EDTA 80 mmol/L的盐酸羟胺再加入0.7 mL的浓度40 mmol/L的ATP溶液，最后加入0.7 mL的粗酶液，混匀。

于37℃下保温0.5 h。

加入显色液（含浓度0.2 mol/L的TCA，0.37 mol/L 的FeCl 3和0.6mol/L的HCl混合液）1 mL，终止反应并显色。

空白对照采用上述反应液体系，不加酶液蒸馏水补足反应体积。

在波长540 nm 处比色测定形成的γ-谷氨酰羟肟酸。

在上述条件下，1 min催化形成1μmolγ-谷氨酰羟肟酸所需要的酶量定义为1个酶活力单位，比活力为U/mg 蛋白。

A计算公式为：GS 酶活力=t⨯⨯VP式中：A———540 nm 处的吸光度；P———粗酶液中可溶性蛋白含量，mg/mL；V———反应体系中加入的粗酶液体积，mL；t ———反应时间，h。

γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（GCANA底物法）
适用范围：用于体外定量测定人血清中的γ-谷氨酰基转移酶（GGT）活性。

1.1包装规格
1.2主要组成成分
2.1 外观
试剂1为无色澄清液体，试剂2为微黄色澄清液体。

试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损。

2.2 装量
不少于瓶签标示量。

2.3 试剂空白
2.3.1 试剂空白吸光度
在410nm（400nm～420nm）处测定试剂空白吸光度，应≤0.60。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率
试剂空白吸光度变化率△A/min≤0.01。

2.4 分析灵敏度
测试151U/L的被测物时，吸光度变化率△A/min≥0.04。

2.5 线性
2.5.1在[3，1200] U/L区间内，线性相关系数r≥0.990；
2.5.2在[3，200）U/L区间内，线性绝对偏差不超过±30U/L；在[200，1200）U/L区间内，线性相对偏差不超过±15%。

2.6 精密度
2.6.1重复性
检测高、低两个浓度水平的样本，变异系数CV不大于5％。

2.6.2 批间差
随机抽取三批试剂盒对同一份样品进行重复测定，相对极差不超过10％。

2.7 准确度
待检系统与比对系统测值的相关系数r≥0.975；在[3，200）U/L区间内，绝对偏差不超过±30U/L；在[200，1200] U/L区间内，相对偏差不超过±15%。

2.8 稳定性
该产品在2℃～8℃条件下贮存有效期为12个月，取效期末的产品进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

植物植物谷氨酰胺合成酶谷氨酰胺合成酶(GS)酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。

检测范围检测范围：： 96T1 IU/L -48 IU/L使用目的使用目的：：本试剂盒用于测定植物组织，细胞上清及相关液体样本中谷氨酰胺合成酶(GS)的活性。

实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物谷氨酰胺合成酶(GS)水平。

用纯化的植物谷氨酰胺合成酶(GS)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入谷氨酰胺合成酶(GS)，再与HRP 标记的谷氨酰胺合成酶(GS)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的谷氨酰胺合成酶(GS)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中植物谷氨酰胺合成酶(GS)活性浓度。

试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品（96 IU/L ） 0.5ml ×1瓶 3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶 4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份 5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。

若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。

操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

γ- 谷氨酰基转移酶检测试剂盒（速率法）说明书[产品名称] 通用名称：γ- 谷氨酰基转移酶检测试剂盒（速率法）英文名称：γ-Glutamyl Transpeptidase Assay Kit(γ-GGT)[包装规格]2×200Tests；2×400Tests；R1:4×60ml、R2:4×15ml；R1:4×80ml、R2:4×20ml；R1:4×120ml、R2:2×60ml；R1:8×40ml、R2:2×40ml；R1:4×50ml、R2:2×25ml；R1:2×40ml、R2:2×10ml；R1:4×50ml、R2:4×50ml。

[预期用途] 用于体外定量检测人血清中的γ- 谷氨酰基转移酶的活力。

[检验原理]γ-GGTγ-L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+ 甘氨酰甘氨酸γ-L-谷氨酰甘氨酰甘氨酸+ 2-硝基-5-氨基苯甲酸[主要组成成份]由试剂R1和试剂R2组成。

试剂R1：三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液、甘氨酰甘氨酸；试剂R2：γ-L-谷氨酰-3羧基-4-硝基苯胺。

[储存条件及有效期] 试剂在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期。

有效期12个月。

开瓶后2℃～8℃可稳定30天。

备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。

[适用仪器]日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。

[样本要求]使用新鲜的血清。

不可使用已被污染的样本。

[检验方法]（1）双试剂无需配制，直接使用。

（2）试验条件：样本（S）：10 µl试剂1(R1) ：160 µl 试剂2（R2）：40 µl温度：37 ℃测定类型：速率法主波长：405 nm 副波长：505 nm 反应方向：上升方法：先将样本与R1混合，37 ℃5分钟后加入R2试剂，然后测定加入R2后1分钟至3分钟之△A/min 。

谷氨酰胺测试盒使用说明货号：BC1680规格：50T/48样产品内容：试剂一：液体1.6ml×1支，室温保存。

试剂二：液体0.6ml×1支，-20℃保存。

试剂三：液体60ml×1瓶，室温避光保存。

试剂四：液体60ml×1瓶，室温避光保存。

试剂五：谷氨酰胺标准品粉剂×3支，稀释液30ml×1支，4℃保存。

100mmol/L谷氨酰胺标准品贮备液的配置：将1支粉剂加到1ml稀释液溶解混匀。

4℃保存。

2mmol/L谷氨酰胺标准品应用液的配置：取谷氨酰胺标准品贮备液按照1:49加稀释液稀释50倍。

如：取0.04ml标准品贮备液加稀释液稀释至2ml，混匀，待测。

产品说明：谷氨酰胺Glutamine GLN是非必需氨基酸，机体许多组织含有GLN合成酶，此酶能合成GLN，但在剧烈运动、创伤、感染等应急和高分解状态下，机体对GLN的需要量大大超过了机体合成GLN的能力。

机体合成的GLN量不足，导致蛋白质合成减少，小肠粘膜萎缩等现象。

因而GLN被称为条件必需氨基酸。

实验仪器：试管、微量移液器、旋涡混匀器、37℃水浴箱（气浴箱）、可见分光光度计（630nm）适用范围：本试剂盒可测各种动物血清（浆）、组织等样本中谷氨酰胺含量。

操作过程：空白管标准管对照管双蒸水（ml）0.012mmol/L谷氨酰胺标准品应用液（ml）0.01样本（ml）0.01试剂一（ml）0.030.030.03试剂二应用液（ml）0.010.010.01混匀，37℃水浴15分钟试剂三（ml） 1.0 1.0 1.0试剂四（ml） 1.0 1.0 1.0混匀，37℃水浴15分钟，取出于630nm处，1cm光径，双蒸水调零，测各管OD值。

计算公式：1、血清（浆）中谷氨酰胺的计算：谷氨酰胺浓度（mmol/L）=（测定OD值-空白OD值）÷（标准OD值-空白OD值）×标准品浓度（2mmol/L）×样本测定前稀释倍数2、组织中谷氨酰胺的计算：谷氨酰胺浓度（mmol/g prot）=（测定OD值-空白OD值）÷（标准OD值-空白OD值）×标准品浓度（2mmol/L）×样本测定前稀释倍数÷待测样本蛋白浓度（g prot/L）。

谷氨酰胺合成酶(GS)检测试剂盒(氯化铁比色法)简介：谷氨酰胺合成酶(GS)是植物体内氨同化的关键酶之一，可以防止过多的铵离子对生物有毒性，在ATP 和Mg 2+存在下，谷氨酰胺合成酶催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，能催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，谷氨酰胺是氨的主要储存和运输形式。

Leagene 谷氨酰胺合成酶(GS)检测试剂盒(氯化铁比色法)检测原理是GS 催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，后者转化为γ-谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物，单位为μmol/(mg protein ·h)；也可间接用540nm 处吸光度的大小来表示，单位为OD/(mg protein ·h)。

该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中谷氨酰胺合成酶活性，尤其适用于植物体内谷氨酰胺合成酶的活，100T 检测试剂盒可以测定50次左右样本。

该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 离心管或试管3、 匀浆器或研钵4、 低温离心机5、 恒温箱或水浴锅操作步骤(仅供参考)：1、 准备样品：①植物样品：取植物组织清洗干净，切碎，按植物组织：GS Lysis Buffer=比例，加入预冷的GS Lysis Buffer ，冰浴情况下充分匀浆或研磨，离心20min ，留取上清，即为谷氨酰胺编号 名称TE1103 100T Storage试剂(A): GS Lysis Buffer 250ml 4℃ 试剂(B): GS Assay Buffer 250ml 4℃ 试剂(C): GS 启动剂 10ml RT 试剂(D): ATP2支 4℃试剂(F): 蛋白标准(BSA) 20mg RT 试剂(G): G250染色液 100mlRT使用说明书1份合成酶粗提液，4℃保存待用，分别用于测定和对照。

②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，-4℃保存，用于谷氨酰胺合成酶的测定。

谷氨酰胺合成酶
谷氨酰胺合成酶（英语：glutamine synthetase，GS）是一种控制氮代谢的酶。

谷氨酰胺这种氨基酸，不仅被细胞用来合成蛋白质，也是用来运输氮的。

自由的铵离子对生物有毒性，在血液中不能太多，但是一些生物过程又会产生游离的铵离子；所以就让谷氨酰胺来运输这些铵离子。

当细胞需要运输多余的铵离子的时候，就用铵离子和谷氨酸来合成谷氨酰胺，同时消耗ATP。

谷氨酰胺合成酶催化的就是这个反应。

这个反应分成两步进行，酶先让ATP和谷氨酸反应，生成γ-谷氨酰磷酸；接着铵离子上来，替换掉磷酸。

在高等植物的研究中，GS也常被定义为植物氨同化所必需的酶[3]。

人谷氨酰胺合成酶叫做hGS。

谷氨酰胺合成酶可分为三大类[4]：
GSI：分布于原核生物。

GSII：主要分布于真核生物和少量细菌，如根瘤菌和放线菌。

GSIII：目前只在少量的细菌中有发现，如脆弱类杆菌和溶纤维丁酸弧菌。

而在高等植物的种子、叶、根、根瘤和果实等器官中就分布着多种GS的同工酶，分为GS1、GS2、GSx三类[3][5]：
GS1：胞质型GS或胞液型GS，由3-5个核基因编码；主要参与种子萌发时储存氮源的转运及叶片衰老时氮源的转移再利用。

GS2：质体型GS或叶绿体型GS，由1个核基因编码；主要参与
光呼吸以及硝酸还原产生的氨的同化过程。

GSx：通常含量较少。

谷氨酰胺合成酶（GS）活性测定一、实验原理谷氨酰胺合成酶（GS）是植物体内氨同化的关键酶之一，在ATP 和Mg2+存在下，它催化植物体内谷氨酸形成谷氨酰胺。

在反应体系中，谷氨酰胺转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，进而在酸性条件下与铁形成红色的络合物，该络合物在540nm处有最大吸收峰，可用分光光度计测定。

谷氨酰胺合成酶活性可用产生的γ─谷氨酰基异羟肟酸与铁络合物的生成量来表示，单位μmol·mg﹣1protein·h﹣1。

也可间接用540nm处吸光值的大小来表示，单位A·mg﹣1protein·h﹣1。

二、实验仪器与用具冷冻离心机；分光光度计；天平；研钵；恒温水浴；剪刀；移液管（2ml、1ml）三、实验试剂（1）提取缓冲液（0.05mol/L Tris-HCl，pH8.0）。

内含2mmol/L Mg2+，2mmol/L DTT，0.4mol/L蔗糖。

称取Tris（三羟甲基氨基甲烷）1.5295g，0.1245g MgSO4·7H2O，0.1543g DTT（二硫苏糖醇）和34.25g 蔗糖，去离子水溶解后，用0.05 mol/L HCl（0.1mol/L = 1ml的36%~38%浓盐酸加入到100ml去离子水里）调至pH8.0，最后定容至250ml；（2）反应混合液A（0.1mol/L Tris-HCl缓冲，pH7.4）。

内含80mmol/L Mg2+，20mmol/L谷氨酸钠盐，20mmol/L半胱氨酸和2mmol/L EGTA。

称取3.0590g Tris，4.9795 gMgSO4·7H2O, 0.8628g谷氨酸钠盐，0.6057g半胱氨酸，0.1920gEGTA，去离子水溶解后，用0.1mol/L HCl调至pH7.4，定容至250ml；（3）反应混合液B（含盐酸羟胺，pH7.4）。

反应混合液A的成分再加入80mmol/L盐酸羟胺，pH7.4；（4）显色剂（0.2mol/L TCA, 0.37mol/L FeCl3和0.6mol/L HCl混合液）。

还原型谷胱甘肽（Glutathione Reduced,GSH）含量测定试剂盒使用说明货号:BC1170常量法（50T/48S）一、试剂盒组成：试剂Ⅰ液体1瓶50ml（4℃保存）试剂Ⅱ液体1瓶50ml（4℃保存）试剂Ⅲ液体1瓶15ml（4℃避光保存）标准品粉末1支10mg（4℃避光保存）说明书一份二、实验原理谷胱甘肽是由谷氨酸（Glu）、半胱氨酸（Cys）和甘氨酸（Gly）组成的天然三肽，是一种含巯基（—SH）的化合物，广泛存在于动物组织、植物组织、微生物和酵母中。

谷胱甘肽能和5,5’-二硫代-双-（2-硝基苯甲酸）（5,5’-dithiobis-2-nitrobenoic acid，DTNB）反应产生2-硝基-5-巯基苯甲酸和谷胱甘肽二硫化物（GSSG）。

2-硝基-5-巯基苯甲酸为黄色产物，在波长412nm处具有最大光吸收。

因此，利用分光光度计法可测定样品中谷胱甘肽的含量。

三、实验仪器分析天平、微量匀浆器（规格2ml）、低温离心机、水浴锅、移液器、可见分光光度计、1ml比色皿。

四、操作步骤1、样品的处理组织处理新鲜组织首先用PBS冲洗2次，然后称取动物组织或者植物组织0.1g。

加入用试剂Ⅰ润洗过的匀浆器中（匀浆器提前放冰上预冷）；然后加入1ml试剂Ⅰ（组织/试剂Ⅰ比例保持不变即可），迅速冰上充分研磨（使用液氮研磨效果更好）；8000rpm4℃离心10min；取上清液放置于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。

血液处理血浆：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，吸取上层血浆到另一支试管中，加入等体积的试剂Ⅰ,4℃，8000g离心10分钟,将上清移入新的试管中放置于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。

血细胞：将收集的抗凝血于4℃，600g离心10分钟，弃去上层血浆用3倍体积的PBS 清洗3次（用PBS重悬血细胞，600g离心10分钟），加入等体积试剂Ⅰ，混匀后4℃放置10分钟，8000g离心10分钟，吸取上清放于4℃待测，若暂时不能完成测试可放于-80℃保存（可保存10天）。

γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（GPNA底物法）产品技术要求beihuakangtaiγ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（GPNA底物法）适用范围：试剂盒用于体外定量检测人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。

1.1包装规格：试剂1：80ml×1；试剂2：20ml×1。

试剂1：80ml×2；试剂2：20ml×2。

试剂1：80ml×3；试剂2：20ml×3。

试剂1：80ml×4；试剂2：20ml×4。

试剂1：60ml×1；试剂2：15ml×1。

试剂1：60ml×2；试剂2：15ml×2。

试剂1：60ml×3；试剂2：15ml×3。

试剂1：60ml×4；试剂2：15ml×4。

试剂1：40ml×1；试剂2：10ml×1。

试剂1：40ml×2；试剂2：10ml×2。

试剂1：40ml×3；试剂2：10ml×3。

试剂1：40ml×4；试剂2：10ml×4。

1.2组成成份：试剂1：Tris 缓冲液100mmol/L，双甘肽100mmol/L；试剂2：谷氨酰-3羧基-对硝基苯胺6mmol/L。

2.1 外观：均为澄清溶液，外包装完整。

2.2 净含量：不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：A≤0.7（波长405nm，光径10mm）。

2.3.2试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.005（波长405nm，光径10mm）。

2.4 分析灵敏度：浓度为50U/L时,吸光度变化率△A/min 在0.01～0.2范围内。

2.5 线性区间2.5.1线性相关系数：[10，450]U/L范围内，线性相关系数r≥ 0.990。

2.5.2线性偏差：[10，50]U/L时，绝对偏差不超过±5U/L；（50,450]U/L时，相对偏差不超过±10%。