肾上腺素在家兔实验性肺水肿形成过程中的作用
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机能学实验设计大纲
实验名称:肾上腺素在家兔实验性肺水肿形成过程中的作用
课题来源:自选
设计班级:
设计人员:
设计日期:
指导老师:
实验专业设计,实验统计设计,实验方法设计,可行性分析,预期结果,实验设计工作时间安排)。
(一)实验设计目标,拟解决的关键问题
设计目标:实验组动物在大量静脉输入生理盐水的基础上,分别加输0.15~O.45mg/kg的肾上腺素,观察动物血压、呼吸状况、血气分析、肺系数和病理改变等指标的变化,了解肾上腺素在家兔实验性肺水肿形成过程中的作用。
拟解决的关键问题:家兔实验性肺水肿模型的制备。
(二)实验设计
1、实验动物设计
我们选用家兔作为实验动物,有以下几点理由:
1)、家兔易得到,容易饲养,在科研工作中被广泛利用。
2)、家兔的静总动脉较大易插管,耳缘静脉注射也较简单容易。
3)、家兔肺相对较大,易于得到样品,能在称重过程中减少实验误差。
2、实验专业设计
选用家兔作为实验动物,按照家兔颈总动脉插管的方法插管并与压力换能器和BL-420生物信号采集处理系统相连做好准备。
并分别给予不同浓度的肾上腺素,观察对实验性肺水肿的作用,观察动物血压、呼吸状况、血气分析、肺系数和病理改变等指标的变化。
3、实验统计设计
实验统计设计中应始终贯彻随机、对照、重复三大原则。
(1)随机:选正常成年健康体重相近的家兔10只,雌雄不拘,体重2.0~2.6kg,随机分为5组,其中4组为实验组,1组为空白对照。
(2)对照:本组实验做了空白对照和实验对照,在前面的专业设计里已经提及。
(3)重复:本实验采用的是每实验小组有2只家兔,具有一定的重复性。
(4)统计数据收集:本实验搜集计量资料,初步确定对各组实验数据的比较分为实验值和基础值比较。
表1 实验数据收集记录表
组别肺系数 PaO2(mmHg) PaCo2(mmHg) SaO2(%)
实验前肺水肿实验前肺水肿实验前肺水肿
A 组
B1组
B2组
B3组
B4组
(5)统计数据分析
本实验采用计量资料来测定各种指标的数值,所有数据均采用平均数±标准差(±s)表示,五组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析,组间两两比较行q 检验,B1、B2、B3、B4组模型形成时间行两样本比较t检验,均以0.05作为显著性检验水准。
四组间实验数据比较行完全随机单因素方差分析,如各组肺系数总体均值的比较,其方法如下:
(1)建立检验假设
μ=2μ=3μ=μ4(各组肺系数总体均值相等)。
H0:1
μ、2μ、3μ、μ4不等或不全相等,α=0.05。
H1:1
(2)计算统计量
利用统计学专业软件SPSS做One-way ANOVA 。
( 3 ) 查F值表,确定P值,得出结论。
B1、B2、B3、B4组模型形成时间行两样本比较t检验,如B1与B2组之间模型形成时间的比较,其方法如下:
(1)建立检验假设
μ=2μ(两组肺模型形成时间总体均值相等)。
H0:1
μ、2μ不等或不全相等,α=0.05。
H1:1
(2)计算统计量
X=(X1+X2+X3+……+Xn)/n
µ=∑(Xi-X)2/(n-1) t=(x-u)/Sx
( 3 ) 查t值表,确定P值,得出结论。
4、实验方法设计
(1)随机抽样:随机选10只正常的家兔,并分别编号,再随机平分成5组,并称重。
(2)实验分组:分5组,分别为A组、B1B2B3B4组
(3)实验手术:AB组同时取兔,称重(婴儿秤)后固定于兔台上。
1)术前准备;选择合适的动,静脉插管,静脉插管与输液装置连接好。
然后将压力换能器及动脉插管内充满抗凝剂(肝素加0.9%氯化钠注射液),并排尽空气,然后将压力换能器与BL-420生物信号采集处理系统连接好。
实验组家兔耳缘静脉注射3%戊巴比妥钠溶液1ml/kg,麻醉后,采用五点法固定在兔台上,剪去颈部长毛。
切开颈部皮肤(轻点不要损伤气管和血管),呈钝形分离出一侧颈总动脉和另一侧的颈外静脉(分离干净)。
2)动脉插管;动脉插管:将分离好的颈总动脉在远心端结扎,近心端夹闭血管。
用眼科剪做“V”形切口,插入动脉插管并固定好,松开动脉夹。
连接张力换能器描记动物呼吸。
3)肺水肿模型复制;观察动物正常情况后,按100ml/kg的用量,将输液速度调整为180~200滴/min,开始输液。
4)肾上腺素在家兔实验性肺水肿形成过程中的作用;至最后50ml时,4个实验组分别按0.15mg/kg、0.25mg/kg、0.30mg/kg和0.45mg/kg的不同剂量加人肾上腺素,按120滴/min的速度一并输人;随后继续按2O0滴/分的滴速输人生理盐水 10min。
输液期间每3min观察记录一次动物呼吸、血压、心率情况,注意有无湿性啰音及粉红色泡沫痰自气管插管涌出。
(4)处理措施:于输液前和输液完毕后分别取动脉血做血气分析。
空气栓塞法处死动物,开胸取肺、计算肺系数。
(5)实验数据:
心率:用BL-410生物信号采集处理系统记录各组家兔实验前后的心率。
呼吸频率:用BL-410生物信号采集处理系统记录各组家兔实验前后的呼吸频率。
血压:用BL-410生物信号采集处理系统记录各组家兔实验前后的血压。
肺系数:实验完成后取出肺,测量肺系数。
(三)可行性分析:
1、家兔易得到,容易饲养,在科研工作中被广泛利用。
2、实验性肺水肿的动物模型易容易获得,实验条件控制。
3、手术器材和设备均为实验室常用,手术方法我们也相对熟练。
(四)预期效果:
实验组动物均发生不同程度的肺水肿。
实验过程中动物呈现血压先升高后下降及心率减慢的现象,并出现呼吸抑制、缺氧和呼吸性酸中毒的表现。
(五)实验设计工作时间安排:
1、共计0.5D 完成实验动物模型制备和取材。
2、共计0.5D完成材料重量分析
3、总共实验在1D完成。
三、完成实验的条件
1、仪器设备情况:本实验采用机能实验室常用设备,具体如下:兔台,常用手术器械,动脉夹,动脉插管,静脉插管,2ml,5ml注射器,输液器,压力换能器,BL-420生物信号采集处理系统,婴儿秤。
2、实验动物情况:健康的家兔10只。
3、药品试剂来源:15%的戊巴比妥、肝素、肾上腺素,生理盐水。