病理切片的特殊染色方法
1.Van Gieson苦味酸和酸性品红法
【染色方法】
（1）中性甲醛固定组织，石蜡切片；
（2）组织切片脱蜡至水；
（3）用Van Gieson液染1～5分钟；
（4）倾去染液，直接用95％乙醇分化和脱水；
（5）无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
【结果】胶原纤维呈红色，肌纤维、胞质及红细胞呈黄色。
2.Masson氏结缔组织三合染色法
【染色方法】
（1）石蜡切片厚6μm，脱蜡至水；
（2）0.2％冰醋酸水溶液浸泡片刻；
（3）Masson氏染色液中5分钟或更长时间；
（4）0.2％冰醋酸水溶液浸泡片刻；
（5）5％磷钨酸水溶液2～3分钟，再入0.2％冰醋酸水溶液浸洗
（6）投入淡绿、冰醋酸水溶液浸染5分钟或更长时间；
（7）再入0.2％冰醋酸水溶液浸洗片刻；
（8）脱水、透明和封固。
【结果】胞浆和神经胶质纤维染红色，胶原纤维染绿色。
【染色方法】
（1）石蜡切片、脱蜡至水；
（2）0.25％高锰酸钾液3分钟；
（3）蒸馏水洗2次；
（4）1％草酸漂白即可；
（5）蒸馏水洗2次；
（6）2.5％铁明矾水溶液媒染5～10分钟，蒸馏水洗多次；
（7）二氨氢氧化银浸染1分钟，蒸馏水洗3次；
（8）10％甲醛液还原2分钟，蒸馏水洗3次；
（9）0.2％氯化金液调色1～2分钟，蒸馏水洗3次；
（10）5％硫代硫酸钠固定5分钟；
（11）蒸馏水洗，需要时复染；
（12）水洗、脱水、透明和封固。
【结果】网状维呈黑色，其他组织呈复染的颜色。
病理切片的特殊染色方法
显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法
【染色方法】
（1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水；
（2）切片入70％乙醇中洗2分钟；
（3）将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.5～2小时；
病理切片的结果分析方法
HE染色：又称苏木素-伊红染色法，其中苏木素是Hematoxylin，简称H，伊红是Eosin，简称E，这是是普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围广泛，对组织细胞的各种成分都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。
检验原理：
* 苏木素是碱性染料，蓝紫色，可以使细胞核等着色。被苏木素着色的结构本身为酸性，具有嗜碱性(Basophilic)。
* 伊红是酸性染料，粉红色。可以将大多数细胞的细胞质染成红色。被伊红着色的结构本身为碱性，具有嗜酸性(Acidophilic)。
* 不易被苏木素和伊红着色的结构具有嗜中性(Neutrophilic)。
结果：细胞核呈蓝色，细胞质，肌纤维，胶原纤维和红细胞呈不同程度的红色。钙盐和细菌可呈蓝色或紫蓝色。
Masson三色染色：主要用于胶原纤维和肌纤维的鉴别染色。Masson染色是最为常用的结缔组织染色法，此法多用于观察病变组织中纤维结缔组织的增生和分布，纤维性肿瘤与肌源性肿瘤的鉴别。对酒精性肝硬化/坏死后性肝硬化及各型肝炎导致的小叶汇管区纤维组织增生程度的差别具有重要价值。
Masson染色在肾穿刺活检中可以用于判别在肾小球毛细血管网的系膜氏和上皮下是否存在嗜复红蛋白的沉积，对于肾脏疾病的病理诊断有重要意义。
检验原理：
利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子大小和组织的渗透性有关。根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成份显示出来
结果：细胞核呈黑色，肌纤维呈红色，胶原纤维呈亮绿色。
抗酸染色法: acid－fast staining method 1882年由埃利希（F．Ehrlich）首创并经F．齐尔（
Ziehl）改进而创造出的细菌染色法。其中最具代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森（Ziehl－
２００７年１１月第ｌ４卷第３２期（旬刊）ＪＰＭＴ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ．２００７，Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．３２（Ｉｓｓｕｅｄ Ｅｖｅｒｙ Ｔｅｎ
做好病理组织切片的方法
吴计生
（运城市中心医院，山西运城０４４０００）
［关键词］组织切片；染色；方法
［中图分类号］Ｒ４４６．８ ［文献标识码］Ｂ［文章编号］１６７１－５０９８（２００７）３２－４４３３－０２
Ｇｏｏｄ Ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｍａｋｉｎｇ Ｐｏｔｈｏｌｏｇｉｃ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｅｃｔｉｏｎ
Ｗｕ Ｊｉ—ｓｈｅｎｇ
（Ｔｈｅ Ｃｅｎｔｒａｌ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｙｕｎｃｈｅｎｇ，Ｙｕｎｃｈｅｎｇ，Ｓｈａｎｘｉ ０４４０００，Ｃｈｉｎａ） Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｅｃｉｏｎ；Ｄｙｅ；Ｍｅｔｈｏｄ
病理技术是病理学的重要组成部分，并广泛应用于临床 和科研工作中。病理制片的质量直接影响着病理诊断的准确
性，为保证病理医师的诊断准确，结合２０余年实际工作经验， 谈谈做好病理组织切片的体会。 １固定要及时 标本无论大小，离体后均应及时固定，这是切片成功的关 键。标本固定的好坏直接影响制片质量的各个环节，因此要
及时固定，防止组织发生干缩变硬或自溶、腐败。固定时间因 组织大小而定，一般不超过２４ ｈ。由于淋巴结的包膜阻碍固
定液的渗透，所以淋巴结无论大小都要切开固定。 ２取材要规范 取材合格与否将直接影响组织的脱水、透明、浸蜡、切片 等一系列环节。大标本正确的取材应是多部位上、下、左、右、
中间及瘤组织与正常组织的交界处均应取材，所取组织块应 该大小适中，厚薄一致，形状规整。根据观察目的，皮肤要有 表皮和真皮，肠壁和胃壁要有黏膜和肌层，肾脏要有皮质和髓 质；空腔脏器应剪开，平铺取材。骨组织或钙化组织脱钙要充
分，只有组织变软后才可取材。脱钙后的组织要放入２％氢 氧化钠溶液１０ ｍｉｎ除酸处理，并流水冲洗ｌ０ ｍｉｎ１］Ｊ。 ３脱水试剂定期更换 无论脱水机或人工进行组织脱水使用的固定液、乙醇、二
医院病理科病理切片操作规范
病理切片是病理科诊断疾病的重要步骤之一，因此，对于病理切片操作应该遵循以下规范：
2.标本固定：对于切片需要的组织标本，需要及时进行固定以防止组织脱落和变形。通常使用10%的中性缓冲福尔马林进行固定，固定时间应根据样本大小和类型进行调整，以确保组织固定充分。
3.标本处理：接受标本后，需要进行适当的标本处理。对于组织标本，应进行组织去水、蜡浸渍等处理，确保标本组织的切片质量。对于细胞标本，应进行细胞离解和离心等处理。
4.病理切片制作：对于组织标本，制作病理切片通常采用甩片法或旋片法。在制作切片之前，需要使用切片机对刀片进行清洗和消毒，并根据需要调整切片机的切片厚度。确保制作的病理切片的厚度均匀一致。
5.切片染色：病理切片制作完成后，需要进行染色。常用的染色方法包括苏木精-伊红染色、血液学染色、免疫组化染色等。染色时，需要严格按照染色试剂的使用说明进行操作，确保染色的质量和结果的准确性。
6.切片质量控制：在病理切片操作过程中，需要进行质量控制以确保切片的质量。包括检查切片的厚度、颜色、染色效果等。对于染色不好或有问题的切片，需要重新制作。
7.切片保存和归档：制作完的病理切片需要进行保存和归档。切片应放置在干燥、阴凉而通风良好的地方，避免切片暴露在阳光下，防止切片变形和褪色。 8.切片质量评估：对于制作的病理切片进行质量评估，包括切片的清晰度、染色的均匀性、细胞结构的完整性等。评估结果可以作为诊断和治疗的参考。
总结：病理切片操作规范是病理科工作中非常重要的一环，合理规范的操作可以保证病理切片的质量，提高疾病的诊断准确性。因此，医院病理科应该建立标本接受和登记制度，对标本进行适当处理，制作和染色病理切片，对切片进行评估和保存。同时，医院病理科还应定期进行切片质量控制，提高切片的质量。
