常规病理切片HE染色一般规程
★常规病理送检注意事项★
1. 手术中切取的组织标本，应立即投入固定液中固定(手术室应备有标本瓶和固定液)。一般以10％中性福马林为固定液。固定液的量不得少于标本体积的5～10倍。标本瓶口宜大，便于标本固定后取出。标本与瓶壁、瓶底接触影响固定者，以脱脂棉衬垫；浮于液面者，以脱脂棉覆盖。如为传染性标本，应注意勿污染容器外面。
2. 标本容器上，应贴有患者姓名或送检单联号的标签。如同一患者同时取有数种组织，或同一组织由不同部位取出，应分装不同容器，并分别注明。不同患者的标本，不得放在同一容器内。
3．采取标本时，注意勿用有齿镊或钳夹取，勿挤压，以免发生人为的变形，影响诊断。标本送检前勿剖开，应保持原形全部送检。必须剖开时，最好邀请病理医师到场，否则应在病理检查申请单内详细描写标本剖开前后情况。送检的组织不可太小，以免影响诊断。
4．标本如为整个器官或其大部，或体积较大，可不固定，但应尽早送病理科处理(外地或远途标本，可参照第三节的方法处理后送检)。
5．各种体液、穿刺液细胞学检查标本，应立即送检。若不能立即送检，应随即离心沉淀，将沉渣做成均匀的涂片2～3张，及时放入乙醚和95％乙醇等量混合液或95％乙醇中固定，然后连同固定液，或在涂片表面涂以甘油后送检。阴道排出物、鼻咽或其他分泌物、穿刺物涂片，应于涂片制成后即放入上述固定液中固定，然后送检。
6. 送检标本时，应逐项详细填写病理检查申请单，字迹要清楚。临床科有特殊要求时，应在申请单上注明或事先联系。
★组织的脱水透明和浸蜡★
(一)工作中注意事项
1．标本未经充分固定，不得进入脱水处理的程序。
2. 在处理全过程中，每l标本均应附有编号。随时注意防止标本间相互混杂。细小标本应用拭镜纸包裹进行脱水，以免遗失。 3．标本多的单位，可根据标本的性质、大小、分类分批进行脱水，以便按组织的特点安排时间，保证质量，常规标本脱水和透明均应在室温进行。
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组织病理切片的制作流程
组织病理切片的制作流程 1． 取材 组织取材的方法是制作切片的一个重要程序， 根据教学、 科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、 活检标本、 尸检标本） 或动物， 并确定取材的部位和方法。
取材者需要掌握解剖学、 组织学、 病理学的基本理论知识， 还要掌握实际操作技术， 每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，
不能任意切取组织作为制片材料， 不然， 无法达到教学、 科研和临床诊断的目的， 具体要求如下：
(1) 材料新鲜：
取材组织愈新鲜愈好， 人体组织一般在离体后， 动物组织在处死后迅速固定， 以保证原有的形态学结构。
(2) 组织块的大小：
所取组织块较理想的体积为 2. 0cm 2. 0cm 0. 3cm， 以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部， 但根据制片材料和目的不同， 组织块的较理想体积也不同， 如制作病理外检、 科研切片， 其组织块可以薄取 0. 1～0. 2cm 即可， 这样可以缩短固定脱水透明的时间， 若制作教学切片厚取 0. 3 ～0. 5cm， 这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3) 勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利， 切割时不可来回锉动。 夹取组织时切勿过紧， 以免因挤压而使组织、 细胞变形。
(4) 规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材， 病理标本取材按照各病变部位、 性质的不同， 根据要求规范化取材。
(5) 选好组织块的切面: 根据各器官的组织结构， 决定其切面的走向。
1 组织病理切片的制作流程
1． 取材
组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下：
(1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。
(2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。
(3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。
(4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。
(5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。
(6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。
2．固定
(1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 2 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。
1 病理组织切片的制作
卢文丽 吴中华 方肇勤
（2007/01/04）
一、器材（按一小组，约4-6人）
眼科镊：直无勾10cm 、弯无勾10cm各5把；
组织镊；12.5cm 2把；
眼科剪：直尖10cm 4把；
解剖剪：cr/14，4把；
普通双面刀片：10片/盒×1盒；
染色架：5个；
染色缸：1000ml，14-15个；
切片盒：50片/盒×3盒或100片/盒×2盒；
37度、60度恒温箱：各1个；
磨砂载玻片：50片/盒×3盒；
盖玻片：100片/盒×2盒；
广口瓶：30ml或60ml×20个；
滴管及配套吸头：4个；
玻璃漏斗：φ90 3个；玻璃搅棒：2支
普通粗孔大张滤纸：20张；
φ90mm玻璃培养皿：4个；
中号普通毛笔：2支；
烧杯：500ml 、1000ml 各1个；
量筒：100ml、500 ml、1000 ml各1个；
组织切片机及配套刀片：4台；
摊片用水浴锅：2台；
生物切片石蜡：5盒，熔点：56-58℃；
电子天平：1台；
酒精灯：150ml，4台；
脱水篮：1-2个；
打火机、标签纸、铅笔各一，卷筒纸、乳胶手套、口罩、医用纱布足量。
二．试剂
苦味酸（2.4.6-三硝基苯酚）：30g/瓶×1瓶；
37%~40%福尔马林液：500ml/瓶×1瓶；
冰醋酸：AR，500ml/瓶×1瓶；
无水乙醇：AR，500ml/瓶×10瓶；
二甲苯：AR，500ml/瓶×10瓶；
hematoxylin苏木色素（苏木精）：10g/瓶×1瓶；
酸性品红（曙红丫水溶）：25g/瓶×1瓶；
碘酸钠：AR，500g/瓶×1瓶；柠檬酸：AR，500g/瓶×1瓶; 水合氯醛：AR，250g/瓶×1瓶;
铵矾（ALNH4(SO4)2·12H2O）或钾矾（ALK(SO4)2·12H2O）：500g/瓶×1瓶
蛋白甘油（甘油/鸡蛋清=1/1）：50ml
