２６ Ｓｐｅｃｉａｌ Ｗｉｌｄ Ｅｃｏｎｏｍｉｃ Ａｎｉｍａｌ ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｒｅｓｅａｒｃｈ 特产研究
ＤＯＩ：１ ０．１ ６７２０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｔｃｙｊ．２０１ ７．０１．００６
酸性染料比色法测定福王草中总生物碱的含量
李美娟，冯琳琳，王成，赵春芳※
（吉林大学药学院，长春１３００２１）
摘要：对福王草中生物碱含量进行测定，为其质量评价提供依据。以盐酸小檗碱为对照品，采用酸性染料比色法测定福王草总生 物碱含量。盐酸小檗碱在２０．２０ｐｇ／ｍＬ￣１２１．２ ｇ／ｍＬ范围有良好的线性关系（严Ｏ．９９９６），加样回收率为９９．６６％，ＲＳＤ＝ｔ．４３％。该方 法简便、准确，可用于福王草中总生物碱部位的含量测定。 关键词：酸性染料比色法；福王草；总生物碱；含量测定 中图分类号：Ｒ２８４．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—４７２１（２０１７）０１—００２６—０３
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｏｔａｌ Ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｉｎ Ｐｒｅｎａｎｔｈｅｓ ｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉ Ｍａｘｉｍ
ｂｙ Ａｃｉｄ Ｄｙｅ Ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ
ＬＩ Ｍｅｉ・ｊｕａｎ，ＦＥＮＧ Ｌｉｎ－ｌｉｎ，ＷＡＮＧ Ｃｈｅｎｇ，ＺＨＡＯ Ｃｈｕｎ—ｆａｎｇ※
（Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＰｈａｒｍａｃｙ，Ｊｉｌｉｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００２１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｑｕａｎｔｉｔｙ ｏｆ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｉｎ Ｐｒｅｎａｎｔｈｅｓ ｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉ Ｍａｘｉｍ，ｗｈｉｃｈ Ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ．Ｂｅｒ－ ｂｅｆｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｗａｓ ｕｓｅｄ ａｓ ａ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ．Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔｓ ｏｆｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｂｙ ａｃｉｄ ｄｙｅ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ．Ｔｈｅ ｓｔａｎ— ｄａｒｄｃｕｒｖｅｓｏｆｂｅｒｂｅｒｉｎｅｈｙｄｒｏｅｈｌｏｒｉｄｅｗａｓｌｉｎｅａｒｉｎｔｈｅ ｒａｎｇｅｏｆ２０．２０ｏｇ／ｍＬ－１２１．２１ａｇ／ｍＬ（ｒ＝０．９９９６），ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙｗａｓ９９．６６％， ａｎｄ ＲＳＤ ｗａｓ １．４３％．Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｉｎ Ｐ ｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉ Ｍａｘｉｍ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ａｃｉｄｄｙｅ ｃｏｌｏｆｉｍｅｔｒｙ；ＰｒｅｎａｎｔｈｅｓｔａｔａｒｉｎｏｗｉｉＭａｘｉｍ．；ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ：ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
目录
摘要、关键字........................................................ 1
1.前言 ............................................................. 2
2.理论部分......................................... 错误！未定义书签。
2.1棉织物的拼色实验 ............................ 错误！未定义书签。
2.1.1直接染料的定义和分类 ................. 错误！未定义书签。
2.1.2直接染料的染色性能 ................... 错误！未定义书签。
2.1.3直接染料染棉原理....................................... 4
2.1.4拼色实验介绍 .......................................... 5
2.2.羊毛的仿色实验.............................................. 5
2.2.1羊毛纤维的结构 5
2.2.2毛织物染色原理 6
2.2.3仿色实验介绍 6
2.2.4仿色的目的 6
3.实验部分.......................................................... 7
江西中医学院学报２ ０ １ ０年８月第２ ２卷第４期 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＪｆＡＮＧＸＩ ＵＮｌｖＥＲｓｌＴＹ ｏＦ ＴＣＭ２０１０ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．４
４．１７６～１６．６８ ｍｌ，ｒ＝０．９９９７，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ １００．１％，ＲＳＤ １．８４％，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｃｏｐｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｓ ０．１１２ ｇ／ｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｈｉｇｈｌｙ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ
ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｉｎ Ｃｏｐｔｉｓ ｅｈｉｎｅｎｓｉｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｃｉｄｉｃ ｄｙｅ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ；Ｃｏｐｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ；ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ 黄连为毛茛科植物黄连（Ｃｏｐｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ 中总生物碱含量的方法，灵敏度高，操作简便，重现
Ｆｒａｎｃｈ．）、三角叶黄连（Ｃｏｐｔｉｓ ｄｅｌｔｏｉｄｅａ Ｃ．Ｙ．Ｃｈｅｎｇ 性好，更适合于总生物碱的含量测定。
ｅｔ Ｈｓｉａｏ）或云连（Ｃｏｐｔｉｓ ｔｅｅｔａ Ｗａｌ１．）的干燥根茎，具 １仪器与试药
有清热燥湿，泻火解毒的功效…，其主要含有小檗 １．１ 仪器ｕＶ一２５５０型紫外可见分光光度计（日本
碱（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ）、巴马汀（ｐａｌｍａｔｉｎｅ）、黄连碱（ｃｏｐ一 岛津公司），ｐＨＳ一３Ｃ型ｐＨ计（上海虹益仪器仪表有
ｔｉｓｉｎｅ）、表小檗碱（ｅｐｉｂｅｒｂｅｒｉｎｅ）和药根碱（ｊａｔｒｏｒｒｈｉｚ． 限公司），ＴＧ３２Ａ十万分之一天平（北京赛多利斯仪
ｉｎｅ）、甲基黄连碱（ｗｏｒｅｎｉｎ）等多种生物碱 ，具有 器系统有限公司），旋转蒸发仪（厦门精艺兴业科技
ｉ ｉ 酸性染料比色法测定百合中总生物碱的含量 杜萌－刘璇 丁安伟 陈彦 （１．南京中医药大学、江苏省方剂高技术研究重点实验室，江苏南京２１００４６； ２．江苏省中医药研究院，江苏南京２１００２８） 摘 要 目的：建立百合中总生物碱的含量测定方法。方法：采用酸性染料比色法测定总生物碱含量。以秋水仙 缄为对照品，溴甲酚绿为酸性染料，在ｐＨ３．６缓冲溶液条件下，用氯仿萃取，于４１４ｎｍ波长处测定其吸光度，并测定 了４个产区的百合中总生物碱的含量。结果：秋水仙碱在１２０—２００ｔｘｇ／ｍＬ范围内与吸光度呈良好的线性关系，回归方 程为Ａ＝０．００１９Ｃ＋０．００１４（ｒ＝０．９９９７）；秋水仙碱的平均加样回收率为（１０１．８±１．５９）％，ＲＳＤ＝１．５７％（ｎ＝６）。结论：所建立 的总生物碱测定方法简便、准确，为百合质量的控制提供实验依据。 关键词 百合总生物碱酸性染料比色法 中图分类号 Ｒ２８２．７ｌ 文献标识码 Ａ 文章编号 １６７２—３９７Ｘ（２０１２）０１—００６２—０２ 中药百合为百合科植物卷丹（Ｌｉｌｉｕｍ ｌａｎｃｉｆｏｌｉｕｍ Ｔｈｕｎｂ．）、 百合（Ｌｉｌｉｕｍ ｂｒｏｗｎｉｉ Ｆ．Ｅ．Ｂｒｏｗｎｉｉ ｖａｒ．ｖｉｒｉｄｕｌｕｍ Ｂａｋｅｒ）或细 叶百合（Ｌｉｌｉｕｍ ｐｕｍｉｌｕｍ ＤＣ．）的干燥肉质鳞叶，味甘、寒，归心、 肺经，具有养阴润肺、清心安神之功效田。现代医药学研究证实， 百合除了具有镇咳、平喘、祛痰、助眠、抗疲劳、耐缺氧等功效 外，还具有较好的抗肿瘤活性，其抗肿瘤的主要活性成分为生 物碱类成分目，包括秋水仙碱，以及与秋水仙碱结构相似的卓酚 酮类生物碱。但目前尚未有其含量测定的研究，因此有必要对 百合中所含的总生物碱进行含量测定。本研究采用酸性染料比 色法，以秋水仙碱为对照品．建立了百合中主要成分总生物碱 的含量测定方法，并对江苏宜兴、甘肃兰州、浙江湖州、湖南龙 山四大产区百合中的总生物碱进行了含量测定，为更好地控制 百合质量，使其充分发挥抗肿瘤药效提供实验依据。 １仪器、试剂与材料 ＵＶ－２８０２型紫外可见分光光度计（龙尼柯上海仪器有限公 司）：ＭＥＴＩ＇ＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯ分析天平、十万分之一分析天平、 基金项目：江苏省中医药领军人才项目（ＬＪ２００９１３） ＭＥＴｒＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯ ３２０ ｐＨ计（ＭＥＴｒＬＥＲ ＴＯＬＥＤＯ分析仪器 有限公司）；ＨＨ－－６数显恒温水浴锅（金坛市双捷实验仪器厂）。 秋水仙碱对照品（纯度＞９９％，购于中国药品生物制品检 定所）；百合药材，均购于安徽亳州药材有限公司（产地：湖南 龙山２０１１０５２３，甘肃兰州２０１１０５２３，经鉴定为百合科植物百 合：江苏宜兴２０１００８０９．浙江湖州２０１１０５２３，经鉴定为为百 合科植物卷丹），其余试剂均为分析纯。 醋酸一醋酸钠缓冲液（ｐＨ３．６）：取醋酸钠５．１ｇ，加冰醋酸 ２０ｍＬ，再加水稀释至２５０ｍＬ，即得【ｌＪ。 ０．０５％溴甲酚绿酸性染料的配制：精密称取溴甲酚绿 ０．０５ｇ，加ｐＨ３．６醋酸一醋酸钠溶液溶解至１００ｍＬ，摇匀，即得。 ２方法与结果 ２．１ 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的秋水仙碱 对照品１０ｍｇ。置于５０ｍＬ容量瓶中，用ｐＨ ３．６醋酸一醋酸钠 缓冲液溶解，并稀释定容至刻度，摇匀，即得浓度为０．２ｍｇ／ｍＬ 的秋水仙碱对照液。 按：此患者经过手术、化疗后正气受损，脏腑功能减弱， 气血不足。内分泌治疗亦有扰乱脏腑功能，使人体阴阳平衡 紊乱的弊端。气血运行失常则易出现气滞血瘀，气滞痰阻，气 郁化火成毒，导致邪气壅聚，正气耗损，在此种正消邪盛的局 面下，肿瘤易复发、转移，非常有必要配合中医药治疗，扶正 祛邪以改善患者的临床症状及预后转归。方中以太子参、炙 黄芪、茯苓、炒白术、灵芝、炒苡仁健脾益气，熟地、山萸肉、当 归养血柔肝，鳖甲、穿山甲攻坚散结，全蝎、蜈蚣以毒攻毒、消 肿止痛。 ５参考文献 『１１孙飞，张楚，虞萍，等．中医药在乳腺癌综合疗法中的地位评价 中华中医药杂志，２０１０，２５（８）：１２７５ 囵 ！！璺苎竺堂苎 中压；ｉ５ ［２］２ 陈娜，武彪．乳腺癌易感基因的研究进展．江西医药，２０１０，４５ （５）：４９６ 【３】刘华，唐琼．ｑ－药灵芝药理作用研究．中国医药导报，２００９，６（５）： １５３ 【４】胡少华，肖小年，易醒，等．薏苡仁的研究新进展．时珍国医国药， ２００９，２０（５）：１０５９ 第一作者：彭海燕（１９７０一），医学博士，副教授，副主任中 医师．中医内科学专业。 通讯作者：章永红，ｚｎｔｇ２００９＠１６３．ｅｏｍ 收稿日期：２０１１－０９—０６ 编辑：韦 杭
