③酚试剂法:灵敏度高达双缩脲法的100倍,有利于检出微量蛋白质, 较合适于单一蛋白质检测。
④紫外分光光度法:利用蛋白质在280nm处有吸收峰的特点,常用 于测定较纯的酶和免疫球蛋白。
⑤染料结合法:常用氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯三酚红钼 等,前三者主要用于蛋白电泳,邻苯三酚红钼可用于尿液和脑脊 液中蛋白质的测定,简便快速、灵敏,但不同蛋白质结合力不一 样,且试剂对比色杯有吸附作用。
(3).A/G比值 正常为1.5-2.5/1,ALB减少和/或球蛋白升高, A/G降低,严 重者A/G﹤1.0,称为A/G比值 倒置。
(4).先天性ALB缺乏症:ALB合成障碍,极少见。
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4.溴甲酚绿法测定ALB 注意事项
(1).BCG是一种PH指示剂,变色域PH3.8(黄色)-5.4(蓝绿色),控制反应液 PH是本方法的关键。
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一 .蛋白质代谢检查 二 .糖代谢检查 三 .离子测定
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(一)TP测定:方法、原理、操作、临床意义及注意义、注意 事项
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1. TP测定方法简介: TP测定时常利用蛋白质的一些特性,如重复的肽键结构;酪氨 酸和色氨酸残基对酚试剂反应或紫外光吸收;与色素结合 的能力;沉淀后的浊度;电泳的迁移率大小等来设计蛋白质 的测定方法。经典和常见的方法分述如下:
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2.双缩脲法测定TP 方法特点
(1).双缩脲显色反应仅和蛋白质中肽键数成正比,与蛋白质种类,分子量及 氨基酸组成无明显关系,各种蛋白质显色程度基本相同,显色稳定性好,试剂 单一。
(2).双缩脲法重复性好,RCV4%,CCV3.9%;线性范围0-140g/L,干扰少,使用
单一的稳定试剂,操作简单、快速,适于手工操作及自动化分析,为TP测定的 参考方法。 (3).唯一的缺点是灵敏度较低,比酚试剂法低约100倍,但能满足临床生化 检验需要,对血清总蛋白定量较为适用;对蛋白质含量很低的其他体液如脑 脊液、胸腹水和尿液等,不是合适的定量方法。