HPLC法测定抗病毒口服液中连翘苷的含量

安捷 伦 1100 液 相 色 谱 仪； CHEM32 工 作 站； G1314A UV 检测器。连翘 苷 对 照 品 （ 中 国 药 品 生 物 制品检定所，批号 0821-9903） ，柴银口服液 （ 鲁南厚 普制药有限公司生产） 乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯 净水。 2 方法与结果 2. 1 色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充 剂； 以乙腈-水（ 30 ∶ 70 ） 为流动相； 检测波 长 277 nm； 流速 1 mL·min － 1 ； 理 论 板 数 按 连 翘 苷 峰 计 算 不 低 于3 000。 2. 2 溶液的制备 2. 2. 1 对照品溶液的制备 取连翘苷对照品适量， 精密称 定，加 甲 醇 制 成 每 1 mL 含 0. 2 mg 的 溶 液， 即得。 2. 2. 2 供试品 溶 液 的 制 备 精 密 吸 取 本 品 1 mL，
2. 9 样品测定 精密吸取对照品溶液与供试品溶 液各 10 μL，依上述色谱条件测定。结果列于表 2。 3 讨论 3. 1 色谱条件的选择 采用 2010 年版《中国药典》 第一部中连翘药材中测定连翘苷的条件测定柴银口 服液中连翘苷的 含 量，结 果 表 明，出 峰 效 果 良 好，但 出峰时间较长，经 调 整 流 动 相 比 例 乙 腈-水 （ 30 ∶ 70 ）
［关键词］ 柴银口服液； 质量控制； 连翘苷； 高效液相色谱法 ［中图分类号］ R284． 1 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903（ 2011） 16-0094-02
柴银口服液是一种治疗感冒临床常用的成药制 剂，由柴胡、金银花、黄芩、葛根等 11 味中药组成，具 有 清 热 解 毒 ，利 咽 止 咳 之 功 效 ，临 床 用 于 上 呼 吸 道 感 染外感风热症。此 制 剂 在 2009 年防控甲流期间应 用 广 泛 且 效 果 显 著 ，为 更 好 的 控 制 成 药 质 量 ，本 文 采 用高效液相法 对 其 连 翘 苷 进 行 含 量 测 定，获 得 满 意 的结果。 1 仪器与试药

HPLC法测定连翘中连翘苷含量的不确定度评价【摘要】目的：使用HPLC方法来针对连翘中连翘苷含量的不确定性进行分析，总结导致不确定因素产生的成因。

方法：结合我国官修药典相应的连翘含量测定法来规范测定过程，并且针对测量过程进行分析来找出不确定度产生的成因；结果：使用HPLC这种方法来测定连翘苷含量的不确定度大约为1%，最终确定其含量不确定度的主要源为对照品称量。

【关键词】连翘；连翘苷；含量测定；不确定度；高效液相色谱法实验室质量控制可以在很大程度上决定实验结果和测量不确定度。

通过一系列不确定因素的控制就可以找到一个测量数值的合理区间，进而让一个数值变为一个阈值范围，不免将检验结果错判，保证检测结果的有效性。

连翘花是木犀科植物的一种，在民间多作为茶类饮品，对于风热感冒、咽喉肿痛等症状的治疗有奇效。

但是目前对于连翘花中的连翘苷测定的相关文献还仍然较少，本文对连翘苷含量的测定方法进行了简要介绍，并且总结了不确定度的影响要素，希望可以给相关工作的开闸能提供一些参考。

1仪器与材料戴安Ultimate3000高效液相色谱仪(CHROMELEON工作站，紫外检测器)；METrLERAX205DR电子天平(瑞士)；RQ一300VDE型双频数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。

连翘苷对照品购自中国药品生物制品检定所(批号为110821—200508)，甲醇(色谱纯，MERCK)，水为高纯水。

连翘花药材2007年4月采自河南省林州市石板岩乡王相岩桃花谷，经李振国主任药师鉴定为木犀科植物连翘Forsythiasuspense(Thunb．)VaIll的干燥花。

二、连翘花中连翘苷的含量测定（一）色谱条件色谱柱为DIONEXC18色谱柱(DIONEXAcclaim，5Ixm，150x4．6am)，乙腈一水(25：75)为流动相，流速1．0ml／min，柱温30℃，检测波长277nm。

（二）对照品溶液制备精密称取连翘苷对照品5．14mg置25ml容量瓶中，加甲醇使溶解并定容至刻度，摇匀，，备用。

Ｐ ｈ ａ ｒ ｍ ａ ｃ ｅ ｕ ｔ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｚ ｈ ｏ ｎ ｇ ｓ ｈ ａ ｎ ５ ２ ８ ４ ５ ８ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｆ ｏ ｒ ｓ ｙ ｔ ｈ ｏ ｓ ｉ ｄ ｅ Ａ ｉ ｎ Ｓ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｌ ｉ ａ ｎ Ｏ ｒ ａ ｌ Ｓ ｏ ｌ ｕ ｔ ｉ ｏ ｎ ．
摘 要 ：目的 建立双 黄连 口服液 的连翘 酯苷 含量 测定方法 。方法 采用Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ ￣ Ｊ Ｊ 定连翘酯苷Ａ的含量 ，检测 波长２ ８ ０ ｎ ｍ； 流动相 ：甲醇． ０ ． ４ ％冰醋 酸（ ３ ０ ： ７ ０ ） ；流 速： １ ． ０ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ 。结果 连翘酯苷Ａ在 １ ． ４ － １ ５ ｇ 范围 内线性 关系 良好 。加 样 回收率 ９ ８ ． ０ １ ％，Ｒ Ｓ Ｄ ＝ Ｏ ． ８ ９ ％。结论 所用方法简便可行 ，重复性好 ，为双黄连 口服液 的质 量控 制提供 了依据 。 关键词 ：双 黄连 口服 液；连翘 酯苷Ａ；高效液相色谱法 中图分 类号 ：Ｒ９ ２ ７ ． ２ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１ ６ ７ ２ ． ９ ７ ９ Ｘ （ ２ ０ １ ３ ）０ １ ． ０ ０ ４ ９ ． ０ ２
０ ． ８ ９ ％ ５ ） ． Ｃｏ ｎ ｃ ｌ ｕ ｓ ｉ ｏ ｎ Ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｈｏ ｔ ｄ ｉ ｓ ｓ ｉ ｍｐ ｌ ｅ ｎｄ ａ ｒ ｅ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｉ ｂ ｌ ｅ ． Ｉ ｔ ｃ ａ ｎ ｂ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｏｒ ｆ ｈｅ ｔ ｑ ｕ ａ ｌ ｉ ｔ ｙ ｃ ｏ ｎ ｔ ｒ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｓ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｈ ｕ ａ ｎ ｇ ｌ ｉ ｎ ａ

ＤＥＮＧ ｉｍｉ ｇ， ＣＨＥ Ｈａ Ｌ－ ｎ Ｎ ｎ
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抗病 毒 口服 液 主要用 于 治疗 风 热感 冒 、温病 发 １ 高效液相色谱法 热 、上 呼吸道 感 染 、流感 、腮腺 炎等 病毒 感染性 疾 １１ 反 相 高效 液 相 色谱 法 ． 患 ，近 年对 其质 量 标准研 究 的文 献很 多 ，现 就抗 病 桑旭峰Ｍ用 Ｌ ＮＡ ８２色谱柱 （ ． ｍｍ ×１ ０ １ Ｕ Ｃ１ （） ４６ ５
抗 病 毒 口服 液 中连 翘 苷 含量 测 定 的报 道 较 多 ， 主要 残 留物 ，置入 １ｍＬ量 瓶 ，加 甲醇 至 刻度 ，用 ０４ ．５ 有 高 效 液 相 色谱 法 （ ＬＣ） 和 薄层 色谱 扫描 法 ｌ ＨＰ ａ ｍ微 孔滤膜过滤 。测定 抗病毒 口服 液 中连翘 苷含量 （Ｌ Ｔ ＣＳ） 中国药典 ２ ０ 。 ０ ０年版 一部 规 定 ，每 １ ｍＬ 为 ２９ ２ ．６ ａ／ ．７ ～３０ ５ ｌ ｍＬ。线性 范围 为 ０４ ～２３ｕ ， ｇ ．６ ． ｇ 抗病毒 口服液 含连翘 以连翘苷计 不得 少于 ３ｕ ， ｇ 而报 回归方程 为 Ｙ＝９ ６５ Ｘ＋ ０ ．５ 回收率为 １ ０１ ８ ．５ １ ３２ ， ０ ．％。 道文献 的实验 结果 中最低含量 为 ２９ ｇｍＬ 最 高含 ． ｌ／ ， ７ａ 量 为 ３ ． ｇｍＬ。 ００ ｕ ／