荧光法在药物分析中的应用

色谱技术在药物分析中的应用研究

色谱技术是当前药物分析领域中最为常用的分离和检测方法之一。它通过利用样品中各成分间疏水性和亲水性、分子大小、极性等物理化学性质的差异，分离出分子结构相似但性质不同的化合物，为药物分析提供了有力的手段。本文将对色谱技术在药物分析中的应用进行探讨。

一、色谱技术的类型

色谱技术包括气相色谱、液相色谱和毛细管电泳等多种类型，每种类型又有其不同的变体和操作模式。选用何种类型的色谱技术，取决于待分析样品的性质，分辨率要求和实验装置的条件等。

气相色谱（GC）是一种基于气相质谱法的分析技术，适用于挥发性或较易挥发性的有机化合物的分离和检测。其原理是将待分离样品蒸发到气态，通过不同的固定涂层或吸附剂，依据分子大小、极性等物理性质，将各组分分离出来，并通过检测曲线上的各峰的高度或面积，对成分进行定量分析。

液相色谱（HPLC）是一种基于分离柱、运动相和固定相的液相分离技术。样品自动推动通过分离柱，在分离柱中分离，吸附和解吸动力作用下，根据各组分的分子结构进行分离。相比于气相色谱，液相色谱可以分离非挥发性，极性和大分子化合物，且分离效率更高，成为药物分析领域最常用的手段之一。

毛细管电泳（CE）是一种基于电离度的离子迁移技术，适用于药物中小分子以及离子性化合物的分离和检测。其原理是将待检样品在精细毛细管内（通常直径为25-100μm）缓慢泵入，依据分子电荷和分子大小，将各组分进行分离。凭借分离效率和分离速度较快的优点，毛细管电泳技术在研究药物代谢和治疗效应中具有广阔的应用前景。

二、色谱技术在药物分析中的应用

药物分析中，色谱技术被广泛应用于药物代谢，药物毒性研究，药物治疗效应评价等方面。以下将分别介绍其应用场景及主要应用手段

（一）药物代谢学领域

在药物代谢学中，色谱技术主要应用于药物代谢通路的研究，代谢产物的鉴定和代谢动力学的研究。以液相色谱为例，通过对药物代谢产物进行比对，可以了解化合物的结改性和动力学特征，为药品的研发和调整提供依据。同时，通过色谱技术的联用，如毛细管电泳-液相质谱（CE-MS），高效液相质谱（LC-MS）等技术联用，可以更准确的识别出药物代谢产物，进一步完善药品研发过程。

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- . wordzl. 荧光光度分析法与药物分析

化材院 化工3班 姚依弟 10081224

前言

当紫外光照射到某些物质的时候，这些物质会发射出各种颜色和不同强度的光，而当紫外光停顿照射时，这种光线也随之很快地消失，这种光线称为荧光。利用这种能够反映物质特性的荧光对该物质进展定性和定量分析的方法称为荧光分析法。

荧光是分子从激发态的最低振动能级回到它原来的基态时发射的光，激发的完成是由于光的吸收。吸收与荧光密切相关，因为吸收必须先于荧光发射。由于碰撞和热的耗散常使一局部吸收能丧失，剩余荧光的能量比吸收的能量小，因此荧光在更长的波长发射。

【一】荧光分光光度法的分析方法

荧光分析的灵敏度一般都高过应用最广泛的比色法和分光光度法。比色法及分光光度法的灵敏度通常在千万分之几；而荧光分析法的灵敏度常达亿分之几，甚至有千亿分之几的。荧光分析法的另一优点是选择性高。荧光分析法还有方法快捷，重现性好，取样容易，试样需要少等优点。荧光分析法也有它的缺乏之处，主要是指它比起其它方法来说应用X围还不够广泛，因为有许多物质本身不会产生荧光。

为使荧光分析法的应用更加广泛，开展了各类荧光分析方法，如. - -.

- . wordzl. 对不发荧光的物质可通过某类化学反响使其转变为适合测定的荧光物质，对荧光较弱的物质可采取荧光增敏分析法。荧光分析法可分为直接荧光测定法和间接荧光测定法。直接测定法是利用物质自身发射的荧光进展定量测定。但是自身发荧光的药物寥寥无几，所以一般采用间接法测定。

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木兰花碱的荧光性质及其在中药分析中的应用研究

作者：曹津津 孙启瑞 李文红 宋冉冉 曹倩玉 王可 魏永巨

来源：《分析化学》2019年第06期

摘;要;研究了木兰花碱（Magnoflorine，MAG）的荧光光谱和吸收光谱特征，考察了pH值等环境因素对荧光和吸光的影响，探讨了光谱性质与分子结构的关系。木兰花碱水溶液的三维荧光图谱中呈现3个荧光峰，激发波长λex为230、275和315 nm，发射波长λem均为420

nm。随溶液pH值升高，激发光谱中的荧光峰红移并出现等荧光点，吸收光谱中的吸收峰红移并形成等色点，表明木兰花碱分子中的1个羟基发生了质子电离，用pH值-吸光法测得电离常数pKa=4.77。以L-色氨酸为参比，测得木兰花碱水溶液的荧光量子产率Y=0.19。青风藤等多种中药材的三维荧光图谱中呈现木兰花碱的特征荧光峰，λex/λem=315 nm/420 nm处的荧光峰不受共存组分的影响，且荧光强度稳定，据此建立了中药青风藤中木兰花碱的荧光分析新方法。在0.04～1.25 μg/mL范围内，体系荧光强度IF与木兰花碱浓度c呈线性关系，回归方程为：IF=6146.8c+ 24.4（R=0.999， n=11），检出限0.52 ng/mL。采用本方法测得青风藤对照药材中MAG的含量为0.63%，加标回收率为101.2%～102.7%。LC-MS/MS法测定结果为0.61%，与荧光法基本一致。本方法简便快速，结果可靠，有良好的实际应用价值。

关键词;木兰花碱; 青风藤; ;中药; ;三维荧光; ;荧光分析

1;引 言

木兰花碱（又称木兰碱，Magnoflorine，MAG，图1）属于阿朴菲类生物碱（Aporphine

alkaloids）[1]，广泛存在于防己科、马兜铃科等药用植物中[2～4]，具有抗氧化[3，5]、膜保护[6]、降血糖[7]和抗遗忘[8]等药理作用，但目前木兰花碱尚未被收录入中国药典或作为药品标准。关于药用植物和生物样品中木兰花碱的分析方法，主要包括色谱法[9，10]、毛细管电泳法[11，12]和液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）法[13]，迄今尚未见关于木兰花碱荧光性质及荧光分析方法的研究报道。

◇科技论坛◇　科技一向导　２０１３年２１期　

荧光分析法在药物分析中的应用研究进展　

葛连宝　

（奥贝泰克药物化学＜天津＞有限公司　中国　天津３００４５０）　

【摘要】对常规的荧光分析法以及新型荧光分析技术在药物分析中的应用进行评述。常用的荧光分析法有胶束增敏荧光分析法、同步荧　

光分析法、稀土荧光探针法及反相胶束增敏荧光分析法；新型荧光分析方法有化学计量学方法、荧光猝灭分析法、流动注射一荧光检测技术、荧　

光与色谱联用法。为了更好的利用荧光分析法，我们仍需要：找寻不一样的胶束体系来进一步增强药物的荧光效果；发明更简便、灵敏的稀土荧　

光探针；为更加准确、快速的检测多组分样品找出更多的联合检测技术。　

【关键词】药物分析；胶柬增敏；荧光分析法　

荧光是指物质分子吸收光子的能量后从基态变到激发态．而处在　

激发态的电子不稳定再次跃迁回基态而产生的发光现象。应用这种荧　

光性对物质样品进行定性和定量分析的方法即为荧光分析法。高灵敏　度、多选择性、信息量大等都是该法的优点。但是自身就有荧光性的物　

质比较少．另外许多有机药物荧光性差或者荧光性容易受干扰。为了　

解决这些问题已经发展了多种新型荧光分析技术．但是仍然有待改　

进　本文现报告如下：　

１．常规的荧光分析技术　

１．１胶束增敏荧光分析技术　

是一种为了提高荧光的检测性和特异性．利用溶液化学性和专属　

性荧光操纵液体表面活性剂和荧光分子的荧光分析法．有很多优点．　

如增加了灵敏度、稳定性等，而且使用方便、选择性较好。例如，胶束可　以使氟罗沙星自身的荧光性大大增强。但是使用这种技术进行分析需　

要找到适当的胶束体系．到现在为止．已经知道的胶束体系当中用得　

最多的是十二烷基硫酸钠胶束　马小丽等在不同的胶束体系中就氟比洛芬的荧光性做了研究．发　

现十二烷基硫酸钠可以增加氟比洛芬的灵敏度（在酸性介质中）。刘颖　

等的环丙沙星一Ａｌ一十二烷基磺酸钠系统．因为形成多个配合物的胶　

束．使得环丙沙星降低了分子内激活过程和荧光猝灭效应．继而增加　了荧光性。