药物分析中的荧光定量分析方法

. - -.

- . wordzl. 荧光光度分析法与药物分析

化材院 化工3班 姚依弟 10081224

前言

当紫外光照射到某些物质的时候，这些物质会发射出各种颜色和不同强度的光，而当紫外光停顿照射时，这种光线也随之很快地消失，这种光线称为荧光。利用这种能够反映物质特性的荧光对该物质进展定性和定量分析的方法称为荧光分析法。

荧光是分子从激发态的最低振动能级回到它原来的基态时发射的光，激发的完成是由于光的吸收。吸收与荧光密切相关，因为吸收必须先于荧光发射。由于碰撞和热的耗散常使一局部吸收能丧失，剩余荧光的能量比吸收的能量小，因此荧光在更长的波长发射。

【一】荧光分光光度法的分析方法

荧光分析的灵敏度一般都高过应用最广泛的比色法和分光光度法。比色法及分光光度法的灵敏度通常在千万分之几；而荧光分析法的灵敏度常达亿分之几，甚至有千亿分之几的。荧光分析法的另一优点是选择性高。荧光分析法还有方法快捷，重现性好，取样容易，试样需要少等优点。荧光分析法也有它的缺乏之处，主要是指它比起其它方法来说应用X围还不够广泛，因为有许多物质本身不会产生荧光。

为使荧光分析法的应用更加广泛，开展了各类荧光分析方法，如. - -.

- . wordzl. 对不发荧光的物质可通过某类化学反响使其转变为适合测定的荧光物质，对荧光较弱的物质可采取荧光增敏分析法。荧光分析法可分为直接荧光测定法和间接荧光测定法。直接测定法是利用物质自身发射的荧光进展定量测定。但是自身发荧光的药物寥寥无几，所以一般采用间接法测定。

现代分析方法和技术在药物分析中的应用

摘要：在目前阶段，现代分析技术变得更加科学化、高效化，其在药物分析中的作用也越来越大，可以更好地帮助药物分析过程更加高效、实时以及快捷。药品的鉴别和检测是关系到国家医药卫生事业发展和药品使用安全性的一个关键问题。伴随着现代分析技术的持续发展，它不仅为医药分析技术的迅速发展奠定了基础，而且在药物的临床研究和中药成分的分析方面也发挥了很大的作用。

关键词：分析技术；药物分析；应用

1 色谱技术在药物分析中的研究与应用

1.1高效液相色谱法（HPLC）

在药物的研究中，HPLC是最为常用的一种，它的功能是对药物进行检测和分离。主要内容包括：原辅料、药材、不同类型的制剂、中成药等。其分析流程是：高压输液泵将流动相以稳定的流速（或压力）输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将被测样品导入，流动相将样品依次带入预柱、色谱柱，在色谱柱中，被测样品分子与固定相分子之间相互作用，发生吸附、解吸附等过程，使得不同的物质在色谱柱中的移动速度不同，从而得到分离，并依次随流动相流至检测器，转化为可供检测的信号，送至工作站记录、处理和保存，完成定性定量分析。在对现有药品进行检验时，采用《国家药典》规定的常规检验方法；在新药开发过程中，需要通过改变各种色谱条件，摸索分析方法，以获得最佳的分离效果。

1.2超高效液相色谱法（UPLC）

UPLC是在HPLC的基础上开发出来的一种用于对热不稳定性、极性和大分子物质进行分离和分析的新方法。超高效液相色谱柱的特征在于降低了柱子填充粒子的尺寸，并基于柱子的高效性，实现了高精度的高分离性和快速的分析。特别是在对注射剂中的酸醛和醛进行分析和测量的时候，只需要一次进样，就能对两个数据进行分析。并能确保在分析过程中，各成分都能有较好的分析效果，其特征是：分离度高，敏感性高，分析时间短，重复性好。

1.3气相色谱法（GC）

GC和HPLC在于多方面有相似之处。工作原理是：试样气体由载气携带进入色谱柱，与填料之间发生相互作用，这种相互作用大小的差异使各组分互相分离而按先后次序从色谱柱流出，转变为电信号，进行鉴定和测量。目前，GC技术已被广泛用于药品监控和分离等领域。能对药剂中的溶液、杂质含量等进行检测。

第２９卷第１期　２００７年Ｏ１月　武汉工程大学学报　Ｊ．　Ｗｕｈａｎ　Ｉｎｓｔ．Ｔｅｃｈ．　Ｖｏ１．２９　Ｎｏ．１　Ｊａｎ．　２００７　

文章编号：１００４—４７３６（２００７）０１—００２０—０５　

荧光分析法在药物分析中的应用　

彭爱华，席永清，武明丽，邹凤平，邱海鸥　

（中国地质大学材料科学与化学工程学院，湖北武汉４３００７４）　

摘要：论述了近几年荧光分析法在药物分析中的研究进展．主要从荧光分析新技术，以及流动注射一荧光法，　色谱一荧光法等联用技术在药物分析中的应用方面进行了评述．　关键词：荧光分析｝药物分析｝综述　中圈分类号：Ｏ　６５７．３１　文献标识码：Ａ　

Ｏ　引　言　

当紫外光照射到某些物质的时候，这些物质　会发射出各种颜色和不同强度的可见光，而当紫　

外光停止照射时，这种光线也随之很快地消失，这　

种光线称为荧光［】］．利用这种能够反映物质特性　

的荧光来对该物质进行定性和定量分析的方法称　

为荧光分析法．荧光分析法最主要的优势是灵敏　

度高和选择性好［２］，目前已广泛用于工业分析、食　器　褴验ｊ确保护；医药　生物等领域　‘由干荧光分　析法的灵敏度高，许多有机药物分子又都具有特　

征的荧光光谱，当对微量和痕量药物进行灵敏准　

确的检测时，荧光分析法显示出了极大的优越性．　

１药物分析方法　

药物分析大致可分为两大部分：一是对原药　的定量分析、原药中不纯物的测定、药剂的分析等　

以药品质量管理为目的的测试方法；二是对进入　

人体内的药物或代谢物的吸收、分布、代谢、排泄　等体内动态的研究，即临床药物分析［３］．目前，紫　

外一可见分光光度法与高效液相色谱法是药物分　析的基本技术［４］，此外，还有毛细管电泳法、电化　

学分析法、荧光分析法、原子吸收分析法、滴定分　

析法、红外光谱法等．自２０世纪７Ｏ年代以来，特　

别是近年来相继出现的各种荧光分析法已有效地　

用于制剂和生物体液中药物的分析．表１为柴逸　

峰［２　等总结近年来国内有关药物分析的文献数　

荧光定量标准曲线

荧光定量标准曲线是一种用于测定荧光物质浓度的重要方法，它通过建立标准曲线来确定待测样品的浓度。在实验室分析中，荧光定量标准曲线常常被用于测定各种生物分子的浓度，如蛋白质、核酸等。本文将介绍荧光定量标准曲线的建立方法、应用范围及注意事项。

一、建立荧光定量标准曲线的方法。

1. 准备标准溶液，首先需要准备一系列已知浓度的标准溶液，浓度范围应该覆盖待测样品的浓度范围。例如，对于蛋白质浓度的测定，可以准备一系列不同浓度的蛋白标准溶液。

2. 测定荧光强度，将标准溶液和待测样品分别置于荧光分析仪中，测定它们的荧光强度。需要注意的是，测定时应选择适当的激发波长和发射波长，并确保仪器处于稳定状态。

3. 绘制标准曲线，将测得的荧光强度值与标准溶液的浓度对应起来，然后利用这些数据绘制标准曲线。通常情况下，标准曲线可以通过线性回归或多项式拟合来得到。

二、荧光定量标准曲线的应用范围。

荧光定量标准曲线可以广泛应用于生物分子的浓度测定。例如，在生物化学实验中，可以利用荧光定量标准曲线来测定蛋白质、核酸、小分子药物等的浓度。此外，荧光定量标准曲线还可以用于药物分析、环境监测等领域。

三、注意事项。

在建立荧光定量标准曲线时，需要注意以下几点： 1. 标准曲线的选择，应根据待测样品的特性选择合适的标准曲线类型，如线性、对数线性、多项式等。

2. 样品处理，待测样品的处理方法应与标准溶液一致，以保证测定结果的准确性。

3. 仪器校准，在进行荧光强度测定前，需要对荧光分析仪进行校准，确保测定结果准确可靠。

4. 实验环境，应在光线较暗的实验室环境中进行荧光强度测定，避免外部光线对测定结果的影响。

总结：

荧光定量标准曲线是一种重要的定量分析方法，它在生物化学、药物分析等领域具有广泛的应用价值。建立标准曲线的方法简单易行，但在实际操作中需要严格控制各项条件，以确保测定结果的准确性和可靠性。希望本文对您有所帮助，谢谢阅读！