生化大题
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生化大题1.简述糖有氧氧化的生理意义。
①.糖有氧氧化是机体获得能量的主要方式:1分子葡萄糖经有氧氧化可生成38(或36)分子ATP。
②.三羧酸循环是体内营养物质彻底氧化分解的共同通路:三羧酸循环不仅是糖氧化分解的ATP生成的主要环节,也是脂肪、氨基酸等营养物质彻底氧化分解的共同通路和ATP生成的主要环节。
③.三羧酸循环是体内物质代谢相互联系的枢纽。
2.简述核酸变性、复性,及其应用。
①变性:受理化因素影响,维系核酸三维结构的碱基堆积力和氢键被破坏,其三维结构改变、理化性质及生物学功能发生变化,这种现象称为变性。
变性过程中DNA分子双链间氢键断裂,双螺旋结构可完全解开成两条单链;RNA分子中的局部双螺旋也可解开发生变性。
②复性:在适宜条件下,变性的DNA的两条链之间碱基互补,重新恢复双螺旋结构,称为复性。
③应用分子杂交:不完全互补的两条核苷酸链,依据碱基互补配对的原则部分相互结合的现象,称为分子杂交。
不同来源的DNA加热变性后,只要两条多核苷酸链之间有一定数量的碱基能彼此互补,经退火处理就可以形成双螺旋结构.3.蛋白质各结构中都有哪些键,这些键的作用(1)共价键:维持蛋白质的一级结构,如:肽键、二硫键。
(2)非共价键:即次级键,维持蛋白质的空间构象的稳定性,如:①氢键:主要针对维持蛋白质的二级结构,如:а-螺旋、β-折叠等;②疏水键:主要针对维持蛋白质的三级结构;③离子键:蛋白质中有正负电荷侧链的基团间形成的;④范德华力:蛋白质分子间作用力;⑤次级键(氢键,疏水键,离子键):可以使多肽连结合形成复杂结构。
4.简述真核细胞m RNA前体(hnRNA)的加工过程。
①.在5'-末端加上“帽子”结构:在鸟苷酸转移酶催化下,在hnRNA的5'-末端加上一分子鸟苷酸残基,再对该残基进行甲基化修饰,使其成为7-甲基鸟苷酸,该结构称为“帽子”。
②.在3'-末端加上“尾”结构:在多聚腺苷酸聚合酶的催化下,以ATP为底物,在hnRNA的3'-末端加上一段多聚腺苷酸,该结构称为“尾”。
第三章蛋白质化学3,蛋白质的结构层次及其维持力。
蛋白质的一级结构:通常描述为蛋白质多肽链中氨基酸的连接顺序,简称氨基酸序列。
蛋白质的一级结构反映蛋白质分子的共价键结构;其维持力主要为肽键,还可能存在二硫键等其他共价键。
蛋白质的二级结构:是指蛋白质多肽链局部片段的构象,该片段的氨基酸序列是连续的,主链构象通常是规则的;其维持力为氢键。
[蛋白质的二级结构是指蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构,尤其是那些稳定的、有规律的周期性结构。
这些结构涉及的是该段肽链主链骨架原子的相对位置,不涉及AA残基侧链的构象。
](课件概念)蛋白质的超二级结构:又称模体、基序,是指几个二级结构单元进一步聚集和结合形成的特定构象单元,如αα、βαβ、ββ、螺旋-转角-螺旋、亮氨酸拉链等。
蛋白质的三级结构:是指蛋白质分子整条肽链的空间结构,描述其所有原子的空间排布。
蛋白质三级结构的形成是肽链在二级结构基础上进一步折叠的结果;其维持力为疏水作用、氢键、离子键和范德华力等非共价键及二硫键等少量共价键。
蛋白质的四级结构:多亚基蛋白质的亚基与亚基通过非共价键结合,形成特定的空间结构,这一结构层次称为该蛋白质的四级结构;其维持力为疏水作用、氢键、离子键和范德华力等非共价键。
4.比较蛋白质变性和蛋白质变构。
2.B-DNA右手双螺旋结构的基本内容。
①两股DNA链反向互补形成双链结构:在该结构中,脱氧核糖与磷酸交替连接构成主链,位于外面,碱基侧链位于内部。
双链碱基形成Watson-Crick碱基对,即腺嘌呤(A)以两个氢键与胸腺嘧啶(T)结合,鸟嘌呤(G)以三个氢键与胞嘧啶(C)结合,这种配对称为碱基配对原则。
由此,一股DNA链的碱基序列决定着另一股DNA链的碱基序列,两股DNA链称为互补链。
②DNA双链进一步形成右手双螺旋结构:在双螺旋结构中,碱基平面与螺旋轴垂直,糖基平面与碱基平面接近垂直,与螺旋轴平行;双螺旋直径为2nm,每一螺旋含10bp(bp:双链核酸长度单位,1bp 为1个碱基对),螺距为3.4nm,相邻碱基对之间的轴向距离为0.34nm;双螺旋表面有两条沟槽:相对较深、较宽的为大沟(轴向沟宽2.2nm),相对较浅、较窄的为小沟(轴向沟宽1.2nm)。
生化习题及参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、将DNA核苷酸顺序的信息转变成为氨基酸顺序的过程包括A、复制B、转录C、反转录D、翻译E、转录及翻译正确答案:E2、苯丙酮酸尿症患者肝脏缺乏什么酶?A、对羟苯丙酮酸氧化酶B、酪氨酸酶C、苯丙氨酸羟化酶D、酪氨酸转氨酶E、尿黑酸氧化酶正确答案:C3、肾上腺素发挥作用生理时,其第二信使是A、cAMPB、C.GMPC、CMPD、C.UMPE、A.MP正确答案:A4、关于变构调节的叙述哪一项是错误的A、变构酶常由二个以上亚基组成B、变构调节剂常是些小分子代谢物C、变构剂通常与酶活性中心以外的某一特定部位结合D、代谢途径的终产物通常是该途径起始反应酶的变构抑制剂E、变构调节具有放大效应正确答案:E5、合成胆固醇的限速酶是:A、HMGCoA合成酶B、HMGCoA还原酶C、HMGCoA裂解酶D、甲羟戊酸激酶E、鲨烯环氧酶正确答案:B6、下列干扰素的叙述哪一项是正确的?A、是病毒特有的物质B、是细菌的产物C、是化学合成的抗病毒药物D、对细胞内病毒增殖无影响E、其生成需要细胞基因的表达正确答案:E7、由氨基酸生成糖的过程称为A、糖酵解B、糖原分解作用C、糖原生成作用D、糖异生作用E、以上都不是正确答案:D8、酪氨酸蛋白激酶的作用是A、使特殊蛋白质中的特殊酪氨酸磷酸化B、促使蛋白质结合上酪氨酸C、使含酪氨酸的蛋白质激活D、使蛋白质中大部分酪氨酸激活E、使特殊蛋白质中的特殊的酪氨酸分解出来正确答案:A9、下列关于肉毒碱功能的叙述哪一项是正确的?A、转运中链脂酸进入肠上皮细胞B、转运中链脂酸通过线粒体内膜C、参予脂酰转移酶促反应D、为脂酸合成时所需的一种辅酶E、参予视网膜的暗适应正确答案:C10、红细胞存活120天后,即溶解破坏,其血红蛋白分解释放出铁的去向主要是:A、组成含铁血黄素B、组成骨盐C、排出体外D、用于合成新的血红蛋白E、以Fe2+形式贮存正确答案:D11、作用于细胞内受体的激素是A、糖皮质激素B、胰高血糖素C、加压素D、黄体生成素E、催乳素正确答案:A12、可使无细胞质悬液内cAMP浓度降低的物质是A、cAMP磷酸二酯酶B、二丁酰cAMPC、咖啡因D、氨茶碱E、腺苷酸环化酶正确答案:A13、能产生第二信使的激素是A、GTP酶B、GTP酶激活蛋白C、糖皮质激素D、促肾上腺皮质激素E、盐皮质激素正确答案:D14、下列有关维生素D3对钙、磷代谢调节的描述,哪项是错误的?A、成骨作用大于溶骨作用B、肾脏钙排泄减少C、血钙升高D、血磷下降E、小肠对钙、磷吸收增加正确答案:D15、在酶促反应体系中增加酶的浓度时,可出现下列哪一种效应?A、不增加反应速度B、1/[S]对1/v作图所得直线的斜率下降C、Vmax保持不变D、v达到Vmax/2时的[S]已全部转变成产物E、Km值变小正确答案:B16、胆固醇合成的最基本的原料是A、葡萄糖B、乙酰CoAC、脂肪酸D、蛋白质正确答案:B17、酶分子中使底物转变为产物的基团称为A、疏水基团B、催化基团C、结合基团D、碱性基团E、酸性基团正确答案:B18、当6-磷酸葡萄糖脱氢受抑制时,其影响脂肪酸生物合成是因为:A、乙酰CoA生成减少B、柠檬酸减少C、ATP形成减少D、NADPH+H+生成减少E、丙二酸单酰CoA减少正确答案:D19、糖酵解过程中最重要的关键酶是:A、6-磷酸果糖激酶IB、己糖激酶C、6—磷酸果糖激酶ⅡD、果糖二磷酸酶E、丙酮酸激酶正确答案:A20、有机磷化合物对酶的抑制作用是A、与-NH2结合B、与-SH结合C、与苯环结合D、与-OH结合E、与—CO-NH2结合正确答案:D21、在尿素合成中下列哪一种反应需要ATP?A、精氨酸→鸟氨酸+尿素+α-酮戊二酸B、草酰乙酸+谷氨酸→天冬氨酸C、瓜氨酸+天冬氨酸→精氨酸代琥珀酸D、延胡索酸→苹果酸E、以上四种反应都不需要ATP正确答案:C22、临床上切除甲状腺时,常出现出血倾向是因为:A、纤维蛋白原减少B、凝血因子减少C、纤溶酶释放增加D、血钙降低E、纤维蛋白溶酶原活化物释放增加正确答案:E23、凡AUG三联密码都是A、蛋白质合成的终止信号B、线粒体蛋白质合成启动信号C、启动tRNA的反密码D、代表蛋氨酸或甲酰蛋氨酸E、蛋白质合成的启动信号正确答案:D24、典型的坏血病是由于缺乏下列哪种维生素所引起的?A、硫胺素B、核黄素C、泛酸D、抗坏血酸E、维生素A.正确答案:D25、DNA受热变性时A、在260nm波长处的吸光度下降B、多核苷酸链水解成寡核苷酸C、碱基对以共价键连接D、溶液粘度增加E、在有RNA存在下,DNA溶液冷却时,DNA链能与互补的RNA链杂交正确答案:E26、血液中凝血因子化学本质属脂蛋白的有:A、VIII因子B、IV因子C、钙离子D、V因子E、III因子正确答案:E27、结合胆红素是指:A、胆红素与肝细胞内Y蛋白结合B、胆红素与血浆中球蛋白结合C、胆红素与葡萄糖醛酸的结合D、胆红素与肝细胞内Z蛋白结合E、胆红素与血浆中清蛋白结合正确答案:C28、下列哪项不是骨质疏松症的病因?A、维生素D过多B、甲状腺功能亢进C、柯兴氏综合征D、妇女缺乏雌激素E、蛋白质,热卡及维生素供应长期缺乏正确答案:A29、脂肪酸生物合成的情况是A、不需乙酰CoA.B、中间产物是丙二酰CoAC、在线粒体内进行D、以NADH为还原剂E、最终产物为十碳以下脂酸正确答案:B30、在DNA的Watson-Crick分子模型中:A、两条链的核苷酸顺序相同B、一条链是右手螺旋,另一条链是左手螺旋C、两条链反向缠绕D、两条链同向缠绕E、两条链实际上是一条链回折而成正确答案:C31、肝素是一种高分子的酸性粘多糖,是由哪种细胞合成的?A、脂肪细胞B、肾脏细胞C、肝细胞D、肥大细胞和嗜碱性粒细胞E、成纤维细胞正确答案:D32、启动子是A、mRNA上最早被翻译的哪一段核苷酸顺序B、开始转录生成的mRNA的哪一段核苷酸顺序C、RNA聚合酶最早与之结合的那一段核苷酸顺序D、能与阻抑蛋白结合的那一段核苷酸顺序E、引发DNA复制的那一段核苷酸顺序正确答案:C33、以下那一种氨基酸衍生物是神经递质A、5-羟色胺B、组胺C、酪胺D、精胺E、腐胺正确答案:A34、参与药物、毒物生物转化过程的细胞色素是是:A、Cytaa3B、CytC.C、CytB.D、CytP450正确答案:D35、DNA复制引发过程的叙述,错误的是A、引发过程有引发酶及引发前体参与B、引发酶是一种特殊的RNA聚合酶C、随从链的引发较前导链的引发要简单D、引发前体含有多种蛋白质因子E、引发前体与引发酶可联合装配成引发体并解离正确答案:C36、在体内,纤维蛋白形成后,被哪种酶水解?A、脂蛋白脂肪酶B、蛋白激酶C、凝血酶D、磷酸酶E、纤溶酶正确答案:E37、酶催化反应的高效率在于:A、增加活化能B、降低反应物的能量水平C、增加反应物的能量水平D、降低活化能E、以上都不对正确答案:D38、脚气病是由于缺乏下列哪一种物质所致?A、硫胺素B、丙酮C、丝氨酸D、乙醇胺E、胆碱正确答案:A39、促进破骨细胞转化成为成骨细胞的一组因素是:A、PTH及Ca2+B、1,25-(OH)2-D3及Ca2+C、CT及Ca2+E、PTH.Ca2+及1,25-(OH) 2-D3正确答案:B40、某饱和脂肪酸1摩尔在体内完全氧化为CO2、H2O同时形成147摩尔ATP,此饱和脂肪酸为:A、硬脂酸B、十四碳脂肪酸C、软脂酸D、二十碳脂肪酸E、十二碳脂肪酸正确答案:A41、2,3—DPG降低Hb对O2的亲和力是由于:A、2,3—DPG与Hb的两条β链成盐键B、2,3—DPG与Hb的两条α链成盐键C、2,3—DPG与Hb的任意一条链成盐键D、2,3—DPG使脱氧HB对称中心的空穴变小E、2,3—DPG使脱氧Hb分子稳定于R态构象正确答案:A42、下列有关呼吸链的叙述哪些是正确的?A、体内最普遍的呼吸链为NADH氧化呼吸链B、呼吸链的电子传递方向从高电势流向低电势C、如果不与氧化磷酸化偶联, 电子传递就中断D、氧化磷酸化发生在胞液中E、β羟丁酸通过呼吸链氧化时P/O比值为2正确答案:A43、PTH对尿中钙磷排泄的影响是A、增加肾小管对钙的重吸收,B、增加肾小管对磷的重吸收,减少减少对磷的重吸收对钙的重吸收C、增加肾小管对钙,磷的重吸收D、减少肾小管对钙,磷的重吸收E、以上都不对正确答案:A44、细胞内的固有蛋白质,合成场所在A、核仁内B、高尔基氏体内C、粗面内质网上D、胞液内E、溶酶体内正确答案:D45、下列哪种酶属需氧脱氢酶?A、乳酸脱氢酶B、L-氨基酸氧化酶C、琥珀酸脱氢酶D、NADH脱氢酶E、苹果酸脱氢酶正确答案:B46、维持DNA双螺旋结构稳定的因素有A、分子中的3.5磷酸二酯键B、碱基对之间的氢键C、肽键D、盐键正确答案:B47、胆囊中有限量胆汁酸之所以能发挥最大限度乳化食物中脂肪的作用原因是:A、饭后胆汁酸立即一次全部倾入小肠B、饭后胆汁酸缓慢地分泌到小肠C、饭后可进行一次胆汁酸肠肝循环D、饭后可进行2-4次胆汁酸肠肝循环E、饭后肝内立即加速胆汁酸的生成,以满足乳化脂肪的需要正确答案:D48、在离体线粒体实验中测得一底物的P/O比值为1.8,该底物脱下的氢最可能在下列哪一部位进入呼吸链?A、NAD+B、F.MNC、ytclD、cytaa3E、以上都不是正确答案:E49、以下反应属于RNA编辑的是A、转录后碱基的甲基化B、转录后产物的剪接C、转录后产物的剪切D、转录产物中核苷酸残基的插入、删除和取代E、以上反应都不是正确答案:D50、生物合成胆固醇的限速步骤是A、焦磷酸牛儿酯→焦磷酸法呢酯B、鲨烯→羊毛固醇C、羊毛固醇→胆固醇D、3-羟基-3-甲基戊二酰CoA→甲基二羟戊酸(MVA)E、二乙酰CoA→3-羟基-3-甲基戊二酰CoA.正确答案:D51、丙酮酸羧化支路中有几种核苷酸成分参与A、3B、2C、lD、5E、4正确答案:B52、除了下列哪一种化合物外,其它什么物质分子中都含有高能磷酸键:A、磷酸烯醇式丙酮酸B、磷酸肌酸C、ADPD、葡萄糖-6-磷酸E、1,3-二磷酸甘油酸正确答案:D53、下列有关Ca2+对细胞作用的叙述哪一点是不正确的?A、Ca2+浓度过高时可抑制磷酸二酯酶的活性B、Ca2+可促使cGMP的生成C、Ca2+的作用是通过与钙调蛋白的结合D、IP3的作用在先,Ca2+的作用在后E、Ca2+与cAMP在调节糖原代谢上具有协同作用正确答案:A54、1摩尔八碳的饱和脂肪酸经β-氧化分解为4摩尔乙酰CoA,同时可生成ATP摩尔数是:A、15摩尔ATPB、62摩尔ATPC、14摩尔ATPD、63摩尔ATPE、48摩尔ATP正确答案:C55、应急时需要调动的是机体哪一水平的调节A、激素水平B、神经水平C、细胞水平D、整体水平E、局部水平正确答案:D56、维持蛋白质α-螺旋的化学键主要是A、二硫键B、盐键C、氢键D、肽键E、疏水键正确答案:C57、NH3经鸟氨酸循环形成尿素的主要生理意义是A、是精氨酸合成的主要途径B、可消除NH3毒性,产生尿素由尿排泄C、是鸟氨酸合成的重要途径D、是NH3贮存的一种形式正确答案:B58、维生素E是一种什么化合物?A、脂肪酸B、丙基硫尿嘧啶类似物C、生育酚D、苯醌E、前列腺素正确答案:C59、合成血红素原料主要是A、Fe3++甘氨酸+琥珀酸B、乙酰CoA.C、琥珀酰CoA+甘氨酸+Fe2+D、琥珀酸+甘氨酸+Fe2+E、葡萄糖正确答案:C60、DNA 复制起始时,参与从超螺旋结构解开双股链的酶或因子是A、解链酶 "B、拓扑异构酶 IC、DNA 结合蛋白 "D、引发前体E、拓扑异构酶Ⅱ正确答案:A61、下列关于乳酸脱氢酶的描述,哪一项是错误的?A、乳酸脱氢酶可用LDH表示B、它是单体酶C、它的辅基是NAD+D、它有5种结构形式E、乳酸脱氢酶同工酶之间的电泳行为不尽相同正确答案:B62、下列哪一种激素在饱食后分泌量增多?A、甲状腺素B、胰高血糖素C、胰岛素D、肾上腺素E、醛固酮正确答案:C63、蛋白质生物合成过程特点是A、蛋白质水解的逆反应B、肽键合成的化学反应C、遗传信息的逆向传递D、在核蛋白体上以mRNA为模板的多肽链合成过程E、氨基酸的自发反应正确答案:D64、DNA复制时,子代DNA的合成方式是A、两条链均为不连续合成B、两条链均为连续合成C、两条链均为不对称转录合成D、两条链均为3’→5’合成E、一条链5’→3’,另一条链3’→5’合成正确答案:D65、关于变构酶的结构特点的错误叙述是A、催化部位与别构部位既可处于同一亚基,也可处于不同亚基上B、有与底物结合的部位C、有与变构剂结合的部位D、有多个亚基组成E、催化部位与别构部位都处于同一亚基上正确答案:E66、下列关于反转录酶作用的叙述哪一项是错误的?A、以RNA为模板合成DNA.B、需要一个具有3'-OH的引物C、催化链的延长,其方向为3'→5'D、底物是四种dNTPE、需要Mg2+或Mn2+正确答案:C67、下列有关细胞色素的叙述哪一项是正确的?A、全部存在于线粒体B、全部含有血红素辅基C、都是递氢体D、都是递电子体E、与CO、CN-结合后丧失活性正确答案:D68、在糖元分解中起始步骤是生成:A、6-磷酸葡萄糖B、1-磷酸葡萄糖C、6-磷酸果糖D、1,6-二磷酸葡萄糖E、UDP-葡萄糖正确答案:B69、多肽链的合成开始于A、甘氨酸B、酪氨酸C、脯氨酸D、C.端氨基酸E、甲酰蛋氨酸或蛋氨酸正确答案:E70、C.GMP是什么?A、G蛋白B、小分子G蛋白C、PKGD、PKAE、GTP酶正确答案:C71、成熟红细胞中NADH的主要来源A、糖酵解B、2,3-DPG支路C、磷酸戊糖途径D、糖醛酸途径E、脂肪酸氧化正确答案:D72、激素必需与靶细胞的什么物质结合才能发挥调节作用A、配体B、质膜C、核D、受体正确答案:D73、下列物质中哪种是呼吸链抑制剂?A、ATPB、寡酶素C、2,4-二硝基苯酚D、氰化物"E、二氧化碳正确答案:D74、通过细胞内受体发挥生理效应的激素有:A、胰岛素B、胰高血糖素C、肾上腺皮质激素D、PTHE、A.DH正确答案:C75、体内脱氧核苷酸是由下列哪类物质直接还原生成的A、三磷酸核苷B、一磷酸核苷C、二磷酸核苷D、核糖E、核糖核苷正确答案:C76、催化底物直接以氧为受氢体产生水的酶是:A、黄嘌呤氧化酶B、细胞色素氧化酶C、琥珀酸脱氢酶D、乳酸脱氢酶E、以上都不是正确答案:A77、某些氨基酸脱羧的辅酶是A、磷酸吡哆醛B、尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸C、黄素腺嘌呤二核苷酸D、生物素E、焦磷酸硫胺素正确答案:A78、在下面酶促反应中的Vmax值为:K1 K3S+E E .S P+EK2A、K3[E]C、K2/K1D、(K2+K3)/K1E、都不对正确答案:A79、丙酮酸羧化酶的辅酶是A、FAD.B、NAD+C、TPPD、辅酶A.E、生物素正确答案:E80、肝病患者,血浆胆固醇酯浓度降低是因为:A、胆固醇酯酶活性增加B、脂蛋白脂肪酶活性增加C、胆固醇合成减少D、胆固醇酯分解加强E、LCAT合成减少正确答案:E81、下列关于B-DNA双螺旋结构模型的叙述中哪一项是错误的?A、两条链方向相反B、两股链通过碱基之间的氢键相连维持稳定C、为右手螺旋,每个螺旋为10个碱基对D、嘌呤碱和嘧啶碱位于螺旋的外侧E、螺旋的直径为20A°正确答案:D82、细胞中分泌性蛋白质的合成与分泌所依赖的重要酶是A、信号肽酶B、氨基酰-tRNA合成酶C、磷酸酶D、蛋白激酶E、GTP酶活性正确答案:A83、肝中与胆红素结合的最主要基团是:B、乙酰基C、葡萄糖醛酸基D、甲基E、以上都不是正确答案:C84、除需维生素D之外,牙齿的生成与生长还需下列哪组维生素参与?A、维生素A及C.B、维生素A及B2C、维生素C及维生素B12D、维生素K及生物素正确答案:D85、线粒体外NADH经α-磷酸甘油穿梭作用进入线粒体内,实现氧化磷酸化,其P/O比值为:A、0B、1C、2D、3E、以上都不对正确答案:C86、下列哪种物质与脂肪酸生物合成无关?A、乙酰CoA.B、丙二酸单酰CoAC、生物素D、酰基载体蛋白(ACP)E、NAD+正确答案:E87、目前已测知最小分子量的蛋白质是A、免疫球蛋白B、血红蛋白C、胰岛素D、肌红蛋白E、白蛋白正确答案:C88、L-氨基酸氧化酶的辅基是:A、NAD+B、NADP+C、FADD、F.MNE、CoQ正确答案:D89、下列化合物中哪一个分子中不具有环戊烷多氢菲化学骨架?A、睾丸酮B、前列腺素C、皮质醇D、胆汁酸E、胆固醇正确答案:B90、肠道中氨基酸的主要腐败产物是A、吲哚B、氨C、腐胺D、组胺E、色胺正确答案:B91、糖酵解途径中生成的丙酮酸必须进入线粒体氧化,因为A、丙酮酸与苹果酸交换B、丙酮酸在苹果酸酶作用下转为苹果酸C、这样胞液可保持电中性D、乳酸不能通过线粒体E、丙酮酸脱氢酶在线粒体内正确答案:E92、加单氧酶又名羟化酶或混合功能氧化酶其特点是:A、催化氧分子中的一个原子进入底物,另一个被还原产生水B、催化底物脱氢,以氧为受氢体产生H2O2C、将氧分子(O2)加入底物,故称加单氧酶D、主要参与为细胞提供能量的氧化过程E、具有氧化、还原、羟化、水解等多种功能,故称混合功能氧化酶正确答案:A93、C.AMP通过激活哪种酶发挥作用A、蛋白激酶B、己糖激酶C、丙酮酸激酶D、脂肪酸合成酶E、蛋白磷酸酶正确答案:A94、对1-α-羟化酶活性进行调节最强有力的因素是:A、PTHB、降钙素C、1,25-(OH) 2-D3的负反馈D、Ca2+浓度E、血磷浓度正确答案:C95、体内由垂体前叶分泌的促激素39肽是A、催产素B、加压素C、谷胱甘肽D、促甲状腺素释放激素E、ACTH正确答案:E96、下列哪种因素能增强25-(OH)-D3-1羟化酶的生理活性?A、抗霉素A.B、降钙素C、无机磷酸D、1,25,-(OH)2-D3增高E、甲状旁腺素(PTH)正确答案:E97、正常情况下,肝脏获得能量的主要代谢途径:A、葡萄糖进行糖酵解氧化B、脂肪酸氧化C、葡萄糖的有氧氧化D、磷酸戊糖途径氧化葡萄糖E、以上都是正确答案:B98、对成熟红细胞来说,下列哪项说法是正确的?A、具有分裂增殖的能力B、存在RNA和核蛋白体C、具有催化磷酸戊糖途径的全部酶系D、DNA不能复制,但可转录E、除存在于血液中外,还大量见于造血器官正确答案:C99、维生素C的化学本质是一种:A、含有二个羧基的有机酸B、含有一个羧基的有机酸C、含有六碳原子的、二个烯醇式羟基的化合物D、含有六个碳原子及一个羟基的化合物E、含8个碳的有机酸正确答案:C100、催化单纯电子转移的酶是:A、以NAD+为辅酶的酶B、细胞色素和铁硫蛋白C、需氧脱氢酶D、加单氧酶E、脱氢酶正确答案:B。
1. 简述酶的“诱导契合假说”。
2. 受试大鼠注射DNP(二硝基苯酚)可能引起什么现象?其机理何在?3. 复制中为什么会出现领头链和随从链?4. 简述乳糖操纵子的结构及其调节机制。
5. 何谓限制性核酸内切酶?写出大多数限制性核酸内切酶识别DNA序列的结构特点。
1.酮体是如何产生和利用的?2.为什么测定血清中转氨酶活性可以作为肝、心组织损伤的参考指标?3.讨论复制保真性的机制。
4.试述乳酸异生为葡萄糖的主要反应过程及其酶。
5.举例说明蛋白质一级结构、空间构象与功能之间的关系。
1.胞浆中的NADH如何参加氧化磷酸化过程?试述其具体机制。
2.举例说明蛋白质的变构效应。
3.糖、脂、蛋白质在体内是否可以相互转变?简要说明可转变的途径及不能转变的原因。
4.试述复制和转录的异同点。
5. 试述人体胆固醇的来源与去路。
1.人体生成ATP的方法有哪几种?请详述具体生成过程。
2. 何谓基因克隆?简述基因克隆的基本过程。
3. 细胞内有哪几类主要的RNA?其主要功能是什么?4. 原核生物复制中的引发体是如何形成的?5. 脂肪酸的β-氧化与生物合成的主要区别是什么?1.什么是血浆脂蛋白,它们的来源及主要功能是什么?2.简述谷氨酸在体内转变成尿素、CO2与水的主要代谢过程。
3.试述复制和转录的异同点。
4.已知人类细胞基因组的大小约30亿bp,试计算一个二倍体细胞中DNA 的总长度,这么长的DNA分子是如何装配到直径只有几微米的细胞核内的?5. 原核生物和真核生物翻译起始复合物的生成有何异同?1.试讨论各类核苷酸抗代谢物的作用原理。
2.为什么说真核生物基因是断裂基因?请讨论hnRNA的剪接过程。
3.什么是蛋白质的二级结构?它主要有哪几种?各有何结构特征?4.简述肝糖原合成代谢的直接途径与间接途径。
5.何谓目的基因?写出其主要来源或途径1.比较三种可逆性抑制作用的特点。
2.试述原核生物的转录终止。
3.概述肾上腺素对血糖水平调节的分子机制。
生化考试题+参考答案一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、血浆中哪种脂蛋白水平高的人群,动脉粥样硬化的发生率低( )A、CMB、VLDLC、LDLD、HDLE、LDL和HDL正确答案:D2、δ-氨基-γ-酮戊酸合成酶的辅基中含有( )A、硫胺素B、钴胺素C、烟酸D、吡哆醛E、核黄素正确答案:D3、帕金森氏病(Parkinson’s diseae)患者体内多巴胺生成减少,这是由于:( )A、蛋氨酸代谢异常B、胱氨酸代谢异常C、精氨酸代谢异常D、酪氨酸代谢异常正确答案:D4、尿毒症患者治疗中采用的血液透析、腹膜透析利用的原理是( )A、蛋白质是亲水胶体B、蛋白质的变性C、蛋白质的两性电离D、蛋白质的沉淀E、蛋白质不能透过半透膜正确答案:A5、下列对脂肪酸β-氧化的叙述中正确的是( )A、反应在胞液中进行B、反应产物为CO2和H2OC、反应在胞液和线粒体中进行D、反应过程中消耗ATPE、起始代谢物是脂酰CoA正确答案:E6、某底物脱下的2H氧化时P/O比值约为3.0,应从何处进入呼吸链:( )A、FADB、NAD+C、CoQD、CytbE、Cytaa3正确答案:B7、完全食肉的个体,下列哪种维生素可能缺乏?( )A、TPP+B、烟酸C、钴胺素D、VitCE、泛酸正确答案:C8、糖无氧分解有一步不可逆反应是下列那个酶催化的?( )A、3-磷酸甘油醛脱氢酶B、醛缩酶C、丙酮酸激酶D、乳酸脱氢酶E、磷酸丙糖异构酶正确答案:C9、苯丙酮尿症是先天性氨基酸代谢缺陷病,原因是( )A、缺乏二氢蝶啶氧化酶B、缺乏酪氨酸氧化酶C、缺乏苯丙氨酸氧化酶D、缺乏苯丙氨酸羟化酶正确答案:D10、细胞色素含有:( )A、胆红素B、铁卟啉C、血红素D、FADE、NAD+正确答案:B11、低血钾是指血钾浓度(mmol/L)低于( )A、5.5B、4.1C、5D、4E、3.5正确答案:E12、Tm是指什么情况下的温度?( )A、双螺旋DNA达到完全变性时B、双螺旋DNA开始变性时C、双螺旋DNA结构失去1/2时D、双螺旋结构失去1/4时正确答案:C13、肺在维持酸碱平衡中的作用是调节( )A、NaHCO3的浓度B、血浆H2CO3的含量C、NaH2PO4的含量D、NaHCO3和H2CO3的含量E、CO2呼出的速度正确答案:E14、在RNA分子中不含有的碱基是( )A、胞嘧啶B、尿嘧啶C、胸腺嘧啶D、鸟嘌呤E、腺嘌呤正确答案:C15、tRNA分子二级结构的特征是( )A、3’端有多聚AB、5’端有C-C-AC、有反密码子环D、有氨基酸残基E、尿嘧啶环正确答案:C16、体内氨的主要运输,贮存形式是:( )A、胺B、谷氨酰胺C、谷氨酸D、尿素E、嘌呤,嘧啶正确答案:B17、DNA复制与转录过程的许多异同点中,描述错误的是( )A、转录是只有一条DNA链作为模板,而复制时两条DNA链均可为模板链B、在复制和转录中合成方向都为5′→3′C、复制的产物通常大于转录产物D、两过程均需RNA引物E、两过程均需聚合酶和多种蛋白因子正确答案:D18、生物氧化CO2的产生是:( )A、呼吸链的氧化还原过程中产生B、有机酸脱羧C、碳原子被氧原子氧化D、糖原的合成E、以上都不是正确答案:B19、含GOT(AST)最多的组织是( )A、心B、肝C、骨D、脑E、肾正确答案:A20、DNA复制时,模板序列5′—TAGA—3′,将合成下列哪种互补结构?( )A、5′—TCTA—3′B、5′—ATCA—3′C、5′—UCUA—3′D、5′—GCGA—3′E、5′—TCUA—3′正确答案:A21、酶具有高效催化能力的原因是( )A、酶能改变化学反应的平衡点B、酶能降低反应的活化能C、酶能催化热力学上不能进行的反应D、酶能提高反应物分子的活化能正确答案:B22、下列关于辅基的叙述哪项是正确的?( )A、一般不能用透析和超滤法与酶蛋白分开B、是一种结合蛋白质C、与酶蛋白的结合比较疏松D、只决定酶的专一性,不参与化学基因的传递正确答案:A23、脂肪酸分解产生的乙酰 CoA的去路是( )A、合成脂肪B、一部分氧化供能,另一部分合成酮体C、合成胆汁酸D、合成胆固醇E、以上都是正确答案:B24、已知某混合物存在A.B两种分子量相同的蛋白质,A的等电点为6.8,B的等电点为7.8,用电泳法进行分离,如果电泳液的PH为8.3,则( )A、蛋白质A向正极移动,B向负极移动B、蛋白质A向负极移动,B向正极移动C、蛋白质A和B都向负极移动,A移动速度快D、蛋白质A和B都向正极移动,A移动速度快E、蛋白质A和B都向正极移动,B移动速度快正确答案:D25、三羧酸循环的限速酶是:( )A、延胡羧酸酶B、琥珀酸脱氢酶C、异柠檬酸脱氢酶D、丙酮酸脱氢酶E、顺乌头酸酶正确答案:C26、下列哪种胆汁酸是次级胆汁酸( )A、甘氨胆酸B、甘氨鹅脱氧胆酸C、牛磺胆酸D、脱氧胆酸E、牛磺鹅脱氧胆酸正确答案:D27、电子按下列各式传递,能偶联磷酸化的是:( )A、Cytaa3→ 1/2 O2B、琥珀酸→ FADC、CoQ → CytbD、SH2 → NAD+E、以上都不是正确答案:A28、下列关于cAMP的论述哪一个是错误的( )A、是由腺苷酸环化酶催化ATP产生B、是由鸟苷酸环化酶催化ATP产生的C、是细胞第二信息物质D、可被磷酸二酯酶水解为5'-AMP正确答案:B29、核酸中核苷酸的连接方式是( )A、氢键B、3’,5’-磷酸二酯键C、2’,5’-磷酸二酯键D、糖苷键E、2’,3’-磷酸二酯键正确答案:B30、天然蛋白质中不存在的氨基酸是( )A、瓜氨酸B、脯氨酸C、丝氨酸D、蛋氨酸E、半胱氨酸正确答案:A31、儿茶酚胺是由那种氨基酸转化生成的?( )A、谷氨酸B、胱氨酸C、赖氨酸D、酪氨酸E、色氨酸正确答案:D32、糖原分解过程中磷酸化酶催化磷酸分解的键是( )A、(-1,4-糖苷键B、(-1,4-糖苷键C、(-1,6-糖苷键D、(-1,6-糖苷键正确答案:A33、肌酸激酶催化的化学反应是:( )A、肌酸→肌酐B、肌酸+ATPC、肌酸+CTPD、乳酸E、肌酸+UTP正确答案:B34、脂肪酸合成时所需的氢来自( )A、NADHB、NADPHC、FADH2D、NFMNH2E、UQH2正确答案:B35、磷酸戊糖途径的真正意义在于产生( )的同时产生许多中间物如核糖等。
1. 糖酵解的特点及生理意义。
(熟记)(一)特点:(1)糖酵解的全过程没有氧的参与,乳酸是其产物。
(2)糖酵解是糖在无氧条件下发生的不完全氧化,释放的能量较少。
以葡萄糖为原料可净生成2分子ATP,以糖原为原料可净生成3分子的ATP(3)糖酵解是单向的,不可逆的。
糖酵解有三个关键酶:6-磷酸果糖激酶-1 ;己糖激酶;丙酮酸激酶。
(4)红细胞中存在2,3- 二磷酸甘油酸支路。
(二)生理意义(1)在机体缺氧的情况下迅速供能。
(2)成熟的红细胞没有线粒体,即使在氧供充足的情况下也依糖酵解。
(3 )在某些组织中如神经细胞、白细胞、骨髓细胞等, 即使不缺氧也由糖酵解提供能量。
(4)2,3- 二磷酸甘油酸对于调节红细胞带氧功能有重要意义。
(5)为体内其他物质合成提供原料。
2. 三羧酸循环的特点。
(1)必须在有氧的条件下进行。
(2 )三羧酸循环是机体的主要产能途径,其中有四次脱氢,两次脱羧,一次底物水平磷酸化。
(3)三羧酸循环是单向反应体系,其中有三个关键酶:柠檬酸合酶、异柠檬酸脱氢酶、a -酮戊二酸脱氢酶系。
(4 )三羧酸循环的中间产物必须不断补充。
3. 三羧酸循环的生理意义。
(背过)(1)是体内主要的供能方式。
(2)是三大营养物质代谢联系枢纽。
(3)是三大营养物质的最终代谢通路。
(4)为呼吸链提供氢和电子。
(5)为某些物质的生物合成提供小分子前体物质。
3. 磷酸戊糖途径的生理意义。
发生部位及关键酶。
(重点背过)(一)发生部位:细胞的胞液(二)关键酶:6- 磷酸葡萄糖脱氢酶(三)生理意义1. 为核酸的生物合成提供核糖。
2. 提供NADPH乍为供氢体参与多种代谢反应。
(1)NADPH1体内许多合成代谢的供氢体。
(2)NADPH乍为羟化酶的辅酶维持体内的羟化反应。
(3)NADPH乍为谷胱甘肽还原酶的辅酶维持谷胱甘肽的还原状态。
4. 糖异生是否为糖酵解的逆反应?(重点背过)糖异生不完全是糖酵解的逆反应,糖酵解与糖异生的多数反应是可逆的, 仅糖酵解3个限速步骤所对应的逆反应需由糖异生的特有的关键酶催化。
BiochemistryPart I1.代谢的意义:①将食物转化为能量维持细胞生命活动②合成组成细胞的必需物质,如蛋白质,脂质,核酸,糖类③代谢废物的消除2.糖代谢的意义:①糖类作为能源物质②分解代谢产生的中间物作为合成生物体内重要代谢物质的碳架和前体③是细胞中的结构物质,如细胞壁等④参与分子与细胞特异性识别:由寡糖或多糖组成的糖链常存在于细胞表面,形成糖脂和糖蛋白,参与分子或细胞间的特异性识别和结合3.糖酵解磷酸化中间产物的意义①带有负电荷的磷酸基团使中间产物具有极性,从而使这些产物不易透过脂膜而失散;②磷酸基团在各反应步骤中,对酶来说,起到信号基团的作用,有利于与酶结合而被催化;③磷酸基团经酵解作用后,最终形成ATP的末端磷酸基团,因此具有保存能量的作用。
4.糖酵解意义①在无氧条件下迅速提供能量,供机体需要。
如:剧烈运动、人到高原②是某些细胞在不缺氧条件下的能量来源。
③是某些病理情况下机体获得能量的方式。
④是糖的有氧氧化的前过程,亦是糖异生作用,大部分逆过程。
⑤糖酵解是糖、脂肪和氨基酸代谢相联系的途径⑥若糖酵解过度,可因乳酸生成过多而导致乳酸中毒。
5.糖酵解存在实例?⑴糖酵解与肌肉收缩①肌肉内ATP含量很低;②肌肉中磷酸肌酸储存的能量可供肌肉收缩所急需的化学能;③即使氧不缺乏,葡萄糖进行有氧氧化的过程比糖酵解长得多,来不及满足需要;④肌肉局部血流不足,处于相对缺氧状态。
⑵糖酵解与初到高原:人初到高原,高原大气压低,易缺氧,机体加强糖酵解以适应高原缺氧环境⑶某些组织细胞与糖酵解供能①成熟红细胞无线粒体,无法通过氧化磷酸化获得能量,只能通过糖酵解获得能量②视网膜、肿瘤细胞等,代谢极为活跃,即使不缺氧,也常由糖酵解提供部分能量。
⑷某些病理状态与糖酵解供能:严重贫血,大量失血,呼吸障碍,肺及心血管等疾病,机体主要通过糖酵解获得能量.6.乳酸循环的生理意义:① 乳酸再利用,避免了乳酸的损失。
② 防止乳酸的堆积引起酸中毒。
生化大题都在里面出1、何谓三羧酸循环?它有何特点和生物学意义?特点。
1。
乙酰CoA进入三羧酸循环后,是六碳三羧酸反应2。
在整个循环中消耗2分子水,1分子用于合成柠檬酸,一份子用于延胡索酸的水和作用。
3在此循环中,最初草酰乙酸因参加反应而消耗,但经过循环又重新生成。
所以每循环一次,净结果为1个乙酰基通过两次脱羧而被消耗。
循环中有机酸脱羧产生的二氧化碳,是机体中二氧化碳的主要来源。
4在三羧酸循环中,共有4次脱氢反应,脱下的氢原子以NADH+H+和FADH2的形式进入呼吸链,最后传递给氧生成水,在此过程中释放的能量可以合成ATP。
5三羧酸循环严格需要氧气6。
琥珀CoA生成琥珀酸伴随着底物磷酸化水平生成一分子GTP,能量来自琥珀酰CoA的高能硫酯键意义。
1三羧酸循环是机体将糖或者其他物质氧化而获得能量的最有效方式2,三羧酸循环是糖,脂和蛋白质3大类物质代谢和转化的枢纽。
2、磷酸戊糖途径有何特点?其生物学意义何在?特点:无ATP生成,不是机体产能的方式。
1)为核酸的生物合成提供5-磷酸核糖,肌组织内缺乏6-磷酸葡萄糖脱氢酶,磷酸核糖可经酵解途径的中间产物3- 磷酸甘油醛和6-磷酸果糖经基团转移反应生成。
2)提供NADPH a.NADPH是供氢体,参加各种生物合成反应,如从乙酰辅酶A合成脂酸、胆固醇;α-酮戊二酸与NADPH及氨生成谷氨酸,谷氨酸可与其他α-酮酸进行转氨基反应而生成相应的氨基酸。
b.NADPH是谷胱甘肽还原酶的辅酶,对维持细胞中还原型谷胱甘肽的正常含量进而保护巯基酶的活性及维持红细胞膜完整性很重要,并可保持血红蛋白铁于二价。
c.NADPH参与体内羟化反应,有些羟化反应与生物合成有关,如从胆固醇合成胆汁酸、类固醇激素等;有些羟化反应则与生物转化有关。
物学意义1,产生大量的NADPH,为细胞的各种合成反应提供还原力2,1 产生NADPH(注意:不是NADH!NADPH不参与呼吸链)2 生成磷酸核糖,为核酸代谢做物质准备 3 分解戊糖意义:1 补充糖酵解2 氧化阶段产生NADPH,促进脂肪酸和固醇合成。
1、论述DNA的结构与功能的关系。
①DNA分子中各脱氧核苷酸的排列顺序。
核苷酸之间以磷酸二酯键连接形成多核苷酸链,即核酸。
不同的脱氧核苷酸的排列顺序决定不同的遗传信息。
②DNA的二级结构:DNA双螺旋结构是核酸的二级结构。
双螺旋的骨架由糖和磷酸基构成,两股链之间的碱基互补配对,是遗传信息传递者,DNA半保留复制的基础,结构要点:a.DNA是一反向平行的互补双链结构亲水的脱氧核糖基和磷酸基骨架位于双链的外侧,而碱基位于内侧,碱基之间以氢键相结合,其中,腺嘌呤始终与胸腺嘧啶配对,形成两个氢键,鸟嘌呤始终与胞嘧啶配对,形成三个氢键。
确保了DNA分子的稳定性。
b.DNA是右手螺旋结构螺旋直径为2nm。
每旋转一周包含了10个碱基,每个碱基的旋转角度为36度。
螺距为3.4nm,每个碱基平面之间的距离为0.34nm。
纵向碱基堆积力进一步稳定了DNA双链结构。
DNA 双螺旋结构稳定的维系横向靠互补碱基的氢键维系,纵向则靠碱基平面间的疏水性堆积力维持,尤以后者为重要。
③DNA的三级结构三级结构是在双螺旋基础上进一步扭曲形成超螺旋,使体积压缩。
在真核生物细胞核内,DNA三级结构与一组组蛋白共同组成核小体。
在核小体的基础上,DNA链经反复折叠形成染色体。
使得在狭小的细胞空间内存储巨大的遗传信息成为可能。
④DNA的功能:DNA的基本功能就是作为生物遗传信息复制的模板和基因转录的模板,它是生命遗传繁殖的物质基础,也是个体生命活动的基础。
DNA中的核糖和磷酸构成的分子骨架是没有差别的,不同区段的DNA分子只是碱基的排列顺序不同。
2、什么是基因表达? 有何基本特征?试述基因表达调控对生物体的重要性。
①生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录及翻译,产生具有生物学功能的产物(蛋白质、RNA),这一过程称为基因表达。
②基本特征(一)时间特异性:按功能需要,某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生,称之为基因表达的时间特异性(temporalspecificity)。
多细胞生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性(stage specificity)。
(二)空间特异性多细胞生物个体在生长发育过程中,同一基因产物在不同组织器官的表达水平不同,称为基因表达的空间特异性(spatial specificity)。
基因表达伴随时间顺序所表现出的空间分布差异,是由细胞在器官的分布决定的,故空间特异性又称细胞或组织特异性(cell or tissuespecificity)。
基因表达调控的生物学意义1、适应环境、维持生长和增殖2、维持细胞分化与个体发育3. 比较真核和原核生物基因表达和基因表达调控的相似和不同之处。
(1)原核生物和真核生物基因表达调控的共同点:a 结构基因均有调控序列; b 表达过程都具有复杂性,表现为多环节;c 表达的时空性,表现为不同发育阶段和不同组织器官上的表达的复杂性;(2)与原核生物比较,真核生物基因表达调控具有自己的特点:a 真核生物基因表达调控过程更复杂;b 基因及基因组的结构特点不同,如真核生物基因具有内含子结构等;c 转录与翻译的间断性,原核生物转录与翻译同时进行,而真核生物该两过程发生在不同区域,具有间断性;d 转录后加工过程;e正负调控机制;f RNA聚合酶种类多。
4. 什么叫衰减子?以色氨酸操纵子为例说明衰减子的调控机制。
⑴原核生物基因转录不依赖ρ(rho)因子的终止结构------茎环结构紧接约6个U,使RNA聚合酶脱落,转录终止,称为衰减子(attenuator)。
⑵细菌E.Coli具备合成色氨酸所需要的酶,这些酶的编码基因串联成一个操纵子------trp operon , trpoperon是一个阻遏型操纵子,在第一个结构基因与启动序列P之间有一个衰减子区域(attenuator region)。
当细菌内色氨酸浓度很高时,trpoperon表达关闭。
是因为trp operon的序列1中有两个色氨酸密码子,色氨酸浓度高时,核蛋白体很快通过编码序列1,并封闭序列2,这种与转录偶联进行的翻译过程导致序列3、4形成一个不依赖ρ(rho)因子的终止结构------衰减子attenuator[茎环结构紧接约6个U],使RNA聚合酶脱落,转录终止。
而细菌内色氨酸浓度缺乏时,trpoperon转录,转录速率受转录衰减机制调节。
色氨酸缺乏,没有色氨酸-tRNA 供给,核蛋白体翻译停止在序列1中的两个色氨酸密码子前,序列2与序列3形成发夹结构,阻止了3、4形成衰减结构,RNA转录继续进行。
实质上是转录与一个前导肽翻译过程的偶联,是原核特有的一种基因调控机制。
5、试列举几种研究基因表达调控的方法,并简述其原理。
目前常用的方法有:(1)、电泳迁移率实验(EMSA)又称凝胶阻滞试验,是体外分析DNA(或RNA)结合蛋白和特异DNA (或RNA)序列相互作用的一种技术。
基本原理:蛋白质可与标记的核酸探针结合,电泳时蛋白质-探针复合物比游离探针在凝胶中泳动的速度慢。
(2)、DNase I 足迹分析,是体外鉴定DNA结合蛋白在DNA 分子上结合位点的实验方法。
基本原理:DNA的特定序列与DNA结合蛋白结合后,结合的DNA结合蛋白可保护该部位的DNA序列不受DNase I 的水解。
(3)、甲基化干扰试验通过甲基化修饰识别与DNA结合蛋白相结合核苷酸的一种方法。
基本原理:利用硫酸二甲酯(DMS)使DNA 分子中的嘌呤碱基G与A发生甲基化,被甲基化修饰的G和A,会干扰DNA结合蛋白与所在部位的DNA结合;甲基化的探针可被化学试剂哌啶特异地切割,从而得到不同分子量的DNA探针片段。
而与蛋白质结合着的DNA位点则不会被切割。
(4)、报告基因分析是通过基因重组方法将待测DNA序列与特异报告基因相连,然后导入细胞中进行表达。
通过测定表达出的报告基因产物的量,即可得知该DNA是否具有启动子活性及启动子活性的高低。
(5)、染色质免疫沉淀分析(CHIP)CHIP是研究体内DNA与蛋白质相互作用的重要工具。
是基于体内分析发展起来的方法,它能真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白。
基本原理:在生理状态下把细胞内的蛋白质和DNA 交联在一起,超声波将其打碎为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过所要研究目的蛋白质特异性抗体沉淀此复合物,特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。
6、常用的研究基因功能的方法有哪些?基因转导、反义核酸技术、基因敲入及基因敲除技术、基因诱捕技术、RNAi应用、核酶技术、microRNA应用、基因芯片技术、蛋白质水平对基因功能的研究、生物信息学方法预测基因功能。
基因转导:将目的基因导入某一细胞中,通过观察细胞生物学行为的变化来认识基本的功能,是目前应用最多、技术最成熟的基因功能研究方法。
反义核酸:相对于其他蛋白或基因抑制剂,反义核酸对靶基因的抑制具有可抑制基因范围广,抑制靶向基因程度可调控以及特异性高等独特的有点。
利用基因敲除,使的其他基因不能表达,我们所要研究的基因进行表达,观察生物的性状发生什么变化,从而来确定基因的功能。
转基因和基因剔除、染色体转导、RNA干涉等是目前研究基因功能的主要方法7、什么是RNA干扰?简述其机理和应用领域。
RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。
这种有siRNA介导的基因表达抑制作用被称为RNA干扰其作用机理:RNAi是通过长度为21~23nt的小RNA分子介导实现。
这种小RNA分子被称之为小干扰RNA(siRNA)。
siRNA由Dicer酶切割双链RNA产生。
Dicer属于RNaseⅢ家族成员,是双链RNA特异性核酸内切酶。
siRNA与RNA诱导沉默复合体(RISC)结合,激活RISC。
RISC的成分:Dicer、Argonaute酶、TRBP结合蛋白。
活化的RISC中的siRNA反义链引导与mRNA 结合,AGO2剪切mRNA。
RNAi具有放大效应。
其应用领域:1.RNAi作为一种强有力的研究工具,用于功能基因组的研究;细胞水平的基因敲除。
2.RNAi应用于基因治疗(抗感染、抗肿瘤等)。
体内小RNA分子的作用:抗病毒功能、基因调控、染色质浓缩、转座子沉默、基因组重组8试从生物合成过程特点比较N-连和O-连蛋白聚糖的异同。
N连接糖蛋白O连接糖蛋白糖基化位点Asn-X-S/Thr不太清楚,通常在丝苏AA集中且有脯AA的序列中合成场所粗面内质网和高尔基体中,可与肽链合成同时在多肽链合成后进行载体在内质网上以长萜醇为糖链载体无糖链载体整个过程在内质网开始在高尔基体结束N-连接聚糖和O-连接聚糖均是在内质网和高尔基复合体中合成的,均由特异的糖基转移酶逐个连接单糖基,单糖基供体一般是UDP或GDP的衍生物。
但N-连接聚糖的合成是与蛋白质肽链的合成同时进行的,其以长萜醇为糖链载体,先将UDP-N乙酰葡萄糖胺中的N乙酰葡萄糖胺转移到长萜醇分子上,然后逐个加上糖基,直至形成含14个糖基的长萜醇焦磷酸聚糖结构,再将含14个糖基的聚糖链作为一个整体转移到糖基化位点在的天冬酰胺的酰胺氮上,最后再进行加工,成为成熟的N-连接聚糖。
O-连接聚糖的合成是在多肽链合成后进行的,没有糖链载体,在相应糖基转移酶的作用下,将O-连接聚糖的第一个糖基转移到多肽链糖基化位点的氨基酸残基的羟基氧上,形成O-连接,然后逐个加上糖基,直至最后形成O-连接聚糖链。
9 试述导致肿瘤细胞过度增殖的信号转导异常。
[答案]:肿瘤细胞信号转导的改变是多成分、多环节的。
1)促细胞增殖的信号转导过强⑴生长因子产生增多:已证明多种肿瘤组织能分泌生长因子,且肿瘤细胞通常具有上述生长因子的受体,因此肿瘤细胞可通过自分泌方式刺激自身增殖。
⑵受体的改变:①某些生长因子受体异常增多:某些癌基因可以表达生长因子受体的类似物,通过模拟生长因子受体的功能起到促增殖的作用;②突变使受体组成型激活:使受体处于配体非依赖性的持续激活状态,持续刺激细胞的增殖转化。
③细胞内信号转导蛋白的改变;除此之外,某些编码蛋白激酶的癌基因的表达增强,也可促进细胞增殖。
2)抑制细胞增殖的信号转导过弱由于生长抑制因子受体的减少,丧失以及受体后的信号转导通路异常,使细胞的生长负调控机制减弱或丧失从而发生肿瘤。
10.请简述GPCR介导的信号转导通路。
[答案要点]:G蛋白可与鸟嘌呤核苷酸可逆性结合。
由、和γ亚基组成的异三聚体,在膜受体与效应器之间起中介作用。
信息分子与受体结合后,激活不同G蛋白,有以下几种途经:(1)腺苷酸环化酶途径通过激活G蛋白不同亚型,增加或抑制腺苷酸环化酶(AC)活性,调节细胞内cAMP浓度。