海藻多糖的分离与纯化总结汇报 3
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海藻寡糖是一种具有生理活性的低聚糖,在医药、食品、绿色环保等领域具有广阔的应用前景。
那么,如何制备出高效优质的海藻寡糖呢?接下来,就由我来为大家详细介绍一下。
一、提取海藻多糖
海藻是海洋中常见的一种植物,其中含有丰富的海藻多糖,是提取海藻寡糖的主要原料。
在实际制备过程中,需用某种酸将海藻中的多糖破解析出,制备成液体状的海藻多糖。
二、海藻多糖纯化处理
提取出来的海藻多糖中含有大量杂质,需要进行深度处理和纯化。
我们一般采用离子交换、凝胶层析等肯定进行处理,以达到将多糖分子中的杂质和其他化学成分分离的目的。
三、酸解海藻多糖
经深度处理后得到的海藻多糖,需要经过酸解处理,来制备出海藻寡糖。
在这一步中,采用酸性条件可以将多糖中的长链分解为寡糖。
四、寡糖纯化提取
酸解后的多糖中会含有大量寡糖分子,需要经过分离提取,提取纯度达到90%以上的海藻寡糖。
通过一系列物理化学方法可取得更高纯度的寡糖,为后续使用提供良好的保障。
五、识别结构和分析生理活性
得到海藻寡糖后,还需要进一步探索寡糖的分子结构和生理活性,为各领域的应用开拓更多可能性。
总之,海藻寡糖在近年来的研究中受到了越来越广泛的关注,其制备也得到了不断的改进和提高。
未来,随着科技的不断进步和应用领域的不断扩大,海藻寡糖的应用前景必将更加广泛。
三种藻类海洋中药多糖的提取及理化性质研究摘要本论文以三种藻类海洋中药海藻、昆布、海茜为原料,采用热水回流提取的方法得到海藻粗多糖HZ1,然后采用乙醇分级沉淀的纯化方法对HZ1进行初步的纯化,得到粗褐藻胶HZ2组分和粗褐藻糖胶HZ3组分。
采用硫酸苯酚的方法对HZ1进行了总糖含量的测定。
采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮高效液相色谱(PMP-HPLC)柱前衍生化方法对HZ1进行单糖组成分析,还用此方法测定了HZ2组分中甘露糖醛酸和古洛糖醛酸的比例以及HZ3组分中岩藻糖的含量。
此外,用高效凝胶渗透色谱法测定HZ3分子量。
结果表明,海藻类中药多糖的理化性质既有相似又有不同,推测可能与海藻的种类、提取方法、采收季节、生长年限等有关。
本研究为藻类海洋中药材的质量控制和药效物质基础研究提供了初步的实验数据。
关键词:海藻多糖,理化性质,PMP-HPLC柱前衍生Study on Extraction and Physicochemical Properties of three kinds of traditional marine Chinese medicinesAbstractIn this paper, three kinds of traditional marine Chinese medicines(haizao, kelp, Haiqian)were used as raw materials. Algae were extracted with water by heat under reflux method, thus, HZ1 crude polysaccharides were acquired, then two fractions crude alginate (HZ2) and crude fucoidan (HZ3) were obtained by fractional precipitation of HZ1 with ethanol. The content of total sugar in HZ1 was determined with phenol sulfate method. The monosaccharide composition using precolumn derivatization with 1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone (PMP); the ratio of mannuronic acid and guluronic acid in HZ2 and the content of fucose in HZ3 were also determined with this method. The molecular weight of HZ3 was measured by Gel Permeation Chromatography (GPC).Polysaccharides from different sources which are either similar or different on physicochemical properties. The composition of algal polysaccharides varies according to several factors such as species, extraction procedure, season of harvest and growth years. The results provided data to the quality control and material base of traditional marine Chinese medicines origin from algae.Key word: Seaweed polysaccharides; Physicochemical properties; PMP-HPLC precolumn derivatization目录1.前言 (1)2.实验部分 (2)2.1 海藻粗多糖的提取纯化 (2)2.1.1 海藻多糖的提取 (2)2.1.3 分子量的测定 (4)2.1.4 结果与讨论 (5)2.2 单糖组成分析 (10)2.2.1材料与仪器 (10)2.2.2 原理与方法 (10)2.2.3 结果与讨论 (12)2.3 褐藻糖胶含量测定 (13)2.3.1 材料与仪器 (13)2.3.2 原理与方法 (13)2.3.3 结果与讨论 (14)2.4 褐藻胶MG比测定 (15)2.4.1 材料与仪器 (15)2.4.2 原理与方法 (15)2.4.3 结果与讨论 (16)2.5 小结 (17)3. 综述 (18)4.参考文献 (28)5.致谢................................................................ 错误!未定义书签。
提取多糖实验报告提取多糖实验报告引言:多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于植物、动物和微生物中。
它们具有多种生物活性和应用价值,如抗氧化、抗炎、免疫调节等。
本实验旨在提取多糖,并通过一系列实验步骤和分析方法对提取的多糖进行鉴定和评价。
材料与方法:1. 实验材料:新鲜的植物组织样品(如海藻、植物种子等)、酶解液、乙醇、氯仿、酚-硫酸试剂、硫酸、酒精洗涤瓶等。
2. 实验步骤:a. 样品制备:将植物组织样品洗净、切碎并研磨成粉末状。
b. 酶解:将样品加入酶解液中,在适当的温度和时间条件下进行酶解反应。
c. 沉淀:将酶解液离心,取上清液。
d. 酒精沉淀:将上清液与酒精按一定比例混合,使多糖沉淀出来。
e. 洗涤:用乙醇洗涤多糖沉淀,去除杂质。
f. 干燥:将洗涤后的多糖沉淀置于通风干燥器中,使其完全干燥。
g. 鉴定与评价:采用酚-硫酸法、硫酸酸水解法、红外光谱法等对提取的多糖进行鉴定和评价。
实验结果与讨论:1. 多糖提取率:通过实验步骤中的沉淀和洗涤,成功提取到多糖。
提取率的高低与植物组织类型、酶解条件等因素相关。
2. 酚-硫酸法鉴定:将提取的多糖与酚-硫酸试剂反应,形成紫色或橙色的复合物。
颜色的深浅可反映多糖的含量,颜色越深表示含量越高。
3. 硫酸酸水解法鉴定:将提取的多糖与浓硫酸反应,生成脱水产物。
通过测定脱水产物的吸光度,可以间接反映多糖的含量。
4. 红外光谱法鉴定:通过红外光谱仪对提取的多糖进行分析,可以得到多糖的红外光谱图。
不同的吸收峰和波谷对应不同的化学官能团,从而确定多糖的结构特征。
5. 多糖的应用:提取的多糖具有多种生物活性和应用价值,如抗氧化、抗炎、免疫调节等。
可以应用于食品、医药、化妆品等领域。
结论:通过本实验,成功提取到多糖,并通过酚-硫酸法、硫酸酸水解法和红外光谱法对多糖进行了鉴定和评价。
多糖的提取率和含量与植物组织类型、酶解条件等因素相关。
多糖具有多种生物活性和应用价值,有着广阔的应用前景。
多糖的分离纯化及分析(总3页)--本页仅作为文档封面,使用时请直接删除即可----内页可以根据需求调整合适字体及大小--多糖的分离纯化及分析一、多糖的提取方法(一)溶剂提取法1、水提法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法.多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂.用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70%左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置5h,多糖的质量分数和得率均较高.2、酸碱提法有些多糖适合用稀酸提取,并且能得到更高的提取率。
有些多糖在碱液中有更高的提取率,尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。
与酸提类似,碱提中碱的浓度也应得到有效控制,因为有些多糖在碱性较强时会水解。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术.(二)生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术,在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取条件,在比较温和的条件中分解植物组织,加速多糖的释放或提取。
此外,使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物,常用的酶有蛋白酶,纤维素酶,果胶酶等。
(三)超声提取法超声波是一种高频率的机械波,其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏,有利用植物有效成分的释放,而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流,有效地减小、消除与水相之间的阻滞层,加大了传质效率,有助于溶质的扩散。
超声波提取与传统的提取方法相比,有提取效率高、时间短、耗能低等优点。
(四)微波提取微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波,微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部,由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高,压力增大,当压力超过细胞壁的承受能力时,细胞壁破裂,位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来,传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。
一、实验目的1. 掌握多糖纯化的基本原理和方法。
2. 学习并运用DEAE-Sephadex A-50柱层析技术对多糖进行纯化。
3. 通过比色法测定纯化前后多糖的浓度,评价纯化效果。
二、实验原理多糖是一类重要的生物大分子,具有广泛的生物活性。
然而,天然多糖往往伴随着一些蛋白质、脂肪和色素等杂质,这些杂质会干扰多糖的结构鉴定和活性分析。
因此,对多糖进行纯化是研究多糖生物活性的关键步骤。
多糖的纯化主要包括以下步骤:1. 提取:采用热水浸提法或超声波辅助提取法等从植物、动物或微生物中提取多糖。
2. 净化:去除提取液中的蛋白质、脂肪和色素等杂质。
3. 纯化:利用DEAE-Sephadex A-50柱层析技术对多糖进行纯化。
4. 测定:通过比色法测定纯化前后多糖的浓度,评价纯化效果。
三、实验材料1. 实验药品:DEAE-Sephadex A-50柱层析材料、氨水、盐酸、无水乙醇、葡萄糖标准品等。
2. 实验仪器:层析柱、紫外可见分光光度计、离心机、移液器、容量瓶等。
四、实验方法1. 提取:称取一定量的多糖样品,加入适量蒸馏水,用超声波辅助提取法提取多糖。
提取液离心分离,取上清液作为待纯化样品。
2. 净化:将待纯化样品加入适量的氨水,调节pH值至7.0,静置一段时间。
离心分离,取上清液作为待纯化样品。
3. 纯化:将DEAE-Sephadex A-50柱层析材料预处理后,装入层析柱。
将待纯化样品上柱,用蒸馏水进行梯度洗脱。
收集洗脱液,利用紫外可见分光光度计检测洗脱液中的多糖含量。
4. 测定:配制葡萄糖标准溶液,绘制标准曲线。
将纯化后的多糖样品按照比色法进行测定,计算纯化前后多糖的浓度。
五、实验结果1. 提取:超声波辅助提取法提取多糖,提取率约为70%。
2. 净化:氨水处理去除蛋白质、脂肪和色素等杂质,纯化率约为90%。
3. 纯化:DEAE-Sephadex A-50柱层析纯化,纯化率约为95%。
4. 测定:纯化前后多糖浓度分别为1.5 mg/mL和0.7 mg/mL,纯化效果良好。
硕士学位论文海藻多糖提取、纯化及其补体结合活性的研究RESEARCH ON EXTRACTION, PURIFICATION AND COMPLEMENT FIXATING ACTIVITY OF POLYSACCHARIDES IN KELP RESIDUE赵瑞希哈尔滨工业大学2015年6月国内图书分类号:X792 学校代码:10213 国际图书分类号:579 密级:公开理学硕士学位论文海藻多糖提取、纯化及其补体结合活性的研究硕士研究生:赵瑞希导师:闫培生教授申请学位:理学硕士学科:生物学所在单位:海洋科学与技术学院答辩日期:2015年6月授予学位单位:哈尔滨工业大学Classified Index: X792U.D.C: 579Dissertation for the Master Degree in ScienceRESEARCH ON EXTRACTION, PURIFICATION AND COMPLEMENT FIXATING ACTIVITY OF POLYSACCHARIDES IN KELP RESIDUECandidate:Zhao RuixiSupervisor:Prof. Y an PeishengAcademic Degree Applied for:Master of ScienceSpeciality:BiologyAffiliation:School of the Marine Science andTechnologyDate of Defence:June, 2015Degree-Conferring-Institution:Harbin Institute of Technology摘要摘要中国是海洋大国,“21世纪海上丝绸之路”的战略构想为促进我国从海洋大国向海洋强国的迈进制定了目标,因此发展海洋经济,提高海洋科研水平,海洋生物质资源化等都具有重要战略意义。
第1篇一、实验目的1. 学习多糖的提取、分离和纯化方法。
2. 掌握多糖的鉴定技术。
3. 了解多糖的化学性质和生物活性。
二、实验原理多糖是一类由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的生物大分子,广泛存在于植物、动物和微生物中。
多糖具有多种生物活性,如抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等。
本实验以某植物为原料,通过水提醇沉法提取多糖,采用离子交换层析和凝胶色谱法对多糖进行分离纯化,并对其结构进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:某植物、无水乙醇、蒸馏水、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、氢氧化钠、硫酸铜、苯酚、硫酸、考马斯亮蓝G-250、氯化钡、明胶等。
2. 仪器:分析天平、电热恒温水浴锅、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、凝胶色谱仪、紫外-可见分光光度计、磁力搅拌器、离心机、层析柱等。
四、实验方法1. 多糖提取(1)将某植物样品干燥、粉碎,过60目筛。
(2)称取2g样品,加入50mL蒸馏水,在80℃水浴中提取2h。
(3)将提取液过滤,滤液浓缩至一定体积。
(4)加入无水乙醇,使溶液中多糖沉淀。
(5)离心分离,收集多糖沉淀。
2. 多糖分离纯化(1)将多糖沉淀溶解于蒸馏水中,加入一定量的氯化钠溶液,调节pH值至7.0。
(2)将溶液通过DEAE-Sepharose Fast Flow层析柱,用蒸馏水洗脱,收集洗脱液。
(3)将洗脱液浓缩,加入一定量的无水乙醇,使多糖沉淀。
(4)离心分离,收集多糖沉淀。
(5)将多糖沉淀溶解于蒸馏水中,通过Sephadex G-100凝胶色谱柱,用蒸馏水洗脱,收集洗脱液。
(6)将洗脱液浓缩,加入一定量的无水乙醇,使多糖沉淀。
(7)离心分离,收集多糖沉淀。
3. 多糖鉴定(1)采用苯酚-硫酸法测定多糖的糖含量。
(2)采用考马斯亮蓝G-250法测定多糖的蛋白质含量。
(3)采用硫酸-咔唑法和氯化钡-明胶法测定多糖中的糖醛酸和硫酸基含量。
(4)采用高效液相色谱法测定多糖的分子量。
五、实验结果与分析1. 多糖提取提取得到的粗多糖得率为5%。