中国马铃薯部分品种资源遗传多样性的RAPD分析
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文章编号
1 0 — 3 9(0 8 0 — 0 1 0 0 5 9 6 2 0 ) 7 0 0 —4
中国马铃薯部 分品种资源 遗传 多样 性 的 R P 分析 A D
邸 宏 ,陈伊里 ,卢翠华
( 东北农业大学农学院,哈尔滨 10 3 50 0)
摘
要 :采用 R P A D方法分析 10份 中国马铃薯 品种 资源 ,获得 了 2 引物 的扩增谱 带 , 2 2 2条 2条 引物 扩增 出
交 织 聚在 一 起 。
关键词 :马铃薯 ;遗传 多样性 ;R P AD 中图分 类号 :¥ 3 ;¥/90 1 52 55 11 文献标识码:A
本研究利用 R P A D分子标记技术 ,对 中国马
CA T B小量法提取 叶片的 D A N 。将各 材料的 D A N
浓 度调 整至 2 g 0n ・ 型扩增 仪上 进行 。 。R P A D反 应 在 M T 一 0 JP C 20
mm |L ,d T . mm lL ,弓 物 0 2I o・ o・ N P01 o・ l . m lL , 3  ̄
模板 D A 4 g a D A聚合酶 (r ea 司生 N 0n ,Tq N Po g 公 m
找新 的基 因库提供分子水平 的依据 ,以利 于选择
亲源关系较远 的材料做杂交 ,增加后代 的遗传变
离 )J 【 】 。 1 数 据 处理 . 3
和杂交实生种子 ,提高育种效率 。
1 材 料 与 方 法
11 试验材 料 .
使用凝胶成像 系统拍照记录试验结果 。统计 P R扩增的条带数 ,谱带按 01 C / 系统记录 ,有带记
为 1 ,无 带 记 为 0 ,利 用 Saiia软 件 进 行 U G ttt sc P—
事 马铃薯组 织培养 和生物技术方 面的教学与研究工作 。
通讯作者 E malptt@na .d .n - i oa : o eue u c
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东
北
农
业
大
学 学
报
第 卷 9
带 清 晰稳 定 的 2 2条 引 物 扩增 结 果 进行 分 析 ( 表 见 2 、图 1 。2 ) 2条引 物共 扩增 出 24条 带 ,多态 性条 7
2 4条 带,多态性 条带为 2 5条 ,多态性比率为 7 .%。不 同引物扩增的条带数在 6 2 之 间,每条 引物平 均扩增 7 1 8 5 —1 出 l . 带,扩增 条带数最 多的是 S 2 ,多态性 比率最 高引物为 ¥ 6 10份材料之 间的遗传距 离为 00  ̄ .1 25条 16 6。 2 , 08 , 4 平 均值 为 0 8 . 。聚类分析将 10 材料分为五类 。除 N 7 — 1 1以外 ,所有的新型栽培种资源与普通 栽培 种划分 3 2份 s8 1 - 在 不 同的类 中,有亲缘关 系的材料 大多聚在 一类,品种的分类没有明显的地域特征 ,各 育种 单位 育成 的品种相互
铃薯部分种质资源进行遗传 多样性分 析 ,建立高 效 、稳定 、重复性 好 的 R P A D反 应体 系和流 程 ,
从分子水平分析 中国各地 马铃薯 主栽 品种 间的遗 传关 系及遗传基础 ,目的是获得 中国马铃薯 主栽 品种亲缘关系图和 D A特征谱带 ,为马铃薯品种 N 的进一步利用和开发以及种质鉴定提供分子依据 ; 分析我 国马铃薯地方 品种和新型栽 培种资 源 ,鉴 定其遗传变异 的丰富性 ,为种质资源 的拓 宽和寻
扩增 的多态 比率分 布于 6 . 10 3 %~ 0%之 间 ,引 物 6
¥6扩 增 的多 态 比率 最 高 。 6
带为 2 5 ,多态性 比率为 7 . 1条 8 %。平均每条引物 5 扩增 出 1. 25条带 ,多 态性 条带 为 98条 。不 同引物 .
试验所用 R P A D随机引物和 d T s 自上海 NP购
生工生 物工程公 司。对 l0条随 机引物进行 了筛 1 选 ,R P A D反 应 体 系 为 2 L 5 ,含 Ti— C 0 f H 11 s
mm l L p .) K I 0 mm l L , M C221 o ・ (H 83 , C o ・ ~ 5 gl .
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第3卷第7 9 期
20 0 8年 7月
东
北
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报
3 () 14 97: -
J y2 0 ul 0 8
Junl f r es A r utrl nvri o ra o t at gi l a U i st No h c u e y
21 A D揭示的多态性 . R P
本试验从上海生工生物工程公 司合成的 1 0 0 0 条 随机 引物 中初 步筛选 出 4 5条 ,对 全部试 验材 料进行扩增 ,从 中选 出重 复性 好 、多态性强 、条
的草炭蛭石培养基质上 ,待 叶片充分 伸展 。采用
收稿 日期:2 0 - 4 1 0 7- — 7 - 0 作者简介:邸宏(9 4 ) 17 - ,女,黑龙江人 ,博士 , 讲师 ,主要从
本试验选取 8 份 中国各 地马铃薯 主栽 品种 , 9
1 4份地 方 品种 ,1 7份新 型栽 培 种 ,见 表 1 。 1 试 验方 法 . 2
M A聚类分析。
薯块发芽后 ,剥取茎尖 ,转 移到试 管培养基 上 ,获得脱毒试管苗 。试管苗移栽 至 日光温室 中
2 结果 与分析
异 ,选 育 出杂 种 优 势 强 、综 合 性 状 好 的优 良品种
产)U d2 1 ,d H0补足体系。反应混合物用 2 石 0
蜡油覆盖。反应程序为 :9 4℃ 4m n 4℃ 3 , i,9 0 S 3 7℃ 4 , 2 C6 0S 7 S o 0 ,扩增 4 个循环,最后 7 0 2℃ 1 i P R扩增产物在 1 %琼脂糖凝胶上电泳分 0mn C ( . 5