标准曲线的绘制课件

怎样绘制标准曲线
首先，准备实验所需的材料和仪器。

通常情况下，我们需要准备标准样品、实验室常用的仪器（比如分光光度计、色谱仪等）、实验室常用的试剂和溶剂等。

确保所有的材料和仪器都是干净的，并且处于良好的工作状态。

其次，根据实验的需要选择合适的标准样品。

标准样品的选择应当与待测样品的性质相符合，确保标准样品的浓度范围覆盖到待测样品的浓度范围内。

这样才能够绘制出准确的标准曲线。

然后，按照实验的要求进行标准样品的稀释。

通常情况下，标准样品的浓度会比较高，需要进行适当的稀释，使得标准样品的浓度可以覆盖到待测样品的浓度范围内。

在进行稀释的过程中，需要注意精确的操作，避免出现误差。

接着，进行实验测量。

将稀释后的标准样品依次放入仪器中进行测量，记录下每个标准样品的测量数值。

在记录数据的过程中，需要注意保持仪器的稳定，避免外界因素对实验结果的影响。

最后，根据实验测量得到的数据绘制标准曲线。

通常情况下，
我们会将标准样品的浓度作为自变量，测量数值作为因变量，绘制
出标准曲线的图像。

在绘制曲线的过程中，需要选择合适的曲线拟
合方法，确保曲线能够准确地反映出标准样品浓度与测量数值之间
的关系。

绘制标准曲线是实验室工作中非常重要的一环，准确的标准曲
线可以帮助我们准确地测量和分析样品中的成分。

通过以上的步骤，我们可以清晰地了解到如何绘制标准曲线，希望这些内容对你有所
帮助。

标准加入法绘制标准曲线
标准加入法是一种常用的实验方法，可以用于测定样品中某种成分的含量。

在进行标准加入法实验时，需要绘制标准曲线，以便计算出样品中目标成分的含量。

本文将介绍如何使用标准加入法绘制标准曲线。

第一步，准备标准品溶液。

选择一种已知浓度的标准品，将其加入到一系列试管中，浓度逐渐加大，例如0.1mol/L、0.2mol/L、
0.3mol/L等。

第二步，加入试剂。

将每个试管中的标准品溶液加入一定量的试剂，使其发生反应，产生可测量的信号。

例如，可以加入一定量的指示剂或者反应剂。

第三步，测量信号强度。

使用光谱仪、电化学分析仪等设备，测量每个试管中的信号强度。

例如，可以测量吸光度、电位等。

第四步，绘制标准曲线。

将每个试管中的信号强度与其对应的标准品浓度绘制到图表上，可以得到一条标准曲线。

第五步，测量样品信号强度。

将待测样品加入到一个新的试管中，加入相同的试剂，测量其信号强度。

第六步，计算样品中目标成分的含量。

根据标准曲线，可以计算出样品中目标成分的含量。

总之，标准加入法绘制标准曲线是一个重要的实验步骤，需要仔细操作。

通过合理地设置标准品浓度、试剂种类和测量方法，可以得到准确可靠的标准曲线，用于测定样品中目标成分的含量。

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。

另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。

将甲醛标准样品稀释成10 ug/ml，2~5℃贮存。

取7支25ml具塞比色管按下表绘制标准色列：
于上述标准系列中，用水稀释定容至10.0ml刻线，加0.25%乙酰丙酮溶液2.0ml，混匀，置于沸水浴中加热3min，取出冷却至室温，用1cm吸收池，以水为参比，于波长413nm处测定吸光度。

将上述系列标准溶液测得的吸光度A值扣
值，便得到校准吸光度y值，以标准吸光度y 除试剂空白（零浓度）的吸光度A
为纵坐标，以甲醛含量x（ug）为横坐标，绘制标准曲线，或用最小二乘法计算其回归方程式。

注意零浓度不参与计算。

y=bx+a
式中：a——校准曲线截距；
B——标准曲线斜率。

由斜率倒数求得校准因子：Ba=1//b
样品测定
将吸收后的样品溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水稀释定容，取少于10ml试样（吸取量视溶液浓度而定），于25ml比色管中，用水定容至10.0ml刻线，以下步骤按标准曲线的绘制过程进行分光光度测定。

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。

另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。

化学分析中的标准曲线绘制方法在化学分析中，标准曲线是一种非常重要的方法，用于量化分析样品中某种物质的含量。

标准曲线的绘制是分析师在实验室工作中必备的技能之一。

它不仅能够提高分析数据的准确性，还可以帮助我们了解待测物质与信号之间的关系，从而更好地理解样品中的化学成分。

首先，我们需要明白标准曲线的基本原理。

标准曲线是通过制备一系列不同浓度的标准溶液，测量其对应的信号强度，并将这些数据绘制在一张图上得到的。

通常情况下，我们认为标准溶液中待测物质的浓度与信号强度之间存在线性关系。

因此，标准曲线呈现为一条直线。

在实验中，首先我们需要制备一系列的标准溶液。

这些标准溶液的浓度范围应该尽量覆盖我们要测试的样品中待测物质的浓度范围。

制备标准溶液时，我们需要注意控制好实验条件，确保每个标准溶液的制备过程相同，这样才能保证标准曲线的可靠性。

此外，我们还需要使用纯净的溶剂和准确的浓度计量器具，以保证标准溶液的准确性。

接下来，我们需要使用适当的仪器仪表对这些标准溶液进行测量。

仪器的选择应根据待测物质的属性来确定。

如对于紫外-可见吸收光谱分析，我们可以使用紫外-可见分光光度计，通过测量标准溶液在特定波长下的吸光度来获取信号强度。

对于色谱分析，我们可以使用气相色谱仪或液相色谱仪，根据样品中化合物的保留时间来获得信号强度。

不同仪器仪表对应的信号强度也是不同的，因此在绘制标准曲线时需要注意选择适当的仪器仪表。

测量完标准溶液各个浓度对应的信号强度后，我们需要将这些数据绘制在一张图上。

横轴通常表示待测物质的浓度，纵轴表示信号强度。

对于线性关系，我们可以使用最小二乘法进行数据拟合，得到一条直线。

拟合直线的斜率和截距分别代表了信号强度与浓度之间的比例关系和零浓度时的信号强度。

这样，当我们需要测量待测样品中待测物质的浓度时，只需要通过测量其对应的信号强度，然后利用拟合直线的方程进行计算即可。

需要注意的是，绘制标准曲线时应尽量采用多个浓度点，以提高拟合直线的准确性。

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。

另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。

《畜产品检测技术》技能实训指导书实训项目名称标准曲线的绘制学时4学时实训目的1.熟练掌握标准曲线的测定与绘制方法。

2.了解绘制标准曲线的原理和注意事项。

一、标准品吸光度值的测定分别吸取0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.50mL、2.00mL、2.50mL亚硝酸钠标准使用液（相当于0.0μg 、1.0μg、2.0μg、3.0μg、4.0μg、5.0μg、7.5μg、10.0μg、12.5μg 亚硝酸钠），置于50mL带塞比色管中。

分别加入2mL 4g/L 对氨基苯磺酸溶液，混匀，静置3min~5min后各加入1mL 2g/L 盐酸萘乙二胺溶液，加水至刻度，混匀，静置15min，用1cm比色皿，以零管调节零点，于波长538nm 处测吸光度，并记录吸光度。

二、标准曲线的绘制以亚硝酸盐标准溶液的浓度C为标准曲线的横坐标(X)，以不同浓度亚硝酸盐标准溶液对应测得的吸光度值A为标准曲线的纵坐标(Y)，按回归方程式计算结果绘制标准曲线。

或当标准溶液的浓度(X)取值为C1、C2、……C n时，对应分光光度计测得的吸光度值分别为A1、A2……Yn。

将这些测量点描绘在坐标系中，用直尺绘出一条表示X与Y之间的直线线性关系，这就是常标准曲线。

用作绘制标准曲线的标准物质，它的含量范围应包括试祥中被测物质的含量，标准曲线不能任意延长。

用作绘制标准曲线的绘图纸的横坐标和纵坐标的标度以及实验点的大小均不能太大或太小，应能近似地反映测量的精度。

图1 亚硝酸盐测定标准曲线的绘制三、绘制标准曲线的注意事项1.设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度，并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度，即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内，包括上限和下限。

2.最好采用倍比稀释法配制标准曲线中的标准样品浓度，这样就能够保证标准样品的浓度不会出现较大的偏离。

3.检测标准样品时，应按浓度递增顺序进行，以减少高浓度对低浓度的影响，提高准确性。

K 哼 / \ ---------------------- * -----荧光定量PCR 之绝对定量分析一一标准曲线的绘制1. 绝对定量定义绝对定量是用已知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量将标准品稀释至不同浓度，作为模板进行PCR 反应。

以标准品拷贝数 的对数值为横坐标，以测得的CT 值为纵坐标，绘制标准曲线，对未知样品进行 定量时，根据未知样品的CT 值，即可在标准曲线中得到样品的拷贝数。

* Log （起始浓度）与循环数呈线性关系，通过已知起始拷贝数的标准品可作出标 准曲线，即得到该扩增反应存在的线性关系*由样品CT 值，就可以计算出样品中所含的模板量2. 绝对定量标准品 标准品的一些标准*必须用与扩增目的基因相同的引物进行扩增，并且扩增效率相同*标准品必须是经过准确定量的（我们通常用的是 ASP-3700紫外光/可见光微 量分光光度计）*标准品必须是标准化的（例如，同一化的细胞数）*在每组实验时，必须用相同的阈值设定来确定 CT 值标准品可以是含有目的基因的线性化的质粒 DNA ，也可以是比扩增片 段长的纯化后的PCR 产物，当然也可以是基因组 DNA ，甚至cDNA ，但前提是 所有的作为标准品的核酸都必须保证稳定。

3. 标准品的制备一般一条标准曲线取四到五个点，浓度范围要能覆盖样品的浓度区间，以保证定量RNA-d>NA PCR<*4的准确性。

一般一个点重复三至五次，对于常期稳定使用的标准品可以适当减少重复的次数。

倍比梯度稀释方法：1v原液(标准品i) +9v稀释缓冲液，得标准品ii1v标准品ii+9v稀释缓冲液，得标准品iii1v标准品iii+9v稀释缓冲液，得标准品iv1v标准品iv+9v稀释缓冲液，得标准品v 依次倍比稀释拷贝数的计算：详见核酸拷贝数的计算4.实例标准品的制作：将标准品依次进行10倍稀释，ASP-3700测得其拷贝数1.55X 810 copy /ul标准曲线的绘制(1cycle=1mi n)设置对照：浓度为 1.55X 107、1.55X 106、1.55X 105、1.55X 104、1.55X 103、1.55X 102、1.55X 101的标准样品各一个，设空白对照PCR反应：以不同浓度标准品作为模板标准品的扩增曲线标准品的标准曲线图XLog 7 6 5 4 3 2 1 Y CT 值「 12.01 14.89 17.92 21.18 「24.56 27.89 31.25 亠U-UO*EA POU31U标准品的溶解曲线5-34.29-3 23x S r 0.2l533fi50r r th 彌颐轴,.<扩增效率（E）计算：E=10-1/斜率=10-1/-3.23=2.04, E%=（2.04-1）X 100%=104%若未知样本的CT值为19.11，将CT值代入线性方程：即 19.11=34.29-3.23X，所以 X=（19.11-34.29）/（-3.23）=4.74 7Qua ntity unkno w=10 =50118 copies核酸拷贝数的计算一、分步推理如何计算核酸拷贝数1A260 吸光度值=dsDNA 50ug/ml=ssDNA 33ug/ml=ssRNA 40ug/ml核酸浓度=（OD260）x （dilution factor）x [33 或 40 或 50]=ng/ulMW 代表克/摩尔，单位dolton： 1dolton即表示1g/mol1摩尔=6.02x1023摩尔分子（拷贝数）平均分子量（MW） : dsDNA=（碱基数）x （660道尔顿/碱基）ssDNA = （碱基数）x （330 道尔顿/碱基）ssRNA=（碱基数）x （340道尔顿/碱基）得到拷贝数计算公式：（6.02x1023拷贝数/摩尔）x （浓度）/（MW g/mol）= copies/ml. 即（6.02X102）x （g/ml）/（DNA length x 660）=copies/ml.或（6.02x 1023）x （ng/ul x 10-9）/（DNA length x 660）=copies/ul.例：3000碱基质粒，浓度100 ng/ulMW=3000bp x 660dalton/bp=1.98x 10 daltons,即 1mol=1.98 x 10 g（100 ng x 10-9）g/1.98x 106 =摩尔数copy数=摩尔数x 6.02x 1023 = 3x 1010copies/ul.二、这是一个小小的计算器，使你计算更加方便快捷，免去算数之苦……http://www.bioask.me/html/541.html什么是拷贝数？www.bioask.c n/html/540.html如何计算拷贝数？计算方法：（6.02x 1023拷贝数 /摩尔）x （浓度 g/ml） / （MW g/mol） = copies/ml[平均分子量（MW g/mol）: dsDNA=（碱基数）x （660道尔顿/碱基）;ssDNA=（碱基数）x （330道尔顿/碱基）;ssRNA=（碱基数）x （340道尔顿/碱基）]。

主题：edta试验标准曲线画法1. 介绍edta试验的概念和意义edta试验是一种常用的化学分析方法，用于测定金属离子的浓度。

通过edta与金属离子的化合反应，可以实现对金属离子的定量分析。

edta试验广泛应用于环境监测、食品安全等领域，是一种重要的化学分析技术。

2. edta试验标准曲线的作用edta试验标准曲线是用于测定待测溶液中金属离子浓度的重要工具，通过测定一系列标准溶液的吸光度或电位值，绘制标准曲线，可以确定待测溶液中金属离子的浓度。

绘制edta试验标准曲线的画法至关重要，可以影响到实验结果的准确性和可靠性。

3. 绘制edta试验标准曲线的步骤准备一系列浓度不同的标准溶液，每种溶液中含有相同金属离子的量，但浓度逐渐增加。

分别对各个标准溶液进行edta试验，测定其吸光度或电位值。

接下来，将测得的吸光度或电位值作为纵坐标，标准溶液的浓度作为横坐标，绘制出标准曲线。

利用待测溶液的吸光度或电位值，通过标准曲线，可以确定其中金属离子的浓度。

4. edta试验标准曲线的画法绘制标准曲线时，通常将纵坐标取对数，这样可以使得各标准溶液的吸光度或电位值能够分布在较小的范围内，使得曲线更加平滑。

绘制标准曲线时，要注意选择适当的比例尺，使得标准曲线能够清晰地反映各标准溶液的浓度变化。

在绘制曲线时，要使用细细的直尺和细细的铅笔，以保证曲线的精细度和准确度。

标准曲线的绘制要在室温下进行，避免温度对实验结果的影响。

5. edta试验标准曲线的应用绘制好标准曲线后，可以使用该曲线进行待测溶液中金属离子浓度的测定。

通过测定待测溶液的吸光度或电位值，并由标准曲线确定其金属离子浓度，可以得到准确的分析结果。

正确绘制标准曲线对于edta 试验的准确性和可靠性具有重要意义。

6. 结语edta试验标准曲线的画法对于化学分析实验具有重要的意义，正确绘制标准曲线可以保证实验结果的准确性和可靠性。

在进行edta试验时，应当严格按照标准曲线的画法进行操作，以确保实验结果的准确性。

标准曲线的绘制标准曲线是科学实验和数据分析中常用的一种方法，它可以帮助我们更直观地理解数据之间的关系，并用于预测和分析实验结果。

在实验室中，我们经常需要绘制标准曲线来确定未知样品的浓度或其他性质。

下面将介绍标准曲线的绘制方法及其在实验中的应用。

首先，我们需要准备一系列已知浓度的标准溶液，以及相应的实验数据。

这些数据通常是在实验室条件下通过仪器测量得到的，比如光谱仪、色谱仪等。

接下来，我们将这些数据进行处理和分析，然后利用统计学方法来确定标准曲线的方程。

在绘制标准曲线时，我们通常选择横轴表示浓度或其他已知量，纵轴表示测量值或响应值。

然后，我们将已知浓度与相应的测量值进行配对，然后利用这些数据点来绘制曲线。

通常情况下，我们会选择直线、二次曲线或者其他函数来拟合这些数据点，以得到标准曲线的方程。

绘制好标准曲线后，我们就可以利用它来确定未知样品的浓度或其他性质了。

我们只需要测量未知样品的响应值，然后代入标准曲线的方程中，就可以得到相应的浓度或其他性质。

这种方法非常简便和准确，因此在实验室中得到了广泛的应用。

除了用于测定未知样品的性质外，标准曲线还可以用于监测实验条件的稳定性和仪器的精密度。

通过定期绘制标准曲线并对比不同时间点或不同仪器的曲线，我们可以及时发现实验条件或仪器的变化，从而保证实验结果的准确性和可靠性。

总之，标准曲线的绘制是实验室工作中非常重要的一部分，它可以帮助我们更好地理解数据和实验结果，提高实验的准确性和可靠性。

因此，我们在实验中应该认真学习和掌握标准曲线的绘制方法，并合理地应用于实际工作中。

希望本文对您有所帮助，谢谢阅读！。

考马斯亮蓝G-250法测定蛋白质含量定一、目的学习和掌握考马斯亮蓝G-250 测定蛋白质含量的原理和方法。

二、原理考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。

考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm 波长下有最大光吸收。

其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。

蛋白质与考马斯亮蓝G-250 结合在2min 左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h 内保持稳定。

该法是1976年Bradford 建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry 法还高4 倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为0～1 000μg／mL，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。

二、材料、主要仪器和试剂1．实验材料新鲜绿豆芽2．主要仪器（1）分析天平、台式天平（2）刻度吸管（3）具塞试管、试管架（4）研钵（5）离心机、离心管（6）烧杯、量筒（7）微量取样器（8）分光光度计3．试剂（1）牛血清白蛋白标准溶液的配制：准确称取100mg 牛血清白蛋白，溶于100mL 蒸馏水中，即为1 000μg／mL 的原液。

（2）蛋白试剂考马斯亮蓝G-250 的配制：称取100mg 考马斯亮蓝G-250，溶于50mL90％乙醇中，加入85％（W／V）的磷酸100mL，最后用蒸馏水定容到1 000mL。

此溶液在常温下可放置一个月。

（3）乙醇（4）磷酸（85％）四、操作步骤1．标准曲线制作（1）0~100μg／mL 标准曲线的制作：取6 支10mL 干净的具塞试管，按表1 取样。

盖塞后，将各试管中溶液纵向倒转混合，放置2min 后用1cm 光经的比色杯在595nm 波长下比色，记录各管测定的光密度OD595nm，并做标准曲线。

表1 低浓度标准曲线制作（2）0~1 000μg／mL 标准曲线的制作：另取6 支10mL 具塞试管，按表2 取样。

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。

另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本：广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间：2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人：何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1．数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后，得到的ALT活力单位值均大于40，即均为非正常值，综上，认为待测血清中ALT 含量超于正常值。

3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系，符合理论规律，但其他的数据误差较大。

另外，比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。

4.经分析，总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时，丙酮酸标准溶液的剂量都很小，容易造成误差。

加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差，保温的时间，以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差，容易造成较大。