浙江大学 研究生 期末考试 分子生物学复习题

分子生物学题库引言分子生物学是研究生物分子结构、功能、相互作用及其调控的学科。

在当今科学研究的前沿领域，分子生物学被广泛应用于生物医学、基因工程、农业科技和环境保护等领域。

为了能够更好地掌握分子生物学的知识和技能，我们需要不断学习和训练。

本文档将提供一系列分子生物学的题目，帮助读者进行练习和巩固知识。

1. DNA的结构和功能1.1. 描述DNA的结构，并解释其双螺旋结构的重要性。

1.2. DNA的复制是如何进行的？请详细描述DNA复制的步骤。

1.3. DNA修复是维护基因组稳定性的重要机制，请列举常见的DNA损伤和相应的修复机制。

2. RNA的结构和功能2.1. RNA与DNA的结构有何不同？请对比二者的差异。

2.2. mRNA是如何转录的？请描述转录的过程，并解释其重要性。

2.3. tRNA和rRNA在蛋白质合成中的作用是什么？请分别描述它们的功能。

3. 基因调控与表达3.1. 请解释什么是基因调控？列举常见的基因调控机制。

3.2. DNA甲基化是一种常见的基因调控方式，请解释DNA甲基化的作用和调控机制。

3.3. miRNA是一类重要的非编码RNA，请描述miRNA在基因表达调控中的作用。

4. 蛋白质结构与功能4.1. 描述蛋白质的级别结构，并解释其重要性。

4.2. 蛋白质的折叠是如何发生的？请解释蛋白质折叠的机制和重要性。

4.3. 请解释蛋白质与其他生物分子之间的相互作用，并列举常见的蛋白质相互作用类型。

5. 基因工程与基因组编辑5.1. 描述常见的基因工程技术，包括重组DNA技术和基因克隆技术。

5.2. CRISPR-Cas9技术是一种重要的基因组编辑技术，请解释CRISPR-Cas9技术的原理和应用。

5.3. 请描述基因组编辑在植物育种和医学研究中的应用。

结论分子生物学作为生物学的重要分支学科，研究了生物分子的结构、功能和相互作用。

理解分子生物学的知识对于从事生物医学研究、基因工程、农业科技和环境保护等领域的科学家和研究人员来说至关重要。

一是非题1/301 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解3 E.coli 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键4 通过柠檬酸途径将乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP+生成NADPH5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸7 脯氨酸是α螺旋破坏者8 维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中11 DNA双螺旋的两条链方向一定是相反的12 酶影响其催化反应的平衡13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关14 维生素E是一种天然的抗氧化剂15 维生素B1的辅酶形式是TPP16 ATP是体内能量的储存形式17 糖酵解过程无需氧气的参与18 胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用21 DNA复制时,后滞链需多个引物22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件23 PCR是包括变性,复性和延伸三个步骤的循环反应24 Sanger曾两获诺贝尔奖25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点26 生长激素释放抑制因子是一个14肽27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别29 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务二写出下列物质的分子结构式1/61 Thr2 D-核糖3 A4 GSH5 尼克酰胺6 丙酮酸三名词解释4/241 反密码子2 操纵基因3 多肽核酸( peptide nucleic acid )4 折叠酶5 共价调节6 Humen Genome Project四综合题10/401 试表述Glu经脱氨基,有氧氧化等途径彻底分解成NH3 , CO2, 和H2O 时的代谢路线,要求用箭头表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP?2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异同3 请对中心法则加以阐述4 凝胶过滤是分离蛋白质混合物最有效的方法之一,请说明其工作原理并简述用该法分离蛋白质的实验操作步骤02一是非题1/201 所谓肽单位就是指组成蛋白质的氨基酸残基2在竞争性抑制剂存在的情况下,即使加入足够量的底物,酶仍不能达到其催化的最大反应速度3 一级结构决定空间结构,所以蛋白质合成中新生肽链的折叠无须其他蛋白质的帮助.4 Sanger反应(二硝基氟苯法)用以鉴定多肽链羧基末端氨基酸,而Edman反应(苯异硫氰酸酯法)则用以鉴定多肽链氨基末端氨基酸.5 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.6 在某些生物中,RNA也可以是遗传信息的基本携带者7 生长激素释放抑制因子是一个14肽8 维生素B1的辅酶形式是TPP9 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种10 肾上腺素和胰高血糖素都通过cAMP很快地对机体组织发挥作用11 呼吸链电子载体是按照其标准势能逐步下降而氧化还原电势逐步增加的方向排列的12 CO对氧化磷酸化的影响主要是抑制ATP的形成过程,但不抑制电子传递过程13 花生四烯酸广泛存在与植物中,它是哺乳动物的必需脂肪酸14 即使在饥饿状态下,肝脏也不利用酮体作为燃料分子,而大脑组织在血糖供应不足时会利用酮体作为燃料分子供能15 不同生物对氨基氮的排泄方式不同,如鱼类以氨的形式直接将氨基氮排出体外;鸟类以尿酸形式,植物和动物以尿素形式将氨基氮排出体外16 紫外辐射引起的DNA损伤可通过光复活作用修复. 光复活酶虽然在生物界分布很广,从低等单细胞生物直到鸟类都有,但高等哺乳类中却没有17 逆转录酶存在与所有RNA病毒中,在RNA病毒复制中起作用18 遗传密码字典在生物界并非完全通用,像原生动物纤毛虫就有例外19 糖基化是真核生物蛋白质修饰的一种重要方式,内质网和高尔基体两种亚细胞器都能对蛋白质进行糖基化修饰20 真核生物中同一转录单位可以通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板mRNA二用化学结构式完成下列酶促反应4/201异柠檬酸裂解酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖异构酶4 烯脂酰辅酶A水化酶5 丙氨酰tRNA合成酶三综合题10/601 什么是蛋白质的二级结构?稳定二级结构的主要作用力是什么?多肽链中存在的脯氨酸对α螺旋的形成有何影响,为什么?哪种蛋白质完全由α螺旋构成?2 电泳是分离生物大分子的主要方法之一,简述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子量,其原理是什么? 分子量不同的蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率与其分子量有什么关系?3 何谓酶促反应动力学?底物浓度,温度和PH值对酶促反应速度各有什么影响?试分析之.如果希望反应初速度达到其最大速度的90%,底物浓度应为多大?4 何谓核酸变性?引起核酸变性的因素有哪些?何谓DNA的熔解温度(Tm)?其大小与哪些因素有关? 5从结构和功能两大方面比较E.coli DNA 聚合酶III和RNA聚合酶6 Jacob 和Monod在上个世纪60年代初提出乳糖操纵子模型,开创了基因表达调节研究的新领域,具有划时代意义.请你试述乳糖操纵子理论.03一是非题1/201 氧化磷酸化作用是ATP的生成基于与相偶联的磷酸化作用.( )2 酶的化学本质是蛋白质.( )3 多肽链结构中,一个氨基酸残基就是一个肽单位.( )4 FMN和FAD的组成中有核黄素.( )5 在细菌的复制中起主要作用的是DNA聚合酶I( )6 DNA变性后其粘度增大( )7乙醛酸循环在所有的高等植物中都存在.( )8 EMP途径本身只产生还原剂,而不产生高能中间产物.( )9酶促反应的能量效应是降低反应的活化能.( )10 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.( )11 CoQ只能作为电子传递的中间载体.( )12 DNA双螺旋结构的稳定性主要来自碱基对之间的氢键( )13 组成蛋白质的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子属于不对称碳原子,因此都具有旋光性.( )14 mRNA的3`端polyA结构是由DNA的非编码区转录的.( )15 糖酵解的限速酶为丙酮酸激酶.( )16 乙酰辅酶A是进入TCA循环还是生成酮体,主要由草酰乙酸浓度调控.( )17 E.coli RNA 聚合酶的σ亚基与转录的终止识别有关.( )18 氧化还原电对中,电子从电势较低的电对流向电势较高的电对,这是自由能降低的现象.( )19 葡萄糖和果糖都具有还原性.( )20 如果加入足够量的底物,即使有竞争性抑制剂存在,酶催化的最大反应速度Vmax是可以达到的( )二写出下列物质的结构式2/101 Ser2 U3 草酰乙酸4 ATP5 D-glucose三写出下列酶催化的生化反应式( 不要求写结构式)3/301 磷酸果糖激酶2 磷酸甘油变位酶3 丙酮酸脱氢酶系4 顺乌头酸酶5 异柠檬酸裂解酶6 脂酰辅酶A脱氢酶7 谷丙转氨酶8 鸟氨酸转氨甲酰酶9 DNA合成酶10 氨酰tRNA合成酶四综合题15/901 简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理,你使用该技术分离和检测过何种物质?主要操作步骤有哪些?2 质粒是基因工程中最常用的载体,为获得某质粒(如pUC18)DNA,请你设计一个简单的实验过程(步骤).3 谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展.4 DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的?简述其基本内容.为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献?5 何谓变性,那些因素可以引起蛋白质的变性?何谓别构(变构)?举一例说明.6 试述三羧酸循环是如何沟通糖类,脂类和蛋白质三大有机物的代谢的?2004年生物化学1、名词解释（5分每题）1）埃德曼降解（Edman Degradation）抗体（Antibody）诱导契合学说（Induced Fit Thermosdynamics）热力学第二定律补救途径荷尔蒙竞争性抑制细胞膜 DNA聚合酶基因表达2、回答（共100分）1）根据国际分类法将酶分成哪几大类，分别叙述它们的酶反应特征。

分子生物学考研试题及答案# 分子生物学考研试题及答案## 一、选择题（每题2分，共20分）1. 以下哪个不是DNA聚合酶的功能？A. 校对功能B. 催化DNA链的延伸C. 催化RNA链的合成D. 催化DNA链的复制2. 真核生物的基因表达调控主要发生在哪个阶段？A. 转录前B. 转录后C. 翻译D. 翻译后3. 以下哪个是真核生物mRNA的5'端帽子结构？A. 甲基化鸟苷B. 磷酸化鸟苷C. 乙酰化鸟苷D. 腺苷4. 以下哪个不是蛋白质合成过程中的元件？A. 核糖体B. tRNAC. mRNAD. 内质网5. 基因克隆中，常用的载体是：A. 质粒B. 病毒C. 线粒体DNAD. 染色体DNA6. 以下哪个是限制性内切酶识别的序列？A. ATGB. GGTACCC. TATAAAD. CTTGAC7. 以下哪个是基因表达的负调控因子？A. 转录激活因子B. 转录抑制因子C. 转录因子D. RNA聚合酶8. 以下哪个是RNA干扰的机制？A. 降解mRNAB. 促进mRNA翻译C. 抑制蛋白质合成D. 促进DNA复制9. 以下哪个是基因组编辑技术CRISPR-Cas9的组成部分？A. 单链RNAB. 双链RNAC. 三链RNAD. 四链RNA10. 以下哪个是真核生物细胞周期的阶段？A. G0期B. G1期C. S期D. 所有选项都是## 二、简答题（每题10分，共30分）1. 简述PCR技术的原理及其在分子生物学中的应用。

2. 解释什么是转录后修饰，并举例说明其在蛋白质功能中的作用。

3. 描述基因敲除技术的原理，并简述其在生物医学研究中的重要性。

## 三、论述题（每题25分，共50分）1. 论述基因表达调控的多层次机制，并举例说明其在疾病发生中的作用。

2. 讨论CRISPR-Cas9基因编辑技术的优势、局限性以及未来可能的发展方向。

## 参考答案### 一、选择题1. C2. A3. A4. D5. A6. B7. B8. A9. B10. D### 二、简答题1. PCR技术，即聚合酶链反应，是一种分子生物学中用于快速制备大量特定DNA片段的方法。

专业代码：生物学（0710）考试科目：生物化学与分子生物学一．名词解释1.蛋白质内稳态解析：体内的蛋白质在不断的合成与分解中，保持一个动态的平衡。

蛋白质的稳态与其N端的氨基酸有关，N端为甲硫氨酸、苏氨酸、丝氨酸则是稳定的。

2.糖异生作用解析：细胞内由非糖物质作为前体合成葡萄糖的过程，包括乳酸、丙酮酸、甘油等。

3.可变剪切解析：由同一个基因转录出来的RNA通过不同的剪切方式形成不同的成熟mRNA。

为了适应不同的发育时期。

4.遗传密码解析：DNA和RNA上的遗传信息以三联体密码子的形式编码，每个密码子对应专一的氨基酸，称为遗传密码。

核苷酸和氨基酸之间的对应关系称为遗传密码。

5.转座子解析：：能够从染色体的一个位置转移到另一位置的遗传因子，即可以发生转座的DNA序列称为转座子6.膜蛋白解析：生物膜结构的组成部分的蛋白质，以覆盖、贯穿或部分镶嵌的形式存在于膜上，是生物膜功能的主要执行者，包括通道蛋白、载体蛋白、酶、信号受体蛋白等。

7.信号转导答案: 对解析：细胞外信号（电信号、化学信号、机械）被放大并转化为细胞内化学变化的过程。

胞外信号往往是无法通过质膜的生物大分子。

转化为细胞内信号，并通过一系列胞内第二信使传递，最终引起细胞生理效应的过程。

8.酶抑制剂解析：引起酶的必需化学基团性质的改变，使酶活性降低或丧失，而酶不变性的物质。

9.必需脂肪酸解析：哺乳动物缺少能在C9位引入双键的酶，因此亚油酸和亚麻酸不能经生物合成得到，只能通过膳食获取，因此称为必需脂肪酸。

10.氧化磷酸化解析：发生在细菌质膜、线粒体内膜上的，NADH和FADH2通过电子传递链将电子传递给O2，形成质子梯度势能驱动ADP和Pi合成A TP的过程。

二.问答题1. 什么是诱导契合假说？有哪些作用力可能参与诱导契合过程？哪些理化因素可能会影响诱导契合？酶联免疫吸附有哪些基本步骤解析：①诱导契合假说：酶是具有高柔性的动态构想分子，酶与底物在空间上靠近时，底物诱导酶的构象发生改变，使其活性中心的构象更适于与底物结合，酶与底物在此基础在互补契合进行反应。

分子生物学考研题库
一、选择题
1. DNA复制的起始点通常位于：
A. 启动子区域
B. 终止子区域
C. 增强子区域
D. 原点（OriC）
2. 真核生物的基因表达调控主要发生在：
A. 转录前
B. 转录后
C. 翻译前
D. 翻译后
3. 下列哪种酶在RNA干扰中起作用？
A. DNA聚合酶
B. RNA聚合酶
C. 核糖核酸酶
D. Dicer酶
二、填空题
1. 转录过程中，RNA聚合酶首先识别并结合到DNA上的________区域。

2. 真核生物中，mRNA的5'端加上一个特殊的结构称为________，它
有助于mRNA的翻译和稳定性。

3. 蛋白质合成过程中，tRNA分子通过________碱基与mRNA上的密码子进行配对。

三、简答题
1. 简述PCR技术的原理及其在分子生物学研究中的应用。

2. 描述基因克隆的基本步骤，并解释其在生物技术中的重要性。

四、论述题
1. 论述基因编辑技术CRISPR-Cas9的工作原理，并讨论其在医学和生物研究中的潜在应用。

2. 分析比较原核生物和真核生物基因表达调控的差异，并讨论这些差异对生物体功能的影响。

五、实验设计题
1. 设计一个实验来验证某一特定基因在细胞周期中的表达模式。

2. 描述如何利用分子标记技术追踪遗传病的遗传模式。

结束语
分子生物学是一个不断发展的领域，掌握其基础知识和技能对于未来的研究和职业发展至关重要。

希望以上题库能够帮助学生更好地理解分子生物学的基本概念，并为即将到来的考试做好准备。

预祝大家考试顺利！。

6、AFLP：扩增片段长度多态性，其特点是把RFLP和PCR结合了起来。其基本步骤是：把DNA进行限制性内切酶酶切，然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”，用与接头互补的3’—端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增，只有那些与3’—端严格配对的片段才能得到扩增)，再在有高分辨力的测序胶上分开这些扩增产物，用放射性法、荧光法或银染染色法均可检测之。
2、SSR：简章序列重复多态性，引物是根据微卫星DNA重复序列两翼的特定短序列设计，用来扩增重复序列本身。由于重复的长度变化极大，所以是检测多态性的一种有效方法。其特点包括：一般检测到的是一个单一的多等位基因位点，共显性遗传，故可鉴别杂合子与纯合子；得到的结果重复性很高。
3、EST：表达序所产生的cDNA序列。随着高通量测序技术的进步，使人们越来越相信，大规模地产生EST，结合生物信息学的手段，将为人们提供一种快速有效的发现新基因的方法。
7、SNP：单核苷酸多态性，是一种较为新型的分子标记，其依据的是一位点的不同等位基因之间常常只有一个或几个核苷酸的差异，因此在分子水平上对单个核苷酸的差异进行检测是很有意义的。
8、FISH：荧光原位杂交技术，是一种利用非放射性的荧光信号对原位杂交样本进行检测的技术。它将荧光信号的高灵敏度、安全性，荧光信号的直观性和原位杂交的高准确性结合起来，通过荧光标记的DNA探针与待测样本的DNA进行原位杂交，在荧光显微镜下对荧光信号进行辨别和计数，从而对染色体或基因异常的细胞、组织样本进行检测和诊断，为各种基因相关疾病的分型、预前和预后提供准确的依据。
考试科目：医学分子生物学
注意：所有答案一律写在答题纸上，写在试题纸上或其他地方一律不给分。
一、名词解释：(25%)

分子生物学复习题一、柯越海教授（导论、基因组与基因组变异、分子生物学与模式动物）1、Central dogma中心法则Gene--One enzyme（polypeptide）hypothesis一基因一个酶（多肽）假说：2、One GeneBeadle和Tatum利用红色面包霉不同类型营养缺陷型突变株，发现营养缺陷和基因突变直接相关，每一种基因突变只阻断某一生化反应，而每一种生化反应都特异性依赖一种酶的催化，从而提出一个基因一个酶假说。

但有些酶由多条肽链聚合才有活性，一条多肽链也可以是多种酶的组成成分。

在一个基因一个酶假说基础上产生了一个基因一条多肽链假说，认为一个基因决定一条多肽链的结构。

一个基因一条多肽链假说具有普遍意义。

3、Translational medicine转化医学：转化医学是一种医学研究，试图在基础研究和临床治疗之间建立更直接的关系，把生物医学的研究成果转化为有前景的新型诊断试验、治疗及药物。

加速从循证医学到可持续解决方案的进程，进而解决公众健康问题。

4、Robertsonian translocation罗伯逊易位：常见人类染色体结构异常，又称着丝粒融合，一种特殊类型的交互易位。

两个端部着丝粒染色体在着丝粒处发生断裂，一条染色体的长臂与另一条染色体的短臂发生交换，形成一条大染色体和一条由两个短臂重接而成的小染色体，后者在减数分裂过程中丢失。

短臂携带的遗传信息少，丢失并不影响易位携带者的表型及智力，但其后代有患唐氏综合症的风险。

5、Genome基因组：生物体所携带的全部遗传信息。

即单倍体细胞中全套染色体为一个基因组，或是单倍体细胞中全部基因为一个基因组。

6、Histone组蛋白：组蛋白是真核生物染色体的基本结构蛋白，是一类保守的小分子碱性蛋白质，富含带正电碱性氨基酸，能够同DNA中带负电磷酸基团相互作用，有五种类型：H2A、H2B、H3、H4、H1。

组蛋白H2A、H2B、H3、H4各两分子组成蛋白八聚体，外绕DNA形成核小体，H1独立于核小体外，结合在连接相邻两个核小体的DNA分子上。

一、胰岛素的信号转导途径胰岛素(包括IGFI、IGFII) 信号所激发的信号传递途径主要有二,一为Ras-MAPK途径，一为PI3-激酶途径。

(一) Ras-MAPK途径当胰岛素或IGF 与胰岛素受体结合后，引起受体自身磷酸化而活化（酪氨酸激酶的活性），活化的受体使胞质内的胰岛素受体底物(IRS) IRS-1和SHc等的酪氨酸残基磷酸化，磷酸化的酪氨酸残基结合Grb2的SH2结构域，Grb2的SH3结构域又可与Sos 结合并使之活化，激活的Sos即可与质膜上的Ras相结合。

Sos具有鸟苷酸交换因子( GEF) 的作用，使Ras释放结合的GDP，结合GTP而活化。

Ras 的下游信息传递是一系列蛋白激酶的级联传递和放大过程。

活化的Ras-GTP与Raf的N端结构域结合并使之活化，Raf 是丝氨酸/ 苏氨酸蛋白激酶（MAPKKK），活化Raf结合并激活另一种蛋白激酶MAPKK，它可结合并磷酸化有丝分裂原活化蛋白激酶MAPK (mitogen－activated protein kinase，MAPK)的第185位酪氨酸残基及第183位苏氨酸残基，而使之激活。

活化的MAPK进入细胞核，可使EIK-1、RNA 聚合酶II等许多转录因子活化，进而促进c-fos，c-jun的表达。

Ras-MAPK信号通路可概括如下：配体→RPTK→adaptor（如Grb2）→GEF→Ras→Raf（MAPKKK）→MAPKK→MAPK→进入细胞核→转录因子→基因表达。

通过Ras-MAPK传递途径可促使靶细胞基因表达，导致细胞生长、增殖及分化。

(二) 磷脂酰肌醇3-激酶( PI3-K) 途径PI3-K 的SH2 结构域能与含磷酸酪氨酸残基的信号分子如IRS-1 结合，SH3 结构域能与富含脯氨酸的各种信号蛋白结合。

当胰岛素或IGF作用于胰岛素受体后, PI3-K 与酪氨酸磷酸化的IRS-1 结合，激活催化活性，PI3-K的靶蛋白是蛋白激酶B ( PKB) 。

浙江大学分子生物学真题2007年(总分：110.00，做题时间：90分钟)一、(总题数：1，分数：20.00)1.分子生物学研究中，需要配制多种试剂、标样和凝胶等，以下是实验室现有有关母液和药品：10%SDS母液；5×TBE母液；10mg/ml的溴化乙锭母液。

NaCl的分子量为58.5；EcoR Ⅰ的分子量为125；BamH Ⅰ的分子量为415；EtBr的分子量为394；EDTA的分子量为416；Tris的分子量为121；HCl的分子量为36.5；琼脂糖(Agarose)的分子量为204。

请利用以上物品，进行下列实验操作：(1)某一试剂1倍浓度的配方为0.15M Tris；200mM NaCl；pH值为8.0。

请配制400毫升10倍浓度的母液(10×)。

(2)配制200毫升1%的琼脂糖胶，含1μg/ml的溴化乙锭；0.5×的TBE缓冲液。

(3)用浓度为400μg/ml的商用DNA标样配制200μL，25μg/ml的DNA分子量标样。

(4)现有浓度为25μg/ml的DNA样品，需要进行EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切，已知这二种酶可以用同一种酶切缓冲液。

请写出对200ng DNA进行酶切反应的配方，请将反应体积定在15μl。

（分数：20.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：(计算各组分用量如下：Tris用量：10×0.15mol/L×0.400L×121g/mol=72.6g；NaCl用量:10×200/1000mol/L×0.400L×58.5g/mol=46.8g。

配制过程：分别称取Tris 72.6g，NaCl 46.8g，置于烧杯中，加入400ml超纯水或蒸馏水溶解，用盐酸调节pH值至8.0，混匀即可。

分子考研试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1. 以下哪个选项是分子生物学中常用的克隆载体？A. 噬菌体B. 质粒C. 病毒D. 细菌答案：B2. DNA聚合酶的主要功能是：A. 复制DNAB. 修复DNAC. 转录RNAD. 翻译蛋白质答案：A3. 在蛋白质合成过程中，mRNA的起始密码子是：A. AUGB. UGAC. UAAD. UAG答案：A4. 真核生物的基因表达调控主要发生在：A. 转录前B. 转录后C. 翻译D. 翻译后答案：A5. 下列哪种酶在DNA复制过程中不起作用？A. DNA聚合酶B. DNA连接酶C. DNA解旋酶D. DNA拓扑异构酶答案：B6. 以下哪种技术用于检测特定DNA序列的存在？A. PCRB. ELISAC. Northern blotD. Western blot答案：A7. 基因突变通常发生在：A. 基因的非编码区B. 基因的编码区C. 基因的启动子区域D. 基因的终止子区域答案：B8. 以下哪种细胞器是蛋白质合成的主要场所？A. 线粒体B. 内质网C. 高尔基体D. 核糖体答案：D9. 在基因工程中，限制性内切酶的作用是：A. 连接DNA片段B. 分割DNA片段C. 复制DNA片段D. 修饰DNA片段答案：B10. RNA干扰（RNAi）技术可以用于：A. 基因表达分析B. 基因治疗C. 基因克隆D. 基因测序答案：B二、填空题（每空1分，共20分）1. DNA的双螺旋结构是由________和________两种核苷酸配对形成的。

答案：腺嘌呤（A）；胸腺嘧啶（T）2. 真核生物的mRNA在翻译前需要经过________，形成成熟的mRNA。

答案：剪接3. 在PCR技术中，________是用于扩增特定DNA片段的短序列。

答案：引物4. 基因表达的调控可以通过________来实现。

答案：转录因子5. 在DNA测序中，Sanger测序法使用的终止核苷酸是________。

浙江大学细胞生物学和生物化学与分子生物学真题Document serial number【KK89K-LLS98YT-SS8CB-SSUT-SST108】细胞生物学一、名词解释（5'x10）1.冷冻电子显微镜技术2.蛋白质模式结合域3.磷脂交换蛋白4.纤连蛋白5.核质互作6.凋亡诱导因子7.双信使系统8.泛素化和蛋白酶体介导的蛋白质降解9.胞内受体超家族10.踏车行为二、论述题（20'x5）1.请描述线粒体的融合和分裂分子与细胞生物学基础2.靶细胞信号分子脱敏机制3.什么是细胞分化简述其分子机制、调控机制4.如何理解高尔基体作为细胞大分子转运的枢纽5.请描述细胞骨架的分子组成及结构特征，并简述其在细胞生命活动中的作用生物化学与分子生物学830一、判断20'1.蛋白质中的稀有氨基酸是翻译后修饰而成的2.蛋白质具有紫外吸收能力的原因是酪氨酸和色氨酸3.肽链具有一定的刚性是因为肽键上的氧原子和氮原子共振4.α螺旋具有电偶极，氨基端带正电，羧基端带负电5.质子会降低血红蛋白对氧气的结合能力6.胰凝乳蛋白的催化机理是共价键作用和金属键作用7.酶反应动力学参数Kcat的单位是时间8.葡萄糖在水中多为直链结构而非环状9.阿莫西林的抗菌机理是阻止肽聚糖的合成10.血管的弹性来自于硫酸皮肤素的蛋白聚糖、糖胺聚糖…11.磷脂双分子层的相变温度取决于磷脂和膜蛋白的含量12.烟酰胺乙酰胆碱受体是配体门通道13.人对颜色的区分依靠视杆细胞而非视锥细胞14.蚕豆病源于葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的缺失15.细菌的抗药性来源于质粒，但没有质粒细菌也能存活16.原核生物也有内含子，但不会出现在编码蛋白基因序列中17.蓖麻毒蛋白能破坏真核生物的40S核糖体亚基18.嘧啶核苷酸从头合成途径不涉及天冬酰胺19.氟喹诺酮类抗生素如环丙沙星的作用机理是抑制DNA转录20.人体内色氨酸可以通过两步反应转化为5羟色胺二.选择题20'1.组氨酸的酸碱性1’下同2.哪个氨基酸会阻碍α螺旋的形成3.镰刀型贫血病对何种疾病有耐性4.Ig有几个抗原结合位点5.过敏是由哪种抗体造成的6.腺苷酰化通常发生在哪个氨基酸上7.胆固醇在哪个细胞器膜中含量最高8.下列不是还原糖的是9.咖啡因会作用于__（信号分子）保持人兴奋10.下列信号分子不使用cAMP作为第二信使的是11.ATP水解发生的反应是亲核/电SN1/212.FAD是哪个酶的辅基13.大肠杆菌主要的DNA聚合酶是14.糖异生主要发生在哪个器官15.脂肪酸合成发生在哪个细胞器16.固氮过程一次反应消耗多少ATP17.原核生物中谷氨酸合成什么的（色、组、苯丙、腺苷三磷酸）18.腺嘌呤核苷酸从头合成途径原料19.乙酰CoA合成的部位20.哪个酶不是柠檬酸循环的调节酶三、名词解释20'1.凝集素2.阻抑物3.信号识别颗粒4.癌基因5.Ⅱ型限制性核酸内切酶6.操纵基因7.管家基因8.剪接体9.锌指结构10.端粒四、大题90'1.肌钙蛋白有哪些肌肉收缩过程2.转座子概念真核转座子特征3.糖酵解过程4.同工酶概念和生化特征5.蛋白质合成阶段起始复合物过程组成（15'）6.WesternBlotting原理过程7.信号转导概念显着特征8.酶的抑制剂概念分类作用特征9.基因克隆载体组分功能常用类型（5'）。

浙江大学2000年分子生物学试题一、名词解释(12)1、PCR2、Southern bolt3、外显子4、G蛋白5、基因组6、反式作用子二、问答题：1、简述DNA结构(15)2、何为分子克隆?扼要说明分子克隆技术操作要点和常用的工具酶(15)。

3、何为基因突变?扼要说明基因突变的类型及其后果(15)。

4、RNA聚合酶的作用特点。

以真核细胞mRNA为例说明转录产物的加工过程(15)。

5、简述基因的表达与调控机理(18)。

6、阐述目前国际上的植物基因组研究的现状和发展趋势(10）。

浙江大学2001年分子生物学试题一、名词解释（20%）1.基因组2.突变3.染色体4.克隆二、真核生物基因表达调控过程描述（30%）三、描述从基因到蛋白质的过程（30%）四、简述21世纪生命前沿领域（20%）浙江大学2004年分子生物学试题1、阐述PCR技术原理 (15)2、描述一种研究基因表达的方法 (15)3、阐述蛋白质生物合成途径 (25)4、阐述一条真核细胞信号转导途径(从信号接受到调控基因表达) (25)5、阐述一条反向遗传克隆功能基因的途径 (20)6、A,B和C三个基因都决定矮牵牛花的花色,当基因型为A-B-C-时表型为红色,其余为白色.AaBbCc的个体与三种纯系（系1系2和系3）杂交。

分别的红色：白花1：3，1：7和1：1的分离比。

问：系1和系2杂交，F1基因型和表型如何，F2的基因型和表型如何？系3和系2杂交，F1基因型和表型如何，F2的基因型和表型如何？（要写出分离比）（25）7、什么是染色体重排和基因重排？它们在发育中有和作用？它们在进化中有和作用（25）浙江大学2005年分子生物学试题一、名词解释：（20）突变顺式作用元件（cis acting element ）操纵子转座子RNA剪辑载体（vector）二、描述cDNA文库构建原理与方法（25）三、描述蛋白质生物合成过程（20）四、阐述真核生物基因表达调控的基本过程（20）五、阐述DNA半保留复制过程（15）六、一个父亲是色盲而本人色觉正常的女子，与一个色觉正常的男子结婚，但这个男子的父亲是色盲，问这对夫妇的子女表现色觉正常和色盲的可能性各有多少？（10）七、果蝇的某一性状其正反交结果不同，你如何判断该性状是伴性遗传？是母性影响？还是细胞质遗传？（10）八、下面是位于同一条染色体上的三个基因的隐性基因连锁图，并注明了重组频率。

专业代码：生物学（0710）考试科目：生物化学与分子生物学一.问答题1. 结合血红蛋白和肌红蛋白结构差异说明两者氧结合能力的差异。

解析：血红蛋白分子有两个α和两个β亚基，一般用α2β2表示，每个亚基都有一个辅基血红素。

血红蛋白分子是一个近似于圆球的四面体，四个亚基分别位于四面体的四个角上，相同的亚基位于对角线位置。

亚基虽近似于球状，但相互之间凹凸正好相补。

肌红蛋白分子由一条肽链组成，每个肌红蛋白分子含有一个血红素辅基。

肌红蛋白的氧结合曲线呈双曲线，而血红蛋白呈S形曲线。

这是因为每个肌红蛋白分子仅有一个O2的结合位置，因此每一肌红蛋白分子和O2的结合均是独立的，和其他肌红蛋白分子无关。

而血红蛋白分子是由四个亚基所组成，每一亚基均有一个O2的结合位置，血红蛋白分子对O2的结合是四个亚基的协同作用的结果。

2. 细胞呼吸的三个阶段分别是什么？解析：糖酵解、柠檬酸循环、电子传递链3. 线粒体内膜上A TP合成的机制解析：由电子传递链上电子传递过程中产生的跨膜质子梯度驱动。

内膜上的ATP合成酶是一个多亚基组成的酶，它由F1和F0两部分组成，F0嵌于线粒体内膜中，F1为亲水的分子转动马达，由α，β，γ，δ，ε等5种亚基组成。

F1部分外形如橘瓣，α和β亚基相间交叉分布在一起。

α和β亚基上都有核苷酸结合点，但只有β亚基上的结合点具有催化ATP合成或水解的活性，即三个催化区分别位于三个β亚基上。

每个β亚基具有松弛、紧密结合和开放的状态，在任一时刻，3个β亚基的构象总是互不相同的。

ADP+Pi可与β亚基松弛状态相结合，当其构象转变为紧密结合状态时，ADP+Pi即形成ATP，之后当β亚基转变为开放状态后，ATP就被释放下来。

每一β亚基的这种构象改变循环反复地进行，从而不断合成ATP。

4. 真核生物中mRNA选择性剪接的分子机制解析：真核生物内的选择性剪接由剪接体介导。

剪接小体是核内最大的RNP复合物，能够识别反应位点并催化前体mRNA发生剪接。

分子生物学复习题名词解释1.Tunneling nanotubes（通道纳米管）：在压力刺激下，不同细胞间产生的直径在50-200nm之间，用于传递信息和交流物质细膜通道。

2.Hippo signaling pathway （Hippo 信号通路）：正常的Hippo 信号通路通过高度保守的蛋白激酶Hpo磷酸化蛋白激酶Wts的核心激酶级联反应维持细胞增殖、促进细胞凋亡、参与压力应答，从而维持组织器官的正常大小。

3.SD序列（Shine-Dalgarno sequence）：原核生物中mRNA起始密码子AGU上游8个碱基处存在的一个可以与核糖体小亚基16S rRNA 3’末端序列互补结合的序列，使得翻译起始复合物准确定位于翻译起始部位。

4.内部核糖体进入位点序列（Internal ribosome entry site, IRES）：它的存在能够使蛋白质翻译起始不依赖于5’帽结构，从而使直接从信使mRNA中间起始翻译成为可能，一般来讲，内部核糖体进入位点通常位于RNA病毒基因组的5’端非翻译区，这样病毒蛋白的翻译就可以不依赖于5’帽子结构，常用构建于真核生物双顺反子，第一个蛋白通常靠5’帽子结构起始翻译，而第二个蛋白则依靠IRES起始翻译。

IRES前后的两个蛋白的表达通常是成比例的，因此可以根据其中一个报告基因的表达情况来反映另外一个蛋白的表达情况。

5.分子伴侣（chaperone）：能够识别并结合到不完整折叠或装配的蛋白质，帮助这些多肽正确折叠、转运或防止他们聚集，其本身不参与最终产物的形成。

6.核定位信号（nuclear localization signal, NLS）：蛋白质的一个结构域，通常为一短的氨基酸序列，与入核载体相互作用，使蛋白能被转运进细胞核。

7.共翻译转位（co-translational translocation）：膜结合核糖体上合成的蛋白质,在它们进行翻译的同时就开始了转运,主要是通过定位信号,一边翻译,一边进入内质网, 然后再进行进一步的加工和转移。

浙江省考研生物学复习资料分子生物学基础知识点一、DNA的结构DNA是核酸的一种，由磷酸、糖和碱基组成，呈螺旋形结构。

在DNA结构中，磷酸和糖通过酯键连接形成磷酸二酯桥，而糖和碱基通过糖苷键连接。

碱基有4种类型：腺嘌呤（A）、鸟嘌呤（G）、胸腺嘧啶（T）和胞嘧啶（C）。

二、RNA的结构RNA是一种核酸分子，与DNA有很多相似之处，但也有一些明显的差异。

与DNA不同的是，RNA的糖是核糖而非脱氧核糖，碱基胸腺嘧啶（T）在RNA中被尿嘧啶（U）所替代。

RNA分为信使RNA （mRNA）、转运RNA（tRNA）和核糖体RNA（rRNA）等几种类型。

三、核酸的复制核酸复制是细胞分裂过程中重要的一环，确保每个新细胞得到与母细胞完全相同的遗传信息。

DNA的复制是半保留复制，即两条亲本DNA分子的每条链都用作新合成链的模板。

复制过程中，DNA的双链被解旋，其中一个链被用作新合成链的模板，通过酶的作用，将合适的碱基与模板链上的碱基配对并形成新的链。

四、转录和翻译转录和翻译是生物体内基因表达的关键过程。

转录是指DNA模板链上的信息被转录成mRNA的过程，mRNA带着DNA上的基因信息移出细胞核进入细胞质。

在细胞质中，mRNA通过翻译过程，由核糖体将其信息翻译成蛋白质。

五、基因调控基因调控是细胞适应外界环境变化的一种机制，它控制着基因的表达水平。

基因调控可以通过多种方式实现，其中一种方式是转录因子与DNA上的启动子区域结合，激活或抑制基因的转录。

此外，还有一些非编码RNA分子也参与到基因调控中。

六、DNA修复细胞内的DNA遭受损伤时，维持DNA的完整性变得尤为重要。

DNA修复是细胞保持遗传信息稳定的关键机制。

细胞有多种修复机制，包括直接修复、碱基切除修复和重组修复等。

这些机制能够修复DNA中的损伤碱基、单链断裂和双链断裂等不同类型的损伤。

七、基因突变基因突变是指DNA序列发生改变，从而导致基因功能发生变化。

基因突变可以分为点突变和染色体突变两种类型。

06浙江大学分子生物学试卷06浙江大学分子生物学试卷(含答案，90分以上)一、名词解释：(25%)1、RFLP:限制性片段长度多态性，是由DNA变异(产生新的酶切位点或消除原有的酶切位点)导致在限制性核酸内切酶酶切时产生不同的长度片段。

可借助Southern Blotting或PCR 的方法进行检测。

2、SSR：简章序列重复多态性，引物是根据微卫星DNA重复序列两翼的特定短序列设计，用来扩增重复序列本身。

由于重复的长度变化极大，所以是检测多态性的一种有效方法。

其特点包括：一般检测到的是一个单一的多等位基因位点，共显性遗传，故可鉴别杂合子与纯合子；得到的结果重复性很高。

3、EST：表达序列标签，是指从不同的组织构建的cDNA文库中，随机挑选不同的克隆，进行克隆的部分测序所产生的cDNA序列。

随着高通量测序技术的进步，使人们越来越相信，大规模地产生EST，结合生物信息学的手段，将为人们提供一种快速有效的发现新基因的方法。

4、STS：序列标签位点，是由特定引物序列所界定的一类标记的统称，短的在基因组上是可以被唯一操作的序列，因而可以确定在物理图谱上的特定位置。

5、CAP: CAP即分解代谢物基因活化蛋白是一种激活蛋白，因为细菌的许多启动子为弱启动子，本身与RNA聚合酶的作用较弱，在有CAP蛋白这类激活蛋白存在下，可使RNA聚合酶与启动子的亲和力增强，CAP蛋白的活性强烈依赖cAMP。

6、AFLP：扩增片段长度多态性，其特点是把RFLP和PCR结合了起来。

其基本步骤是：把DNA进行限制性内切酶酶切，然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”，用与接头互补的但3?端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增，只有那些与3?端严格配对的片段才能得到扩增)，再在有高分辨力的测序胶上分开这些扩增产物，用放射性法、荧光法或银染染色法均可检测之。

7、SNP：单核苷酸多态性，是一种较为新型的分子标记，其依据的是一位点的不同等位基因之间常常只有一个或几个核苷酸的差异，因此在分子水平上对单个核苷酸的差异进行检测是很有意义的。

Central dogma: 中心法则：是指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。

也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。

某些病毒中的RNA自我复制（如烟草花叶病毒等）和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程（某些致癌病毒）是对中心法则的补充。

Translational medicine: 转化医学,医学研究,试图在基础研究和临床治疗之间建立更直接的关系,把生物医学的研究成果转化为有前景的新型诊断试验,治疗及药物.Hapmap: 国际人类基因组单体型图计划.HVP (Human Variome Project): the global initiativeto collect and curate all human genetic variation affecting human health. Its mission is to improve health outcomes by facilitating the unification of data on human genetic variation and its impact on human healthReversible phosphorylation:可逆磷酸化,很多蛋白都通过磷酸化和去磷酸化发挥功能Translational research:转化研究,转化研究转化医学或称为转化研究(Translational research)作为一种新理念,旨在推动基础研究成果快速临床转化用于疾病诊断、预防和治疗之中,其核心是在实验室与临床之间建立一个双向转化通道.Genetic variation:遗传变异,是对同一基因库中生物体之间呈现差别的定量描述。

遗传与变异，是生物界不断地普遍发生的现象，也是物种形成和生物进化的基础Polymorphisms:多态性,指生物群体内存在和等位基因相关的若干种表现型,是单一基因座变异在群体水平的体现,Hardy–Weinberg equilibrium:哈迪温伯格平衡,在理想状态下，各等位基因的频率和等位基因的基因型频率在遗传中是稳定不变的，即保持着基因平衡。