蛙心灌流实验
2012级临七3班廖梦宇2012021320
一、实验目的
1.学习离体蛙心灌流的实验方法。
2.观察Na、K、Ca三种离子及肾上腺素、乙酰胆碱等因素对心脏活动的影响。
二、实验准备
1.实验对象：蟾蜍
2.实验器材：BL-420生物信号采集系统、张力换能器、蛙类手术器械1套、蛙心插管、
蛙心夹、试管夹、双凹夹、滴管、小烧杯4个、任氏液。
3.实验药品：0. 65％氯化钠、3％氯化钙、1％氯化钾、1：10 000肾上腺素、1：10 000
乙酰胆碱等。
三、实验步骤
1.离体蛙心的制备：
破坏脑和脊髓，仰卧固定于蛙板上。由剑突处向两锁骨肩峰端呈三角形剪开皮肤、胸壁，打开心包，暴露心脏。在两个主动脉干下各穿一根细线，并打一活结备
用。用连有细线的蛙心夹在心舒期夹住心尖部，将心脏上翻，辨认心房，静脉窦，腔静脉，然后结扎腔静脉，用眼科剪在左侧主动脉距分叉部3mm处剪一切口。将
盛有少量任氏液的蛙心套管(用拇指将套管堵住) 插入动脉球底部，稍后撤套管，再
将蛙心管尖端转向蟾蜍的背侧及左下方，于心缩期插入心室；将预置线的活结扎紧，并固定于插管壁的小钩上小心提起套管和心脏，剪断主动脉左右分支，将心脏连同
静脉窦一起剪下用任氏液反复冲洗心室。
2.实验装置：
将蛙心插管用试管夹固定于支架上，蛙心夹的连线连接在机械换能器上。
记录心脏收缩曲线。
3.处理因素
(1) 记录仅有任氏液时的收缩曲线，观察心率及收缩幅度，作为正常对照。
(2) 换以等量0.65％Nacl，观察心跳的变化。
(3) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入3％Cacl 1—2滴，观察心跳变化。
(4) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入l％Kcl 1～2滴，观察心跳变化。
(5) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入1：l0 000肾上腺素1～2滴，观察心跳变化。
(6) 任氏液换洗，待心跳恢复后，加入l：10 000乙酰胆碱1～2滴，观察心跳变化。
四、实验结果
1.仅有任氏液时，正常对照：
2.换以等量0.65％Nacl：
3.3％Cacl 1—2滴：
4.l％Kcl 1～2滴：
5.1：l0 000肾上腺素1～2滴：
6.l：10 000乙酰胆碱1～2滴：
五、结果分析
1.将任氏液换以等量0.65％Nacl，相当于细胞外环境没有了钙离子，由图象看出，心
肌收缩力减弱，因为心肌的收缩是由细胞外的钙离子刺激胞内肌浆网释放钙离子，作用于肌球蛋白、肌钙蛋白，肌丝滑动引起的。
2.加入3％Cacl 1—2滴后，出现了心脏骤停，立即采取急救措施，后平稳。由图象看
出，心肌收缩力减弱，可能是外环境高浓度的钙产生的抑制，也可能是因为心肌刚
恢复而达不到之前正常的收缩力。
3.加入l％Kcl 1～2滴后，由于高浓度的钾离子产生抑制，心率减慢，心肌收缩力下降。
4.1：l0 000肾上腺素1～2滴，肾上腺素作用于心肌，使心率加快，心肌收缩力增强，
心搏出量增强。
5.l：10 000乙酰胆碱1～2滴对心肌收缩产生了抑制，心率减慢，心肌收缩力下降。
六、注意事项
1.当实验效果明显后，应及时将插管内的溶液吸出，至少用任氏液冲洗2～3次，待
心跳恢复正常后，再进行下一项实验。
2.各种溶液的滴管不要混用。
3.蛙心插管内灌流液的液面高度应始终保持一致，以保证固定的负荷
4.每一项实验，均应先记录一段正常对照曲线，然后再加入药液并记录其效应。
5.肾上腺素：加2-3滴，可多次使用；乙酰胆碱：必须最后一次滴加
6.NaCl：全换其余：从一滴加起
